检索结果-内蒙古大学图书馆

中国地方病学杂志 2006年第6期25卷 643-645页

作者：徐威于波李厚伟陈香梅安毅李呼伦哈尔滨医科大学附属第二医院心内科 150081 哈尔滨医科大学遗传学教研室青岛大学医学院附属医院心内科哈尔滨医科大学神经生物学教研室

目的研究真核表达载体pcDNA3．1／V5-His-FGF2(成纤维细胞生长因子2)在骨髓间充质干细胞(MSCs)中的表达及其对MSCs的影响。方法基因克隆构建pcDNA3．1／V5-His-FGF2真核表达载体,利用FuGENETM6转染大鼠MSCs,RT-PCR、免疫荧光检测其表达... 详细信息

目的研究真核表达载体pcDNA3．1／V5-His-FGF2(成纤维细胞生长因子2)在骨髓间充质干细胞(MSCs)中的表达及其对MSCs的影响。方法基因克隆构建pcDNA3．1／V5-His-FGF2真核表达载体,利用FuGENETM6转染大鼠MSCs,RT-PCR、免疫荧光检测其表达情况,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测其对MSCs生物学活性的影响。结果构建了含FGF2基因的真核表达载体;RT-PCR证实外源FGF2基因可转染到MSCs;免疫荧光检测转染24 h即可在MSCs中表达;MTT法检测转染48、72 h后细胞吸光度值(0．3871±0．0433、0．4349±0．0319)明显高于空载体组(0．3457±0．0162、0．3881±0．0434)(t1=2．833、t2=2．313,P<0．05)和未转染组(0．3378±0．0215、0．3641±0．0365)(t1=3．227、t2=3．650,P<0．05),而空载体对细胞增殖无影响(P> 0．05)。结论构建了FGF2真核表达质粒,并在MSCs中成功表达,为FGF2基因治疗的研究奠定了坚实的基础。

关键词：骨髓间充质干细胞成纤维细胞生长因子2 质粒基因转染

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辅助性CD4^+ T细胞亚群失衡在实验性自身免疫性重症肌无力大鼠发病机制中的作用

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中国生物制品学杂志 2010年第9期23卷 930-934页

作者：王小冬孙博王菁华孔庆飞谢晓丽周明言李娜李呼伦穆莉莉哈尔滨医科大学附属第二医院急诊科哈尔滨150086 哈尔滨医科大学神经生物学教研室黑龙江省高校神经生物学重点实验室哈尔滨150081

目的研究实验性自身免疫性重症肌无力(Experimental autoimmune myasthenia gravis,EAMG)大鼠发病过程中辅助性CD4+T细胞亚型的变化。方法将Lewis大鼠分为完全弗氏佐剂(CFA)早、晚期发病时对照相和EAMG早期(初次免疫后13d)、高峰期(初... 详细信息

目的研究实验性自身免疫性重症肌无力(Experimental autoimmune myasthenia gravis,EAMG)大鼠发病过程中辅助性CD4+T细胞亚型的变化。方法将Lewis大鼠分为完全弗氏佐剂(CFA)早、晚期发病时对照相和EAMG早期(初次免疫后13d)、高峰期(初次免疫后50d)发病时相4组,各组分别给予相应的药物后,于发病早期和高峰期分离淋巴细胞,采用流式细胞术检测各组大鼠淋巴细胞中Th1、Th2、Th17和Treg细胞的比例,ELISA法检测淋巴细胞培养上清中各种细胞因子水平。结果在EAMG发病的早期时相,与CFA组比较,EAMG组Th1、Th2、Th17细胞的比例下降,而Treg细胞比例上升;淋巴细胞培养上清中IFNγ和IL-4水平显著下降(P<0.05),IL-6水平显著升高(P<0.05),IL-17和TGF-β水平略升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。在EAMG发病的高峰期,与CFA组比较,EAMG组Th1和Th17细胞的比例显著上升(P<0.05),而Th2和Treg细胞的比例显著下降(P<0.05),淋巴细胞培养上清中IFNγ和IL-17水平显著上升(P<0.05),IL-4和TGF-β水平显著下降(P<0.01),IL-6水平略上升,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论在EAMG发生过程中,4种辅助性CD4+T细胞亚型之间的平衡被打破,晚期时相中Th1和Th17细胞比例上升,而Th2和Treg细胞比例下降。

关键词：重症肌无力,自身免疫性,实验性 Th1细胞 Th2细胞 Th17细胞 Treg细胞

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骨髓间充质干细胞对大鼠脑胶质瘤C6细胞系分化的影响

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中国生物制品学杂志 2010年第8期23卷 793-796页

作者：王小冬穆莉莉戢玉环孙博王广友韩志娟刘婷婷李呼伦王菁华哈尔滨医科大学附属第二医院急诊科哈尔滨150086 哈尔滨医科大学神经生物学教研室黑龙江省高校神经生物学重点实验室哈尔滨150081

目的探讨骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stem cells,BMSCs)对大鼠脑胶质瘤C6细胞系分化的影响及其相关机制。方法用Transwell小室共培养BMSCs与C6细胞,采用细胞计数法检测C6细胞增殖水平;流式细胞术检测C6细胞的细胞周期;免疫荧光... 详细信息

目的探讨骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stem cells,BMSCs)对大鼠脑胶质瘤C6细胞系分化的影响及其相关机制。方法用Transwell小室共培养BMSCs与C6细胞,采用细胞计数法检测C6细胞增殖水平;流式细胞术检测C6细胞的细胞周期;免疫荧光与免疫组化法分别检测波形蛋白(vimentin)和胶质纤维酸性蛋白(Glia lfibrillary acidic protein,GFAP)的表达;生化法检测谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)的活性。结果 BMSCs对C6细胞的增殖具有抑制作用;与BMSCs进行双层培养72h的C6细胞出现G0/G1期细胞周期阻滞,双层培养组的C6细胞GFAP表达明显增强,同时vimentin表达减弱,并且这两种分化标志物在细胞内的分布及排列发生了改变;双层培养组C6细胞内GS活性升高。结论 BMSCs能诱导C6细胞向成熟星形胶质细胞分化,可能与BMSCs分泌的某些细胞因子有关。

关键词：间质干细胞 C6细胞系细胞分化

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外水相对胰岛素载药纳米颗粒胶体系统分散性的影响

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中国生物制品学杂志 2007年第1期20卷 15-18页

作者：彭海生李呼伦吕桂香刘明孙博曹京燕乔慧王广友刘希君王菁华赵崴哈尔滨医科大学神经生物学教研室哈尔滨医科大学神经生物省重点实验室哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属肿瘤医院哈尔滨150081

目的探索不同外水相组成对胰岛素纳米颗粒胶体系统分散性的影响,为深入开展纳米载药颗粒研究提供依据。方法采用高速高压联合均质机,经乳化-溶剂挥发法制备不同粒径的纳米载药颗粒,再通过光学显微镜、扫描电镜、激光粒径分析仪分析颗粒... 详细信息

目的探索不同外水相组成对胰岛素纳米颗粒胶体系统分散性的影响,为深入开展纳米载药颗粒研究提供依据。方法采用高速高压联合均质机,经乳化-溶剂挥发法制备不同粒径的纳米载药颗粒,再通过光学显微镜、扫描电镜、激光粒径分析仪分析颗粒在胶体系统中的分散情况。结果高速均质和高速高压均质聚乙烯醇组粒径分布(d50)分别为(5·410±0·487)μm和(0·389±0·034)μm,高速均质和高速高压均质偏磷酸钠-柠檬酸盐缓冲液组粒径分布(d50)分别为(5·505±0·854)μm和(0·204±0·020)μm。联合均质结果缓冲液组粒径分布小于聚乙烯醇组,颗粒表面光滑平整;比表面积与之相反,聚乙烯醇组低于缓冲液组。结论偏磷酸钠-柠檬酸盐缓冲液作为乳化-溶剂挥发法制备胰岛素纳米载药颗粒的外水相,能够获得更好的分散体系。

关键词：纳米颗粒分散性胰岛素外水相

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一个细胞融合实验体系的建立及初步应用

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中国地方病学杂志 2007年第6期26卷 695-698页

作者：程德春钟国才刘彦虹李宇星张凤民凌虹哈尔滨医科大学微生物学教研室 150081 哈尔滨医科大学附属第二医院美国NIH疫苗研究中心

目的建立一个细胞融合实验体系,观察凝血酶(thrombin,Th)对Ⅰ型人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus typeⅠ,HIV-1)包膜糖蛋白(envelope glycoproteins,Env)介导的细胞融合的影响。方法采用携带HIV-1 JRFL株env基因的表达质粒pSV-Ⅲ-JRFL-dCT与携带HIV-1 tat基因的表达质粒pcTat共转染293T细胞,检测到细胞膜表面Env表达后。将pSV-Ⅲ-JRFL-dCT与pcTat分别按1:2、2:3、1:1、2:1、5:1、10:1共转染293T细胞,然后再与Magic 5A细胞进行融合实验,计数融合细胞数目并确定最适宜的融合条件,建立稳定的细胞-细胞融合实验体系。在所建立融合体系基础上利用Th处理Env表达细胞,观察对融合作用的影响。结果pSV-Ⅲ-JRFL-dCT与pcTat按1:1、2:1共转染293T细胞,可建立稳定的细胞-细胞融合实验体系。Th能够增强细胞融合,且融合细胞数随着Th浓度增高而逐渐增加。Th处理10 min与处理30 min比较,融合增强作用更加显著。结论质粒pSV-Ⅲ-JRFL-dCT与pcTat按1:1、2:1共转染293T细胞,与Magic5A细胞进行融合实验可得到稳定的细胞-细胞融合实验体系,Th对HIV-1包膜介导的细胞融合有促进作用。

关键词： Ⅰ型人免疫缺陷病毒 HIV-1 包膜糖蛋白细胞融合凝血酶实验体系

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ATP2B1基因单核苷酸多态性及基因-吸烟交互作用与原发性高血压的关联研究

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中华流行病学杂志 2014年第5期35卷 588-592页

作者：宋娟娟张海英周宏博李天晓邓颖哈尔滨医科大学附属第二医院急诊医学科 150086 哈尔滨医科大学附属第二医院生物化学与分子生物学教研室 150086 哈尔滨医科大学附属第二医院2009级基础七年制 150086

目的：探讨ATP2B1基因单核苷酸多态性及基因-吸烟交互作用与原发性高血压的关联性。方法以医院资料为基础采用病例对照方法，分析哈尔滨医科大学附属第二医院1280例原发性高血压住院患者和1010名当地汉族健康体检对照者。使用德国QIAGE... 详细信息

目的：探讨ATP2B1基因单核苷酸多态性及基因-吸烟交互作用与原发性高血压的关联性。方法以医院资料为基础采用病例对照方法，分析哈尔滨医科大学附属第二医院1280例原发性高血压住院患者和1010名当地汉族健康体检对照者。使用德国QIAGEN公司试剂盒提取人血全基因组DNA，应用Snapshot技术检测ATP2B1基因rs17249754位点和对照位点rs6253单核苷酸多态性，利用SPSS 19.0统计软件进行数据分析。结果 ATP2B1基因rs17249754位点等位基因G的频率在病例组和对照组间的差异有统计学意义（OR＝1.223，95%CI：1.083～1.381，P＝0.001），调整性别、年龄、BMI、吸烟、饮酒后，差异有统计学意义（OR＝1.212，95%CI：1.070～1.373， P＝0.003）。对照位点rs6253等位基因频率在两组间的差异无统计学意义。在不同的生物学模式下，基因型频率的分布均表现出显著差异性：加性模型OR＝1.469，95%CI：1.121～1.925，P＝0.005；显性模型OR＝1.324，95%CI：1.029～1.704，P＝0.029；隐性模型OR＝1.123，95%CI：1.031～1.223，P＝0.008。病例组中，吸烟者所占的比例显著高于对照组（P＝0.005）。调整性别、年龄、BMI、饮酒后，基因位点rs17249754和吸烟的交互作用对原发性高血压的影响无统计学意义（OR＝1.024，95%CI：0.614～1.707）。结论 ATP2B1基因rs17249754位点单核苷酸多态性与北方汉族人群原发性高血压的易感性显著关联；基因与吸烟的交互作用未发现与原发性高血压相关联。

关键词：原发性高血压 ATP2B1基因单核苷酸多态性吸烟交互作用

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IL-17对髓鞘碱性蛋白诱导鼻黏膜免疫耐受治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎的影响

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中国生物制品学杂志 2008年第7期21卷 598-601页

作者：邓晓波孙博孔庆飞张瑶王菁华靳轶敏王秀云李呼伦王广友黑龙江省医院道外分院哈尔滨150020 哈尔滨医科大学神经生物学教研室哈尔滨医科大学神经生物省重点实验室哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第一医院哈尔滨150001

目的探讨IL-17对髓鞘碱性蛋白(MBP)68-86诱导鼻黏膜免疫耐受治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的影响。方法将大鼠分为5组,分别经鼻黏膜滴注PBS、MBP68-86、MBP68-86+IL-17(0.01μg/d)、MBP68-86+IL-17(0.05μg/d)和MBP68-86+IL-17(0.1μg/d)诱导其发生免疫耐受,并在此基础上建立EAE动物模型,观察各组大鼠发病情况;通过3H掺入试验检测特异性抗原MBP68-86多肽诱导T淋巴细胞增殖活性;HE染色观察脊髓淋巴细胞浸润情况,免疫组化方法检测脊髓中单位面积IL-17+细胞数。结果PBS组和IL-170.1μg/d组与MBP组相比,大鼠免疫后出现进食减少、体重减轻、尾瘫、后肢瘫痪等临床症状,IL-170.01μg/d组和0.05μg/d组大鼠临床症状较轻或无症状。淋巴细胞增殖试验结果显示,PBS组和IL-170.1μg/d组与MBP组相比,特异性淋巴细胞增殖反应显著增高,IL-170.01μg/d组和0.05μg/d组与MBP组相比,差异无显著意义,与IL-170.1μg/d组相比差异有显著意义;PBS组、IL-170.1μg/d组与MBP组、IL-170.01μg/d组和0.05μg/d组相比,脊髓切片中淋巴细胞浸润面积较大且细胞数量较多,IL-17+细胞数也显著增多。结论MBP68-86特异性肽段可诱导EAE免疫耐受的形成,预防EAE的发生;鼻黏膜给予IL-17可以打破MBP诱导的特异性免疫耐受,且存在剂量依赖性。

关键词：实验性自身免疫性脑脊髓炎髓鞘碱性蛋白鼻黏膜免疫耐受白细胞介素-17

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白细胞介素-17和6及内皮素-1在他汀类药物减轻大鼠急性心肌缺血再灌后无复流现象中的作用

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中国地方病学杂志 2011年第5期30卷 506-509页

作者：刘巧丽王广友李呼伦张克成袁杰哈尔滨医科大学附属第二医院心内科心肌缺血机理与诊疗技术省部共建教育部重点实验室 150086 哈尔滨医科大学神经生物学教研室

目的探讨白细胞介素（IL）-17、IL-6、内皮素（ET）-1在他汀类药物减轻大鼠急性心肌缺血再灌后无复流现象中的作用。方法健康雄性Wistar大鼠18只，按体质量随机分成3组：假手术组、损伤组、预处理组，每组6只。预处理组给予阿托伐他汀2m... 详细信息

目的探讨白细胞介素（IL）-17、IL-6、内皮素（ET）-1在他汀类药物减轻大鼠急性心肌缺血再灌后无复流现象中的作用。方法健康雄性Wistar大鼠18只，按体质量随机分成3组：假手术组、损伤组、预处理组，每组6只。预处理组给予阿托伐他汀2mg·kg^-1·d^-1，另外2组给等量生理盐水，每日1次。喂养7d后，将实验大鼠给予腹腔注射水合氯醛麻醉，然后打开胸腔。其中损伤组和预处理组予冠状动脉结扎60min，再灌注15min。建立大鼠急性心肌缺血再灌注模型，假手术组只穿线不结扎。大鼠冠状动脉结扎前，结扎后15、30、45rain、再灌15min时进行心电图检查。再灌注15rain后由股静脉注入硫黄素和Even蓝，立即取血及心脏（只保留左心室）。用生理盐水冲洗心脏并沿心脏长轴将左心室切成5～7片心肌，在365nm光波下观察是否存在无荧光的区域，即无复流区。用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清IL—17、IL-6、ET-1。结果假手术组心电图无明显变化．损伤组和预处理组心电图显示急性缺血再灌注模型复制成功。在365nm光波下可看到损伤组和预处理组大鼠心肌存在无复现象。损伤组和预处理组的结扎区心肌范围[LA％，（57．34±11．49）％、（53．08±8．66）％]均高于假手术组（0，P均〈0．05），损伤组和预处理组的无复流范围[ANF％，（48．96±6．94）％、（21．37±3．35）％]均高于假手术组（0，P均〈0．05），损伤组的ANF％高于预处理组（P〈0．05）；损伤组的IL-17、IL巧、ET-1[（151．67±11．19）×10^-9、（167．89±5．13）×10^-9、（322．37±19．08）×10^-9g/L]均高于假手术组[（49．75±14．06）×10^-9、（59．32±5．26）×10^-0、（109．9±12．12）×10^-9g／L，P均〈0．05]及预处理组[（90．45±11．63）×10^-9、（112．47±10．40）×10＆-9、（198．91±27．88）×10^-9／L，P均〈0．05]，预处理组的IL-17、IL-6、ET-1均高于假手术组（P均〈0．05）。结论IL-17及ET-1参与大鼠急性心肌缺血再灌注后无复流现象的发生，他汀类药物可抑制IL-17及ET-1的表达，他汀类药物减轻大鼠急性心肌缺血再灌注后无复流现象可能与IL-17及ET-1的表达减少有关。

关键词：白细胞介素类内皮缩血管肽类再灌注损伤西司他汀类

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大鼠缺血脑组织中树突状细胞的来源与作用

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中国免疫学杂志 2002年第12期18卷 813-819页

作者：李呼伦钟照华李国忠关丽荣王辉金连弘哈尔滨医科大学微生物教研室哈尔滨150086 哈尔滨医科大学第一附属医院神经内科哈尔滨150086 哈尔滨医科大学第二附属医院哈尔滨150086 哈尔滨医科大学组胚学教研室哈尔滨150086

目的 :探讨大鼠脑缺血后DC在脑损伤过程的意义。方法 :线栓法封闭大鼠右侧大脑中动脉。免疫组化检测缺血脑组织中DC的存在以及胶质细胞巨噬细胞转化成DC的情况 ,并检测了DC样细胞的功能。结果 :比较缺血组两侧半球 ,缺血侧DC数量显著... 详细信息

目的 :探讨大鼠脑缺血后DC在脑损伤过程的意义。方法 :线栓法封闭大鼠右侧大脑中动脉。免疫组化检测缺血脑组织中DC的存在以及胶质细胞巨噬细胞转化成DC的情况 ,并检测了DC样细胞的功能。结果 :比较缺血组两侧半球 ,缺血侧DC数量显著增多 (P <0 0 0 1)。比较缺血组与对照组 ,缺血组DC表达MHC II分子显著增高 (P <0 0 0 1) ,表达IL 10在 2 4h、48h也增高 (P <0 0 1,P <0 0 0 1)。比较缺血组两侧半球 ,6h和 12h缺血侧DC表达IL 1β明显增加 (P <0 0 5和P<0 0 1) ,12h、2 4h和 48hIL 6的表达显著升高 (P <0 0 5 ) ,TNF α的表达高峰分别为 6h～ 12h(P<0 0 5、P<0 0 1)和 48h～6d(P <0 0 1、P <0 0 5 )。结论 :脑缺血后DC参与了脑缺血病理过程 ,表达细胞因子产生免疫效应。

关键词：脑缺血树突状细胞细胞因子免疫组化动物模型免疫学

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CYP2C19和CYP2C9基因型与苯妥英血药浓度关系的研究

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中华医学杂志 2004年第20期84卷 1686-1689页

作者：黄越杨静芳齐晓涟王育琴王维治陈彪首都医科大学宣武医院神经生物学研究室北京100053 首都医科大学宣武医院药剂科北京100053 哈尔滨医科大学附属第二医院神经科

目的　探讨细胞色素氧化酶P4 5 0 2C19(CYP2C19)和CYP2C9基因型对癫痫患者苯妥英血药浓度的影响。方法　对 32例癫痫患者应用变性高效液相技术分析中国人常见的 2个CYP2C19和 1个CYP2C9等位基因变异 ,应用荧光偏振免疫法测定患者苯妥英... 详细信息

目的　探讨细胞色素氧化酶P4 5 0 2C19(CYP2C19)和CYP2C9基因型对癫痫患者苯妥英血药浓度的影响。方法　对 32例癫痫患者应用变性高效液相技术分析中国人常见的 2个CYP2C19和 1个CYP2C9等位基因变异 ,应用荧光偏振免疫法测定患者苯妥英的血药浓度 ,在进行标准化以排除剂量和体重对血药浓度的影响后 ,分析CYP2C19和CYP2C9基因型和苯妥英血药浓度的关系。结果　服用单一苯妥英药物的 32例患者中 ,CYP2C19 2、CYP2C19 3和CYP2C9 3等位基因频率分别为 31%、8%和 6 %。根据携带CYP2C19和CYP2C9突变等位基因的数量 ,将患者分为基因型为CYP2C19 1/ 1合并CYP2C9 1/ 1的野生型纯合子强代谢者 (EM) ,基因型为CYP2C19 1/ 2或CYP2C19 1/ 3的杂合中间代谢者 (IM) ,基因型为CYP2C19 2 / 2或CYP2C19 2 / 3或CYP2C19 1/ 2合并CYP2C9 1/ 3的突变型纯合子弱代谢者 (PM)。 3组频率分别为 34%、4 4 %、和 2 2 %。并且突变基因携带数量与标准化血药浓度呈正相关。PM患者服用同等剂量苯妥英时血药浓度比EM患者高 34% (P <0 0 1)。结论　苯妥英代谢受CYP2C9和CYP2C19基因调控。根据患者CYP2C19和CYP2C9基因型可以预测患者的药物浓度。

关键词： CYP2C19 CYP2C9 苯妥英血药浓度患者基因型代谢 EM 等位基因变异数量

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