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中国药学会学术年会

作者：吴琳华王晔孙考祥刘红梅纪宏宇王智勇哈尔滨医科大学附属第二医院药学部黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学药剂学教研室黑龙江哈尔滨150086

本文对仙鹤草药材的HPLC的指纹图谱进行了研究。文章选取了不同产地的仙鹤草药材建立了其HPLC指纹图谱，为鉴别药材和药材的质量控制打下了基础。

关键词：中药鉴定仙鹤草指纹图谱

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实时荧光定量PCR检测血清中HCV-RNA

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世界华人消化杂志 2004年第6期12卷 1464-1465页

作者：张淑云刘伟谷鸿喜杜博常曼丽哈尔滨医科大学附属第二医院科研实验中心黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省哈尔滨市150086

目的:通过实时荧光定量PCR(FQ-PCR)与逆转录PCR(RT- PCR)两种方法检测血清HCV-RNA的结果比较,评价FQ- PCR法的临床应用价值. 方法:样本为经ELISA法筛选抗HCV阳性血清401份,其中221份采用实时荧光定量PCR法检测,180份采用RT- PCR法检测.... 详细信息

目的:通过实时荧光定量PCR(FQ-PCR)与逆转录PCR(RT- PCR)两种方法检测血清HCV-RNA的结果比较,评价FQ- PCR法的临床应用价值. 方法:样本为经ELISA法筛选抗HCV阳性血清401份,其中221份采用实时荧光定量PCR法检测,180份采用RT- PCR法检测. 结果:FQ-PCR法检测HCV-RNA,阳性率(≥102拷贝/mL) 68.3%(151/221),定量范围在102-107拷贝/mL之间,但≤106拷贝/ml占98.1%(148/151);RT-PCR法检测阳性率为30%(54/180). 结论:FQ-PCR检测HCV-RNA较RT-PCR是一种省时、简便、敏感、特异和防污染的体外基因扩增与定量检测方法,其结果对临床诊断和疗效观察有重要的指导意义.

关键词：实时荧光定量 PCR检测血清 HCV-RNA FQ-PCR HCV感染

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遗传性痉挛性截瘫患者ERDA1和SEF2-1基因三核苷酸重复序列的研究

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中国神经精神疾病杂志 2004年第4期30卷 244-247页

作者：郭辉拉布耿德勤刘焯霖李洵桦王学峰徐评议张成陈素琴徐兴顺王一鸣中山大学中山医学院医学遗传学教研室广州510080 西藏自治区第二人民医院妇产科徐州医学院附属医院神经科中山大学附属第一医院神经内科重庆医科大学附属第一医院神经科

目的　对ERDA1基因CAG/CTG和SEF2 1基因CTG重复序列数目的遗传性痉挛性截瘫 (HSP)患者及正常人群中的分布和二者在逐代传递中的动态变化进行研究。方法　采用PCR扩增 ,聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,GeneS can和Genotype软件分析的方法 ,对 7个... 详细信息

目的　对ERDA1基因CAG/CTG和SEF2 1基因CTG重复序列数目的遗传性痉挛性截瘫 (HSP)患者及正常人群中的分布和二者在逐代传递中的动态变化进行研究。方法　采用PCR扩增 ,聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,GeneS can和Genotype软件分析的方法 ,对 7个有 2～ 3代样本的HSP家系中的 6 2名HSP患者和家系中 10 5名表型正常的患者亲属 ,2 2名散发患者和 31名散发患者的一级亲属 ,以及 116名无血缘关系的正常人检测ERDA1基因CAG/CTG和SEF2 1基因CTG重复序列的数目。结果　ERDA1基因CAG/CTG重复序列的数目在正常人中范围为 9～ 82 (平均2 6 35± 2 0 35 ) ,HSP患者为 9～ 85 (平均 2 8 35± 2 3 4 1) ,患者亲属为 9～ 87(平均 2 6 36± 2 2 0 6 )。SEF2 1基因CTG重复序列的数目在正常人中范围为 2 3～ 4 9(平均 30 90± 6 95 ) ,HSP患者为 2 4～ 5 7(平均 31 17± 7 99) ,患者亲属为 18～ 5 3(平均 30 37± 7 0 2 )。两种三核甘酸重复序列数目在HSP患者与患者亲属之间 ,以及患者与无关正常人群之间比较均无显著性差异。尽管在逐代传递中ERDA1基因CAG/CTG重复序列数目有一定的动态变化 ,但与发病年龄和疾病的严重程度无关。而SEF2 1基因CTG重复序列数目在各代间稳定传递。结论　ERDA1基因CAG/CTG和SEF2 1基因CTG重?

关键词：遗传性痉挛性截瘫三核甘酸序列相关关系

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人唾液腺肿瘤PLAG1转基因小鼠模型的建立

人唾液腺肿瘤PLAG1转基因小鼠模型的建立

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2004年口腔颌面肿瘤基础研究学术研讨会

作者：杨雯君赵旭东张陈平王铸钢上海第二医科大学附属第九人民医院口腔颌面外科上海第二医科大学医学遗传学教研室上海南方模式生物研究中心上海第二医科大学附属第九人民医院口腔颌面外科上海第二医科大学医学遗传学教研室上海南方模式生物研究中心

目的克隆人PLAG1基因,构建PLAG1组织非特异性和特异性表达载体,并建立PLAG1转基因小鼠模型,研究PLAG1基因的高表达与唾液腺肿瘤发生的关系。材料与方法取PLAG1高表达的瘤组织或正常胎盘组织,提取总RNA,RT-PCR 扩增获得PLAG1 cDNA全部编... 详细信息

目的克隆人PLAG1基因,构建PLAG1组织非特异性和特异性表达载体,并建立PLAG1转基因小鼠模型,研究PLAG1基因的高表达与唾液腺肿瘤发生的关系。材料与方法取PLAG1高表达的瘤组织或正常胎盘组织,提取总RNA,RT-PCR 扩增获得PLAG1 cDNA全部编码框序列。将PLAG1分别克隆至pCMV-EGFP 和pMMTV-EGFR-stop载体获得pCMV-EGFP／PLAG 1和pMMTV-PLAG 1表达载体。用pCMV-EGFP／PLAG1瞬时转染NIH3T3细胞以观察融合基因的表达及 PLAG1的细胞内定位。经显微注射分别获得pCMV-EGFP／PLAG1和 pMMTV-PLAG1转基因小鼠。结果从不同组织来源的RNA克隆的PLAG1 cDNA经测序后发现与GenBank 中的PLAG1基因(GenBank No．U65002)比较有一多态性位点,相应氨基酸由苏氨酸变为脯氨酸。构建的组织非特异性表达载体pCMV-EGFP／PLAG1和组织特异性表达载体pMMTV-PLAG1经酶切和测序鉴定,证实PLAG1序列及插入方向正确。用pCMV-EGFP／PLAG1转染NIH3T3细胞,在细胞水平证明PLAG1的表达及其在细胞核的定位。两种表达载体分别经显微注射,获得了多个转基因阳性小鼠(Founders,G0代),经交配繁育,建立了相应的转基因小鼠模型。转基因的表达分别经RT-PCR和Northern杂交证实。表型观察发现pMMTV-PLAG1转基因小鼠系M42在出生后3个月内,100％的阳性小鼠发生唾液腺肿瘤。结论从多个肿瘤标本及正常胎盘组织克隆的PLAG1基因在同一位置与 GenBank中的相应序列相比,发现相同的核苷酸变异,说明这种核苷酸的变异并非由肿瘤组织内的基因突变或PCR错配所致。可能是一个单核苷酸多态性(SNP) 位点。PLAG1在细胞内定位于细胞核,符合转录因子的细胞核分布规律。PLAG1 转基因小鼠的表型提示该基因的高表达与唾液腺肿瘤的发生密切相关。

关键词：多形性腺瘤基因1(PLAG1) 转基因小鼠唾液腺肿瘤

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具有早发冠心病家族史的健康同胞血脂水平及载脂蛋白E基因多态性分析

具有早发冠心病家族史的健康同胞血脂水平及载脂蛋白E基因多态性...

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第八次全国心血管病学术会议

作者：赵玫白小涓赵彦艳张明于亚媛陈长熙孙英贤中国医科大学附属第二临床学院心内科(沈阳) 中国医科大学附属第一临床学院心内科(沈阳) 中国医科大学基础医学院遗传学教研室(沈阳) 辽宁省人民医院心内科(沈阳)

目的早发冠心病家族史是冠心病明确的危险因素,遗传性脂质代谢紊乱往往与早发冠心病相关,载脂蛋白E(ApoE)基因所编码的多态性蛋白参与脂质代谢过程,与冠心病心肌梗死的发生之间可能存在某种联系.本文将对63例具有早发冠心病家族史的同... 详细信息

目的早发冠心病家族史是冠心病明确的危险因素,遗传性脂质代谢紊乱往往与早发冠心病相关,载脂蛋白E(ApoE)基因所编码的多态性蛋白参与脂质代谢过程,与冠心病心肌梗死的发生之间可能存在某种联系.本文将对63例具有早发冠心病家族史的同胞进行血脂水平检测及ApoE基因型分析,探讨血脂异常及ApoE基因多态性与早发冠心病的关系及疾病的遗传易感性.方法选择63例具有早发冠心病家族史的"健康"(尚未发生冠心病)同胞和49例年龄、性别相匹配的健康对照者,抽取空腹12~14h静脉血5ml分装,其中3ml于普通非抗凝试管中分离血清,3h内送检血脂,余2ml置EDTA抗凝试管-20℃冻存留待基因型检测,使用聚合酶链式反应(PCR)和Hhal酶切法测定ApoE基因多态性,SPSS11.0软件包行统计学处理.结果整体血脂水平上同胞组与对照级比较差异显著(P<0.01).本研究只发现3种常见ApoE基因型ε3/3、ε2/3和ε4/3,两组在基因型频率和等位基因频率分布上无统计学差异(P>0.05)两组中不同基因型亚组间血脂水平无显著差异(P>0.05),ε3/3基因型亚组中同胞组与对照组比较,血脂水平有显著差异(P>0.01).结论具有早发冠心病家族史的同胞具有明显的血脂代谢紊乱,对此高危人群的早识别早预防具有重要义,但ApoE基因多态性并非早发冠心病独立的危险因素.

关键词：载脂蛋白E 家族史冠心病血脂水平基因多态性

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具有早发冠心病家族史的健康同胞血脂水平及载脂蛋白E基因多态性分析

具有早发冠心病家族史的健康同胞血脂水平及载脂蛋白E基因多态性...

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中华医学会心血管病分会第八次全国心血管病学术会议

作者：赵玫白小涓赵彦艳张明于亚媛陈长熙孙英贤中国医科大学附属第二临床学院心内科中国医科大学附属第一临床学院心内科中国医科大学基础医学院遗传学教研室辽宁省人民医院心内科中国医科大学附属第一临床学院心内科中国医科大学附属第一临床学院心内科中国医科大学附属第二临床学院心内科

目的早发冠心病家族史是冠心病明确的危险因素,遗传性脂质代谢紊乱往往与早发冠心病相关,载脂蛋白E(ApoE)基因所编码的多态性蛋白参与脂质代谢过程,与冠心病心肌梗死的发生之间可能存在某种联系。本文将对63例具有早发冠心病家族史的同... 详细信息

目的早发冠心病家族史是冠心病明确的危险因素,遗传性脂质代谢紊乱往往与早发冠心病相关,载脂蛋白E(ApoE)基因所编码的多态性蛋白参与脂质代谢过程,与冠心病心肌梗死的发生之间可能存在某种联系。本文将对63例具有早发冠心病家族史的同胞进行血脂水平检测及ApoE基因型分析,探讨血脂异常及ApoE基因多态性与早发冠心病的关系及疾病的遗传易感性。方法选择63例具有早发冠心病家族史的“健康”(尚未发生冠心病)同胞和49例年龄、性别相匹配的健康对照者,抽取空腹12-14 h静脉血5 ml分装,其中3 ml于普通非抗凝试管中分离血清,3 h内送检血脂,余2 ml置EDTA抗凝试管-20℃冻存留待基因型检测,使用聚合酶链式反应(PCR)和HhaI酶切法测定ApoE基因多态性,SPSS11.0软件包行统计学处理。结果整体血脂水平上同胞组与对照组比较差异显著(P<0.01)。本研究只发现3种常见ApoE基因型ε3/3、ε2/3和ε4/3,两组在基因型频率和等位基因频率分布上无统计学差异(P>0.05);两组中不同基因型亚组间血脂水平无显著差异(P>0.05),ε3/3基因型亚组中同胞组与对照组比较,血脂水平有显著差异(P<0.01)。结论具有早发冠心病家族史的同胞具有明显的血脂代谢紊乱,对此高危人群的早识别早预防具有重要义,但ApoE基因多态性并非早发冠心病独立的危险因素。

关键词：载脂蛋白E 冠状动脉疾病家族史

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具有早发冠心病家族史“健康”同胞的血脂水平及ApoE基因多态性分析

具有早发冠心病家族史“健康”同胞的血脂水平及ApoE基因多态性分...

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中华医学会心血管病分会第八次全国心血管病学术会议

目的早发冠心病家族史是冠心病明确的危险因素,遗传性脂质代谢紊乱往往与早发冠心病相关,载脂蛋白E(ApoE)因所编码的多态性蛋白参与脂质代谢过程,与冠心病心肌梗死的发生之间可能存在某种联系。本研究对63例具有早发冠心病家族史的同胞... 详细信息

目的早发冠心病家族史是冠心病明确的危险因素,遗传性脂质代谢紊乱往往与早发冠心病相关,载脂蛋白E(ApoE)因所编码的多态性蛋白参与脂质代谢过程,与冠心病心肌梗死的发生之间可能存在某种联系。本研究对63例具有早发冠心病家族史的同胞进行血脂水平检测及ApoE基因型分析,探讨血脂异常及ApoE基因多态性与早发冠心病的关系及疾病的遗传易感性。方法选择63例具有早发冠心病家族史的“健康”(尚未发生冠心病)同胞和49例年龄、性别相匹配的健康对照者,抽取空腹12～14小时静脉血5 ml分装,其中3ml于普通非抗凝试管中分离血清,3小时送检血脂,余2ml置EDTA抗凝试管-20℃冻存留待基因型检测,使用聚合酶链式反应(PCR)和Hhal酶切法测定ApoE基因多态性,SPSS11.0软件包行统计学处理。结果整体血脂水平上同胞组与对照组比较差异显著(P<0.01)。本研究只发现三种常见ApoE基因型ξ3/3、ξ2/3和ξ4/3,两组在基因型频率和等位基因频率分布上无统计学差异(P>0.05);两组中不同基因型亚组间血脂水平无显著差异(P>0.05),ξ3/3基因型亚组中同胞组与对照组比较,血脂水平有显著差异(P<0.01)。结论具有早发冠心病家族史的同胞具有明显的血脂代谢紊乱,对此高危人群的早识别早预防具有重要意义,但ApoE基因多态性并非早发冠心病独立的危险因素。

关键词：冠心病家族史基因多态性

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细胞内钙离子螯合剂抑制HSV-1诱导Hela细胞的凋亡作用

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细胞与分子免疫学杂志 2003年第5期19卷 421-424页

作者：杨秋霞姜洪池李斌郗雪艳刘玉王兰吕雪莹谷金宇李殿俊哈尔滨医科大学免疫学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学附属第一医院黑龙江哈尔滨150040 大连医科大学免疫学教研室辽宁大连116000 哈尔滨医科大学附属第二医院黑龙江哈尔滨150086

目的 :探讨HSV 1在诱导Hela细胞凋亡中 ,细胞内游离钙浓度的变化及钙离子螯合剂对HSV 1诱导Hela细胞凋亡的抑制作用。方法 :HSV 1感染Hela细胞后 ,用扫描电镜及透射电镜观察凋亡情况。用荧光探针标记细胞内游离Ca2 + ,在不同时间观察细... 详细信息

目的 :探讨HSV 1在诱导Hela细胞凋亡中 ,细胞内游离钙浓度的变化及钙离子螯合剂对HSV 1诱导Hela细胞凋亡的抑制作用。方法 :HSV 1感染Hela细胞后 ,用扫描电镜及透射电镜观察凋亡情况。用荧光探针标记细胞内游离Ca2 + ,在不同时间观察细胞内游离Ca2 + 浓度的变化。结果 :HSV 1感染Hela细胞后 ,出现了典型的凋亡形态学变化。细胞内游离Ca2 + 浓度在HSV 1感染Hela细胞后 12h达高峰 ;典型的凋亡形态学变化出现在HSV 1感染Hela细胞后 2 4h。细胞内Ca2 +螯合剂能显著抑制HSV 1诱导的Hela细胞凋亡。结论 :细胞内游离Ca2 + 在HSV 1诱导的Hela细胞凋亡过程中 ,具有重要作用 ,此实验结果为临床治疗相关疾病提供了有用的线索。

关键词： HSV-1 Hela细胞细胞凋亡细胞内Ca^2+ 螯合剂

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BRI基因在一对转移能力不同的肺腺癌细胞系中的序列分析与表达研究

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中华医学遗传学杂志 2003年第4期20卷 292-296页

作者：杨焕杰李钰陈英准吕冰洁陈峰陈宇李璞傅松滨哈尔滨医科大学医学遗传学研究室 150086 哈尔滨医科大学附属第二医院 150086

目的　确认淀粉样纤维蛋白基因 (amyloid fibrils,BRI)基因在 1对同源但转移能力不同的肺腺癌细胞系 AGZY83- a和 Anip973中的序列并分析其表达。方法　采用测序技术 ,Northern印迹杂交 ,G显带后荧光原位杂交分析 BRI基因在肺腺癌细胞... 详细信息

目的　确认淀粉样纤维蛋白基因 (amyloid fibrils,BRI)基因在 1对同源但转移能力不同的肺腺癌细胞系 AGZY83- a和 Anip973中的序列并分析其表达。方法　采用测序技术 ,Northern印迹杂交 ,G显带后荧光原位杂交分析 BRI基因在肺腺癌细胞系的序列与表达。结果　 BRI基因在高转移肺腺癌细胞系 Anip973中高表达 ,在其低转移母系 AGZY83- a中低表达 ,两细胞系 BRI基因染色体定位区均存在断裂重排 ,该基因染色体定位区在 Anip973中出现扩增。已知 BRI基因的 - 116 bp～ - 5 bp处碱基序列和- 115 bp～ - 5 bp处碱基序列在 AGZY83- a和 Anip973中分别突变为 CTCAGCAGCCCGC和 TCAGC-CGC。结论　BRI基因在转移能力不同的肺腺癌细胞系差异表达与该基因的染色体定位区域的断裂重排无关 ,与该基因染色体定位区拷贝数增加及 5′非翻译区存在不同的突变可能相关。

关键词：肺腺癌 BRI基因淀粉样纤维蛋白基因基因表达序列分析

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毛细管电泳分子信标技术与SARS病毒的实验室检测

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中国生物工程杂志 2003年第9期23卷 15-17页

作者：梁红艳白静李正军姜晓峰哈尔滨医科大学附属第二医院检验科哈尔滨150086 哈尔滨医科大学遗传教研室哈尔滨150086

随着非典型肺炎的病原体SARS病毒的发现 ,为研究者提出了一个新的课题———如何有效地进行SARS病毒的实验室早期诊断。为此 ,各种检测方法应运而生 ,对SARS病毒的现有检测方法进行综述 ,并对毛细管电泳分子信标技术的原理 ,及在SARS病... 详细信息

随着非典型肺炎的病原体SARS病毒的发现 ,为研究者提出了一个新的课题———如何有效地进行SARS病毒的实验室早期诊断。为此 ,各种检测方法应运而生 ,对SARS病毒的现有检测方法进行综述 ,并对毛细管电泳分子信标技术的原理 ,及在SARS病毒检测中的优势进行简单叙述。

关键词：严重呼吸综合征 SARS病毒毛细管电泳分子信标检测方法

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