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中华消化杂志 2006年第4期26卷 262-263页

作者：殷积彬刘铁夫刘伟赵瑞波哈尔滨医科大学附属第四医院消化内科 150001 哈尔滨医科大学附属第二医院实验中心哈尔滨医科大学病理教研室

近年研究发现,选择性环氧合酶（COX）-2抑制剂具有抑制肿瘤细胞生长,促进其凋亡的作用.但是选择性COX-2抑制剂影响肿瘤细胞侵袭转移能力的报道较少,其影响基质金属蛋白酶（MMP）和基质金属蛋白酶抑制剂（TIMP）表达方面的报道尤其少见.... 详细信息

近年研究发现,选择性环氧合酶（COX）-2抑制剂具有抑制肿瘤细胞生长,促进其凋亡的作用.但是选择性COX-2抑制剂影响肿瘤细胞侵袭转移能力的报道较少,其影响基质金属蛋白酶（MMP）和基质金属蛋白酶抑制剂（TIMP）表达方面的报道尤其少见.因此,我们以选择性COX-2抑制剂NS-398作用于HepG2肝癌细胞株,观察MMP-2、TIMP-2表达的变化,探讨其在肿瘤侵袭和转移中的作用.

关键词：选择性COX-2抑制剂基质金属蛋白酶-2 NS-398 基质金属蛋白酶抑制剂抑制肿瘤细胞生长肿瘤细胞侵袭 TIMP-2 转移能力肝癌细胞株 HepG2

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容量敏感外向整流性氯通道参与氧化应激介导的系膜细胞凋亡

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中华肾脏病杂志 2006年第7期22卷 416-420页

作者：焦军东李哲艾维李策刘素雁李文志杨宝峰哈尔滨医科大学附属第二医院肾内科 150086 哈尔滨医科大学药理学教研室黑龙江生物医药工程重点实验室哈尔滨医科大学附属第二医院麻醉科 150086

目的探讨容量敏感外向整流性(VSOR)氯通道在H2O2介导系膜细胞凋亡中的作用和可能的机制。方法全细胞膜片钳技术用于检测VSOR氯电流。细胞凋亡通过吖啶橙／溴化乙锭荧光染色、电子显微镜、TUNEL染色和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3... 详细信息

目的探讨容量敏感外向整流性(VSOR)氯通道在H2O2介导系膜细胞凋亡中的作用和可能的机制。方法全细胞膜片钳技术用于检测VSOR氯电流。细胞凋亡通过吖啶橙／溴化乙锭荧光染色、电子显微镜、TUNEL染色和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3活性确定。结果150μmol／L H2O2激活系膜细胞VSOR氯电流,H2O2激活的氯电流具有典型的VSOR氯电流电生理特性。包括:外向整流性、电压依赖性失活。对细胞外高渗透压敏感及被VSOR氯通道阻断剂抑制。VSOR氯通道阻断剂DIDS(100μmol／L),NPPB(10μmol／L)和尼氟灭酸(10μmol／L)明显抑制H2O2介导的系膜细胞凋亡。150μmol／L H2O2处理2 h内,细胞容量明显下降,但这种细胞容量下降被100μmol／L DIDS,10μmol／L NPPB和10μmol／L尼氟灭酸抑制。结论VSOR氯通道参与H2O2介导的系膜细胞凋亡,其机制与介导凋亡性容量下降有关。

关键词：细胞凋亡氯化物通道氧化性应激膜片钳术细胞容量系膜细胞

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YMDD耐药变异与HLA位基因多态性的相关性

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世界华人消化杂志 2006年第29期14卷 2854-2859页

作者：张淑云李兴库董广璐仰曙芬谷鸿喜李迪金茜刘伟杜博卢滨哈尔滨医科大学附属第二医院科研实验中心黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学附属第二医院肿瘤放射治疗科黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省哈尔滨市150086

目的：初步探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者拉米夫定治疗中YMDD变异与HLA-A，B，DRB1各位点等位基因分布频率的相关性．方法：对142例CHB患者，采用荧光标记杂交双探针PCR融解曲线法（FH-PCR-MC）检测血浆HBV YMDD变异；对其56例患者的外... 详细信息

目的：初步探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者拉米夫定治疗中YMDD变异与HLA-A，B，DRB1各位点等位基因分布频率的相关性．方法：对142例CHB患者，采用荧光标记杂交双探针PCR融解曲线法（FH-PCR-MC）检测血浆HBV YMDD变异；对其56例患者的外周血白细胞，采用序列特异性引物／聚合酶链式反应（PCR—SSP）技术检测人类白细胞表面抗原等位基因（HLA—A，B，DRB1）分型．结果：在用拉米夫定治疗的142例CHB患者中，YMDD变异率为56．3％．HLA—B＊58和DRB1＊03等位基因分布频率在YMDD变异组与YMDD野生组比较有显著性降低（0．013 vs 0．094．P=0．036；0．000 vs 0．063．P=0．024）；HLA—A＊30等位基因分布频率在YIDD组明显增高，与YVDD组比较差异显著（0．158 vs 0．024，P=0．034）；HLA—A＊33等位基因分布频率在YVDD变异组明显增高，与YIDD变异组比较差异显著（0．119 vs 0．000，P=0．028）．结论：YMDD耐药变异与HLA等位基因多态性有一定相关性．携有HLA—B＊58和DRB1＊03等位基因的个体感染的HBV可能不易发生YMDD变异：携有HLA—A＊30等位基因的个体感染的HBV可能易发生YIDD变异：携有HLA—A＊33等位基因的个体感染的HBV可能易发生YVDD变异．

关键词：乙型肝炎病毒慢性乙型肝炎 YMDD变异人类白细胞抗原等位基因

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HBV感染者人类白细胞Ⅰ,Ⅱ类抗原等位基因多态性分析

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世界华人消化杂志 2006年第10期14卷 963-968页

作者：张淑云李迪谷鸿喜李兴库金茜刘伟杜博卢滨哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学附属第二医院科研实验中心黑龙江省哈尔滨市150086

目的:分析HBV感染者体内病毒持续和清除与HLA-A,B,DRB1各位点等位基因分布频率的关系.方法:采用序列特异性引物-聚合酶链式反应(PCR-SSP)技术,对61例慢性乙型肝炎患者(CHB)、32例HBV感染后病毒清除者(感染恢复组)和40例骨髓移植供者(正... 详细信息

目的:分析HBV感染者体内病毒持续和清除与HLA-A,B,DRB1各位点等位基因分布频率的关系.方法:采用序列特异性引物-聚合酶链式反应(PCR-SSP)技术,对61例慢性乙型肝炎患者(CHB)、32例HBV感染后病毒清除者(感染恢复组)和40例骨髓移植供者(正常组)的外周血白细胞,进行人类白细胞抗原等位基因(HLA-A,B,DRB1)分型检测.结果:在慢性乙型肝炎组,HLA-DRB1*12等位基因分布频率较正常组(0.230vs0.075,P=0.004,OR=3.674,95%CI:1.445-9.338)和HBV感染恢复组(0.230vs0.063,P=0.004,OR=4.468,95%CI:1.492-13.377)均显著增高,HLA-B*35,DRB1*13则显著降低(0.066vs0.163,P=0.027,OR=0.362,95%CI:0.143-0.918;0.016vs0.008,P=0.017,OR=0.174,95%CI:0.035-0.859);HLA-A*69,B*56也显著降低(均0.000vs0.037,P=0.031).HLA-A*02等位基因分布频率在慢性肝炎组与HBV感染恢复组比较显著降低(P=0.044),HLA-B*51在感染恢复组与正常组比较显著增高(P=0.019).结论:机体对HBV易感性和病毒持续或清除与HLA等位基因多态性相关.HLA-DRB1*12可能既为易感性位点,又能促进病毒的持续感染;HLA-B*51,A*02可能为易感性位点,但感染后易清除病毒;HLA-DRB1*13可能是抗HBV感染的保护性基因;HLA-B*35,B*56和A*69在中国北方汉族人可能也为抗HBV感染的保护性基因.

关键词：乙型肝炎病毒感染人类白细胞抗原等位基因 PCR—SSP

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样品的不同保存方法对血浆Hcy测定结果的影响

样品的不同保存方法对血浆Hcy测定结果的影响

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第五次全国中青年检验医学学术会议

作者：金英玉哈尔滨医科大学附属第一医院实验诊断教研室

目的探讨样品的不同保存方法对Hcy测定结果的影响,从而使实验操作更加准确。方法选用30份标本,每份分别处理成新鲜血浆、-20℃冰冻血浆和加入荧光剂后保存的血浆,进行 Hcy测定,并比较三组之间区别。结果新鲜血浆组与-20℃冰冻血浆组Hcy... 详细信息

目的探讨样品的不同保存方法对Hcy测定结果的影响,从而使实验操作更加准确。方法选用30份标本,每份分别处理成新鲜血浆、-20℃冰冻血浆和加入荧光剂后保存的血浆,进行 Hcy测定,并比较三组之间区别。结果新鲜血浆组与-20℃冰冻血浆组Hcy值无统计学差异(p=0．23);与加入荧光剂后保存组比较无统计学差异(p=0．18),但后者的值普遍有降低的趋势;在轻、中度高Hcy血症(16-100μmol/L)时,新鲜血浆组与加入荧光剂后保存组Hcy值有统计学差异(p=0．03)。结论为保证结果的准确,尽量使用新鲜血浆和-20℃冰冻血浆。

关键词： Hcy 冰冻血浆保存方法测定结果

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反复脑梗死患者服阿司匹林后血小板聚集功能的变化

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中国实验诊断学 2006年第3期10卷 269-270页

作者：金英玉辛晓敏张云平李洁哈尔滨医科大学附属第一医院实验诊断教研室黑龙江哈尔滨150001

目的比较反复脑梗死患者同一次脑梗死患者服用阿司匹林后血小板聚集功能的差异,来探讨阿司匹林预防脑血管方面的作用。方法40名至少二次脑梗死的患者和28名一次脑梗死的患者服用阿司匹林(100 mg/d)至少7天以上,用二磷酸腺苷和花生四烯... 详细信息

目的比较反复脑梗死患者同一次脑梗死患者服用阿司匹林后血小板聚集功能的差异,来探讨阿司匹林预防脑血管方面的作用。方法40名至少二次脑梗死的患者和28名一次脑梗死的患者服用阿司匹林(100 mg/d)至少7天以上,用二磷酸腺苷和花生四烯酸作诱导剂,测定血小板聚集功能。结果花生四烯酸作诱导剂时,反复脑梗死患者同一次脑梗死患者的血小板聚集功能有显著差异(P<0.01)。结论服用阿司匹林需检测血小板聚集功能,反映阿司匹林能否有效预防脑梗死复发。

关键词：阿司匹林脑梗死血小板聚集

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放疗对恶性肿瘤患者红细胞膜带3蛋白表达和功能的影响

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中国肿瘤 2006年第8期15卷 533-536页

作者：刘晓滨吴昊白淑芝姜晓姝傅国辉哈尔滨医科大学附属第二医院黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学附属四院黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学病理生理教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学机能实验中心黑龙江哈尔滨150086 上海第二医科大学病理生理教研室上海200025

[目的]研究放疗对恶性肿瘤患者红细胞膜带3蛋白的表达和功能的影响。[方法]随机抽取8例恶性肿瘤患者并取其治疗前后的红细胞,应用Clˉ荧光探针6-甲基-3-磺丙基-1-喹啉-水化合物(SPQ)检测其治疗前后红细胞膜带3蛋白的阴离子转运活性,并通... 详细信息

[目的]研究放疗对恶性肿瘤患者红细胞膜带3蛋白的表达和功能的影响。[方法]随机抽取8例恶性肿瘤患者并取其治疗前后的红细胞,应用Clˉ荧光探针6-甲基-3-磺丙基-1-喹啉-水化合物(SPQ)检测其治疗前后红细胞膜带3蛋白的阴离子转运活性,并通过Westernblot检定治疗前后带3蛋白表达量的变化。[结果]8例恶性肿瘤患者放疗后红细胞膜带3蛋白的离子转运活性均明显减弱,其中6例患者红细胞膜带3蛋白表达减少。[结论]带3蛋白的表达和功能与肿瘤细胞的增殖和凋亡相关。

关键词：带3蛋白阴离子转运活性肿瘤放射疗法

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荧光标记杂交双探针PCR融解曲线法在临床的应用评价

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世界华人消化杂志 2005年第11期13卷 1291-1294页

作者：张淑云刘伟李迪谷鸿喜仰曙芬周志红杜博金茜常曼丽哈尔滨医科大学附属第二医院科研实验中心黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省哈尔滨市150086

目的:对国产荧光标记杂交双探针PCR融解曲线法(FH—PCR—MC)检测乙型肝炎病毒聚合酶酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸基序(HBVYMDD)变异的试剂进行临床应用评价.方法:慢性乙型肝炎患者外周血浆标本217份,分别采用荧光标记Taqman探... 详细信息

目的:对国产荧光标记杂交双探针PCR融解曲线法(FH—PCR—MC)检测乙型肝炎病毒聚合酶酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸基序(HBVYMDD)变异的试剂进行临床应用评价.方法:慢性乙型肝炎患者外周血浆标本217份,分别采用荧光标记Taqman探针定量PCR法(FT—PCR)和荧光标记杂交双探针PCR融解曲线法(FH—PCR—MC)检测HBVDNA含量和YMDD及其变异;其中78份HBVDNA阳性标本采用基因型特异性多引物对巢式PCR法进行基因分型(A—F),30份标本用PCR产物克隆测序法检测HBVYMDD及其变异.结果:血浆标本HBVDNA阳性率(≥1.0×106copies/L)为75.6%(164/217).YMDD及其变异检出率为67.7%(147/217).其中YMDD44.9%(66/147),YIDD22.5%(33/147).YVDD17.7%(26/147),YIDD/YVDD混合株10.9%(16/147),其他混合株4.0%(6/147);结合HBVDNA含量,HBVYMDD及其变异的检出下限为HBVDNA=5.0×106copies/L,但在106copies/L时检出率较低,仅为36.4%,随着HBVDNA含量增高,检出率显著增高(>80%),且在107copies/L时即有显著增高(χ2=7.177,P<0.01).在基因分型的78份标本中,C基因型占89.8%,B和D基因型分别占8.9%和1.3%,YMDD及其变异总检出率为100%,变异总检出率为59.0%;1份D基因型YMDD及其变异检测为YIDD/YVDD混合变异;B,C两种基因型变异检出率分别为71.4%和55.7%,但二者无统计学差异.以测序法的检测结果为相对标准,则FH—PCR—MC法检测HBVYMDD及其变异的相对敏感性、特异性和符合率分别为96.3%(26/27),100%(3/3)和96.7%(29/30);对于HBVYMDD及其变异的类型,两种方法检测结果一致.结论:FH—PCR—MC法是一种快速、特异的HBVYMDD及其变异检测方法,具有较高的检出率,且能区分YMDD及其变异的类型.

关键词：荧光标记曲线法双探针融解杂交乙型肝炎病毒聚合酶慢性乙型肝炎患者 DNA含量 YMDD 天门冬氨酸临床应用评价定量PCR法 Taqman 巢式PCR法 HBV 血浆标本基因分型 D基因型总检出率检测结果克隆测序法 PCR产物基因型变异

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黑龙江地区乙型肝炎病毒耐药变异与基因型

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世界华人消化杂志 2005年第14期13卷 1696-1699页

作者：李迪张淑云谷鸿喜程险峰王晓燕哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学附属第二医学院科研实验中心黑龙江省哈尔滨市150086 黑龙江省医院南岗分院泌尿外科黑龙江省哈尔滨市150001 哈尔滨医科大学附属第二医学院传染科黑龙江省哈尔滨市150086

目的:探讨黑龙江地区乙型肝炎病毒发生YMDD基因变异与HBV基因型的关系. 方法:首先HBVA-F6个主要基因型特异性多引物对巢式PCR法对106例接受拉米夫定抗病毒治疗患者的血清HBV DNA进行基因分型和分析.再采用实时荧光PCR法对标本进行YMDD... 详细信息

目的:探讨黑龙江地区乙型肝炎病毒发生YMDD基因变异与HBV基因型的关系. 方法:首先HBVA-F6个主要基因型特异性多引物对巢式PCR法对106例接受拉米夫定抗病毒治疗患者的血清HBV DNA进行基因分型和分析.再采用实时荧光PCR法对标本进行YMDD变异检测. 结果:在106例标本中有8例为B基因型,其阳性率为7.6%;有94例为C基因型,其阳性率为88.7%:4例为D基因型,其阳性率为3.8%.从106例血清标本中检测出63例YMDD发生变异占59.4%,其余43例为野生型YMDD.在8例B基因型的标本中,有5例发生YMDD变异,变异率为62.5%:在94例C基因型的标本中,有55例发生YMDD变异,变异率为58.5%. HBV B,C两基因型间的YMDD变异率无显著性差异(P>0.05).在5例B基因型YMDD变异的标本中,有1例发生YIDD变异(20%),其余4例发生YVDD (YMDD+YVDD)变异占80%;在55例C基因型YMDD 变异的标本中,有26例发生YIDD(YMDD+YIDD)变并占47.3%,17例发生YVDD(YMDD+YVDD)变异占30.9%,12例发生YIDD+YVDD变异占21.8%.HBV B,C两基因型间的YMDD不同变异类型发生率无显著性差异(P>0.05). 结论:在黑龙江地区拉米夫定抗病毒治疗2—4 a,HBV YMDD变异率为59.4%;HBV B,C基因型标本间发生YMDD变异率及基因变异类型均无显著性差异.

关键词：黑龙江地区乙型肝炎病毒耐药变异基因型拉米夫定抗病毒治疗乙型肝炎

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应用高效毛细管电泳筛检和鉴定血清中M蛋白

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诊断学理论与实践 2005年第4期4卷 303-307页

作者：顾志冬徐汝明王颖智樊建萌樊绮诗上海第二医科大学附属瑞金医院临床实验诊断中心上海200025 上海第二医科大学化学教研室上海200025

目的:应用毛细管区带电泳法(CZE)和毛细管区带电泳-免疫削减法(IS-CZE)对M蛋白进行筛检和鉴定。方法:运用CZE和琼脂糖凝胶电泳(AGE)分别对532例血清进行M蛋白的筛检;用IS-CZE和免疫固定电泳(IFE)对M蛋白阳性的64例标本进行免疫分型。结... 详细信息

目的:应用毛细管区带电泳法(CZE)和毛细管区带电泳-免疫削减法(IS-CZE)对M蛋白进行筛检和鉴定。方法:运用CZE和琼脂糖凝胶电泳(AGE)分别对532例血清进行M蛋白的筛检;用IS-CZE和免疫固定电泳(IFE)对M蛋白阳性的64例标本进行免疫分型。结果:与AGE相比较,CZE筛检M蛋白的阳性率为96.9%;与IFE相比较,IS-CZE分型的符合率为89.1%;自包被固相抗体能满足试验要求。结论:毛细管区带电泳可高效、快速完成M蛋白的筛检和鉴定,适合临床推广。

关键词：毛细管区带电泳免疫固定电泳免疫削减 M蛋白

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