检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2006年第9期26卷 771-776页

作者：庄敏谷鸿喜李迪崔洪波刘希君魏兰兰凌虹哈尔滨医科大学微生物学教研室 150086

目的将本地区流行株HPV-16 L1基因与HPV-11 L1基因双表达于杆状病毒昆虫细胞表达系统,组装成类病毒颗粒(virus like particles,VLP)。为研制同时预防宫颈癌和尖锐湿疣等多种疾病的HPV-16-11型基因工程疫苗奠定基础。方法对本地流行株HPV... 详细信息

目的将本地区流行株HPV-16 L1基因与HPV-11 L1基因双表达于杆状病毒昆虫细胞表达系统,组装成类病毒颗粒(virus like particles,VLP)。为研制同时预防宫颈癌和尖锐湿疣等多种疾病的HPV-16-11型基因工程疫苗奠定基础。方法对本地流行株HPV-16 L1基因进行亚克隆,构建pBluescript-HPV-16L1克隆质粒,并对其测序。再将质粒中HPV-16 L1基因切下,连接到pFastBacDual的强启动子phol后;从克隆质粒pSP73-HPV-11 L1切下HPV-11 L1,连接到pFastBacDual的弱启动子p10后,利用Bac to Bac系统在昆虫细胞Sf9中表达外源蛋白。SDS-PAGE和Western blot鉴定HPV-16 L1和HPV-11 L1蛋白的表达量及特异性,电镜观察昆虫细胞内VLP的存在。结果酶切和PCR法证实pFastBacDual-HPV-16 L1-HPV-11 L1转移质粒连接正确,转染昆虫细胞Sf9后,检测到HPV-16和HPV-11 L1特异蛋白,两种蛋白的相对分子质量(Mr)相近,约56×103;电镜观察到了VLP。结论本研究利用Bac to Bac系统构建Bacmid／HPV-16-HPV-11 L1,转染到Sf9昆虫细胞后重组外源蛋白得到高效表达,并经电镜证实昆虫细胞内存在较大量VLP,用此VLP免疫BALB／c小鼠后产生抗L1蛋白的抗体。共表达HPV L1蛋白可能为预防多型别HPV感染提供新途径。

关键词：人乳头状瘤病毒16型人乳头状瘤病毒11型 L1基因共表达类病毒颗粒杆状病毒

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禽流感病毒所致人类疾病及其预防

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哈尔滨医科大学学报 2006年第1期40卷 83-84,F0003页

作者：曲章义高虹哈尔滨医科大学卫生微生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)是引起禽类病毒性流行性感冒,即禽流感的病原体。AIV所致的禽流感是禽类严重的传染性疾病,被国际兽疫局定为A类传染病。禽流感严重危害着养禽业的健康发展和国民经济的发展,因此,对禽流感病毒的... 详细信息

禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)是引起禽类病毒性流行性感冒,即禽流感的病原体。AIV所致的禽流感是禽类严重的传染性疾病,被国际兽疫局定为A类传染病。禽流感严重危害着养禽业的健康发展和国民经济的发展,因此,对禽流感病毒的研究日益受到重视。尤其是从1997年开始,禽流感病毒的传播跨越了原来的宿主范围,开始感染人类,使人类发病。至2005年12月16日为止,亚洲地区已有139人被H5N1型禽流感病毒感染发病,其中71人死亡,死亡率高达51%,远比2003年的“SARS”死亡率高。禽流感不仅给人类的健康带来了严重的威胁,还造成了人类的心理恐慌和巨大的社会影响。因此,有效防治禽流感病毒的传播,控制禽流感的传染和蔓延具有重大的经济意义和社会意义。[第一段]

关键词：禽流感禽流感病毒致病性预防

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体外癫癎微环境下神经干细胞发育的初步研究

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中华神经科杂志 2006年第9期39卷 616-619页

作者：林志国刘利沈红车彦军张帆白云龙张凤民杨富明哈尔滨医科大学第一临床医学院神经外科四病房 150001 哈尔滨医科大学第一临床医学院麻醉科 150001 哈尔滨医科大学药理学教研室哈尔滨医科大学病原微生物学教研室

目的探讨神经干细胞在癫癎微环境下能否发育为"癫癎神经元"。方法"无镁"外液处理神经元建立"癫癎神经元"模型。将绿色荧光蛋白标记的神经干细胞分别与正常海马神经元、"癫癎神经元"共培养,应... 详细信息

目的探讨神经干细胞在癫癎微环境下能否发育为"癫癎神经元"。方法"无镁"外液处理神经元建立"癫癎神经元"模型。将绿色荧光蛋白标记的神经干细胞分别与正常海马神经元、"癫癎神经元"共培养,应用膜片钳记录干细胞的突触后电位,利用免疫荧光检测干细胞突触素抗体染色情况。将神经干细胞分化神经元放入"无镁"外液,应用膜片钳记录其突触后电位。结果在"无镁"细胞外液处理3h 后恢复正常细胞外液培养14d,神经元仍存在自发的"癫癎样放电"。干细胞与"癫癎神经元"共培养时,免疫荧光结果示80%干细胞突触素染色阳性,膜片钳记录到干细胞12次/5min 兴奋性突触后电位。在"无镁"外液中,60%干细胞分化神经元出现14次/5min 时程约10s的兴奋性突触后电位,未记录到"癫癎样放电"。结论干细胞能够与周围神经元形成功能性突触;干细胞在癫癎微环境下转变成"癫癎神经元"的可能性极小。

关键词：干细胞癫痫神经元细胞分化

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不同剂量的华支睾吸虫囊蚴感染大鼠的实验研究

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哈尔滨医科大学学报 2006年第1期40卷 27-29页

作者：张晓丽崔洪波李懿宏舒晶文景山杨凤坤徐之杰哈尔滨医科大学寄生虫学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的观察不同剂量的华支睾吸虫囊蚴感染后大鼠粪便中虫卵检出率及肝组织的病理变化。方法分离采自疫区麦穗鱼体内的囊蚴,分别以50、100和200个囊蚴经口感染3组大鼠,同时设对照组。生理盐水涂片法检查大鼠粪便中虫卵,虫卵检出率达100%时... 详细信息

目的观察不同剂量的华支睾吸虫囊蚴感染后大鼠粪便中虫卵检出率及肝组织的病理变化。方法分离采自疫区麦穗鱼体内的囊蚴,分别以50、100和200个囊蚴经口感染3组大鼠,同时设对照组。生理盐水涂片法检查大鼠粪便中虫卵,虫卵检出率达100%时宰杀动物,取肝脏作组织切片。结果感染组大鼠感染后第20d粪便虫卵检出率为78.8%;第30d为90.9%;第40d为96.9%;第45d检出率为100%。对照组均未检出虫卵。结论感染后第45d虫卵检出率达高峰;200个囊蚴可作为动态观察宿主状态的感染剂量。

关键词：华支睾吸虫囊蚴大鼠

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博尔纳病病毒感染对新生大鼠脑内单胺类受体基因转录的影响

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中华实验和临床病毒学杂志 2006年第4期20卷 321-323页

作者：董云霞李小光宋武琦李玉军李桂梅马培林生田和良张凤民哈尔滨医科大学微生物学与人体寄生虫学教研室 150081 日本大阪大学微生物病研究所

目的分析博尔纳病病毒(BDV)感染对新生大鼠脑内单胺类受体基因转录的影响。方法选择病毒滴度为2·0×106FFU/ml的BDV病毒液对新生大鼠进行颅内接种,接种量为10μl/只新生大鼠。30d后用RT-PCR和间接免疫荧光方法确定BDV感染情况... 详细信息

目的分析博尔纳病病毒(BDV)感染对新生大鼠脑内单胺类受体基因转录的影响。方法选择病毒滴度为2·0×106FFU/ml的BDV病毒液对新生大鼠进行颅内接种,接种量为10μl/只新生大鼠。30d后用RT-PCR和间接免疫荧光方法确定BDV感染情况;并采用半定量RT-PCR方法检测BDV感染大鼠脑组织中多巴胺2(D2)受体和5-羟色胺2α(5-HT2α)受体基因的mRNA转录情况。结果病毒接种后新生大鼠的BDV感染阳性率为88·89%。病毒感染大鼠脑组织中5-HT2α受体和D2受体基因的mRNA转录水平均明显低于对照组,差异有统计学意义。结论BDV感染可以明显抑制新生大鼠脑组织中D2受体和5-HT2α受体基因的mRNA转录,提示单胺类受体基因的转录与表达参与BDV感染的致病过程。

关键词： Boma病病毒逆转录聚合酶链反应受体血清素多巴胺转录遗传

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鸡沙门菌基因组物理图

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第11期26卷 965-970页

作者：刘桂荣刘葳峤祁丹妮何晓燕张凤民刘树林北京大学医学部病原生物学系 100083 T2N 4N1加拿大卡尔加里大学微生物学系哈尔滨医科大学微生物学教研室

目的建立鸡沙门菌287/91株的基因组物理图,与鸡沙门菌SARB21以及鼠伤寒沙门菌LT2的基因组物理图进行比较,以找出同种细菌不同菌株之间以及近缘菌之间基因组的差异,进而探讨细菌基因组进化的一般规律。方法细菌基因组DNA用XhaⅠ、AvrⅡ和... 详细信息

目的建立鸡沙门菌287/91株的基因组物理图,与鸡沙门菌SARB21以及鼠伤寒沙门菌LT2的基因组物理图进行比较,以找出同种细菌不同菌株之间以及近缘菌之间基因组的差异,进而探讨细菌基因组进化的一般规律。方法细菌基因组DNA用XhaⅠ、AvrⅡ和Ⅰ-CeuⅠ进行酶切,再用脉冲场凝胶电泳方法分离出DNA片段,通过Tn10插入等方法对这些片段进行精确排列。结果构建了鸡沙门菌287/91株的基因组物理图。与SARB21株的基因组物理图比较发现,二者相对于鼠伤寒沙门菌LT2有相似的插入和缺失片段。结论鸡沙门菌287/91株与SARB21株基因组很相似,其主要差异在于rrn操纵子DNA介导的同源性重组发生的具体部位不同,导致了基因组DNA片段的不同排列,因而造成二者不同的基因组结构。

关键词：鸡沙门菌基因组物理图 LCeuⅠ 基因组重排脉冲场凝胶电泳

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颈动脉内-中膜厚度与冠心病的病变程度及其危险因素的相关性研究

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哈尔滨医科大学学报 2006年第3期40卷 243-245,248页

作者：李京秀李学奇金丽娟李晓波哈尔滨医科大学第四临床医学院心内科哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150001

目的探讨超声检测颈动脉内-中膜厚度在冠心病病变程度及其危险因素的相关性研究中的意义。方法随机抽取在我院接受冠状动脉造影检查的患者79例,同时应用超声技术测量双侧颈总动脉、分叉处及颈内动脉后壁内-中膜厚度;应用全自动生化分析... 详细信息

目的探讨超声检测颈动脉内-中膜厚度在冠心病病变程度及其危险因素的相关性研究中的意义。方法随机抽取在我院接受冠状动脉造影检查的患者79例,同时应用超声技术测量双侧颈总动脉、分叉处及颈内动脉后壁内-中膜厚度;应用全自动生化分析仪测定各研究对象血糖、血脂等指标。采用多元线性回归分析颈动脉内-中膜厚度与冠心病病变程度及其危险因素的关系。结果颈动脉内-中膜厚度与冠状动脉造影的病变支数呈正相关,与冠心病的危险因素如年龄、低密度脂蛋白胆固醇、血压、血糖、男性别呈正相关,而与高密度脂蛋白胆固醇水平增高呈负相关。结论超声检测颈动脉内-中膜厚度可早期反映冠状动脉粥样硬化,前瞻性地分析冠状动脉病变程度,且对于冠心病危险因素水平予以评估,可作为监测冠状动脉疾病发生、发展及治疗效果的一项有临床意义的指标。

关键词：颈动脉内-中膜厚度冠心病危险因素

来源：评论

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Ⅰ型人类免疫缺陷病毒包膜糖蛋白修饰体表达载体的构建及鉴定

引用

中国地方病学杂志 2006年第4期25卷 453-456页

作者：张唯哲李妍周海舟服部俊夫凌虹哈尔滨医科大学微生物学和寄生虫学教研室 150081 日本东北大学大学院医学系研究科感染症呼吸病态学分野

目的构建V3环完全或部分缺失的I型人类免疫缺陷病毒(hauman immunodeficiency virus type I,HIV-1)ADA株包膜糖蛋白表达体系。方法分别设计包膜糖蛋白两端及V3环删除区域两端的引物,采用重叠延伸剪接法进行HIV-1 ADA株包膜糖蛋白V3环修... 详细信息

目的构建V3环完全或部分缺失的I型人类免疫缺陷病毒(hauman immunodeficiency virus type I,HIV-1)ADA株包膜糖蛋白表达体系。方法分别设计包膜糖蛋白两端及V3环删除区域两端的引物,采用重叠延伸剪接法进行HIV-1 ADA株包膜糖蛋白V3环修饰体的构建。得到的PCR产物经EcoR I和Xho I双酶切,将酶切产物与pSM载体连接,转化大肠埃希菌后筛选阳性克隆,经PCR及基因序列测定进行鉴定。结果获得HIV-1 ADA株包膜糖蛋白V3环修饰体PCR产物,构建了其表达载体pSM-ADA△V3和pSM- ADAmV3,经转化和筛选获得了重组质粒,经PCR及基因测序鉴定显示重组质粒序列正确,为预期目的片段。结论成功构建了V3环修饰的HIV-1 ADA株包膜糖蛋白的表达载体。此结果为进一步构建伪病毒,观察V3环完全或部分缺失对病毒侵入靶细胞过程的影响,为开发阻止HIV-1进入靶细胞的药物或疫苗打下基础。

关键词： HIV-1 HIV包膜蛋白质gp120 修饰重叠延伸剪接法

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鸡沙门菌NCTC13346株基因组物理图谱的建立与结构特征的比较

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哈尔滨医科大学学报 2006年第6期40卷 450-453页

作者：祁丹妮张凤民哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省高校重点实验室黑龙江哈尔滨150081

目的建立鸡沙门菌NCTC13346株基因组物理图谱,并比较其结构特征。方法制备鸡沙门菌NCTC13346株基因组DNA,用rrl基因特异性的I-CeuⅠ内切酶以及限制性内切酶XbaⅠ和AvrⅡ酶切后,进行脉冲凝胶电泳(PFGE),分离出DNA片段,最后用噬菌体P22转... 详细信息

目的建立鸡沙门菌NCTC13346株基因组物理图谱,并比较其结构特征。方法制备鸡沙门菌NCTC13346株基因组DNA,用rrl基因特异性的I-CeuⅠ内切酶以及限制性内切酶XbaⅠ和AvrⅡ酶切后,进行脉冲凝胶电泳(PFGE),分离出DNA片段,最后用噬菌体P22转导已知携带沙门氏菌基因的Tn10插入子的方法定位基因排列,根据酶切片断的连接与已知基因的定位,绘制该菌的基因组结构物理图,并与已知鸡沙门菌SARB21基因组结构进行比较。结果建立鸡沙门菌NCTC13346株基因组物理图谱,与鸡沙门菌SARB21基因组物理图谱相比,两者具有相对于鼠伤寒沙门氏菌LT2的相似的基因插入和缺失片段,但由于两者基因组中含有rrn操纵子的DNA片段的不同排列,分别表现为迥异的基因组结构。结论建立鸡沙门菌基因组物理图谱可用于分析同种细菌的基因组特点与进化。

关键词：鸡沙门菌基因组物理图谱 I-CeuⅠ 基因组重排脉冲凝胶电泳

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产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌CTX-M基因型和耐药性分析

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哈尔滨医科大学学报 2006年第6期40卷 433-437页

作者：付英梅张文莉许建丰陈小贝崔洪波张凤民哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省高校重点实验室黑龙江哈尔滨150081

目的研究哈尔滨市肺炎克雷伯菌中CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行组别和细菌耐药性特征。方法收集哈尔滨市4所医院非重复的74株产ESBLs肺炎克雷伯菌,采用CTX-M1、2、8、9组特异性PCR引物检测菌株质粒上相应4组CTX-M基因的存在情... 详细信息

目的研究哈尔滨市肺炎克雷伯菌中CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行组别和细菌耐药性特征。方法收集哈尔滨市4所医院非重复的74株产ESBLs肺炎克雷伯菌,采用CTX-M1、2、8、9组特异性PCR引物检测菌株质粒上相应4组CTX-M基因的存在情况,并用K-B纸片扩散法测定菌株对临床相关的广谱β-内酰胺类抗菌药物的耐药性。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌中25.7%的菌株CTX-M1组PCR扩增阳性,39.2%为CTX-M9组阳性,未检测到CTX-M2组和CTX-M8组的存在。CTX-M阳性株对头孢噻肟、头孢曲松和头孢他啶的耐药率与CTX-M阴性株相比,差异无统计学意义(均P>0.05)。结论本地区产ESBLs肺炎克雷伯菌中CTX-M型ESBLs以CTX-M1组和CTX-M9组为主,有同时携带两组CTX-M基因菌株的检出;本地区CTX-M型ESBLs在产ESBLs肺炎克雷伯菌对头孢噻肟、头孢曲松和头孢他啶的耐药特征中不起主要作用。

关键词：肺炎克雷伯菌 blaCTX-M基因耐药性

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