检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物与感染 2016年第5期11卷 302-306页

作者：吴铮李文静李爱梅付英梅张凤民哈尔滨医科大学微生物学教研室伍连德研究所黑龙江省免疫与感染重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室哈尔滨150081

细菌小RNA（small RNA,sRNA）是一类长度为50-500个碱基,具有调控转录、翻译和mRNA稳定性的非编码调节性RNA。随着越来越多的sRNA被鉴定,部分细菌的sRNA功能已逐步阐明,主要参与调控细菌的基因表达、增殖、毒力及对环境的应激反应等生... 详细信息

细菌小RNA（small RNA,sRNA）是一类长度为50-500个碱基,具有调控转录、翻译和mRNA稳定性的非编码调节性RNA。随着越来越多的sRNA被鉴定,部分细菌的sRNA功能已逐步阐明,主要参与调控细菌的基因表达、增殖、毒力及对环境的应激反应等生物学过程。本文就胞内菌（如沙门菌、李斯特菌、嗜肺军团菌等）sRNA对其自身在宿主细胞内的生长、毒力和铁水平的调控作用进行综述。

关键词：细菌小RNA 胞内菌毒力生长

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人类免疫缺陷病毒-1包膜糖蛋白gp41的表达及优化

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国际免疫学杂志 2016年第2期39卷 101-106页

作者：包丽娜白杨姚岚庄敏凌虹哈尔滨医科大学医学微生物学教研室伍连德研究所黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室150081

目的优化HIV．1本地流行株06044sp4t蛋白表达设计，为gp41免疫原的制备提供实验基础。方法以含HIV．106044gp41基因的质粒为模板，采用聚合酶链反应（PCR）扩增gp41目的基因，分别构建原核表达载体pET26b：gp41T（含546—683f1．a片段... 详细信息

目的优化HIV．1本地流行株06044sp4t蛋白表达设计，为gp41免疫原的制备提供实验基础。方法以含HIV．106044gp41基因的质粒为模板，采用聚合酶链反应（PCR）扩增gp41目的基因，分别构建原核表达载体pET26b：gp41T（含546—683f1．a片段）及去掉N一端（NHR）和C一端（CHR）七价重复序列中间部分loop区（582～627aa）的pET26b—Sr41T（AL），经测序确认后，转化至大肠杆菌感受态细胞BL21（DE3）中，IPTG诱导表达。用聚丙烯酰氨凝胶电泳（SDS-PAGE）及Westernblot检测并鉴定重组表达蛋白。优化了重组蛋白的诱导表达条件。结果pET26b-gp41T和pET26b—gp41T（AL）重组表达质粒均能表达gp41蛋白，glMlT（△L）蛋白表达量高于gp41T；不同IPTG浓度诱导的蛋白表达量没有区别；用1mmol／LIPTG诱导后，37℃条件下表达量最高。Westernblot结果显示，gp41T（△L）与His抗体结合性能好。结论实验获得了稳定表达HIV-106044gp41的原核表达载体以及表达条件，为大量制备gp41蛋白免疫原奠定了基础。

关键词：人类免疫缺陷病毒-1 Gp41 原核表达优化

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融合肽抑制剂T20抵抗株包膜蛋白热变异位点547对人类免疫缺陷病毒-1生物学功能的影响

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国际免疫学杂志 2016年第3期39卷 210-217页

作者：赵海娇原晨张雪莹凌虹庄敏哈尔滨医科大学医学微生物学教研室伍连德研究所黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室150081

目的分析人类免疫缺陷病毒（HIV）的融合肽抑制剂T20抵抗突变株热变异位点547对病毒生物学功能的影响。方法采用PCR和定点突变方法构建HIV包膜蛋白（Env）突变体pSM-HXB2-DIV／DIM／SIM和PSM—LAI-DIV四种表达质粒，并构建了含有547D突... 详细信息

目的分析人类免疫缺陷病毒（HIV）的融合肽抑制剂T20抵抗突变株热变异位点547对病毒生物学功能的影响。方法采用PCR和定点突变方法构建HIV包膜蛋白（Env）突变体pSM-HXB2-DIV／DIM／SIM和PSM—LAI-DIV四种表达质粒，并构建了含有547D突变并置换HXB2或LAI株gp120部分的Env质粒，pSM-LAIgp120／HXB2gp41-DIV（L／H-DIV）和pSM-HXB2gp120／LAIsp4t—DIV（H／L-DIV）。假病毒感染实验和细胞融合实验分析Env的功能；Westernblot检测Env表达。圆二色谱（CD）分析6螺旋束（6HB）的稳定性；PyMOL软件分析含有547D的6HB结构。结果HXB2为骨架的547DIV、DIM及SIM和LAI为骨架的DIV假病毒的感染性低于其野生型（wt），前者的各变异Env的融合活性也明显降低；L／H—DIV假病毒感染性与HXB2wt相似，但融合活性明显低于wt；H／L—DIV假病毒的感染性低于两种野生型，融合活性与LAI叭相似，但低于HXB2wt。CD结果证明547D突变降低6HB的稳定性；结构分析显示，547D突变没有改变NHR中该位点与CHR中Q652位点之间的氢键，但可能通过增加NHR的负电荷从而减少病毒与T20的结合。结论547D突变降低LAI与HXB2株的感染性和HXB2株的融合活性；该突变通过降低6HB稳定性和增加gp41所带负电荷来减少病毒与T20的结合。

关键词：人类免疫缺陷病毒融合肽抑制剂 T20 抵抗突变

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人Toll样受体4重组质粒的构建与鉴定

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国际免疫学杂志 2016年第6期39卷 543-546页

作者：钱钧郭彩玲崔洪波宋武琦李爱梅哈尔滨医科大学微生物学教研室、黑龙江省感染与免疫重点实验室、黑龙江省高校医学病原学重点实验室、伍连德研究所 150081

目的构建人Toll样受体4（TLa-4）3＇非编码区（UTR）野生型/突变型基因重组表达质粒.方法在293T细胞中提取基因组DNA为模板,扩增并获得TLR4基因的3＇UTR片段.根据TLR43＇UTR与miR-122的靶点预测,设计TLR4 3＇UTR突变型TLR4 3＇UTR-m1.... 详细信息

目的构建人Toll样受体4（TLa-4）3＇非编码区（UTR）野生型/突变型基因重组表达质粒.方法在293T细胞中提取基因组DNA为模板,扩增并获得TLR4基因的3＇UTR片段.根据TLR43＇UTR与miR-122的靶点预测,设计TLR4 3＇UTR突变型TLR4 3＇UTR-m1.将pmiR-RB-REPORT^TM质粒和TLR4 3＇UTR/TLR4 3＇UTR-m1 PCR产物双酶切,将酶切后的载体与PCR产物连接,转化入DHSα细胞,在含Amp抗生素的LB固体培养基上培养,筛选阳性菌株,进行PCR验证及序列测定.结果成功构建人TLR4 3＇UTR野生型/突变型重组质粒.结论构建的质粒可以用于TLR4与miR-122相互作用的研究,为研究miRNA的作用提供依据.

关键词： Toll样受体4 基因重组质粒

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Gelsolin的生物学功能与其在疾病诊断及治疗中的作用

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国际免疫学杂志 2016年第4期39卷 364-367页

作者：孙迪李辉考文萍张凤民哈尔滨医科大学基础医学院微生物教研室伍连德研究所黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室150081 哈尔滨医科大学基础医学院

凝溶胶蛋白（Gelsolin）是一种激动蛋白结合蛋白,目前被认为在细胞运动、细胞吞噬中有重要的作用.近年,研究表明在许多疾病中血清Gelsolin水平下降,且其与疾病的严重程度、并发症的发生率和并发症的严重程度有关,能够预测并发症的发生... 详细信息

凝溶胶蛋白（Gelsolin）是一种激动蛋白结合蛋白,目前被认为在细胞运动、细胞吞噬中有重要的作用.近年,研究表明在许多疾病中血清Gelsolin水平下降,且其与疾病的严重程度、并发症的发生率和并发症的严重程度有关,能够预测并发症的发生和严重程度.Gelsolin还被发现有降糖和抗炎的作用,可以对疾病治疗起到一定作用.因而有必要对Gelsolin的生物学功能与其在疾病诊断及治疗中的作用进行研究.

关键词：凝溶胶蛋白诊断治疗

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Ⅰ型人类免疫缺陷病毒包膜gp120与乙型肝炎病毒表面抗原免疫原性比较

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国际免疫学杂志 2016年第4期39卷 313-318页

作者：王明霞王甲业李妍陈文江田丹袁丽庄敏凌虹哈尔滨医科大学医学微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省感染与免疫创新团队黑龙江省普通高校病原学重点实验室150081

目的比较Ⅰ型人类免疫缺陷病毒（HIV-1）及乙型肝炎病毒（HBV）包膜蛋白初次免疫及加强免疫后诱导产生抗体的规律,为提高HIV-1包膜蛋白诱导保护性抗体产生能力提供创新思路.方法以10周龄雌性C57BL/6小鼠为动物模型,分别用HIV-1 06044... 详细信息

目的比较Ⅰ型人类免疫缺陷病毒（HIV-1）及乙型肝炎病毒（HBV）包膜蛋白初次免疫及加强免疫后诱导产生抗体的规律,为提高HIV-1包膜蛋白诱导保护性抗体产生能力提供创新思路.方法以10周龄雌性C57BL/6小鼠为动物模型,分别用HIV-1 06044毒株gp120三聚体（gp120T）、HBV表面抗原（HBsAg）蛋白与AddaVax佐剂免疫小鼠,背部皮下注射,共免疫3次,每次免疫间隔3周,第一、第二次免疫后7d和第三次免疫后3d、7d取血;第一次免疫后7d、第三次免疫后3d、7d取脾组织.用酶联免疫吸附实验（ELISA）及酶联免疫斑点实验（ELISpot）方法检测免疫小鼠血浆特异性结合抗体滴度及抗体分泌细胞（ASC）数量.结果 gp120T和HBsAg两种蛋白初次免疫后,动物均未产生明显的特异性抗体.两种蛋白加强免疫后特异性抗体水平明显升高,gp120T一次加强免疫及两次加强特异性抗体滴度逐渐升高,而HBsAg一次加强抗体滴度已经接近两次加强的水平.二次加强免疫后,gp120T和HBsAg免疫鼠脾脏特异性ASC数量差异不显著.结论 HIV-1包膜gp120T加强免疫诱导抗体水平达到高峰慢于HBsAg加强免疫,即加强免疫后gp120T诱导的回忆反应慢于HBsAg.

关键词： Ⅰ型人类免疫缺陷病毒 gp120 乙型肝炎病毒表面抗原

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HIV-1广谱中和者病毒包膜中和敏感表位及诱导中和抗体能力研究

HIV-1广谱中和者病毒包膜中和敏感表位及诱导中和抗体能力研究

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第十一届全国免疫学学术大会

作者：李妍曹子茜许颖出王甲业李迪庄敏凌虹哈尔滨医科大学微生物学教研室伍连德研究所黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室

研究目的:探讨HIV-1广谱中和者病毒包膜表位特征及其诱导中和抗体的能力。研究方法:通过测定大量我国HIV-1感染者血浆对不同亚型HIV-1毒株的中和能力,分析广谱中和者病毒包膜的一些表位特征;进一步研究广谱中和者HIV-1包膜的抗原性及针... 详细信息

研究目的:探讨HIV-1广谱中和者病毒包膜表位特征及其诱导中和抗体的能力。研究方法:通过测定大量我国HIV-1感染者血浆对不同亚型HIV-1毒株的中和能力,分析广谱中和者病毒包膜的一些表位特征;进一步研究广谱中和者HIV-1包膜的抗原性及针对广谱中和抗体表位的暴露情况;通过突变分析确定中和表型与表位序列差异性的关联,进而确定影响中和敏感性的病毒包膜关键位点;最终通过用包膜糖蛋白三聚体免疫家兔,探讨中和敏感和中和抵抗包膜诱导特异性体液免疫的能力。结果:自HIV-1 CRF7BC亚型广谱中和者分离的病毒包膜中,不但有已知的V1V2可变区广谱中和抗体表位（PG9/16及CD4bd）等,还有一些未经报道的新表位,存在于包膜V4区以及恒定区（C区）;在同一感染者体内分离获得的病毒包膜表现出不同的中和敏感性;发现了广谱中和者包膜中有多个氨基酸单个位点影响包膜对已知广谱中和抗体（VRC01、HJ16、447-52D或4E10等）的中和敏感性;中和敏感和中和抵抗包膜均能诱导出高滴度的特异性结合抗体,但诱导中和抗体能力不同。结论:HIV-1 CRF7BC病毒包膜中一些关键氨基酸位点影响包膜对中和抗体的中和敏感性。中和敏感和中和抵抗包膜诱导中和抗体能力不同。

关键词： HIV-1 包膜蛋白中和抗体

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The miRNA-mediated regulation on the Interaction Between Viruses and Host immunity in Persistent Infection

The miRNA-mediated regulation on the Interaction Between Vir...

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第三届临床微生物学与感染病学国际论坛暨全国微生物与人体健康学术会议

作者：张凤民伍连德研究所微生物学教研室哈尔滨医科大学

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病毒与乳腺癌发生相关性的研究进展

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微生物与感染 2015年第4期10卷 252-256页

作者：任艳丽王鑫谷鸿喜商庆龙哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨150081

乳腺癌是全球发病率最高的女性恶性肿瘤。近年来,病毒感染与乳腺癌发生的相关性研究受到关注。人乳头瘤病毒和Epstein-Barr病毒等多种病毒均在乳腺癌组织中被检出,相关机制研究也支持病毒感染与乳腺癌发生相关这一观点。但目前流行病学... 详细信息

乳腺癌是全球发病率最高的女性恶性肿瘤。近年来,病毒感染与乳腺癌发生的相关性研究受到关注。人乳头瘤病毒和Epstein-Barr病毒等多种病毒均在乳腺癌组织中被检出,相关机制研究也支持病毒感染与乳腺癌发生相关这一观点。但目前流行病学研究数据差异较大,对两者相关性的认识存在较大争议。本文总结了相关研究的进展,并分析了目前研究中存在的主要瓶颈问题。

关键词：乳腺癌人乳头瘤病毒 Epstein-Barr病毒

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表达海肾荧光素酶的重组柯萨奇病毒B组3型质粒的构建及鉴定

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国际病毒学杂志 2015年第3期22卷 149-153页

作者：王慧武帅钦陈阳钟照华赵文然佟雷哈尔滨医科大学病原学实验教学中心哈尔滨150081 哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨医科大学细胞生物学教研室

目的构建能表达荧光素酶的重组柯萨奇病毒B组3型（coxsackievirus B3,CVB3）,以实现定量检测CVB3.方法将荧光素酶基因克隆至CVB3基因组开放读码框起始位置,重组病毒基因组DNA转染HeLa细胞以恢复病毒、测序,评价重组病毒的荧光素酶表达... 详细信息

目的构建能表达荧光素酶的重组柯萨奇病毒B组3型（coxsackievirus B3,CVB3）,以实现定量检测CVB3.方法将荧光素酶基因克隆至CVB3基因组开放读码框起始位置,重组病毒基因组DNA转染HeLa细胞以恢复病毒、测序,评价重组病毒的荧光素酶表达,扩增重组病毒并测定重组病毒株毒力.结果成功构建2个重组病毒质粒,转染HeLa细胞,表达海肾荧光素酶（humanizedform of Renilla Luc,hRLuc）、荧火虫荧光素酶（firefly luciferase,Luc）的pCVB3-hRLuc和pCVB3-Luc转染后第1代均可检测到hRLuc和Luc活性,但只有pCVB3-hRLuc转染细胞有明显细胞病变.扩增和纯化的CVB3-hRLuc病毒感染HeLa细胞可见明显细胞病变及hRLuc活性.扩增的CVB3-Luc没有观察到明显的细胞病变,且从第2代病毒开始就未能检测到荧光素酶活性.用HeLa细胞经空斑形成试验进行毒力测定,CVB3-hRLuc的毒力为1.4（107 pfu/ml）.结论成功构建了表达hRLuc的重组CVB3毒株CVB3-hRLuc,为定量研究CVB3感染打下基础.

关键词：柯萨奇病毒B组3型海肾荧光素酶基因重组

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