检索结果-内蒙古大学图书馆

异嗜性小鼠白血病病毒感染性DNA转染COS-7细胞后形成病毒颗粒的电镜观察

哈尔滨医科大学学报 2002年第2期36卷 121-122页

作者：王宇陈小贝凌虹张凤民哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的　检测异嗜性小鼠白血病病毒感染性DNA(pXeno .inf)转染COS 7细胞后形成病毒颗粒的能力。方法　采用脂质体转染方法 ,将异嗜性小鼠白血病病毒感染性DNA转染至COS 7细胞后 ,用电镜观察该细胞中病毒颗粒的形成情况。结果　在异嗜性小... 详细信息

目的　检测异嗜性小鼠白血病病毒感染性DNA(pXeno .inf)转染COS 7细胞后形成病毒颗粒的能力。方法　采用脂质体转染方法 ,将异嗜性小鼠白血病病毒感染性DNA转染至COS 7细胞后 ,用电镜观察该细胞中病毒颗粒的形成情况。结果　在异嗜性小鼠白血病病毒感染性DNA转染后的COS 7细胞胞浆中 ,可以见到少量病毒颗粒的存在 ,并且转染后细胞表现出相应的病理变化。结论　证实异嗜性小鼠白血病病毒感染性DNA在COS

关键词：异嗜性小鼠白血病病毒感染性DNA COS-7细胞病毒颗粒电镜观察基因转染

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Abl-PTK酪氨酸激酶区基因的克隆与表达

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哈尔滨医科大学学报 2002年第3期36卷 177-179页

作者：金玉霞曲章义哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的　克隆、表达出PTK重组蛋白 ,以鉴定酪氨酸激酶 (PTK)的活性 ,筛选酪氨酸激酶的抑制剂。方法　从PTK重组克隆载体上切下目的基因片段Abl PTK使其连接到表达载体pGEX4T 2上 ,转化大肠杆菌DH5a ,筛选鉴定出正确的转化子。转化菌株经I... 详细信息

目的　克隆、表达出PTK重组蛋白 ,以鉴定酪氨酸激酶 (PTK)的活性 ,筛选酪氨酸激酶的抑制剂。方法　从PTK重组克隆载体上切下目的基因片段Abl PTK使其连接到表达载体pGEX4T 2上 ,转化大肠杆菌DH5a ,筛选鉴定出正确的转化子。转化菌株经IPTG诱导后进行表达并进行SDS PAGE分析。结果　经酶切和诱导表达鉴定 ,重组质粒pGEX4T 2 PTK构建成功 ,并高效表达了 5 8KD的GST PTK融合蛋白。结论　PTK基因被成功地重组至融合蛋白表达载体中 ,并在大肠杆菌中获得高效表达。该研究为进一步纯化、鉴定PTK的活性 ,筛选PTK的抑制剂奠定了基础。

关键词：酪氨酸激酶 Abl-PTK 基因克隆基因表达 PTK活性 PTK酶抑制剂 V-abl癌基因淋巴瘤

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牛S抗原的提取、鉴定及EAU模型的建立

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哈尔滨医科大学学报 2002年第2期36卷 100-101,F004页

作者：郭涛张凤蕴王丽群高淑英崔洪波李迪王红李殿俊哈尔滨医科大学免疫学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的　建立实验性自身免疫性葡萄膜炎 (EAU)动物模型 ,研究自身免疫病的发病机制。方法　依据AI—Mahdawi等的方法并加以改进 ,自牛视网膜组织提取S抗原 ,并用其免疫Wistar大鼠。结果　提取的S抗原与文献报告结果大致相同 ,免疫的Wista... 详细信息

目的　建立实验性自身免疫性葡萄膜炎 (EAU)动物模型 ,研究自身免疫病的发病机制。方法　依据AI—Mahdawi等的方法并加以改进 ,自牛视网膜组织提取S抗原 ,并用其免疫Wistar大鼠。结果　提取的S抗原与文献报告结果大致相同 ,免疫的Wistar大鼠全部出现典型的EAU病变 ,观察临床症状及病理检测。结论　以牛S抗原免疫Wistar大鼠的EAU模型建立成功。

关键词：牛 S抗原提取鉴定 EAU模型葡萄膜视网膜炎自身免疫病小鼠

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Fv-4基因杂合子小鼠对***感染的敏感性差异的分析

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中国微生态学杂志 2002年第6期14卷 338-339页

作者：陈小贝张凤民赵长宏程志谷鸿喜哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学附属第三医院

目的 :探讨新生和成年的Fv 4基因杂合子小鼠 (BALB/C小鼠×G小鼠 )对Friend小鼠白血病病毒 (***)感染的敏感性差异及其与小鼠淋巴细胞表面Fv 4基因产物的表达量的关系。方法 :经腹腔接种***分别感染新生和成年的杂合子小鼠 ,观察小... 详细信息

目的 :探讨新生和成年的Fv 4基因杂合子小鼠 (BALB/C小鼠×G小鼠 )对Friend小鼠白血病病毒 (***)感染的敏感性差异及其与小鼠淋巴细胞表面Fv 4基因产物的表达量的关系。方法 :经腹腔接种***分别感染新生和成年的杂合子小鼠 ,观察小鼠对***感染的敏感性差异 ;并用间接免疫荧光标记 FACS测定法 ,分别对小鼠脾脏淋巴细胞表面的Fv 4基因产物进行定量检测与分析。结果 :接种病毒后 ,新生杂合子小鼠可被病毒感染并出现脾脏肿大等症状 ,而成年杂合子小鼠则不发病 ;但是 ,在新生和成年的杂合子小鼠脾脏淋巴细胞表面均可以检测出Fv 4基因产物 ,其表达量基本相同。结论 :新生和成年的Fv 4基因杂合子小鼠对Friend小鼠白血病病毒感染的敏感性不同 ,但该敏感性差异与小鼠细胞表面Fv 4基因产物的表达量无关。提示Fv 4基因杂合子的抗***感染可能还有其他机制或因素的参与。

关键词：白血病病毒 Fv-4基因杂合子小鼠 Fr.MuLV感染敏感性差异

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柯萨奇B1病毒VP1基因在大肠杆菌中的表达

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中国地方病学杂志 2002年第1期21卷 5-7页

作者：赵铁强钟照华田野韩福生梁瑛娟谷淑燕皮国华孟繁超哈尔滨医科大学第一临床医学院心内科黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 中国地方病中心克山病研究所黑龙江哈尔滨150086 中国预防医学科学院病毒研究所诊断室北京100052

目的　在大肠杆菌中表达柯萨奇 B1(CVB1)病毒 VP1蛋白。方法　用限制性酶切方法将 CVB1VP1基因从 p MD18-T-VP1上切下 ,连接至 p QE3 0构建原核表达系统 p QE3 0 -VP1。经酶切和 PCR验证后转化至大肠杆菌 BL2 1(DE3 ) ,用 IPTG诱导目的... 详细信息

目的　在大肠杆菌中表达柯萨奇 B1(CVB1)病毒 VP1蛋白。方法　用限制性酶切方法将 CVB1VP1基因从 p MD18-T-VP1上切下 ,连接至 p QE3 0构建原核表达系统 p QE3 0 -VP1。经酶切和 PCR验证后转化至大肠杆菌 BL2 1(DE3 ) ,用 IPTG诱导目的基因表达。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和 Western-blot检测 VP1蛋白的表达。结果　酶切、PCR证明构建的原核表达系统携带方向正确的 CVB1VP1基因。SDS-PAGE和 Western-blot实验均可于 3 3 .0 k Da处见到目的条带。结论　

关键词：柯萨奇病毒B 大肠杆菌原核表达 VP1基因

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细菌基因组结构:识别种系群的分子标志(英文)

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北京大学学报（医学版） 2002年第5期34卷 457-463页

作者：刘树林刘桂荣李绍贤刘葳峤郑君芳朱万孚谷鸿喜郭晓奎马佳毓 K.E.Sanderson 周宇光 R.N.Johnston 加拿大卡尔加里大学医学院微生物系哈尔滨医科大学微生物学教研室加拿大卡尔加里大学生物系北京大学基础医学院微生物系中国科学院微生物研究所加拿大卡尔加里大学医学院生物化学系

目的 :评价细菌基因组结构作为种系标志在细菌亲缘关系识别中的应用。方法 :本研究选用 3个属的细菌 :Klebsiel la ,Neisseria以及Vibrio。为得到完整的基因组DNA ,整个提取的操作过程都在琼脂糖凝胶中进行。经proteinaseK除蛋白后 ,基... 详细信息

目的 :评价细菌基因组结构作为种系标志在细菌亲缘关系识别中的应用。方法 :本研究选用 3个属的细菌 :Klebsiel la ,Neisseria以及Vibrio。为得到完整的基因组DNA ,整个提取的操作过程都在琼脂糖凝胶中进行。经proteinaseK除蛋白后 ,基因组DNA置于TE缓冲液中待用。内切酶Ⅰ CeuⅠ是本研究中主要的工具酶。酶切后的基因组DNA经脉冲场电泳分离。结果 :Klebsiella的所有菌株 (两个种 ,即Klebsiellapneumoniae和Klebsiellaoxytoca)都有一个共同的基因组结构 ,而这一“Klebsiella基因组结构”与Escherichiacoli或Salmonella的基因组结构很相似 ,其主要不同之处有 3点 :(1)有 8个rrn操纵子 (Escherichiacoli和Salmonella各有 7个 ) ;(2 )基因组较大 ;(3)Ⅰ CeuⅠE片段易位。以往学术界认为Neisseria具有高度易变和多态的基因组结构。而我们的研究结果表明 ,Neisseria的基本基因组结构是相对稳定的。我们比较研究了 30 0株N .meningitidis,结果仅仅发现了少数几个不同的基因组结构。其中Z2 4 91株代表 5 0 %的群体 (Ⅰ型基因组结构 ) ,MC5 8株代表 2 0 %的群体 (Ⅱ型基因组结构 ) ,N0 4 5株代表 17%的群体 (Ⅲ型基因组结构 )。已知Z2 4 91和MC5 8代表不同的种系群。

关键词：基因结构种系群 I-Ceu I

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ELISA法测定结核菌糖脂(TBGL)抗体对结核病进行血清学诊断

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哈尔滨医药 2002年第4期22卷 3-4页

作者：谷鸿喜凌虹王锐高茹珍赵瑞福包文明哈尔滨医科大学微生物学教研究 150086 黑龙江省结核病院

目的研究抗结核菌糖脂抗原(TBGL抗原)的抗体在结核痛血清学诊断中的意义。方法用ELISA法检测结核患者及正常对照血清中的TBGL抗体。结果通过对56例结核病患者,23例正常人和12例非结核肺部疾病患者血清TBGL抗体的检测,结核病人的阳性... 详细信息

目的研究抗结核菌糖脂抗原(TBGL抗原)的抗体在结核痛血清学诊断中的意义。方法用ELISA法检测结核患者及正常对照血清中的TBGL抗体。结果通过对56例结核病患者,23例正常人和12例非结核肺部疾病患者血清TBGL抗体的检测,结核病人的阳性率为71.8％,与正常组阳性率(17.4％)及非结核肺部疾患组织性率(16.7％)相比差异显著(P<0.05)。肺结核病人与肺外结核病人阳性率无显著差异,P>0.05。结论利用本法检测结核病患血清中TBGL抗体,可以作为结核病实验室辅助诊断方法,也可以用于肺结核与其它肺部疾病的鉴别诊断。

关键词： ELISA 结核病血清学诊断 TBGL抗体

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精神分裂症患者BDV-p24基因的扩增及其产物的测序鉴定

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神经疾病与精神卫生 2002年第6期2卷 321-322页

作者：李桂梅张凤民马培林杨爱英谷鸿喜温捍淑刘雪峰生田和良哈尔滨医科大学微生物学教研室 150086 哈尔滨市精神病院大庆市油田总医院日本大阪大学微生物病研究所

目的扩增精神分裂症患者PBMCs标本中博尔纳病病毒(Borna Disease Virus,BDV)p24基因,并对基因扩增产物进行测序鉴定,分析其与标准株之间的差异。方法用巢式RT—PCR方检测黑龙江省精神分裂症患者及正常人PBMCs中BDV-p24基因片段,对2例... 详细信息

目的扩增精神分裂症患者PBMCs标本中博尔纳病病毒(Borna Disease Virus,BDV)p24基因,并对基因扩增产物进行测序鉴定,分析其与标准株之间的差异。方法用巢式RT—PCR方检测黑龙江省精神分裂症患者及正常人PBMCs中BDV-p24基因片段,对2例BDV—p24基因阳性的巢式RT-PCR产物进行测序,并与标准株比较。结果 9例精神分裂症患者中有2例BDV-p24基因阳性,7例正常人标本中未发现BDV—p24基因阳性。测序结果进一步证实扩增产物为BDV—p24基因,其序列与标准株高度同源。结论用巢式RT—PCR方法可以特异性扩增出BDV—p24基因,扩增产物序列与标准株高度同源,提示黑龙江省的精神分裂症的发生可能与BDV感染有关。

关键词：精神分裂症 BDV-p24基因产物测序鉴定基因扩增

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高糖刺激人脐静脉内皮细胞丝裂素活化蛋白激酶P38的表达

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哈尔滨医科大学学报 2002年第6期36卷 433-435页

作者：李艳波邓华聪郑丹韩君勇李呼伦重庆医科大学附属第一医院内分泌科重庆400016 重庆医科大学附属第一医院心内科重庆400016 哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的探讨丝裂素活化蛋白激酶P38(P38MAPK)在糖尿病血管并发症中的作用。方法采用体外培养和Western-blot等方法,以不同浓度D-葡萄糖及不同时间刺激人脐静脉内皮细胞系,分别检测人脐静脉内皮细胞系P38MAPK的蛋白表达。结果随D-葡萄糖... 详细信息

目的探讨丝裂素活化蛋白激酶P38(P38MAPK)在糖尿病血管并发症中的作用。方法采用体外培养和Western-blot等方法,以不同浓度D-葡萄糖及不同时间刺激人脐静脉内皮细胞系,分别检测人脐静脉内皮细胞系P38MAPK的蛋白表达。结果随D-葡萄糖浓度增加,P38MAPK磷酸化蛋白表达量增加;延长刺激时间,P38MAPK磷酸化蛋白表达量亦随之增加。结论高糖引发的P38MAPK表达异常,可能在糖尿病血管并发症的发生、发展中起关键作用。

关键词：高糖丝裂素活化蛋白激酶P38 糖尿病血管并发症人脐静脉内皮细胞

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酵母RNA聚合酶ⅡRpb2和Rpb3两亚基间相互作用位点的定位

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微生物学报 2001年第5期41卷 592-597页

作者：曲章义郑树谷鸿喜石滨明浙江大学肿瘤学研究所杭州310009 哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨150086

为研究S .pombeRNApolⅡ各亚基间体内装配成复合体的机制 ,本文首次用酵母双杂交系统鉴定了Rpb2和Rpb3两亚基间体内相互作用的位点。首先将Rpb2的 4个片段克隆至Gal4BD表达载体pAS2上 ,构建BD Rpb2片段融合蛋白重组质粒 ;同时将Rpb3克隆... 详细信息

为研究S .pombeRNApolⅡ各亚基间体内装配成复合体的机制 ,本文首次用酵母双杂交系统鉴定了Rpb2和Rpb3两亚基间体内相互作用的位点。首先将Rpb2的 4个片段克隆至Gal4BD表达载体pAS2上 ,构建BD Rpb2片段融合蛋白重组质粒 ;同时将Rpb3克隆至Gal4AD表达载体pGADGH上 ,构建AD Rpb3融合蛋白重组质粒。其次 ,将pGADGHRpb3分别与pAS2Rpb2各片段重组质粒共转化到受体酵母菌Y1 90感受态细胞内 ,筛选并鉴定β gal活性阳性 (β gal+)的共转化子。最后 ,将β gal+共转化子中的Rpb2片段进行序列分析并进行同源序列比较确定其在Rpb2中的位置。结果表明 ,Rpb2与Rpb3相互作用的位点位于Rpb2的 90 2～

关键词：酵母 RNA聚合酶亚基相互作用双杂交系统 Rpb2 Rpb3

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