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中国人兽共患病学报 2007年第7期23卷 710-713页

作者：张晓莉于新慧唐小云刘爱琴宋宝辉刘亚威王志龙凌虹牡丹江医学院病原生物学教研室牡丹江157011 哈尔滨医科大学微生物学寄生虫学教研室150081

目的探讨当归补血汤(Angelicae Sinensis Decoction for Supplementing Blood,ASDSB)对免疫抑制合并隐孢子虫感染的小鼠的治疗作用。方法建立免疫抑制合并隐孢子虫感染模型,随后用ASDSB治疗,并设对照组。每日计数小鼠粪便中卵囊数量,测... 详细信息

目的探讨当归补血汤(Angelicae Sinensis Decoction for Supplementing Blood,ASDSB)对免疫抑制合并隐孢子虫感染的小鼠的治疗作用。方法建立免疫抑制合并隐孢子虫感染模型,随后用ASDSB治疗,并设对照组。每日计数小鼠粪便中卵囊数量,测定外周血T细胞亚群、血清可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)和肠液分泌型免疫球蛋白A(sIgA)的水平,并进行肠组织病理检测。结果与模型组相比较,大剂量ASDSB组的小鼠粪便卵囊排出数量明显减少(P<0.01),肠粘膜损伤较模型组轻,并且可以提高免疫抑制小鼠的CD4+T水平,促进肠道粘膜sIgA的产生,降低外周血sIL-2R水平。结论大剂量ASDSB对免疫抑制合并隐孢子虫感染的小鼠的治疗作用是通过提高机体免疫功能发挥的。

关键词：免疫抑制隐孢子虫当归补血汤(ASDSB) 免疫功能

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HPV16L1VLP纯化、鉴定及血凝抑制实验方法的建立

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微生物学杂志 2007年第2期27卷 29-32页

作者：邵迪王燕谷鸿喜韩聪李茉商庆龙李承刚哈尔滨医科大学微生物学教研室

摘要通过昆虫细胞-杆状病毒表达系统表达HPV16L1 VLP,纯化鉴定后利用其建立血凝抑制实验,检测HPV16L1单克隆抗体的血凝抑制活性。利用重组杆状病毒感染悬浮培养的昆虫细胞表达HPV16L1蛋白,大量获得VLP;优化扩增蛋白的条件并用SDS-PAGE... 详细信息

摘要通过昆虫细胞-杆状病毒表达系统表达HPV16L1 VLP,纯化鉴定后利用其建立血凝抑制实验,检测HPV16L1单克隆抗体的血凝抑制活性。利用重组杆状病毒感染悬浮培养的昆虫细胞表达HPV16L1蛋白,大量获得VLP;优化扩增蛋白的条件并用SDS-PAGE分析鉴定;经氯化铯密度梯度离心法纯化VLP;利用所得VLP建立血凝抑制试验,鉴定制备的HPV16L1单克隆抗体的血凝抑制活性。优化蛋白表达条件结果显示,当重组杆状病毒感染细胞的MOI=10时目的蛋白表达量最大;按此滴度感染悬浮培养的昆虫细胞,收获、纯化VLP并鉴定其特异性;利用所得VLP建立了血凝抑制实验,鉴定HPV16L1单克隆抗体的血凝抑制效价为1∶16。建立的血凝实验,可用于鉴定和检测HPV16L1相关抗体,为HPV诊断试剂的开发提供实验基础。

关键词：人乳头瘤病毒16型悬浮培养病毒样颗粒 HPV16L1单克隆抗体血凝抑制

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七年制医学微生物学实验教学探讨

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2007年第1期9卷 39-40页

作者：钱钧佟雷包丽丽哈尔滨医科大学微生物学教研室

医学微生物学是一门基础学科，而实验课是其重要的组成部分。为培养跨世纪人才，对七年制实验教学模式进行探索，针对学生的特点在双语教学和课堂的组织上进行改进，注意知识更新，使学生形成系统的科学思维及培养创新能力。达到更好的... 详细信息

医学微生物学是一门基础学科，而实验课是其重要的组成部分。为培养跨世纪人才，对七年制实验教学模式进行探索，针对学生的特点在双语教学和课堂的组织上进行改进，注意知识更新，使学生形成系统的科学思维及培养创新能力。达到更好的教学效果。

关键词：微生物学实验教学教学组织

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哈尔滨地区儿科病房感染常见革兰阴性菌及其耐药性分析

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中国卫生检验杂志 2007年第3期17卷 487-489页

作者：张文莉付英梅许建丰陈小贝马佳毓刘树林张凤民哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨150086

目的:分析哈尔滨地区儿科病房2005年9月至2006年3月间临床分离革兰阴性杆菌分布及其耐药性,为儿科合理使用抗生素提供依据。方法:应用API20E微生物鉴定系统对临床分离菌株进行鉴定,RAPD法排除重复菌株;K-B纸片扩散法对12种抗菌药物进行... 详细信息

目的:分析哈尔滨地区儿科病房2005年9月至2006年3月间临床分离革兰阴性杆菌分布及其耐药性,为儿科合理使用抗生素提供依据。方法:应用API20E微生物鉴定系统对临床分离菌株进行鉴定,RAPD法排除重复菌株;K-B纸片扩散法对12种抗菌药物进行敏感性测定。结果:儿科病房分离310株革兰阴性杆菌中,以克雷伯菌属(49.1%)多见,肠杆菌属(14.1%)、大肠埃希菌(10.3%)、不动杆菌属(6.7%)和沙雷菌属(5.2%)等构成比低。粪便、痰、脓汁、血液标本中细菌构成比分别为56.4%、25.4%、7.7%和5.1%。药物敏感性实验显示,儿科常见革兰阴性菌对头孢唑啉和头孢呋辛敏感性较差,对头孢唑啉耐药率平均达85.0%,而亚胺培南、头孢西丁、β-内酰胺加酶抑制剂、头孢哌酮、拉氧头孢和阿米卡星的抗菌作用较强;尿液标本分离菌对二代头孢菌素、三代头孢菌素、头霉素和喹诺酮类耐药率较其他部位分离菌高。结论:哈市儿科病房分离的革兰阴性菌中以克雷伯菌属为主,细菌对不同抗生素表现为较高的耐药性,在治疗中应该考虑细菌的耐药特点与感染类型等,合理选择抗生素。

关键词：儿科感染革兰阴性杆菌抗生素耐药性

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肺炎克雷伯菌对环丙沙星的药物敏感性和qnr基因检测

肺炎克雷伯菌对环丙沙星的药物敏感性和qnr基因检测

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第七次全国临床微生物学术年会暨第三届两岸三地临床微生物与感染病学术论坛

作者：付英梅张文莉张凤民马佳毓赵松哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨 150081 哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨 50081

目前,细菌对喹诺酮类药物的耐药性逐年增加。细菌染色体基因突变导致喹诺酮的作用靶位改变和主动外排系统可导致喹诺酮类耐药,近年又发现了由qnr基因决定的质粒介导的喹诺酮耐药。为研究肺炎克雷伯菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药性和qnr基... 详细信息

目前,细菌对喹诺酮类药物的耐药性逐年增加。细菌染色体基因突变导致喹诺酮的作用靶位改变和主动外排系统可导致喹诺酮类耐药,近年又发现了由qnr基因决定的质粒介导的喹诺酮耐药。为研究肺炎克雷伯菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药性和qnr基因在肺炎克雷伯菌喹诺酮类耐药株中的存在情况,我们在2005年9月-2006年3月,自哈尔滨市四所医院收集肺炎克雷伯菌临床分离株231株,常量肉汤稀释法确定细菌对环丙沙星的MIC范围是<0.061μg/ml-64μg/ml,MIC<,50>为D.25μg/ml,MIC<,90>为16μg/ml,74株MIC≥4μg/ml,对环丙沙星的耐药率为32.0％;应用K-B纸片扩散法筛选对环丙沙星或左氧氟沙星呈中介或耐药的菌株130株,以qnr基因特异引物通过聚合酶链反应,结果有2株检测到qnr基因,检出率为1.54％(2/130),2株qnr阳性肺炎克雷伯菌对环丙沙星的MIC值均为0.25μg/ml。结果表明哈尔滨地区肺炎克雷伯菌临床分离株对环丙沙星耐药性较高,本地区肺炎克雷伯菌中已出现质粒qnr基因。

关键词：肺炎克雷伯菌喹诺酮环丙沙星药物敏感性基因检测

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检测博尔纳病病毒RNA的RACE技术的建立

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中国微生态学杂志 2007年第4期19卷 337-338,342页

作者：钱钧李小光包丽丽宋武琦翟爱霞陈小贝李玉军车洋张凤民哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的建立检测博尔纳病病毒(BDV)RNA的3′RACE(rapid amplification of cDNA ends)方法。方法根据已知的BDV p40基因序列设计上游引物sp1;提取BDV(H1766株)持续感染OL细胞的总RNA,用引物sp1和oligo dT进行3′RACE扩增,将PCR产物克隆到pGEM-T载体并转化到大肠埃希菌中,制备阳性菌落的目的质粒,进行序列测定和同源性比对;同时对检测BDV RNA的3′RACE方法的特异性和敏感性进行分析。结果建立了检测BDV RNA的3′RACE技术;所获得的BDV p40基因的3′末端扩增产物的核苷酸序列与已知BDV(H1766株)p40基因的核苷酸序列同源性为100%;本方法对BDV RNA(mRNA)具有特异性,但对BDV p40基因重组质粒无扩增结果;并且可以检测到0.04 ng以上含量的BDV感染细胞的总RNA。结论检测BDV RNA的3′RACE技术可以排除实验室污染造成的BDV基因扩增的假阳性,并可用于进一步分析BDV基因序列的特点以及评价BDV相关基因的表达情况。

关键词：博尔纳病病毒快速cDNA末端扩增序列分析

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人腺病毒六邻体蛋白保守区抗原性分析

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国际免疫学杂志 2007年第3期30卷 135-138页

作者：王鹏曲章义张鸿彦陈晶魏凤香哈尔滨医科大学卫生微生物学教研室硕士研究生 150086

目的阐明人腺病毒（HAdV）六邻体蛋白保守区的抗原性的特征，为鉴定六邻体的抗原表位奠定基础。方法用生物信息学软件ANTHEPROT5．0和DNAMAN对HAdV3六邻体氨基酸序列进行抗原性预测分析和二级结构的分析，然后由SWISS-MODEL Protein M... 详细信息

目的阐明人腺病毒（HAdV）六邻体蛋白保守区的抗原性的特征，为鉴定六邻体的抗原表位奠定基础。方法用生物信息学软件ANTHEPROT5．0和DNAMAN对HAdV3六邻体氨基酸序列进行抗原性预测分析和二级结构的分析，然后由SWISS-MODEL Protein Modelling Server预测出HAdV3六邻体蛋白三维结构。结果抗原性预测分析显示，在六邻体的前段和中段，该区域含有大量的保守区，可能具有较强的抗原性，而六邻体后段总体抗原性较弱。根据HAdV2六邻体蛋白三维结构模型预测出HAdV3六邻体蛋白三维结构。结论六邻体的前段和中段的部分保守区域在腺病毒颗粒上可能具有较好的暴露性并可能含有抗原性较强的型间或组特异性抗原表位。

关键词：人腺病毒六邻体抗原性分析蛋白质三维结构预测

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5’-非编码区第6茎环区突变可显著改变B组柯萨奇病毒毒力

5’-非编码区第6茎环区突变可显著改变B组柯萨奇病毒毒力

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第七届全国病毒学学术研讨会暨第二届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：钟照华赵文然佟雷李晓波林乐勋武帅钦张凤民哈尔滨医科大学微生物教研室哈尔滨医科大学细胞生物学教研室

B 组柯萨奇病毒(CVB)基因组是+ssRNA,其5’非编码区(5'-UTR)含6个茎环结构,是核糖体结合位点(IRES)。研究发现 IRES 非茎环区突变会严重影响 CVB 复制效率。我们前期研究发现心肌病心肌组织检测的 CVB 5'-UTR 第6茎环

关键词：柯萨奇病毒 CVB 非编码区

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肥胖及皮质醇、雌激素等因素与2型糖尿病的关系调查

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苏州大学学报（医学版） 2007年第5期27卷 787-789页

作者：赵英伟袁重胜孙萌樊立华卢明俊苏州大学医学院微生物学教研室江苏苏州215123 哈尔滨医科大学公共卫生学院黑龙江哈尔滨150086 苏州大学药学院江苏苏州215123

目的探讨肥胖及皮质醇、雌激素、睾酮、瘦素、TNF-α、胰岛素等因素对2型糖尿病的作用,为有效预防和控制2型糖尿病提供科学依据。方法2002年对哈尔滨市道里区通江社区20岁以上常住居民2689人进行2型糖尿病流行病学分层抽样调查;并对其... 详细信息

目的探讨肥胖及皮质醇、雌激素、睾酮、瘦素、TNF-α、胰岛素等因素对2型糖尿病的作用,为有效预防和控制2型糖尿病提供科学依据。方法2002年对哈尔滨市道里区通江社区20岁以上常住居民2689人进行2型糖尿病流行病学分层抽样调查;并对其中诊断为糖尿病者170例采用125I放射免疫分析法分别测定皮质醇、雌激素、睾酮、瘦素、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)、胰岛素等指标;采用Logistic回归分析方法处理数据。结果出现腹型肥胖,瘦素水平降低,胰岛素、皮质醇、睾酮、雌二醇水平增高,则糖尿病患病危险大;TNF-α与2型糖尿病患病关系不显著。结论体内瘦素水平、皮质醇、雌激素、睾酮间存在着复杂的联系,其综合作用的结果影响糖尿病的发生和发展。

关键词： 2型糖尿病肥胖瘦素皮质醇性激素

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凝血酶对HIV-1包膜介导的细胞-细胞融合的影响

凝血酶对HIV-1包膜介导的细胞-细胞融合的影响

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第七届全国病毒学学术研讨会暨第二届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：程德春钟国才刘彦虹李宇星张凤民凌虹哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨医科大学附属第二医院检验科

本研究采用 HIV-1包膜基因(env)的真核表达质粒 pSⅧ-JR-FL-dct 与 tat 基因的真核表达质粒 pcTat 共转染293T 细胞:将 Env 表达细胞与同时表达 HIV-1受体和辅助受体的靶细胞共同培养,细胞发生融合后,通过优化转染和融合条件,建

关键词：凝血酶细胞融合 HIV-1

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