检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学报 2023年第8期63卷 3083-3095页

作者：王梦莹刘马峰程安春四川农业大学动物医学院预防兽医研究所四川成都611130 四川农业大学动物医学院禽病防治中心四川成都611130 四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130

血红素是绝大多数细菌生长繁殖所必需的一种营养物质,其参与了细菌多种重要的生理过程。细菌可以通过自身合成和从外界摄取2种方式获得血红素。然而过多的血红素对细菌是有毒性的,细菌则会利用外排、螯合和降解等多种方式减轻血红素毒... 详细信息

血红素是绝大多数细菌生长繁殖所必需的一种营养物质,其参与了细菌多种重要的生理过程。细菌可以通过自身合成和从外界摄取2种方式获得血红素。然而过多的血红素对细菌是有毒性的,细菌则会利用外排、螯合和降解等多种方式减轻血红素毒性。鸭疫里氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)是一种感染禽类的革兰氏阴性菌,前期研究表明该菌可通过转运的方式从外界环境摄取血红素。然而,是否该菌也可以自身合成血红素未知。基因组分析发现鸭疫里氏杆菌ATCC11845菌株中的基因RA0C_RS08070编码铁螯合酶(ferrochelatase)HemH,是参与将铁插入卟啉中心,形成血红素的关键酶。hem H缺失后会导致铁离子和卟啉的积累,对细菌造成毒性。【目的】为鉴定Hem H在合成血红素中的功能及查找参与鸭疫里氏杆菌铁离子和卟啉解毒相关基因。【方法】本研究构建了RAATCC11845Δhem H缺失株,并检测亲本株和hem H缺失株在GCB以及GCB添加血红蛋白液体培养基中的生长情况;随后对亲本株和hem H缺失株进行转录组测序并进行比较分析。【结果】RAATCC11845Δhem H缺失株不能在GCB培养基中生长,而在GCB培养基补充血红蛋白后生长良好。转录组测序及比较分析发现,与亲本株相比,hem H缺失株中有354个显著差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)。基因本体论(gene ontology,GO)功能富集分析发现差异表达基因主要富集在催化活性、生物调节和代谢过程等途径,京都基因和基因组百科全书(Kyotoencyclopediaofgenesandgenomes,KEGG)通路富集分析发现差异表达基因主要富集在氨基酸代谢、氧化磷酸化和三羧酸循环(tricarboxylic acid cycle,TCA cycle)等途径。【结论】Hem H参与了血红素的合成,hem H缺失后导致大量的基因表达改变来适应代谢的改变,为进一步研究鸭疫里氏杆菌的Hem H的功能奠定基础。

关键词：鸭疫里氏杆菌血红素 hemH

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鸭疫里默氏杆菌自然转化的发现及机制研究进展

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微生物学报 2023年第2期63卷 483-493页

作者：刘思齐时春凤刘马峰四川农业大学动物医学院禽病防治中心四川成都611130 四川农业大学动物医学院预防兽医研究所四川成都611130 动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130

自然转化(natural transformation)是微生物水平基因转移的一种重要机制,其在遗传多样性的产生或修复DNA损伤等方面发挥着重要作用,并且与耐药基因、毒力因子的扩散息息相关。鸭疫里默氏杆菌(Riemerellaanatipestifer,RA)是威克斯菌科... 详细信息

自然转化(natural transformation)是微生物水平基因转移的一种重要机制,其在遗传多样性的产生或修复DNA损伤等方面发挥着重要作用,并且与耐药基因、毒力因子的扩散息息相关。鸭疫里默氏杆菌(Riemerellaanatipestifer,RA)是威克斯菌科中第一个被发现可以发生自然转化的细菌,本文作者利用此特点建立了多种基因编辑的方法,促进了对其遗传多样性和致病机理的研究进程。通过系统性地研究影响鸭疫里默氏杆菌自然转化的因素,鉴定出了参与该菌自然转化的营养物质;通过筛选转座子插入突变体文库,鉴定出了参与该过程的必需基因;最终,在该菌发现了一种新型的自然转化系统。本文结合其他细菌自然转化研究进展,针对以上研究结果进行综述,以期对该菌的自然转化机制有更深入的理解,也为更进一步探明该菌的耐药和毒力基因获得机制提供参考。

关键词：鸭疫里默氏杆菌自然转化水平基因转移生物学功能

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鸭疫里氏杆菌B739_RS00825基因缺失株抗血红素毒性和氧化应激损伤以及定殖能力分析

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微生物学报 2023年第3期63卷 1141-1151页

作者：郭方邱媛媛程安春刘马峰四川农业大学动物医学院预防兽医研究所四川成都611130 四川农业大学动物医学院禽病防治中心四川成都611130 动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130

【目的】血红素可作为细菌重要的铁离子来源,然而转运过多的血红素也会对细菌造成毒性。细菌通过调节、外排、螯合等多种方式减轻血红素毒性作用。鸭疫里氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)是一种感染鸭及其他禽类的革兰氏阴性病原菌... 详细信息

【目的】血红素可作为细菌重要的铁离子来源,然而转运过多的血红素也会对细菌造成毒性。细菌通过调节、外排、螯合等多种方式减轻血红素毒性作用。鸭疫里氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)是一种感染鸭及其他禽类的革兰氏阴性病原菌。前期研究表明,该菌编码血红素转运系统,且能够从血红蛋白获取血红素,然而该菌是否编码血红素解毒蛋白未知。本研究以编码一氧化氮合成酶的基因B739_RS00825为研究对象,分析其在抗血红素毒性和氧化应激损伤以及定殖能力中的功能。【方法】构建B739_RS00825缺失株,并通过测定生长曲线、细菌存活率、毒力及定殖等试验方法鉴定其在抗血红素毒性、抗氧化应激损伤、宿主致病中的功能。【结果】与RA CH-1相比,RA CH-1ΔB739_RS00825在添加过量血红素的培养基中生长不受影响;然而与RA CH-1Δfur相比,RA CH-1ΔfurΔB739_RS00825在含血红素培养基中的生长明显受到抑制且对H2O2的抵抗力降低;B739_RS00825基因在氧化应激条件下及fur缺失株中明显上调;与RA CH-1相比,RA CH-1ΔB739_RS00825在雏鸭的毒力和定殖能力无明显减弱。【结论】B739_RS00825基因参与了该菌抗血红素毒性和抗氧化应激反应的功能,且受铁摄取调节子(ferric uptake regulator,Fur)调控。然而,B739_RS00825基因并未参与该菌在宿主体内的定殖。

关键词：鸭疫里氏杆菌(RA) 血红素毒性氧化应激

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柠檬酸改性的羟基磷灰石纳米片抗病毒效果及作用方式

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东北农业大学学报 2024年第8期55卷 142-150页

作者：黄正群谭辉容赵兴洪万红平四川农业大学动物医学院动物传染病控制中心实验室成都611130 动物疫病与人类健康四川省重点实验室(四川农业大学) 成都611130

为探究柠檬酸改性的羟基磷灰石纳米片(HA-Cit)对猪伪狂犬病毒(PRV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的抑制活性及其作用方式,以CaCl_(2)、Na_(2)HPO_(4)、柠檬酸为原料,采用水热法合成HA-Cit,通过高分辨透射电镜、激光粒度仪、红外光谱仪、X... 详细信息

为探究柠檬酸改性的羟基磷灰石纳米片(HA-Cit)对猪伪狂犬病毒(PRV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的抑制活性及其作用方式,以CaCl_(2)、Na_(2)HPO_(4)、柠檬酸为原料,采用水热法合成HA-Cit,通过高分辨透射电镜、激光粒度仪、红外光谱仪、X射线衍射仪对HA-Cit进行图谱分析,并应用CCK-8法检测HA-Cit细胞毒性、病毒空斑法检测HA-Cit抗病毒活性及对病毒的作用方式。结果表明:相较于纯相的羟基磷灰石纳米棒(HA),HA-Cit为片状,粒径增加,拥有更强的负电性和分散性,含有柠檬酸特征官能团,结晶度降低;HACit具有更高的生物相容性,对两种病毒的治疗指数(I_(S))均显著高于HA,其抗病毒作用方式为直接灭活病毒及抑制病毒的复制和释放。

关键词：柠檬酸羟基磷灰石抗病毒活性伪狂犬病毒传染性胃肠炎病毒

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YFV17D非感染性报告复制子及假病毒包装系统的建立

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生物技术通报 2023年第8期39卷 165-172页

作者：何宇航胡涛吴震贺煜程安春陈舜四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心成都611130 四川农业大学动物医学院预防兽医研究所成都611130 动物疫病与人类健康四川省重点实验室成都611130

构建YFV17D非感染性复制子及假病毒包装系统,旨在进一步解析黄热病毒的复制、组装分子机制。该研究利用反向遗传学技术,将基于SP6启动子的单拷贝YFV17D报告复制子改造成由CMV启动子驱动的低拷贝YFV17D报告复制子,同时将表达YFV17D结构... 详细信息

构建YFV17D非感染性复制子及假病毒包装系统,旨在进一步解析黄热病毒的复制、组装分子机制。该研究利用反向遗传学技术,将基于SP6启动子的单拷贝YFV17D报告复制子改造成由CMV启动子驱动的低拷贝YFV17D报告复制子,同时将表达YFV17D结构蛋白的包装质粒与复制子质粒共同转染BHK-21细胞而建立YFV17D的反式假病毒包装系统。通过检测NanoLuc萤光素酶活性(Nluc)、oxGFP和mCherry荧光蛋白表达、间接免疫荧光实验监测病毒双链RNA来确定复制子在BHK-21细胞中复制情况和包装效果。结果表明,与复制缺陷型复制子相比,野生型复制子转染至BHK-21细胞中,随着转染时间的增加,Nluc活性、oxGFP和mCherry荧光蛋白表达也随之增加,同时dsRNA也随时间延长而增多。将复制子质粒和包装质粒共同转染至BHK-21细胞后,收集上清再次感染BHK-21细胞,随后通过检测Nluc活性和oxGFP与mCherry蛋白的表达而确定假病毒包装成功。综上,成功构建了携带不同报告基因的YFV17D复制子,用于监控病毒基因组RNA的复制;成功搭建由包装质粒提供的结构蛋白,将不具备感染性的YFV17D亚基因复制子打包成具有单轮感染能力的YFV17D假病毒系统。

关键词： YFV17D报告复制子反向遗传学反式互补单轮感染病毒颗粒

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植物提取物促动物生长作用机制的研究进展

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动物营养学报 2023年第8期35卷 4850-4859页

作者：张泽茹赵玉全董可沈留红四川农业大学动物医学院动物疫病与人类健康四川省重点实验室奶牛疾病研究中心成都611130 四川育强本草生物技术有限公司成都611130

植物提取物(PE)是提取于植物中且具有抗菌、抗氧化和免疫调节等1种或多种生物学功能的天然成分物质,可通过改善饲料适口性,增加动物采食量;促进消化液和消化酶分泌,调节肠道菌群并改善肠道生理形态和功能状态,从而促进营养物质消化吸收... 详细信息

植物提取物(PE)是提取于植物中且具有抗菌、抗氧化和免疫调节等1种或多种生物学功能的天然成分物质,可通过改善饲料适口性,增加动物采食量;促进消化液和消化酶分泌,调节肠道菌群并改善肠道生理形态和功能状态,从而促进营养物质消化吸收;促进生长激素(GH)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和甲状腺激素(THs)分泌,调节机体生长和代谢;提供维生素D并促进成骨,维持骨组织生长,从而起到促进动物生长的作用。近年来,PE作为天然促生长饲料添加剂已成为国内外研究热点,而目前对PE的研究主要集中在对动物机体某一方面或某一功能的单一影响上。因此,本文针对PE促动物生长作用的机制进行系统综述,为PE的开发利用提供参考。

关键词：天然植物提取物促进动物生长作用机制饲料添加剂

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鸭疫里默氏杆菌CH-1株37℃和42℃的转录组测序及比较分析

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微生物学报 2024年第7期64卷 2368-2380页

作者：汪思懿郭方程安春刘马峰西南动物疫病防控技术教育部工程研究中心四川成都611130 四川省动物疫病防控国际联合研究中心四川成都611130 动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130 四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心四川成都611130

【目的】鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer)是一种感染鸭的革兰氏阴性菌,给养鸭业造成较大经济损失。由于鸭体内温度为42℃,当鸭疫里默氏杆菌感染鸭后必然会调节自身基因表达来适应鸭体内温度。为鉴定鸭疫里默氏杆菌CH-1株感染... 详细信息

【目的】鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer)是一种感染鸭的革兰氏阴性菌,给养鸭业造成较大经济损失。由于鸭体内温度为42℃,当鸭疫里默氏杆菌感染鸭后必然会调节自身基因表达来适应鸭体内温度。为鉴定鸭疫里默氏杆菌CH-1株感染鸭的适应性机制,本研究测定和比较了鸭疫里默氏杆菌CH-1株在37℃和42℃下的转录组。【方法】将鸭疫里默氏杆菌RA-CH-1株在37℃培养至对数生长期后,分别在37℃和42℃热应激1 h,收集菌体,提取总RNA。利用转录组测序(RNA-seq)技术获得RA-CH-1在37℃和42℃下的转录组原始数据,筛选得到差异表达基因,通过基因本体论(geneontology,GO)数据库和京都基因与基因组百科全书(Kyotoencyclopediaof genes and genomes,KEGG)数据库对差异表达基因进行富集分析。选取dnaK作为热应激反应基因进行功能初步鉴定。【结果】共筛选获得234个显著差异表达基因,其中169个基因显著上调,65个基因显著下调。显著差异表达基因通过GO富集分析主要富集在核苷代谢过程、糖基化合物代谢过程和核心RNA聚合酶结合转录因子活性等;显著差异表达基因通过KEGG富集分析主要富集在氧化磷酸化、核糖体和细菌分泌系统等通路。与37℃条件下生长能力比较,dnaK缺失后导致鸭疫里默氏杆菌在42℃条件下生长能力受损。【结论】RA-CH-1在37℃和42℃下生长不受影响,通过热休克反应相关蛋白等因子表达上调或下调来应对温度升高后的应激状况。

关键词：鸭疫里默氏杆菌转录组温度

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鸭疫里默氏杆菌九型分泌系统(T9SS)分泌蛋白B739_0093的功能鉴定

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微生物学报 2024年第7期64卷 2407-2418页

作者：江茵罗睿心程安春刘马峰西南动物疫病防控技术教育部工程研究中心四川成都611130 四川省动物疫病防控国际联合研究中心四川成都611130 动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130 四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心四川成都611130

【目的】鸭疫里默氏杆菌是引起鸭浆膜炎的一种革兰氏阴性病原菌,该菌编码的九型分泌系统(type IX secretion system,T9SS)参与滑动、致病等过程。前期研究结果表明,鸭疫里默氏杆菌CH-1株B739_0093基因在限铁培养条件明显上调。序列分析... 详细信息

【目的】鸭疫里默氏杆菌是引起鸭浆膜炎的一种革兰氏阴性病原菌,该菌编码的九型分泌系统(type IX secretion system,T9SS)参与滑动、致病等过程。前期研究结果表明,鸭疫里默氏杆菌CH-1株B739_0093基因在限铁培养条件明显上调。序列分析表明,B739_0093编码蛋白含有一个T9SS分泌蛋白保守的C端结构域,然而其具体功能未知。本研究旨在鉴定该基因编码蛋白是否被T9SS分泌,以及在该菌致病中的作用。【方法】用荧光定量PCR检测B739_0093是否被铁离子和铁转运调节子(ferric uptake regulator,Fur)调控;用大肠杆菌表达重组B739_0093截短蛋白制备多克隆抗体,通过Western blotting检测是否由T9SS分泌;构建B739_0093基因缺失株,通过毒力和定殖试验鉴定B739_0093在鸭疫里默氏杆菌致病中的功能。【结果】荧光定量PCR结果表明,B739_0093基因在铁离子限制性培养基明显上调,此调控是由调控蛋白Fur介导的;Western blotting结果显示,B739_0093基因编码蛋白在亲本株RA CH-1主要定位在分泌物中,而在T9SS缺失株定位在菌体且不能在分泌物被检测到;与亲本株RA CH-1相比,RA CH-1ΔB739_0093对雏鸭的致病力减弱,在雏鸭各组织器官的定殖能力明显降低。【结论】B739_0093基因编码蛋白是由鸭疫里默氏杆菌T9SS分泌的,其表达受铁离子及Fur调控,并且参与了该菌的致病。

关键词：鸭疫里默氏杆菌九型分泌系统毒力

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葛根多糖对犊牛血清抗氧化、免疫指标及肠道菌群的影响

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动物营养学报 2023年第3期35卷 1696-1704页

作者：吕尚揆莘余樊磊张泽茹赵玉全尤留超张钺张琼苏柘僮曹随忠余树民沈留红四川农业大学动物医学院动物疫病与人类健康四川省重点实验室奶牛疾病研究中心成都611130 广西英路维特药物有限公司荔浦546600

本试验旨在研究葛根多糖对犊牛血清抗氧化、免疫指标及肠道菌群的影响。试验选取(6.20±3.65)日龄和体重[(47.09±4.50)kg]相近的新生健康荷斯坦犊牛24头,随机分为对照组(C组)和试验组(T组),每组12头。T组犊牛每头每天按每千克... 详细信息

本试验旨在研究葛根多糖对犊牛血清抗氧化、免疫指标及肠道菌群的影响。试验选取(6.20±3.65)日龄和体重[(47.09±4.50)kg]相近的新生健康荷斯坦犊牛24头,随机分为对照组(C组)和试验组(T组),每组12头。T组犊牛每头每天按每千克体重于牛奶中添加400 mg葛根多糖,连续5 d;C组不添加。检测试验犊牛第7天血清抗氧化指标——超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮合酶(NOS)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量,免疫指标——CD4分子(CD4)、免疫球蛋白A(IgA)、分泌型免疫球蛋白A(sIgA)、免疫球蛋白G(IgG)含量和肠道黏膜通透性指标——二胺氧化酶(DAO)活性以及肠道菌群多样性和相对丰度。结果显示:1)与C组相比,T组犊牛血清SOD、CAT、NOS和GSH-Px活性分别提高了10.16%、1.79%、7.05%和3.43%(P>0.05),血清MDA含量降低了2.27%(P>0.05)。2)与C组相比,T组犊牛血清DAO活性降低了2.38%(P>0.05),血清CD4、sIgA、IgA和IgG含量分别提高了2.47%、4.05%、8.91%和6.11%(P>0.05)。3)与C组相比,T组肠道中拟杆菌门、放线菌门和梭杆菌门相对丰度增多,厚壁菌门和变形杆菌门相对丰度降低。与C组相比,T组肠道中双歧杆菌属相对丰度显著增加(P<0.05),瘤胃球菌属相对丰度极显著降低(P<0.05),狭义梭菌属1相对丰度呈下降趋势(P=0.087)。由此可见,葛根多糖可提高犊牛抗氧化能力,增强免疫功能,调节肠道通透性,促进肠道有益菌生长,抑制有害菌增殖,从而有利于犊牛的生长发育。

关键词：葛根多糖犊牛抗氧化免疫肠道菌群

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半枝莲醇提液对2型糖尿病大鼠HPA轴的结构损伤、糖原沉积及相关递质表达的改善作用

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四川农业大学学报 2024年第4期42卷 899-907页

作者：汪乐田春洋王荣会邓逸云唐丽四川农业大学动物医学院/动物疾病与人类健康四川省重点实验室成都611130 四川栗子坪国家级自然保护区管理局四川雅安625400

【目的】为明确半枝莲醇提液对2型糖尿病(T2DM)及伴其发的下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)亢进的治疗效果,从HPA轴的角度为T2DM提供安全且有效的治疗手段。【方法】选取120只4周龄SPF级Wistar雄性大鼠,随机分为正常饮食组(GD组)24只和高糖... 详细信息

【目的】为明确半枝莲醇提液对2型糖尿病(T2DM)及伴其发的下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)亢进的治疗效果,从HPA轴的角度为T2DM提供安全且有效的治疗手段。【方法】选取120只4周龄SPF级Wistar雄性大鼠,随机分为正常饮食组(GD组)24只和高糖高脂饮食组(H组)96只;H组注射STZ诱导T2DM模型,造模成功后随机分为模型对照组(HD组)24只、半枝莲低(SD-L)、中(SD-M)和高(SD-H)剂量组各24只;GD、HD组灌服生理盐水,SD组分别灌服半枝莲醇提液,分别于治疗第5、10、20、30天测定各组大鼠体重、FBG、INS及血脂代谢指标。最后于30 d分别采用H.E、PAS染色法观察HPA轴的组织病理结构及其内糖原数量的变化;醛复红染色法观察胰腺α、β细胞数量的变化;IHC法观察5-HT、GABA分别在下丘脑PVN、VMH中表达的变化。【结果】与GD组相比,HD组发生以下变化:(1)大鼠体重、INS极显著降低,FBG极显著升高。(2)下丘脑PVN和VMH-GE、VMH-GI神经细胞数量减少,神经胶质细胞增多;腺垂体嗜碱性细胞数量减少;肾上腺球状带、束状带萎缩;胰岛萎缩。(3)HPA轴内糖原量均显著或极显著升高。(4)胰岛β细胞坏死、α细胞增多。(5)5-HT、GABA在下丘脑PVN、VMH-GI中的表达量均极显著降低。给药治疗后,这些病理性变化基本得以改善。【结论】半枝莲醇提液对T2DM具有较好的治疗作用,可以缓解T2DM并发的HPA轴内糖原异常沉积及其过度活化。

关键词：半枝莲 2型糖尿病(T2DM) 大鼠 HPA轴糖原 5-HT GABA

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