检索结果-内蒙古大学图书馆

兔出血症病毒(RHDV)WHNRH株的分离鉴定及基因组全序列的测定与分析

微生物学报 2006年第5期46卷 720-725页

作者：李建文王红宁田浪黄勇张夏兰四川农业大学动物科技学院动物预防医学生物工程实验室雅安625014

从发病长毛兔中分离鉴定了兔病毒性出血症病毒WHNRH株。参考GenBank中已登录的RHDV毒株序列对RHDV WHNRH分离株进行了全基因组序列测定与分析。设计5对扩增区段相互重叠的RHDV特异性引物，扩增除5’和3’末端以外的序列，采用设计锚引物... 详细信息

从发病长毛兔中分离鉴定了兔病毒性出血症病毒WHNRH株。参考GenBank中已登录的RHDV毒株序列对RHDV WHNRH分离株进行了全基因组序列测定与分析。设计5对扩增区段相互重叠的RHDV特异性引物，扩增除5’和3’末端以外的序列，采用设计锚引物的5’RACE方法以及针对RHDV 3’末端的polyA结构设计引物获得了RHDV WHNRH株的5’和3’末端序列。胶回收各PCR产物，连接pMD18-T克隆载体，测得RHDV WHNRH分离株的基因组全长为7437nt（不包括polyA），与GenBank公布的全部共6株RHDV全基因序列进行同源性比较分析，同源性在89．0％～97．1％之间，ORF1同源性为89．0％～97．1％，编码氨基酸序列的同源性为95．2％～98．7％；ORF2的核酸苷序列同源性为92．1％～97．7％，编码氨基酸序列的同源性为94．1％～96．6％。

关键词：分离鉴定兔出血症病毒全基因组测序 WHNRH

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禽传染性支气管炎病毒SAIBk株全基因组的分段克隆、测序及分析

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畜牧兽医学报 2007年第1期38卷 72-77页

作者：周生王红宁唐梦君黄勇柳萍四川农业大学动物科技学院动物预防医学生物工程实验室雅安625014

根据GenBank上公布的IBV基因组序列，经多重比较后设计19对引物，用RT-PCR方法对禽传染性支气管炎病毒致肾病变型分离株SAIBk株的全基因组进行了分段扩增、克隆和序列测定。测序结果表明：SAIBk株基因组序列全长27520 bp，A＋T的含量占6... 详细信息

根据GenBank上公布的IBV基因组序列，经多重比较后设计19对引物，用RT-PCR方法对禽传染性支气管炎病毒致肾病变型分离株SAIBk株的全基因组进行了分段扩增、克隆和序列测定。测序结果表明：SAIBk株基因组序列全长27520 bp，A＋T的含量占61．74％，具有典型的冠状病毒基因组结构。基因组内碱基的插入和缺失主要分布在3 220-3470位、20560-20810位、25310-25600位和27150—27220位。与GenBank上公布的5株IBV基因组序列Beaudette、Mass41、Ca199、BJ、KQ6的同源率分别为87．2％、87．6％、87．2％、85．6％和87．5％。SAIBk株基因组不同区域的同源性分析结果表明，3＇UTR和5＇UTR是基因组中最为保守的区域，同源率在90．9％～97．7％，而S1基因是基因组中变异最大的区域，同源率在74．8％～83．2％。系统进化分析结果表明SAIBk株与国内分离株S14、LX4、BJ的亲缘关系较近。

关键词：禽传染性支气管炎病毒致肾病变型基因组序列分析

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IBV S1基因和IL-2基因双顺反子DNA疫苗的免疫原性研究

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微生物学报 2007年第6期47卷 1055-1059页

作者：唐梦君王红宁周生黄勇柳萍胡慧琼廖娟四川农业大学动物科技学院动物预防医学生物工程实验室雅安625014 四川大学生命科学学院成都610064

为了研制更加有效的IBV DNA疫苗,将IBV的S1基因和禽白介素2(IL-2)基因插入双顺反子表达载体pIRES-EGFP/DsRed中,构建能分别或同时表达S1基因和IL-2基因的pIRES-S1、pIRES-IL2、pIRES-S1/IL-2质粒。通过脂质体转染Vero细胞,利用RT-PCR及... 详细信息

为了研制更加有效的IBV DNA疫苗,将IBV的S1基因和禽白介素2(IL-2)基因插入双顺反子表达载体pIRES-EGFP/DsRed中,构建能分别或同时表达S1基因和IL-2基因的pIRES-S1、pIRES-IL2、pIRES-S1/IL-2质粒。通过脂质体转染Vero细胞,利用RT-PCR及间接免疫荧光检测表达。将构建的质粒用脂质体包裹后,通过腿部肌肉多点注射免疫7日龄雏鸡,二免后两周用IBV肾型强毒进行攻毒。结果表明,pIRES-S1/IL-2在体外能够诱导Vero细胞表达S1蛋白和IL-2;pIRES-S1/IL-2和pIRES-S1+pIRES-IL2免疫雏鸡后均能促进外周血T淋巴细胞亚群数量和血清中特异性抗体水平的增加,能明显增强IBV DNA疫苗对同型强毒的攻击保护,但pIRES-S1/IL-2免疫组要优于pIRES-S1+pIRES-IL2混合免疫组及其它对照组,差异显著或极显著。以上结果表明禽IL-2能同时加强DNA疫苗的细胞免疫和体液免疫应答;但抗原基因和IL-2共表达DNA疫苗的免疫效果明显要优于混合注射的DNA疫苗。

关键词：禽传染性支气管炎病毒 S1基因 IL-2 双顺反子 DNA疫苗

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鸡IL-2和IL-15基因真核表达质粒对禽流感疫苗的免疫增强作用

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中国兽医科学 2006年第10期36卷 805-810页

作者：胡慧琼王红宁袁斌周生李晓英黄勇柳萍徐永莉四川农业大学动物科技学院动物预防医学生物工程实验室四川雅安625014 四川大学生命科学学院四川成都610064

根据GenBank中的鸡IL-2和IL-15序列设计了2对引物,采用RT-PCR法从山地乌骨鸡外周血淋巴细胞RNA中克隆了IL-2和IL-15基因,与pcDNA3.1连接构建了真核表达质粒pDNAIL-2和pDNAIL-15,研究了其对禽流感灭活疫苗的免疫增强作用。结果显示,免疫... 详细信息

根据GenBank中的鸡IL-2和IL-15序列设计了2对引物,采用RT-PCR法从山地乌骨鸡外周血淋巴细胞RNA中克隆了IL-2和IL-15基因,与pcDNA3.1连接构建了真核表达质粒pDNAIL-2和pDNAIL-15,研究了其对禽流感灭活疫苗的免疫增强作用。结果显示,免疫后第10d,pDNAIL-15+AI灭活疫苗组和pDNAIL-2+AI灭活疫苗组HI抗体水平显著高于AI灭活疫苗组(P<0.05)。免疫后第10 d,pDNAIL-15+AI灭活疫苗组CD4+淋巴细胞百分含量显著高于pDNAIL-2+AI灭活疫苗和AI灭活疫苗组(P<0.05);免疫后第23 d,pDNAIL-2+AI灭活疫苗组CD4+淋巴细胞百分率显著高于pDNAIL-15+AI灭活疫苗和AI灭活疫苗组(P<0.05)。证实pDNAIL-2和pDNAIL-15能提高禽流感灭活疫苗的免疫效果。

关键词：鸡白细胞介素-2 鸡白细胞介素-15 禽流感疫苗 HI抗体

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基因芯片技术检测细菌耐药性

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中国兽医杂志 2003年第12期39卷 45-46页

作者：邹立扣王红宁四川农业大学动物科学院预防医学生物工程实验室四川雅安625014

1 基本概念生物芯片(Biochip)是指将大量的生物分子探针以大规模阵列形式排布在很小的载玻片、尼龙网等载体上,通过与标记的样品进行杂交,检测杂交信号的强弱进而判断样品中靶分子的数量.依据生物分子探针的不同,生物芯片可分为很多种类... 详细信息

1 基本概念生物芯片(Biochip)是指将大量的生物分子探针以大规模阵列形式排布在很小的载玻片、尼龙网等载体上,通过与标记的样品进行杂交,检测杂交信号的强弱进而判断样品中靶分子的数量.依据生物分子探针的不同,生物芯片可分为很多种类,包括基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片、组织芯片.

关键词：基因芯片技术检测细菌耐药性生物分子

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兔病毒性出血症基因工程疫苗的研究进展

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中国预防兽医学报 2007年第10期29卷 821-824页

作者：张夏兰王红宁张昌菊向菁徐永莉余协中四川农业大学动物科学院动物预防医学生物工程实验室四川雅安625014 重庆市巴南区畜牧兽医站重庆401320

兔病毒性出血症俗称兔瘟，它是由兔出血症病毒（Rabbit hemorrhagic disease virus，RHDV）引起的一种急性、烈性、高度接触性、致死性传染病。1984年中国首次报道了该病。RHDV曾是兔的一种毁灭性传染病，因给养兔业带来巨大的经济损失... 详细信息

兔病毒性出血症俗称兔瘟，它是由兔出血症病毒（Rabbit hemorrhagic disease virus，RHDV）引起的一种急性、烈性、高度接触性、致死性传染病。1984年中国首次报道了该病。RHDV曾是兔的一种毁灭性传染病，因给养兔业带来巨大的经济损失而备受养兔业的关注。1989年，世界动物卫生组织（OIE）将该病正式列为B类传染病，我国将其列为二类传染病。

关键词：兔病毒性出血症基因工程疫苗世界动物卫生组织兔出血症病毒 virus 传染病 RHDV 经济损失

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鸡传染性支气管炎病毒M蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

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中国生物制品学杂志 2013年第10期26卷 1463-1466页

作者：王富妍任雅邹年莉郭明萍吴瑞婷付润饶文心田曹三杰黄勇四川农业大学动物医学院动物预防医学生物工程实验室四川雅安625014 四川省雅安市天全县农业局四川雅安625500

目的制备鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)M蛋白单克隆抗体,并进行鉴定。方法利用IBV Sczy3株免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA法筛选杂交瘤细胞,强阳性孔经有限稀释法亚克隆,制备抗IB... 详细信息

目的制备鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)M蛋白单克隆抗体,并进行鉴定。方法利用IBV Sczy3株免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA法筛选杂交瘤细胞,强阳性孔经有限稀释法亚克隆,制备抗IBV M蛋白单克隆抗体。对制备的单抗进行单抗亚型、腹水ELISA效价、特异性、交叉反应性鉴定及Western blot分析。结果获得2株能稳定分泌抗IBV M蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为2C10和7H6,单抗亚型分别为IgM和IgG1;腹水ELISA效价分别为1∶25 600和1∶12 800;2株单抗均只与IBV发生特异性反应,而与新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)、禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)H9亚型、AIV H5抗原和鸡传染性法氏囊病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)均不反应;2株单抗与5种基因型的其他10株IBV均有良好的反应性。结论制备出2株针对IBV M蛋白的单抗,为今后更深入地研究该蛋白的分子生物学功能、抗原表位的鉴定及抗原捕获ELISA方法的建立等提供了有力的工具。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒 M蛋白单克隆抗体酶联免疫吸附测定

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健康养殖是畜牧业发展的必然趋势

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农村养殖技术 2006年第2期 5-7页

作者：王红宁四川农业大学动物科技学院动物预防医学生物工程实验室

健康养殖生产的产品首先必须被社会接受,是质量安全可靠、无公害的畜产品;其次,健康养殖是具有较高经济效益的生产模式;再次,健康养殖对于资源的开发利用应该是良性的,其生产模式应该是可持续的,其对于环境的影响是有限的,体现了现代畜... 详细信息

健康养殖生产的产品首先必须被社会接受,是质量安全可靠、无公害的畜产品;其次,健康养殖是具有较高经济效益的生产模式;再次,健康养殖对于资源的开发利用应该是良性的,其生产模式应该是可持续的,其对于环境的影响是有限的,体现了现代畜牧业的经济、生态和社会效益的高度统一,即三大效益并重。

关键词：健康养殖畜牧业发展经济效益生产模式社会效益现代畜牧业养殖生产安全可靠开发利用畜产品

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推进动物健康养殖保障畜产品安全

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四川畜牧兽医 2005年第12期32卷 8-10页

作者：王红宁四川农业大学动物科技学院动物预防医学生物工程实验室四川雅安625014

1健康养殖的概念健康养殖业是以安全、优质、高效、无公害为主要内涵的可持续发展的养殖业,是在以主要追求数量增长为主的传统养殖业的基础上实现数量、质量和生态效益并重发展的现代养殖业.

关键词：畜产品安全健康养殖动物保障可持续发展养殖业生态效益无公害优质重发

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规模化猪场繁殖障碍性疾病的血清学调查

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养猪 2006年第2期 33-36页

作者：罗宗刚王红宁黄勇柳萍田国宝杨鑫罗昊张安云四川农业大学动物科技学院动物预防医学生物工程实验室四川雅安625014

此试验用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对规模化猪场的1498份猪血清进行了猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪伪狂犬病(PR)、猪细小病毒病(PP)、猪日本乙型脑炎(JE)、猪瘟(HC)以及猪圆环病毒2型(PCV2)感染的抗体检测。检测结果表明,猪瘟免疫... 详细信息

此试验用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对规模化猪场的1498份猪血清进行了猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪伪狂犬病(PR)、猪细小病毒病(PP)、猪日本乙型脑炎(JE)、猪瘟(HC)以及猪圆环病毒2型(PCV2)感染的抗体检测。检测结果表明,猪瘟免疫抗体的阳性率为69.0%(156/226);猪细小病毒病、猪日本乙型脑炎和猪伪狂犬病免疫抗体的阳性率分别为79.9%(175/219)、87.2%(191/219)和74.8%(217/290);猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体的阳性率为58.8%(67/114),未免疫抗体的阳性率达61.5%(150/244);猪圆环病毒2型感染未免疫抗体的阳性率为66.7%(98/147)。结果表明,引起繁殖障碍的疾病中,猪细小病毒病、猪日本乙型脑炎和猪伪狂犬病的免疫效果较好;而猪繁殖与呼吸综合征的免疫效果较差,并与猪圆环病毒病困扰某些猪场。根据检测结果,提出了相应的防制措施。

关键词：规模化猪场繁殖障碍性疾病 EusA 抗体检测

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