检索结果-内蒙古大学图书馆

哈尔滨医科大学学报 2001年第2期35卷 85-88页

作者：曲章义郑树赵育莹谷鸿喜石浜明哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 浙江大学肿瘤学研究所浙江杭州310009

目的　建立分离、纯化流感病毒RNA聚合酶PB1、PB2和PA 3P蛋白的有效方法 ,为进一步研究 3P蛋白的结构和功能奠定基础。方法　用甘油、CsCl1及CsTFA不同介质的密度梯度超速离心法进行分离 ,用SDS -PAGE电泳及Westernblot法检测 3P蛋白 ,... 详细信息

目的　建立分离、纯化流感病毒RNA聚合酶PB1、PB2和PA 3P蛋白的有效方法 ,为进一步研究 3P蛋白的结构和功能奠定基础。方法　用甘油、CsCl1及CsTFA不同介质的密度梯度超速离心法进行分离 ,用SDS -PAGE电泳及Westernblot法检测 3P蛋白 ,用尿素变性PAGE检测vRNA。结果　用甘油密度梯度离心 ,可从病毒粒子中分离由NP、3P和RNA组成的RNP。将纯化的RNP用CsCl和甘油双组分不连续密度梯度离心 ,可形成NP和 3P -RNA两部分 ,使NP与 3P -RNA分离。进一步将 3P -RNA在CsTFA -甘油双组分不连续密度梯度介质中进行超速离心 ,可有效地将 3P与RNA分离 ,获得较纯的 3P蛋白。 3P位于离心管的上半部分 ,而RNA则位于离心管的近底端部分。结论　用甘油、CsCl-甘油和CsTFA

关键词：流感病毒 RNA聚合酶密度梯度分离纯化

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16型人乳头瘤病毒疫苗研究进展

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国外医学（预防．诊断．治疗用生物制品分册） 2001年第2期24卷 52-55页

作者：魏兰兰谷鸿喜韩立群哈尔滨医科大学微生物学教研室 150086 中国预防医学科学院病毒所遗传与免疫室

16型人乳头瘤病毒 ( HPV16)与宫颈癌的发生关系密切 ,由于该病毒尚不能在体外有效培养 ,而限制了疫苗的研究进展。目前通过分子生物学方法在体外表达的 HPV16病毒样颗粒( VL P)成为疫苗研究的热点。研究表明 VLP可诱导机体产生抗病毒攻... 详细信息

16型人乳头瘤病毒 ( HPV16)与宫颈癌的发生关系密切 ,由于该病毒尚不能在体外有效培养 ,而限制了疫苗的研究进展。目前通过分子生物学方法在体外表达的 HPV16病毒样颗粒( VL P)成为疫苗研究的热点。研究表明 VLP可诱导机体产生抗病毒攻击的细胞免疫和体液免疫应答 ,从而为基因工程亚单位疫苗的研制提供了科学依据。

关键词： 16型人乳头瘤病毒疫苗病毒样颗粒免疫应答宫颈癌

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RT套式PCR检测血浆HCV RNA及与抗HCV检测的比较

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微生物学杂志 2001年第4期21卷 37-38页

作者：赵继义刘雪梅郭薇媛高磊钟照华谷鸿喜哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨市道里区防疫站黑龙江哈尔滨150010 哈尔滨医科大学附属第二医院黑龙江哈尔滨150086

应用微量血清热变性法提取核酸 ,逆转录套式聚合酶链反应 (RT nestPCR)检测血浆HCVRNA ,并与抗HCVELISA检测结果比较 ,对HCVRNA阳性标本进行HGVRNA的筛查。结果在 32例抗HCV阳性和 2 0例抗HCV阴性血浆中 ,HCVRNA分别检出 18例和 2例 ,... 详细信息

应用微量血清热变性法提取核酸 ,逆转录套式聚合酶链反应 (RT nestPCR)检测血浆HCVRNA ,并与抗HCVELISA检测结果比较 ,对HCVRNA阳性标本进行HGVRNA的筛查。结果在 32例抗HCV阳性和 2 0例抗HCV阴性血浆中 ,HCVRNA分别检出 18例和 2例 ,总符合率为 70 % ,2 0例HCVRNA阳性者中有 2例合并感染HBV ,1例合并感染HGV。

关键词：丙型肝炎病毒逆转录套式PCR 血浆 HCVRNA 检测抗体

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哈尔滨市妊娠妇女风疹病毒感染的筛查及分析

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哈尔滨医科大学学报 2001年第3期35卷 188-189页

作者：姜昕王燕王锐刘海棠谷鸿喜哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 东北农业大学黑龙江哈尔滨150030 哈尔滨医科大学附属第一医院妇产科黑龙江哈尔滨150001

目的　调查 2 0 0 0年哈尔滨市妊娠妇女风疹病毒感染情况。方法　收集 6 0例妊娠 8～ 2 4周孕妇血清 ,采用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测风疹特异性IgM抗体 ,对该人群的风疹病毒感染率进行调查。结果　 2 1例正常妊娠组血清样本的阳性率为... 详细信息

目的　调查 2 0 0 0年哈尔滨市妊娠妇女风疹病毒感染情况。方法　收集 6 0例妊娠 8～ 2 4周孕妇血清 ,采用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测风疹特异性IgM抗体 ,对该人群的风疹病毒感染率进行调查。结果　 2 1例正常妊娠组血清样本的阳性率为 4 76 % ,39例异常妊娠组血清样本阳性率为 17 95 % ,两组数值经统计学处理 ,χ2 =7 33,P <0 .0 5 ,有显著性差异。结论　风疹病毒感染是造成异常妊娠的主要原因之一 ,妊娠早期进行风疹病毒感染的检测。

关键词：风疹病毒 IgM 妊娠合并症筛查哈尔滨市

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柯萨奇病毒B组3型VP1基因的体外表达和鉴定

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微生物学杂志 2001年第4期21卷 13-14页

作者：钟照华田野李呼伦关欣赵文然赵铁强谷鸿喜孟繁超哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学第一临床医学院心内科黑龙江哈尔滨150001 中国地方病中心克山病研究所黑龙江哈尔滨150086

将克隆的CVB3VP1基因亚克隆至真核表达载体 pCEP4构建CVB3VP1的真核表达质粒 pCEP4 CVB3VP1。pCEP4 CVB3VP1转染HeLa细胞 ,蛋白印迹试验证明该表达体系可以在体外表达能为CVB3中和抗体识别的VP1蛋白。

关键词：柯萨奇病毒B组3型真核表达中和抗原鉴定

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以lacZ作为报告基因研究霍乱弧菌irgA基因表达的铁调控性

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中华微生物学和免疫学杂志 2001年第4期21卷 372-372页

作者：路波阚飙刘延清王滨有高守一哈尔滨医科大学公共卫生学院流行病学教研室 150001 中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所

细菌蛋白分泌表达基因水平的调控与许多环境信号密切相关，铁浓度作为环境信号影响许多基因的表达。irgA为霍乱弧菌中铁抑制外膜蛋白，在乳鼠模型中检测irgA突变株毒力下降100倍。鉴于irgA的可诱导表达，其启动子在可调控高效表达外源... 详细信息

细菌蛋白分泌表达基因水平的调控与许多环境信号密切相关，铁浓度作为环境信号影响许多基因的表达。irgA为霍乱弧菌中铁抑制外膜蛋白，在乳鼠模型中检测irgA突变株毒力下降100倍。鉴于irgA的可诱导表达，其启动子在可调控高效表达外源基因方面可能会发挥较好的作用。本研究用启动子探测质粒、以lacZ作为报告基因对irgA在大肠杆菌工程菌中的铁浓度调控表达方面进行了初步的定量研究。

关键词：霍乱弧菌 irgA 基因表达 LacZ 铁调控性

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人乳头瘤病毒16型L1基因重组表达质粒的构建及在***宿主中的表达与鉴定

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中国公共卫生 2000年第10期16卷 875-876页

作者：林道红凌虹庄敏郭淑元马培林谷鸿喜哈尔滨医科大学微生物学教研室 150086

构建 pGEX4T 1 HPV16L1重组表达系统 ,为进一步研制基因工程疫苗奠定基础 ,采用PCR方法扩增HPV16中国分离株L1外源基因片段 ,pGEX4T 1为表达载体 ,构建pEGX4T 1 HPV16L1重组表达系统 ,在大肠杆菌宿主BL(2 1)中 ,经IPTG诱导 ,表达融合蛋... 详细信息

构建 pGEX4T 1 HPV16L1重组表达系统 ,为进一步研制基因工程疫苗奠定基础 ,采用PCR方法扩增HPV16中国分离株L1外源基因片段 ,pGEX4T 1为表达载体 ,构建pEGX4T 1 HPV16L1重组表达系统 ,在大肠杆菌宿主BL(2 1)中 ,经IPTG诱导 ,表达融合蛋白GST L1,经SDS PAGE电泳和Westernblot进行鉴定结果表明 ,成功构建pEGX4T 1 HPV16L1重组表达质粒并获得高效表达并经Westernblot鉴定为L1外源蛋白。提示 :所构建的 pGEX4T 1

关键词：人乳头瘤病毒16型质粒构建 L1基因表达鉴定

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人乳头瘤病毒16型晚期基因L1的原核表达质粒的构建和鉴定

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中国地方病学杂志 2000年第6期19卷 472-473页

作者：郭淑元凌虹钟照华庄敏林道红曲章义郭彩玲谷鸿喜哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的　构建人类乳头瘤病毒 (HPV) 16型晚期基因 L1的原核表达质粒 ,以期从中选出能够高效表达 HPV16 L1的重组子 ,为进一步表达 L1蛋白奠定基础。方法　应用定向克隆策略 ,将 HPV16 L1基因分别克隆到原核表达载体 p Trac99A和 p ET- 2 1... 详细信息

目的　构建人类乳头瘤病毒 (HPV) 16型晚期基因 L1的原核表达质粒 ,以期从中选出能够高效表达 HPV16 L1的重组子 ,为进一步表达 L1蛋白奠定基础。方法　应用定向克隆策略 ,将 HPV16 L1基因分别克隆到原核表达载体 p Trac99A和 p ET- 2 1c中。结果　通过酶切鉴定选出了重组子 p Trc99A- HPV16 L1和 p ET- 2 1c-HPV16 L1。结论　 HPV16

关键词：人类乳头瘤病毒16 晚期基因L1 基因重组质粒

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HPV18 L1基因重组DNA构建及其免疫小鼠体内特异抗体的测定

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中国免疫学杂志 2000年第7期16卷 356-358页

作者：贾士东谷鸿喜王文阁钟照华郭淑元凌虹贺福初哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨150086 中国军事医学科学院实验血液学研究室北京100850

目的：人类乳头瘤病毒18型（HPV18）感染与宫颈癌的发生高度相关。其晚期基因L1编码的L1结构蛋白是刺激机体产生中和抗体的主要抗原。利用HPVL1基因重组质粒进行DNA疫苗的初步免疫学实验研究。方法：从HPV18－pBR322质粒中扩增HPV18L1... 详细信息

目的：人类乳头瘤病毒18型（HPV18）感染与宫颈癌的发生高度相关。其晚期基因L1编码的L1结构蛋白是刺激机体产生中和抗体的主要抗原。利用HPVL1基因重组质粒进行DNA疫苗的初步免疫学实验研究。方法：从HPV18－pBR322质粒中扩增HPV18L1基因，测序证明扩增片段的可靠性，构建了两个真核表达重组质粒HPV18L1-pcDNA3和HPV18L1－peEP4。将提纯的质粒DNA直接免疫小鼠，用HPV18L1抗原经ELISA检测小鼠血清相应抗体。结果：HPV18L1-pcDNA3和HPV18L1-pcEP4质粒DNA均能在小鼠体内表达并诱导产生HPV18特异性抗体。结论：HPV18L1重组质粒DNA直接注射小鼠可以刺激机体产生抗体。

关键词：晚期基因L1 基因表达 DNA HPV18 宫颈癌

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HPV16L1重组蛋白在甲醇营养型酵母菌中的诱导表达及鉴定

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哈尔滨医科大学学报 2000年第1期34卷 3-5页

作者：李秀荣谷鸿喜曲章义张凤民郭彩玲哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的　HPV16L1重组蛋白的表达为研制HPV16L1预防性蛋白疫苗及诊断试剂盒打下基础。方法　pPIC3 5 HPV16L1 GS115阳性菌株 ,经 0 5 %甲醇诱导 ,运用SDS PAGE电泳检测L1蛋白 ;用鼠抗HPV16L1单克隆抗体 ,经WesternBlotting检测蛋白的特... 详细信息

目的　HPV16L1重组蛋白的表达为研制HPV16L1预防性蛋白疫苗及诊断试剂盒打下基础。方法　pPIC3 5 HPV16L1 GS115阳性菌株 ,经 0 5 %甲醇诱导 ,运用SDS PAGE电泳检测L1蛋白 ;用鼠抗HPV16L1单克隆抗体 ,经WesternBlotting检测蛋白的特异性 ;在透射电镜下观察类病毒颗粒 (VLPs)。结果　SDS PAGE检测结果表明 ,在5 5KD处有诱导蛋白带的出现 ;经WesternBlotting验证 ,该蛋白能与HPV16L1单克隆抗体特异结合 ,证明该蛋白确为HPV16L1蛋白 ;电镜下见到了直径约为 5 0nm、形态结构与天然病毒颗粒极其相似的VLPs。结论　pAIC3 5 HPV16L1重组质粒在甲醇营养型酵母菌中可经甲醇诱导产生HPV16L1晚期蛋白 ,该蛋白在酵母菌中可自我组装成VLPs。

关键词： HPV16L1 重组蛋白甲醇子宫颈肿瘤

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