检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2007年第1期23卷 14-17页

作者：张晓徐文华葛银林侯琳李泉青岛大学医学院生物化学与分子生物学教研室山东青岛266021

目的:探讨利用干扰RNA(RNAi)抑制血管内皮生长因子(VEGF)基因表达对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响。方法:设计针对VEGF基因的小干扰RNA(siRNA),合成DNA模板,体外转录siRNA。以脂质体转染法将双链siRNA导入MCF-7细胞后,用MTT比色法检... 详细信息

目的:探讨利用干扰RNA(RNAi)抑制血管内皮生长因子(VEGF)基因表达对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响。方法:设计针对VEGF基因的小干扰RNA(siRNA),合成DNA模板,体外转录siRNA。以脂质体转染法将双链siRNA导入MCF-7细胞后,用MTT比色法检测siRNA对MCF-7细胞增殖的影响。通过Hoechst33258染色观察MCF-7细胞的凋亡。用流式细胞术检测细胞周期的改变,RT-PCR检测VEGFmRNA表达的变化,免疫细胞化学法检测VEGF蛋白的表达。结果:所设计的两个靶位点siRNA,均能有效地抑制MCF-7细胞的增殖,诱导细胞凋亡,使细胞周期阻滞于G0/G1期,VEGFmRNA及其蛋白的表达明显减少;而作为阴性对照的错义序列组siRNASCR则没有上述效应。结论:体外转录合成的siRNA可抑制MCF-7细胞中VEGF基因的表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。

关键词： RNA干扰小干扰RNA MCF-7细胞血管内皮生长因子基因治疗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

脑缺血再灌注后酪氨酸蛋白激酶和蛋白磷酸酶的活性变化及其机制(英文)

引用

Acta Pharmacologica Sinica 2000年第8期21卷 46-51页

作者：裴林李勇颜景芝张光毅崔肇春朱正美 221002 大连医科大学生物化学教研室大连中国 116027 徐州 221002 徐州 221002 徐州 221002 大连中国 116027 大连中国 116027 徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心大连医科大学生物化学教研室大连医科大学生物化学教研室徐州

目的:研究脑缺血再灌注后沙土鼠海马突触体蛋白质酪氨酸激酶(PTK)和蛋白质酪氨酸磷酸酶(PTP)活性的变化及其引起变化的机制。方法:双侧颈总动脉结扎(15min)形成全脑缺血模型;放射性同位素γ-32P掺入法和比色法分别测定了总PTK和PTP的活... 详细信息

目的:研究脑缺血再灌注后沙土鼠海马突触体蛋白质酪氨酸激酶(PTK)和蛋白质酪氨酸磷酸酶(PTP)活性的变化及其引起变化的机制。方法:双侧颈总动脉结扎(15min)形成全脑缺血模型;放射性同位素γ-32P掺入法和比色法分别测定了总PTK和PTP的活性,免疫沉淀和γ-32P放射性同位素测定Src和PYK2活性,免疫印渍测定Src和PYK2蛋白表达量。结果:①脑缺血再灌注引起PTK活性升高,而PTP活性不变。②在假手术对照组中,Src比PYK2活性高,脑缺血再灌引起Src活性明显升高,而PYK2活性无显著变化。③脑缺血前腹腔分别给予氯胺酮和硝苯地平,都能拮抗脑缺血再灌注引起的PTK和Src活性的升高,但对PTP活性无影响。结论:脑缺血再灌注能诱导沙土鼠海马突触体总的PTK活性升高,而对PTP活性无影响,PTK活性的升高主要是Src活性的增加而与PYK2无关;脑缺血再灌注诱导PTK和Src活性升高是通过NR和L-型电压门控钙通道介导的,即与这两种钙通道的激活有关,而与其蛋白表达量无关。

关键词：氯胺酮硝苯地平蛋白质酪氨酸激酶蛋白质酪氨酸磷酸酶海马突触体脑缺血再灌注损伤

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

TTF1-NP诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的内质网应激作用

引用

吉林大学学报（医学版） 2015年第6期41卷 1118-1123,I0012页

作者：肖斌刘荣荣刘炳彤张学武延边大学医学院生物化学与分子生物学教研室吉林延吉133000

目的:通过不同剂量长白山珍珠梅黄酮纳米粒(TTF1-NP)分别诱导不同种人肝癌细胞和人正常肝细胞凋亡,探讨TTF1-NP对不同细胞的作用及涉及的内质网应激作用机制。方法:以体外培养的不同种人肝癌细胞(Hep3B、HepG-2和PLC/PRF/5)和人肝细胞(C... 详细信息

目的:通过不同剂量长白山珍珠梅黄酮纳米粒(TTF1-NP)分别诱导不同种人肝癌细胞和人正常肝细胞凋亡,探讨TTF1-NP对不同细胞的作用及涉及的内质网应激作用机制。方法:以体外培养的不同种人肝癌细胞(Hep3B、HepG-2和PLC/PRF/5)和人肝细胞(Chang Liver)为模型,实验分为阴性对照组、阳性对照组(5-Fu)和TTF1-NP实验组,TTF1-NP处理浓度分别为50、100和200μmol·L-1。采用MTT法检测TTF1-NP对不同种细胞的生长抑制作用,选择最佳抑制效果细胞(HepG-2)为主要研究细胞株;利用流式细胞术检测细胞凋亡率;应用Western blotting和免疫细胞化学染色技术检测内质网应激关键蛋白表达情况;通过内质网应激抑制剂4-苯丁酸(4-PBA)作用,再次检测相关蛋白的表达情况。结果:与阴性对照组比较,不同浓度的TTF1-NP组4种细胞生长抑制率升高(P<0.05或P<0.01),且呈一定的浓度和时间依赖关系。细胞凋亡检测,与阴性对照组比较,TTF1-NP实验组随药物浓度增加其细胞凋亡率逐渐上升(P<0.05或P<0.01);内质网应激关键蛋白GRP78和caspase-4随着TTF1-NP浓度增加,表达水平逐渐升高(P<0.05或P<0.01)。4-PBA有效抑制GRP78和caspase-4表达,与TTF1-NP组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:TTF1-NP可诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡;内质网应激途径是TTF1-NP诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的主要作用机制之一。

关键词：珍珠梅黄酮纳米粒内质网应激细胞凋亡肝肿瘤

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

PI3K信号通路通过Skp2、p27调节肝癌细胞的增殖

引用

生物化学与生物物理进展 2008年第11期35卷 1263-1269页

作者：傅奕方征宇王丽影李增霞杨勇查锡良复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系上海200032 扬州大学医学院生化教研室扬州225001

探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)信号通路调节肝癌细胞增殖的机制.用LY294002特异性阻断PI3K信号通路后,人肝癌细胞(SMMC-7721)的增殖明显被抑制.RT-PCR及蛋白质印迹结果显示,LY294002增加了p27蛋白的表达,但不影响p27的mRNA表达.在LY29400... 详细信息

探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)信号通路调节肝癌细胞增殖的机制.用LY294002特异性阻断PI3K信号通路后,人肝癌细胞(SMMC-7721)的增殖明显被抑制.RT-PCR及蛋白质印迹结果显示,LY294002增加了p27蛋白的表达,但不影响p27的mRNA表达.在LY294002处理的细胞中转入p27的RNAi质粒以干扰p27蛋白的表达后,肝癌细胞的增殖能力可部分恢复.放线菌酮(Chx)处理实验表明,阻断PI3K信号通路使p27蛋白的半衰期延长,稳定性增加.进一步研究发现,LY294002可抑制介导p27蛋白降解的关键分子Skp2的mRNA表达,还可缩短Skp2蛋白的半衰期,降低Skp2蛋白的稳定性.但在SMMC-7721中分别转染PI3K下游重要靶分子Akt的持续激活和失活突变体,却并不影响p27蛋白的表达.这些结果表明,PI3K信号通路在转录及翻译后水平调节Skp2的表达而影响p27蛋白的降解,从而调节肝癌细胞的增殖,但Akt并没有参与这种调节.

关键词： P13K 信号通路 p27 Skp2 Akt 蛋白质降解

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

维生素D对过氧化氢诱导MIN6细胞凋亡的保护作用

引用

中国药理学通报 2020年第2期36卷 198-203页

作者：胡聪吴颛李亚林朱高路曹朝晖胡小波南华大学衡阳医学院生物化学与分子生物学教研室湖南衡阳421001

目的探讨维生素D(vitamin D,VitD)对过氧化氢(hydrogen peroxide,H 2O 2)诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞凋亡的保护作用及机制。方法VitD预处理后,用H 2O 2处理MIN6细胞,分别运用CCK-8法、Hoechst 33258荧光染色法、流式细胞术检测MIN6... 详细信息

目的探讨维生素D(vitamin D,VitD)对过氧化氢(hydrogen peroxide,H 2O 2)诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞凋亡的保护作用及机制。方法VitD预处理后,用H 2O 2处理MIN6细胞,分别运用CCK-8法、Hoechst 33258荧光染色法、流式细胞术检测MIN6细胞增殖、形态及凋亡百分率。Western blot检测增殖与凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-3以及Cleaved caspase-3的表达。结果H 2O 2呈时间和剂量依赖性抑制MIN6细胞增殖,诱导细胞凋亡,降低Bcl-2表达、增加Bax及Cleaved caspase-3表达,Bcl-2/Bax比值降低,Cleaved caspase-3/caspase-3比值增加;当用VitD预处理后,Bcl-2表达增加,Bax、Cleaved caspase-3表达降低,Bcl-2/Bax比值增加,Cleaved caspase-3/caspase-3比值降低,MIN6细胞活力增加。结论VitD预处理后,通过增加抗凋亡Bcl-2表达,降低促凋亡Bax和Cleaved caspase-3表达,减少由H 2O 2诱导的小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞凋亡。

关键词：维生素D 过氧化氢细胞增殖细胞形态细胞凋亡 MIN6细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

丁酸钠诱导Raji细胞表达DAPK的研究

引用

中国药理学通报 2005年第12期21卷 1438-1441页

作者：张海涛冯哲玲梁念慈朱振宇马涧泉广东医学院生物化学与分子生物学教研室广东湛江524023 中山大学中山医学院生物化学与分子生物学教研室广东广州510089

目的探讨丁酸钠(SB)对人淋巴瘤Raji细胞生长和DAPK表达变化的影响。方法用丁酸钠作用于Raji细胞株,观察形态、增殖情况、细胞周期分布变化、死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因启动子甲基化的变化及该酶表达的变化。结果成团悬浮生长的Raji细... 详细信息

目的探讨丁酸钠(SB)对人淋巴瘤Raji细胞生长和DAPK表达变化的影响。方法用丁酸钠作用于Raji细胞株,观察形态、增殖情况、细胞周期分布变化、死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因启动子甲基化的变化及该酶表达的变化。结果成团悬浮生长的Raji细胞呈现贴壁生长,细胞增殖速度明显被抑制,细胞阻滞在G0/G1期;DAPK启动子去甲基化,DAPK表达量增加,细胞凋亡增加。结论丁酸钠具有诱导Raji细胞DAPK基因启动子去甲基化,使DAPK重新表达,诱导细胞凋亡的作用。

关键词： Raji细胞死亡相关蛋白激酶凋亡丁酸钠

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

蓖麻毒素A链与绿色荧光蛋白基因的融合表达和活性测定

引用

浙江大学学报（医学版） 2005年第3期34卷 201-206页

作者：陈欣虹刘琼詹金彪浙江大学医学院生物化学与分子生物学教研室

　目的:表达蓖麻毒素A链(RTA)与绿色荧光蛋白(GFP)的融合蛋白(GFP-RTA),用于蓖麻毒素A链在细胞内的转运机理研究。方法:采用PCR法从重组质粒pKK233.2-RTA中扩增出蓖麻毒素A链基因,然而将其插入真核表达质粒pEGFPC1,构成GFP-RTA融合基因;... 详细信息

　目的:表达蓖麻毒素A链(RTA)与绿色荧光蛋白(GFP)的融合蛋白(GFP-RTA),用于蓖麻毒素A链在细胞内的转运机理研究。方法:采用PCR法从重组质粒pKK233.2-RTA中扩增出蓖麻毒素A链基因,然而将其插入真核表达质粒pEGFPC1,构成GFP-RTA融合基因;GFP-RTA经PCR扩增,与T载体连接,用内切酶从T-GFP-RTA中切下GFP-RTA片段,插入原核表达质粒pET-28a(+);在BL21(DE3)中表达GFP-RTA融合蛋白,通过金属螯合和层析纯化,MTT法检测融合蛋白的细胞毒性。结果:测序发现插入的融合基因全长序列完全正确,SDS-PAGE鉴定表达产物分子量正确;经诱导表达后,菌体产生绿色荧光,MTT法表明该融合蛋白呈现与RTA相似的细胞毒性。结论:从大肠杆菌表达的蓖麻毒素A链与绿色荧光蛋白的融合蛋白,具有蓖麻毒素A链和绿色荧光蛋白的生物学活性,可用于蓖麻毒素A链在细胞内的转运途径研究。

关键词：蓖麻蛋白蓖麻毒素A链发光蛋白质类重组融合蛋白质类/生物合成基因表达大肠杆菌/代谢聚合酶链反应

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞凋亡相关的组合生物标志物的分子基础及其在环境毒理学中的意义

引用

水生生物学报 2005年第3期29卷 329-335页

作者：徐立红浙江大学医学院生物化学与分子生物学教研室杭州310031

摘要: 生物标志物(Biomarker)可以反映机体接触外来化学物后出现的细胞、生物化学或分子生物学改变,或个体对外来因素产生反应的易感性,因此,生物标志物作为指标具有早期预警作用,在生态毒理学、环境毒理学及流行病学研究中都受到极大... 详细信息

摘要: 生物标志物(Biomarker)可以反映机体接触外来化学物后出现的细胞、生物化学或分子生物学改变,或个体对外来因素产生反应的易感性,因此,生物标志物作为指标具有早期预警作用,在生态毒理学、环境毒理学及流行病学研究中都受到极大的重视。生物标志物被用于污染物影响的早期检测时具有极大优势,它们的建立依赖于对污染物致毒机理的揭示,随着对污染物作用机理研究的深入,建立并采用的生物标志物越来越多,污染物的多样性及生物结构的复杂性也决定了生物标志物种类繁多、性质各异。虽然生物标志物的应用已经受到广泛关注并且显示出极大的优越性,然而仍有很大的局限性,当生物标志物用于污染物的危害性预测时,如何将污染物引起生物标志物的改变与具有的危害相关联是尤为受到关注的问题。

关键词：污染物细胞凋亡生物标志物环境毒理学组合生物标志物微囊藻毒素分子调节机制

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

白英水提物诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的实验研究

引用

中药材 2009年第2期32卷 245-249页

作者：万福生吴剑李华涂硕余乐涵南昌大学医学院生物化学与分子生物学教研室江西南昌330006

目的:观察白英水提物(ESL)对胃癌SGC-7901细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法:常规法制备ESL;实验分正常对照组、白英处理组和顺铂处理组。白英处理组加入ESL终浓度分别为12.5、25、50 mg/mL。MTT法检测细胞增殖抑制率,荧光显微镜观察S... 详细信息

目的:观察白英水提物(ESL)对胃癌SGC-7901细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法:常规法制备ESL;实验分正常对照组、白英处理组和顺铂处理组。白英处理组加入ESL终浓度分别为12.5、25、50 mg/mL。MTT法检测细胞增殖抑制率,荧光显微镜观察SGC-7901细胞凋亡及形态变化,半定量RT-PCR分析基因bcl-xl、bid、Caspase-9 mRNA表达,荧光分析法测定Caspase-3活性。结果:与正常对照组比较,三个剂量白英处理组SGC-7901细胞增殖抑制均有显著性增加,且呈明显的时效和量效关系,细胞凋亡显著增多(P<0.05),表现细胞核固缩、染色质凝集、边聚等;bcl-xl mRNA表达显著下降(P<0.05),bid、Caspase-9 mRNA表达显著性升高(P<0.05),并随ESL浓度增加而加强,Caspaes-3活性亦显著性增高(P<0.01)。结论:ESL能剂量依赖性诱导SGC-7901细胞凋亡和抑制增殖,其作用与调控bcl-xl、bid、Caspase-9 mRNA表达和增强Caspase-3活性相关。

关键词：白英凋亡基因表达 SGC-7901细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

CDC28蛋白激酶调节亚基2对卵巢癌A2780细胞丝足形成的影响及其机制研究

引用

解放军医学杂志 2016年第8期41卷 618-623页

作者：孙倩玲董梦梦易祎胡锦辉张米妮朱琳黄石榴孙贤青袁成福三峡大学医学院生物化学与分子生物学教研室湖北宜昌443002

目的探讨CDC28蛋白激酶调节亚基2(CKS2)对A2780细胞丝足形成的影响及其可能机制。方法采用慢病毒介导的sh RNA敲除A2780细胞的CKS2基因,显微镜下观察细胞丝足的变化;采用细胞划痕实验检测A2780细胞迁移能力的变化;采用real time PCR检测... 详细信息

目的探讨CDC28蛋白激酶调节亚基2(CKS2)对A2780细胞丝足形成的影响及其可能机制。方法采用慢病毒介导的sh RNA敲除A2780细胞的CKS2基因,显微镜下观察细胞丝足的变化;采用细胞划痕实验检测A2780细胞迁移能力的变化;采用real time PCR检测CKS2敲除对CDC42两种剪接变异体(CDC42-V1和CDC42-V2)表达的影响,以及不同卵巢癌标本中CKS2、CDC42-V1和CDC42-V2剪接变异体的表达情况。结果 CKS2表达抑制后,A2780细胞丝足明显减少,细胞迁移能力明显减弱(P<0.05),CDC42-V1 m RNA表达降低,而CDC42-V2 m RNA表达升高(P<0.05)。Real time PCR结果显示,卵巢癌组织标本中CKS2及CDC42-V1的表达高于对应的正常卵巢组织,而CDC42-V2的表达低于对应的正常卵巢组织(P<0.05)。结论 CKS2通过调控CDC42的选择性剪接而影响细胞丝足的形成,进而影响卵巢癌细胞A2780的迁移能力。

关键词： CDC28蛋白激酶调节亚基2 CDC42 GTP结合蛋白质卵巢肿瘤伪足选择性剪接

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：