检索结果-内蒙古大学图书馆

哈尔滨医科大学学报 2012年第1期46卷 1-4页

作者：王垚蔡文辉颜培宇翟爱霞吴静张凤民黑龙江中医药大学微生物与免疫学教研室黑龙江哈尔滨150040 哈尔滨医科大学病原生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的筛选和鉴定与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血清特异性结合的噬菌体7肽,并分析其实际意义。方法采用30例正常人混合血清和30例RA患者混合血清作为筛选配基对噬菌体随机7肽库进行亲和筛选、扩增,获得RA血清特异性结合... 详细信息

目的筛选和鉴定与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血清特异性结合的噬菌体7肽,并分析其实际意义。方法采用30例正常人混合血清和30例RA患者混合血清作为筛选配基对噬菌体随机7肽库进行亲和筛选、扩增,获得RA血清特异性结合的噬菌体克隆。用患者混合血清进行Dot-ELISA实验鉴定获得的噬菌体克隆,进一步用RA患者及正常人血清各12例筛选阳性噬菌体的混合克隆。对鉴定的噬菌体克隆进行测序,并分析其同源性。结果获得17个与RA患者混合血清特异性结合的阳性克隆。阳性噬菌体混合克隆与RA患者个体血清反应阳性率明显高于其与正常人血清的反应率。序列分析显示阳性噬菌体克隆的抗原表位之间无共有序列,但与杆菌、球菌等有一定的同源性。结论 RA患者血清中存在与病原体抗原表位结合的抗体成分,提示RA的发病可能与病原体感染有关。

关键词：噬菌体随机肽库类风湿关节炎血清

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分枝杆菌临床分离株菌种的分子鉴定

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中国地方病学杂志 2012年第2期31卷 182-186页

作者：邵永珍范长龙王娟纪滨英全保燕李迪江洋深凌虹哈尔滨医科大学微生物学教研室、黑龙江省感染与免疫重点实验室、黑龙江省教育厅病原生物学重点实验室 150081 哈尔滨市胸科医院检验科 150081 哈尔滨市胸科医院内科 150081 哈尔滨市胸科医院科教科 150081 大连大学新华医院普外科150081

目的建立对临床分离分枝杆菌菌种快速、精确鉴定的方法学平台，了解分枝杆菌菌种的分布，为结核分枝杆菌（MTB）和非结核分枝杆菌（NTM）病临床精确诊断和有效治疗提供依据。方法330株分枝杆菌分离株来自于2007年5月至2008年12月在哈尔... 详细信息

目的建立对临床分离分枝杆菌菌种快速、精确鉴定的方法学平台，了解分枝杆菌菌种的分布，为结核分枝杆菌（MTB）和非结核分枝杆菌（NTM）病临床精确诊断和有效治疗提供依据。方法330株分枝杆菌分离株来自于2007年5月至2008年12月在哈尔滨市胸科医院诊断为结核病的住院患者。菌株灭活后提取基因组DNA．采用PCR方法，结合PCR-限制性片段长度多态性（RFLP）和DNA序列测定方法进行菌种精确鉴定。结果330株临床分离菌株全部精确鉴定，其中328株[占99．4％（328／330）]为结核分枝杆菌复合群（MTBC），2株[占0．6％（2／330）]为NTM。328株MTBC中，MTB326株、非洲分枝杆菌（***）1株、田鼠分枝杆菌（舱microti）1株，分别占MTBC的99．4％（326／328）、O．3％（1／328）和0-3％（1／328）。经测序和基因组同源性分析发现，2株NTM为胞内分枝杆菌（MAC），与MAC的同源性分别为99％和93％，2株菌之间的同源性为93％。结论建立了临床分离分枝杆菌菌种快速鉴定的方法学平台，临床诊断为结核病的患者MTB比例占绝对优势。也发现有舱African、舱microti和NTM感染。

关键词：分枝杆菌属菌种鉴定聚合酶链反应序列比对

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黑龙江省乙型肝炎病毒拉米夫定耐药株YMDD变异与基因型、BCP区变异的相关性研究

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国际病毒学杂志 2012年第1期19卷 15-19页

作者：秦辉程险峰滕旭徐维祯房勇谷鸿喜李迪哈尔滨哈尔滨医科大学微生物学教研室 150081 黑龙江省医院南岗分院泌尿外科 150001

目的探讨黑龙江省乙型肝炎病毒（HBV）拉米夫定耐药株YMDD变异与基因型、HBVBCP变异之间的相关性。方法对收集的245例经拉米夫定治疗的慢性乙型肝炎患者血清标本，采用多重PCR法检测HBV的基因型；荧光标记杂交双探针PCR融解曲线法（FH—... 详细信息

目的探讨黑龙江省乙型肝炎病毒（HBV）拉米夫定耐药株YMDD变异与基因型、HBVBCP变异之间的相关性。方法对收集的245例经拉米夫定治疗的慢性乙型肝炎患者血清标本，采用多重PCR法检测HBV的基因型；荧光标记杂交双探针PCR融解曲线法（FH—PCR—MC）检测HBVYMDD变异及变异类型；巢式PCR法扩增HBVC基因区，测序分析BCP位点变异并进行统计学分析。结果在HBVYMDD野生株、变异株中，基因型B、C、B与C混合型分别为8．8％、89．2％、2．0％；6．3％、93％、0．7％，基因型构成比无统计学的差异。HBVBCP的变异率在YMDD野生株与变异株分别为69．6％、76．9％，无统计学的差异。在HBVYMDD野生株中，HBVB基因型BCP的变异率22．2％，C基因型BCP的变异率73．6％存在统计学差异（P〈0．01），但在YMDD变异株中，无统计学的差异。在YIDD、YVDD变异株HBVBCP变异率分别为83．0％和64．6％，存在统计学的差异（P〈0．05）。结论在HBVYMDD野生株中，与B基因型相比，C基因型更易发生BCP变异；YMDD变异株中，BCP变异率在B、C基因型间无统计学差异，BCP变异在变异类型间（YIDD、YVDD）存在统计学差异；与YVDD变异株相比较，YIDD变异株易发生HBVBCP的变异。

关键词： HBV 拉米夫定耐药株 YMDD变异基因型 BCP变异

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CMV与T7启动子对仙台病毒微小基因组拯救效率的比较

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病毒学报 2012年第3期28卷 237-245页

作者：魏国超田文洪王刚柳云帆尉迟捷董小岩凌虹吴小兵哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨150081 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100052 吉林大学生命科学学院长春130012 北京五加和分子医学研究所北京100176

构建一种以分泌型荧光素酶基因(Gluc)作为报告基因的仙台病毒BB1株微小基因组质粒,比较了CMV启动子与T7启动子对仙台病毒微小基因组的拯救效率。首先设计并合成锤头状核酶序列,仙台病毒trailer、L基因非编码区、N基因非编码区和leader... 详细信息

构建一种以分泌型荧光素酶基因(Gluc)作为报告基因的仙台病毒BB1株微小基因组质粒,比较了CMV启动子与T7启动子对仙台病毒微小基因组的拯救效率。首先设计并合成锤头状核酶序列,仙台病毒trailer、L基因非编码区、N基因非编码区和leader序列以及丁型肝炎病毒核酶序列,插入含有CMV和T7双启动子的质粒pVAX1中,获得仙台微小基因组的通用型载体pVAX-miniSeV。将Gluc基因插入pVAX-miniSeV中,分别获得正向插入的仙台病毒微小基因组载体pVAX-miniSeV-Gluc(+)和反向插入的pVAX-miniSeV-Gluc(-)。用pVAX-miniSeV-Gluc(+)转染BHK21细胞能在上清中检测到高水平的Gluc活性,表明其中的CMV启动子具有正常转录功能。将pVAX-miniSeVGluc(-)和仙台病毒N、P、L蛋白表达质粒共转染BSR T7/5细胞(稳定表达T7RNA聚合酶的BHK-21细胞)检测到Gluc的高效表达,表明pVAX-miniSeV-Gluc(-)能够被有效拯救;但在BHK-21细胞中却未检测到Gluc的有效表达,提示该载体中的CMV启动子对仙台病毒微小基因组的拯救效率可能没有明显作用。为了进一步了解CMV与T7启动子各自对于仙台病毒微小基因组拯救的作用,本研究又构建了单独含有CMV或T7启动子的仙台病毒微小基因组载体pCMV-miniSeV-Gluc(-)和pT7-miniSeV-Gluc(-)。将这两种载体和仙台病毒N、P、L蛋白表达质粒分别共转染BSR T7/5细胞,结果pT7-miniSeV-Gluc(-)共转染组检测到了Gluc的高效表达,而pCMV-miniSeV-Gluc(-)共转染组未检测到,证实了通用型载体pVAX-miniSeV中仅T7启动子对仙台病毒微小基因组的拯救起了关键作用,而CMV启动子作用不明显。本研究成功构建了一种通用型双启动子仙台病毒微小基因组载体pVAX-miniSeV,并证明了T7启动子系统对仙台病毒微小基因组拯救的关键作用。本研究为下一步构建仙台病毒全基因感染性克隆打下了基础。

关键词： T7启动子 CMV启动子仙台病毒微小基因组

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稳定表达荧光素酶裸鼠垂体腺瘤移植瘤模型的建立

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中国微侵袭神经外科杂志 2012年第9期17卷 418-421页

作者：张婧惟魏兰兰秦颖童丽萍纪羽婷徐坤初明哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室 150086 哈尔滨医科大学附属第一医院神经外科 150001

目的建立稳定表达荧光素酶的裸鼠垂体腺瘤移植瘤模型，并通过活体生物发光成像系统实时观察移植瘤的生长特点。方法经G418药物选择性对转染细胞进行筛选，获得稳定表达荧光素酶的GH3-luc和MMQ-luc细胞系。将两株细胞系分别皮下接种于BAL... 详细信息

目的建立稳定表达荧光素酶的裸鼠垂体腺瘤移植瘤模型，并通过活体生物发光成像系统实时观察移植瘤的生长特点。方法经G418药物选择性对转染细胞进行筛选，获得稳定表达荧光素酶的GH3-luc和MMQ-luc细胞系。将两株细胞系分别皮下接种于BALB／c裸鼠，建立BALB／c裸鼠移植瘤模型，利用活体生物发光成像系统观察肿瘤的成瘤和生长情况。结果本组成功构建稳定表达荧光素酶的裸鼠GH3-luc和MMQ-luc移植瘤模型。体表直尺测量显示：移植瘤在接种MMQ-luc和GH3-luc细胞后10d内生长均较缓慢，15—30d肿瘤体积迅速增长．且MMQ-luc移植瘤较GH3-luc移植瘤生长快。活体生物发光成像系统荧光测量显示：接种GH3-luc细胞移植瘤20d时的荧光强度明显高于10d的荧光强度。活体生物发光成像系统荧光测量与取瘤直尺测量的肿瘤体积变化趋于一致，而体表直尺测量的肿瘤体积偏小。结论稳定表达荧光素酶的裸鼠垂体腺瘤移植瘤模型的成功建立，不仅可用于活体生物发光成像系统实时观察肿瘤的成瘤及生长情况，而且为垂体腺瘤的研究及药物开发提供了方便、有效的平台。

关键词：垂体肿瘤移植瘤荧光素类模型,动物小鼠,裸

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哈尔滨老年门诊感染患者抗菌药物使用现状分析

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中国药业 2012年第1期21卷 47-48页

作者：杨伟东付英梅任征黄颖谷佳睿张凤民哈尔滨医科大学基础医学院微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学附属第二医院黑龙江哈尔滨150086 黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江哈尔滨150086

目的分析哈尔滨地区老年门诊感染患者的抗菌药物使用情况,为其合理使用、减少滥用提供依据。方法随机抽取某三甲医院2009年4个季度门诊老年患者处方4 225份,对其中感染性疾病患者处方中抗菌药物使用情况进行回顾性分析。结果本地区老年... 详细信息

目的分析哈尔滨地区老年门诊感染患者的抗菌药物使用情况,为其合理使用、减少滥用提供依据。方法随机抽取某三甲医院2009年4个季度门诊老年患者处方4 225份,对其中感染性疾病患者处方中抗菌药物使用情况进行回顾性分析。结果本地区老年门诊的抗菌药物使用率为4.00%,涉及感染处方193份(包括病毒感染处方24份),以喹诺酮类、头孢菌素类抗菌药物为主;但病毒感染性呼吸疾病患者的抗菌药物使用率为38.80%。结论抗菌药物使用基本合理,但病毒感染性呼吸疾病的抗菌药物使用率过高,需进一步加强管理。

关键词：老年门诊抗菌药物细菌病毒

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利用RV—IgG标准品对风疹疫苗免疫后血清血凝抑制抗体保护浓度的测定

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国际免疫学杂志 2012年第5期35卷 381-383页

作者：赵冠棋程喆歆陈曦王燕徐维祯王华庆谷鸿喜哈尔滨医科大学微生物学教研室 150081 中国疾病预防控制中心免疫规划中心北京100050

目的利用风疹病毒的IgG标准品（RV—IgG）进行定量ELISA试验和血凝抑制试验，以测定风疹疫苗免疫后血清血凝抑制（HI）抗体的保护浓度，并验证试剂盒的准确性。方法RV-IgG标准品和10对风疹疫苗免疫前后血清的定量ELISA试验；风疹病毒血... 详细信息

目的利用风疹病毒的IgG标准品（RV—IgG）进行定量ELISA试验和血凝抑制试验，以测定风疹疫苗免疫后血清血凝抑制（HI）抗体的保护浓度，并验证试剂盒的准确性。方法RV-IgG标准品和10对风疹疫苗免疫前后血清的定量ELISA试验；风疹病毒血凝素的粗提以及血凝试验；RV—IgG标准品的血凝抑制试验测定其血凝完全被抑制时RV-IgG浓度。结果将RV-IgG标准品稀释为8个不同浓度梯度做定量ELISA，所测得的浓度值与已知浓度相比无统计学意义（P〉0．05）；10对风疹疫苗免疫前后人血清抗体浓度进行比较，免疫后血清抗体浓度显著升高（t=2．151，P〈0．05）；风疹病毒血凝素的凝集效价为1：128，RV-IgG标准品血凝抑制效价为1：32，对应的HI抗体浓度为25IU／ml。结论实验结果证实血清中风疹病毒HI抗体保护浓度为25IU／ml；风疹疫苗初次免疫后血清抗体保护性阳转率可达到80％。

关键词：风疹病毒 RV-IgG标准品血凝抑制试验酶联免疫吸附试验

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甲型肝炎疫苗的应用与接种效果评价

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中国疫苗和免疫 2012年第3期18卷 268-271页

作者：商庆龙张国民滕旭李立群谷鸿喜哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150081 中国疾病预防控制中心免疫规划中心北京100050

甲型肝炎(甲肝)疫苗(Hepatitis A Vaccine,HepA)是预防甲肝的有效手段,在国内外得到广泛应用。应用情况和效果评价是进一步制定预防接种策略的基础。现就国内外HepA应用和接种后免疫效果评价进行综述。

关键词：甲型肝炎疫苗:预防接种效果评价

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自然感染方法诱导蝇蛆抗菌活性研究

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微生物学杂志 2012年第4期32卷 87-90页

作者：孟凡飞王海洋李哈莉单鹏刘冰唐波王青山韩鹏付英梅哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省医学科学院基础医学研究所细菌研究室黑龙江哈尔滨150000 哈尔滨医科大学附属第一医院血管外科黑龙江哈尔滨150000

研究通过自然感染方法诱导的丝光绿蝇蛆虫的抗菌活性。用大肠埃希菌感染无菌蛆虫,用灭菌的PBS作为对照。提取血淋巴,以金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌作指示菌,采用平板法作抑菌试验,检验蛆虫血淋巴的抗菌活性。结果发现:感染的蛆虫比无菌蛆... 详细信息

研究通过自然感染方法诱导的丝光绿蝇蛆虫的抗菌活性。用大肠埃希菌感染无菌蛆虫,用灭菌的PBS作为对照。提取血淋巴,以金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌作指示菌,采用平板法作抑菌试验,检验蛆虫血淋巴的抗菌活性。结果发现:感染的蛆虫比无菌蛆虫有较好的抗菌能力;大肠埃希菌预处理12 h后能够诱导蛆虫的抗菌活性,在24 h达到峰值然后下降;血淋巴对金黄色葡萄球菌的抗菌活性高于绿脓杆菌。研究表明,通过自然感染的方法可以诱导丝光绿蝇幼虫抗菌活性。

关键词：丝光绿蝇蛆虫抗菌活性自然感染

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红花多糖抑制PI3K/Akt信号通路诱导人胃癌细胞凋亡的研究

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实用肿瘤学杂志 2012年第2期26卷 119-124页

作者：陶冀黎清炜石学魁梁颖王亚贤哈尔滨医科大学附属第三医院肿瘤内科哈尔滨150081 牡丹江医学院微生物与免疫学教研室黑龙江中医药大学微生物与免疫学教研室

目的探讨红花多糖通过抑制PI3K/Akt信号通路调控胃癌细胞凋亡的机制.方法 MTT比色法观察SPS对人胃癌SGC-7901细胞体外增殖的抑制作用,流式细胞仪（FCM）分析细胞凋亡,实时荧光定量RT-PCR法和Western Blot法检测蛋白激酶B（Akt）基因及... 详细信息

目的探讨红花多糖通过抑制PI3K/Akt信号通路调控胃癌细胞凋亡的机制.方法 MTT比色法观察SPS对人胃癌SGC-7901细胞体外增殖的抑制作用,流式细胞仪（FCM）分析细胞凋亡,实时荧光定量RT-PCR法和Western Blot法检测蛋白激酶B（Akt）基因及蛋白的表达情况.结果红花多糖在一定范围内以剂量依赖方式和时间依赖方式抑制SGC-7901胃癌细胞生长.流式细胞仪检测,SGC-7901细胞经红花多糖处理24h,其早期凋亡率、细胞坏死或晚期凋亡率显著增加,呈现明显的剂量依赖性.Real-time PCR和Western Blot检测发现,SPS处理的细胞Akt基因及蛋白表达量明显下降.结论红花多糖对人胃癌SGC-7901细胞体外增殖具有明显的抑制作用,该抑制作用具有一定的时间依赖性和剂量依赖性;红花多糖能够下调Akt mRNA表达,降低Akt和p-Akt蛋白的表达量,抑制Akt通路发挥抗肿瘤作用.

关键词：红花多糖 PI3K/Akt 凋亡胃癌

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