检索结果-内蒙古大学图书馆

世界华人消化杂志 2005年第11期13卷 1291-1294页

作者：张淑云刘伟李迪谷鸿喜仰曙芬周志红杜博金茜常曼丽哈尔滨医科大学附属第二医院科研实验中心黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省哈尔滨市150086

目的:对国产荧光标记杂交双探针PCR融解曲线法(FH—PCR—MC)检测乙型肝炎病毒聚合酶酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸基序(HBVYMDD)变异的试剂进行临床应用评价.方法:慢性乙型肝炎患者外周血浆标本217份,分别采用荧光标记Taqman探... 详细信息

目的:对国产荧光标记杂交双探针PCR融解曲线法(FH—PCR—MC)检测乙型肝炎病毒聚合酶酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸基序(HBVYMDD)变异的试剂进行临床应用评价.方法:慢性乙型肝炎患者外周血浆标本217份,分别采用荧光标记Taqman探针定量PCR法(FT—PCR)和荧光标记杂交双探针PCR融解曲线法(FH—PCR—MC)检测HBVDNA含量和YMDD及其变异;其中78份HBVDNA阳性标本采用基因型特异性多引物对巢式PCR法进行基因分型(A—F),30份标本用PCR产物克隆测序法检测HBVYMDD及其变异.结果:血浆标本HBVDNA阳性率(≥1.0×106copies/L)为75.6%(164/217).YMDD及其变异检出率为67.7%(147/217).其中YMDD44.9%(66/147),YIDD22.5%(33/147).YVDD17.7%(26/147),YIDD/YVDD混合株10.9%(16/147),其他混合株4.0%(6/147);结合HBVDNA含量,HBVYMDD及其变异的检出下限为HBVDNA=5.0×106copies/L,但在106copies/L时检出率较低,仅为36.4%,随着HBVDNA含量增高,检出率显著增高(>80%),且在107copies/L时即有显著增高(χ2=7.177,P<0.01).在基因分型的78份标本中,C基因型占89.8%,B和D基因型分别占8.9%和1.3%,YMDD及其变异总检出率为100%,变异总检出率为59.0%;1份D基因型YMDD及其变异检测为YIDD/YVDD混合变异;B,C两种基因型变异检出率分别为71.4%和55.7%,但二者无统计学差异.以测序法的检测结果为相对标准,则FH—PCR—MC法检测HBVYMDD及其变异的相对敏感性、特异性和符合率分别为96.3%(26/27),100%(3/3)和96.7%(29/30);对于HBVYMDD及其变异的类型,两种方法检测结果一致.结论:FH—PCR—MC法是一种快速、特异的HBVYMDD及其变异检测方法,具有较高的检出率,且能区分YMDD及其变异的类型.

关键词：荧光标记曲线法双探针融解杂交乙型肝炎病毒聚合酶慢性乙型肝炎患者 DNA含量 YMDD 天门冬氨酸临床应用评价定量PCR法 Taqman 巢式PCR法 HBV 血浆标本基因分型 D基因型总检出率检测结果克隆测序法 PCR产物基因型变异

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抗感染免疫中CD14/TLR-MD-2复合体的信号转导作用

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生命的化学 2005年第3期25卷 205-208页

作者：宋岩李琳李一经东北农业大学动物医学学院微生物学与免疫学教研室哈尔滨150030 哈尔滨医科大学临床医学院哈尔滨150048

TOLL样受体(TOLL-likereceptor,TLR)是近年发现的一族天然受体,在机体内其主要成员可与MD-2蛋白及CD14结合形成CD14/TLR-MD-2复合体,特异性识别多种病原微生物,通过偶联信号转导途径,激活机体的免疫细胞,产生一系列的炎症反应,在抗感染... 详细信息

TOLL样受体(TOLL-likereceptor,TLR)是近年发现的一族天然受体,在机体内其主要成员可与MD-2蛋白及CD14结合形成CD14/TLR-MD-2复合体,特异性识别多种病原微生物,通过偶联信号转导途径,激活机体的免疫细胞,产生一系列的炎症反应,在抗感染免疫中发挥重要作用。

关键词： CDl4/TLR-MD-2复合体 TLR MD-2蛋白 CDl4 抗感染免疫信号转导

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HPV 6b L1基因原核表达系统的构建及鉴定

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微生物学杂志 2005年第4期25卷 25-27页

作者：刘希君庄敏商庆龙王燕魏兰兰李迪谷鸿喜哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

克隆、构建人乳头瘤病毒6b型(HPV6b)L1基因重组质粒,并进行表达和鉴定。用PCR方法,从尖锐湿疣标本中扩增出HPV6b型L1基因,构建重组克隆质粒pblue-HPV6bL1,测序分析其基因变异。将本地株HPV6b型L1基因酶切后连接到原核表达质粒pBAD,构建... 详细信息

克隆、构建人乳头瘤病毒6b型(HPV6b)L1基因重组质粒,并进行表达和鉴定。用PCR方法,从尖锐湿疣标本中扩增出HPV6b型L1基因,构建重组克隆质粒pblue-HPV6bL1,测序分析其基因变异。将本地株HPV6b型L1基因酶切后连接到原核表达质粒pBAD,构建原核表达系统pBAD-HPV6bL1/Top10,酶切鉴定证明重组质粒的正确性。经L-Arobinose诱导后表达HPV6b型L1蛋白,利用SDS-PAGE对表达产物进行鉴定。经酶切及序列分析鉴定,重组质粒pBAD-HPV6bL1构建成功,诱导后能够表达L1融合蛋白。HPV6bL1重组质粒构建成功,并获得HPV6bL1蛋白,为该蛋白的功能及HPV的基因工程疫苗研究提供了物质基础。

关键词：尖锐湿疣人乳头瘤病毒6b型 L1基因基因克隆基因表达原核表达系统酶切鉴定质粒构建 HPV 基因重组质粒

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HIV-1疫苗研究新策略

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中国艾滋病性病 2005年第6期11卷 468-470,473页

作者：钟国才李妍凌虹哈尔滨医科大学微生物学教研室寄生虫学教研室黑龙江哈尔滨150086

1981年发现艾滋病(Acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)以来的20年间,AIDS已成为全球最严重的感染性疾病和非洲地区人口死亡的首要原因.来自联合国艾滋病规划署(UNAIDS)最新的流行病学统计数据显示,到2004年底,全球感染艾滋病病毒... 详细信息

1981年发现艾滋病(Acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)以来的20年间,AIDS已成为全球最严重的感染性疾病和非洲地区人口死亡的首要原因.来自联合国艾滋病规划署(UNAIDS)最新的流行病学统计数据显示,到2004年底,全球感染艾滋病病毒(HIV)的人已达3 940万,较前一年新增490万(http://***).HIV感染正以前所未有的速度蔓延,预防性疫苗是最有前景的控制HIV感染的策略,却面临着诸多科学的挑战,如:(1)缺乏对免疫与保护相关性的了解;(2)对灵长类保护试验与人体保护性疫苗相关性的知识有限;(3)HIV基因的变异及由此导致的病毒免疫学性状的变异对疫苗效力的影响.尽管如此,科学界一致认为研制出安全、有效的HIV疫苗完全可能.

关键词： immunodeficiency HIV-1 疫苗研究联合国艾滋病规划署 syndrome 感染性疾病艾滋病病毒 HIV感染免疫学性状流行病学统计

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人类免疫缺陷病毒与结核分枝杆菌双重感染的流行病学、致病机制与诊断的研究进展

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国外医学（免疫学分册） 2005年第4期28卷 239-243页

作者：曾明刘畅凌虹 150086 哈尔滨医科大学 518036 北京大学深圳医院哈尔滨医科大学微生物学教研室寄生虫教研室

近十年来,由于Ⅰ型人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus type1,HIV-1)感染率在全球范围内不断上升,许多机会感染的发生率也随之而上升。其中最多见的就是HIV和结核分枝杆菌(Mycobacterial tuberculosis,MTB)的联合感染。近... 详细信息

近十年来,由于Ⅰ型人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus type1,HIV-1)感染率在全球范围内不断上升,许多机会感染的发生率也随之而上升。其中最多见的就是HIV和结核分枝杆菌(Mycobacterial tuberculosis,MTB)的联合感染。近年来的研究表明,这种联合感染并不是单纯的两种病症的叠加,而是一个相互促进的过程,这样使得HIV感染者和结核病患者的死亡率大大升高。本文从分子机制上综述了近年来对于HIV和MTB两种病原体相互促进的机制的研究进展,以及对HIV感染者进行MTB检测的最新技术。

关键词： HIV-1 MTB 双重感染机制诊断

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博尔纳病病毒持续感染细胞系中病毒RNA的原位PCR检测

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中国微生态学杂志 2005年第3期17卷 170-171页

作者：杨爱英张凤民马培林林志国刘玉芳谷鸿喜生田和良哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学附属第一医院黑龙江哈尔滨150000 日本大阪大学微生物病研究所

目的建立检测博尔纳病病毒(BDV)RNA的原位PCR方法。方法首先设计BDV特异性引物以及检测BDV-RNA的原位PCR扩增系统,然后对BDV持续感染细胞(BDV/OL)和正常细胞(OL细胞)爬片进行原位PCR扩增,进而分别用DNA酶或RNA酶消化处理BDV/OL细胞爬片... 详细信息

目的建立检测博尔纳病病毒(BDV)RNA的原位PCR方法。方法首先设计BDV特异性引物以及检测BDV-RNA的原位PCR扩增系统,然后对BDV持续感染细胞(BDV/OL)和正常细胞(OL细胞)爬片进行原位PCR扩增,进而分别用DNA酶或RNA酶消化处理BDV/OL细胞爬片后,再进行原位PCR扩增。结果经原位PCR扩增后,约60%～70%的BDV持续感染细胞核中出现了阳性反应信号,但正常细胞无信号出现,并且病毒感染细胞中的阳性信号在RNA酶消化作用下消失,但不受DNA酶作用的影响。结论该研究建立的PCR检测方法具有BDV和RNA特异性,可以应用于检测相关动物或神经精神疾病患者的脑组织中BDV-RNA,为进一步证明BDV的致病性奠定基础。

关键词：博尔纳病病毒持续感染原位细胞系 PCR扩增 PCR检测方法正常细胞感染细胞 RNA酶 PCR方法特异性引物消化处理阳性反应消化作用精神疾病 DNA 细胞核无信号性信号酶作用脑组织致病性神经动物

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病毒分离和PCR-RFLP法对急性结膜炎标本中腺病毒感染及其型别的分析

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中国微生态学杂志 2005年第2期17卷 97-99页

作者：李莉宋武琦李小光马培林张凤民哈尔滨医科大学第一临床医学院眼科黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的　分析2 0 0 3年下半年收集的哈尔滨医科大学第一临床医学院急性结膜炎标本中的腺病毒( Adenovirus,Ad V)感染情况及其型别。方法　采集5 9例临床确诊为急性结膜炎患者的结膜拭子标本,在观察和分析接种细胞的病变( CPE)情况的基础上... 详细信息

目的　分析2 0 0 3年下半年收集的哈尔滨医科大学第一临床医学院急性结膜炎标本中的腺病毒( Adenovirus,Ad V)感染情况及其型别。方法　采集5 9例临床确诊为急性结膜炎患者的结膜拭子标本,在观察和分析接种细胞的病变( CPE)情况的基础上,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析( PCR- RFL P)法,特异性检测CPE阳性细胞中腺病毒核酸的存在情况,并对PCR阳性扩增产物进行病毒型别的分析。结果　70 .7% ( 4 1/5 9)的急性结膜炎标本接种于培养细胞后可以引起明显的CPE;其中,5 3.6 % ( 2 2 / 4 1)的CPE阳性标本可以扩增出腺病毒核酸,RFL P分析证实6 8.18% ( 15 / 2 2 )的腺病毒感染为Ad3型,31.82 % ( 7/ 2 2 )的腺病毒感染为Ad7。结论2 0 0 3年下半年哈尔滨市急性结膜炎主要以腺病毒3、7型感染为主。提示结合病毒分离培养和PCR- RFL P方法。

关键词：腺病毒感染结膜炎 PCR 急性标本型别病毒分离限制性片段长度多态性分析 2003年下半年聚合酶链式反应 RFLP分析病毒核酸特异性检测分析与研究 CPE 医科大学感染情况阳性细胞扩增产物培养细胞哈尔滨市分离培养

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HIV-1黑龙江省分离株CHNHLJ03009包膜克隆及分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2005年第11期25卷 885-889页

作者：周海舟李妍凌虹刘延成黄秉成服部俊夫哈尔滨医科大学微生物学和寄生虫学教研室 150086 黑龙江省疾病预防控制中心病毒病研究所日本东北大学医学系研究科感染病态学分野

目的分析黑龙江省Ⅰ型人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus type1,HIV21)原代分离株包膜糖蛋白的变异性及表型特征。方法从一名HIV阳性但未发病的感染者外周血单个核细胞提取DNA,采用保守引物进行HIV包膜直接克隆,进行序列分... 详细信息

目的分析黑龙江省Ⅰ型人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus type1,HIV21)原代分离株包膜糖蛋白的变异性及表型特征。方法从一名HIV阳性但未发病的感染者外周血单个核细胞提取DNA,采用保守引物进行HIV包膜直接克隆,进行序列分析及系统树分析。构建了一株带该包膜蛋白的伪病毒并利用表达CXCR4和CCR5的靶细胞进行了感染实验,观察该病毒包膜利用辅助受体的表型特征。结果共获得2个有功能全长env克隆,分别命名为CHNHLJ03009c34(Gen-Bank序列号为AY905493)和CHNHLJ03009c33。用全长env氨基酸序列与国内外分离株进行同源性比较分析发现,与分离株CHNHLJ03009c34的包膜同源性最高的病毒为云南的HIV-1B′亚型分离株RL42,同源性为91.52%。系统发育分析结果表明,该株为泰国B′亚型,与云南分离株RL42的遗传距离最近。对包膜蛋白结构分析结果显示,分离株CHNHLJ03009c34包膜在抗原性和亲水性上与RL42没有明显差别。感染性检测结果显示该病毒只能感染***5细胞,不能感染***2CR4细胞。结论本研究从黑龙江省一名HIV21阳性者克隆到HIV-1CHNHLJ03009病毒的包膜基因,该病毒属于B′亚型(泰国亚型),为R5亲嗜性毒株。该包膜基因克隆为首次报道的黑龙江分离株。

关键词： Ⅰ型人免疫缺陷病毒(HIV-1) 包膜变异性亚型感染

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黑龙江地区乙型肝炎病毒耐药变异与基因型

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世界华人消化杂志 2005年第14期13卷 1696-1699页

作者：李迪张淑云谷鸿喜程险峰王晓燕哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学附属第二医学院科研实验中心黑龙江省哈尔滨市150086 黑龙江省医院南岗分院泌尿外科黑龙江省哈尔滨市150001 哈尔滨医科大学附属第二医学院传染科黑龙江省哈尔滨市150086

目的:探讨黑龙江地区乙型肝炎病毒发生YMDD基因变异与HBV基因型的关系. 方法:首先HBVA-F6个主要基因型特异性多引物对巢式PCR法对106例接受拉米夫定抗病毒治疗患者的血清HBV DNA进行基因分型和分析.再采用实时荧光PCR法对标本进行YMDD... 详细信息

目的:探讨黑龙江地区乙型肝炎病毒发生YMDD基因变异与HBV基因型的关系. 方法:首先HBVA-F6个主要基因型特异性多引物对巢式PCR法对106例接受拉米夫定抗病毒治疗患者的血清HBV DNA进行基因分型和分析.再采用实时荧光PCR法对标本进行YMDD变异检测. 结果:在106例标本中有8例为B基因型,其阳性率为7.6%;有94例为C基因型,其阳性率为88.7%:4例为D基因型,其阳性率为3.8%.从106例血清标本中检测出63例YMDD发生变异占59.4%,其余43例为野生型YMDD.在8例B基因型的标本中,有5例发生YMDD变异,变异率为62.5%:在94例C基因型的标本中,有55例发生YMDD变异,变异率为58.5%. HBV B,C两基因型间的YMDD变异率无显著性差异(P>0.05).在5例B基因型YMDD变异的标本中,有1例发生YIDD变异(20%),其余4例发生YVDD (YMDD+YVDD)变异占80%;在55例C基因型YMDD 变异的标本中,有26例发生YIDD(YMDD+YIDD)变并占47.3%,17例发生YVDD(YMDD+YVDD)变异占30.9%,12例发生YIDD+YVDD变异占21.8%.HBV B,C两基因型间的YMDD不同变异类型发生率无显著性差异(P>0.05). 结论:在黑龙江地区拉米夫定抗病毒治疗2—4 a,HBV YMDD变异率为59.4%;HBV B,C基因型标本间发生YMDD变异率及基因变异类型均无显著性差异.

关键词：黑龙江地区乙型肝炎病毒耐药变异基因型拉米夫定抗病毒治疗乙型肝炎

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SIVmac239对恒河猴B淋巴细胞生长繁殖的抑制作用研究

SIVmac239对恒河猴B淋巴细胞生长繁殖的抑制作用研究

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第三届全国中青年流行病学工作者学术会议

作者：姚振江王滨有李洪源赵景波高桥めぐみ高桥秀实哈尔滨医科大学公共卫生学院流行病学教研室日本医科大学微生物学免疫学教研室

目的:为探讨恒河猴免疫缺陷病毒SIVmac239感染CD4+T淋巴细胞后,可否产生某些抑制B淋巴细胞的生长活性因子,为HIV/AIDS进一步的病原学研究和控制提供有益的线索. 方法:用MTT实验观察不同时间收集的SIVmac239感染的CD4+T淋巴细胞(C8166... 详细信息

目的:为探讨恒河猴免疫缺陷病毒SIVmac239感染CD4+T淋巴细胞后,可否产生某些抑制B淋巴细胞的生长活性因子,为HIV/AIDS进一步的病原学研究和控制提供有益的线索. 方法:用MTT实验观察不同时间收集的SIVmac239感染的CD4+T淋巴细胞(C8166)上清和未感染SIVmac239的CD4+T淋巴细胞的上清对恒河猴B淋巴细胞(MM133)生长的抑制作用情况. 结果:SIVmac239感染的CD4+T淋巴细胞(C8166)上清含有抑制猕猴B淋巴细胞生长的因子,并且,其抑制作用效果随着作用时间的延长而增加. 结论:SIVmac239感染CD4+T淋巴细胞(C8166)可产生抑制B淋巴细胞(MM133)生长的因子.

关键词： SIVmac239 CD4+T淋巴细胞 B淋巴细胞抑制作用免疫缺陷病毒动物模型

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