检索结果-内蒙古大学图书馆

四川解剖学杂志 2008年第1期16卷 2-4页

作者：刘行海刘伟隋鹏诺黄宁王伯瑶吴琦四川大学华西医学中心感染免疫研究室成都610041

目的探讨受体相互作用蛋白2(Rip2)在克雷伯杆菌所致的尿路感染中的作用。方法使用含有突变Rip2基因(mRip2)、绿色荧光蛋白(GFP)基因的复制缺陷腺病毒(Ad-mRip2-GFP)感染人膀胱上皮癌细胞T24细胞,表达GFP为转染成功标志,观察转染率,同时... 详细信息

目的探讨受体相互作用蛋白2(Rip2)在克雷伯杆菌所致的尿路感染中的作用。方法使用含有突变Rip2基因(mRip2)、绿色荧光蛋白(GFP)基因的复制缺陷腺病毒(Ad-mRip2-GFP)感染人膀胱上皮癌细胞T24细胞,表达GFP为转染成功标志,观察转染率,同时感染含有GFP基因腺病毒做对照,利用克雷伯杆菌临床分离株Kp5与细胞37℃孵育4、24、48小时,用平板培养菌落计数活菌数。结果刺激后,在感染Ad-mRip2-GFP的T24细胞清除胞内Kp5能力下降,与Ad-GFP组比较P<0.01。结论Rip2可以阻断膀胱上皮细胞的清除克雷伯杆菌作用,提示Rip2在膀胱上皮细胞的天然免疫中可能起重要作用。

关键词：尿路感染受体相互作用蛋白2 天然免疫腺病毒载体

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膀胱上皮细胞清除胞内大肠杆菌

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四川生理科学杂志 2007年第1期29卷 8-11页

作者：路会侠魏桂花王念冯云黄宁王伯瑶吴琦四川大学华西医学中心感染免疫研究室成都610041

目的:了解大肠杆菌与膀胱上皮细胞的相互关系,观察大肠杆菌在人膀胱上皮细胞株T24中的动态变化。方法:采用大肠杆菌标准株K12和大肠杆菌临床分离株299侵袭T24细胞,并用庆大霉素杀死细胞外的细菌,分别于细菌侵袭细胞后的4、24及48 h用Tri... 详细信息

目的:了解大肠杆菌与膀胱上皮细胞的相互关系,观察大肠杆菌在人膀胱上皮细胞株T24中的动态变化。方法:采用大肠杆菌标准株K12和大肠杆菌临床分离株299侵袭T24细胞,并用庆大霉素杀死细胞外的细菌,分别于细菌侵袭细胞后的4、24及48 h用TritonX-100裂解细胞,释放出细胞内的活细菌,用平板菌落计数法计数胞内活菌数。结果:两株大肠杆菌在T24细胞内都不能生长,随着时间的推移,细胞内大肠杆菌活菌数量呈不断减少趋势。24 h细胞内活菌数下降为4 h活菌数的15%。48h细胞内活菌数进一步减少。结论:膀胱上皮细胞清除进入细胞内的大肠杆菌。

关键词：大肠杆菌泌尿道上皮细胞抗菌作用

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α-防御素保护小鼠抵抗肺炎克雷伯杆菌肺部感染的实验观察

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四川生理科学杂志 2006年第1期28卷 5-7页

作者：王念熊文碧魏桂花张娟冯云黄宁王伯瑶吴琦四川大学华西医学中心感染免疫研究室成都610041

目的:探讨人中性粒细胞α-防御素对小鼠感染肺炎克雷伯杆菌肺炎模型动物的保护作用。方法:①用克雷伯肺炎杆菌临床分离株K4与不同浓度α-防御素在37℃孵育两小时,平板培养菌落计数法计数活细菌数。②用K4和α-防御素混合经肺部感染昆明... 详细信息

目的:探讨人中性粒细胞α-防御素对小鼠感染肺炎克雷伯杆菌肺炎模型动物的保护作用。方法:①用克雷伯肺炎杆菌临床分离株K4与不同浓度α-防御素在37℃孵育两小时,平板培养菌落计数法计数活细菌数。②用K4和α-防御素混合经肺部感染昆明种小鼠,观察小鼠生存率。结果:①K4与α-防御素共孵育的菌落数和PBS对照组菌落数比较没有显著性差异。②肺部注入肺炎克雷伯杆菌混合α-防御素组小鼠的死亡率低于单纯注入肺炎克雷伯杆菌的对照组,且生存时间延长(P<0.05)。结论:α-防御素可以保护小鼠抵抗细菌性肺炎,保护机制可能不是α-防御素的直接杀菌,而可能是通过增强上皮细胞天然免疫功能。

关键词：肺炎克雷伯杆菌肺部感染 α-防御素

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肺炎克雷伯杆菌分泌因子及活菌诱导人肺上皮细胞表达分泌IL-8的研究

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四川生理科学杂志 2004年第1期26卷 7-10页

作者：陈襄文王芳周敏燕冯云黄宁王伯瑶吴琦四川大学华西医学中心感染免疫研究室成都610041

目的 :探讨肺炎克雷伯杆菌 (Klebsiellapneumoniae ,Kp)分泌因子及活菌诱导肺上皮细胞株表达和分泌IL 8的状况。方法 :用临床分离株Kp0 3 1 1 6、Kp0 3 1 83的细菌培养上清或活菌刺激肺上皮细胞株A5 49和SPC A 1 ,酶联免疫吸附实验 (ELI... 详细信息

目的 :探讨肺炎克雷伯杆菌 (Klebsiellapneumoniae ,Kp)分泌因子及活菌诱导肺上皮细胞株表达和分泌IL 8的状况。方法 :用临床分离株Kp0 3 1 1 6、Kp0 3 1 83的细菌培养上清或活菌刺激肺上皮细胞株A5 49和SPC A 1 ,酶联免疫吸附实验 (ELISA)检测细胞IL 8表达量。结果 :①两株Kp培养上清分别刺激A5 49或SPC A 1后 ,IL 8表达量均有显著增高 (P <0 .0 1 ) ,且随上清刺激浓度增加而上升。②两株Kp及DH5 (活菌分别与SPC A 1共孵育 2h ,用庆大霉素杀死胞外菌 ,继续孵育 2 4h后两株Kp诱导细胞IL 8表达量均显著高于DH5α(P <0 .0 1 ) ,且随细菌数 /细胞数比例增大而上升。结论 :Kp分泌因子及活菌都能够诱导肺上皮细胞IL 8表达 ,而活菌上调IL 8的效应较培育上清分泌因子更显著 ,提示肺上皮细胞在Kp感染刺激的肺部炎症反应中起重要作用。

关键词：肺炎克雷伯杆菌 IL-8 分泌因子活菌细胞表达 SPC-A-1 酶联免疫吸附实验细胞株A549 肺上皮细胞人肺肺部炎症反应培养上清上皮细胞株临床分离株表达量庆大霉素 DH5α 24h 细胞数细菌数上升孵育

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克雷伯杆菌分泌因子及菌体成分在细胞内、外刺激肺上皮细胞分泌IL-8的研究

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四川生理科学杂志 2005年第1期27卷 1-3页

作者：周敏燕王国兴冯云黄宁王伯瑶吴琦四川大学华西医学中心感染免疫研究室成都610041

目的:通过比较肺炎克雷伯杆菌(Klebsiellapneumoniae,Kp)分泌因子及菌体成分对经过digitonin处理和未处理的肺上皮细胞株IL8分泌的影响,进一步了解克雷伯杆菌诱导肺上皮细胞炎症反应的信号转导机制。方法:实验分为两组,一组使用能使细... 详细信息

目的:通过比较肺炎克雷伯杆菌(Klebsiellapneumoniae,Kp)分泌因子及菌体成分对经过digitonin处理和未处理的肺上皮细胞株IL8分泌的影响,进一步了解克雷伯杆菌诱导肺上皮细胞炎症反应的信号转导机制。方法:实验分为两组,一组使用能使细胞膜通透性增加的温和去污剂digitonin处理,而另一组不处理。分别用Kp03183的细菌培养上清和超声处理的菌体成分刺激肺上皮细胞株A549,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞IL8表达水平。并用RT-PCR的方法检测肺上皮细胞胞内模式识别受体NOD1的表达。结果:Kp培养上清对未经digitonin处理的细胞IL8分泌无明显增强作用,与对照相比差异无显著意义(p>0.05),菌体成分能刺激IL8分泌增加(P<0.01),但增高不超过一倍。经digitonin处理使细胞膜通透性增加后,Kp培养上清及菌体成分刺激细胞IL8的作用都增强,菌体成分刺激IL8效果更为显著,为对照的3倍,而培养上清作用相对较弱。RT-PCR检测结果表明,肺上皮细胞表达胞内模式识别受体NOD1。结论:菌体成分是诱导炎症反应更有效的刺激物,肺炎克雷柏杆菌侵入肺上皮细胞可能是引发细胞炎症反应的始动环节。肺上皮细胞表达胞内模式识别受体NOD1,它是否参与肺上皮细胞识别肺炎克雷伯杆菌菌体成分,值得进一步的研究。

关键词：分泌因子体成分上皮细胞分泌肺炎克雷伯杆菌细胞内外刺激模式识别受体酶联免疫吸附实验 IL-8分泌细胞膜通透性肺上皮细胞细胞株A549 肺炎克雷柏杆菌培养上清信号转导机制炎症反应 RT-PCR 细胞表达上皮细胞株

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HSP60在免疫反应中的作用及信号传导通路

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四川生理科学杂志 2002年第2期24卷 49-51页

作者：汪宇辉四川大学华西医学中心感染免疫研究室成都610041

热休克蛋白 (HSPs)是细胞应激时表达增加的一个蛋白家族 ,近年来发现HSPs尤其是HPS60可介导天然免疫和获得性免疫。

关键词：热休克蛋白免疫反应信号传导通路自身免疫性疾病 HPS60

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结核分枝杆菌毒力基因研究进展

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国外医学（流行病学．传染病学分册） 2004年第4期31卷 235-239页

作者：钟琪鲍朗四川大学华西医学中心感染免疫研究室成都610041

结核病是目前全球重点控制的传染病之一,结核分枝杆菌(简称结核杆菌)具有强大的致病性和传染力,而要彻底了解和控制结核杆菌,对其毒力基因的认识就显得非常重要。近年来世界各国投入了很大的人力物力研究结核杆菌的毒力基因。对毒力基... 详细信息

结核病是目前全球重点控制的传染病之一,结核分枝杆菌(简称结核杆菌)具有强大的致病性和传染力,而要彻底了解和控制结核杆菌,对其毒力基因的认识就显得非常重要。近年来世界各国投入了很大的人力物力研究结核杆菌的毒力基因。对毒力基因的认识将促进结核的疫苗研制、临床诊断与控制,具有十分重要的抗结核战略意义。

关键词：结核分枝杆菌毒力基因传染病细菌感染

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铜绿假单胞菌活菌对呼吸道上皮细胞表达IL-8的影响

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四川生理科学杂志 2006年第1期28卷 10-12页

作者：魏桂花周敏燕熊文碧冯云黄宁王伯瑶吴琦四川大学华西医学中心感染免疫研究室成都610041

目的:探讨铜绿假单胞菌活菌与人呼吸道上皮细胞的相互关系,细菌对呼吸道上皮炎症反应的影响。方法:采用PAO1及ATCC 27853两株铜绿假单胞菌,在体外与培养的呼吸道上皮细胞株A549及无血清培养的人支气管上皮原代细胞相互作用,收集细胞培... 详细信息

目的:探讨铜绿假单胞菌活菌与人呼吸道上皮细胞的相互关系,细菌对呼吸道上皮炎症反应的影响。方法:采用PAO1及ATCC 27853两株铜绿假单胞菌,在体外与培养的呼吸道上皮细胞株A549及无血清培养的人支气管上皮原代细胞相互作用,收集细胞培养上清,ELISA检测上清IL-8浓度。结果:两株绿脓杆菌均能诱导呼吸道上皮细胞IL-8分泌增加,在细菌刺激下,A549细胞IL-8分泌比对照高出5倍(P<0.05),原代上皮细胞IL-8分泌比对照高出8倍(P<0.05)。结论:铜绿假单胞菌呼吸道感染的过程中,细菌与上皮细胞的直接作用可能是呼吸道炎症反应的重要原因。铜绿假单胞菌刺激上皮细胞炎症的分子机制和信号传导值得进一步探讨。

关键词：呼吸道上皮细胞铜绿假单胞菌白细胞介素-8

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人β防御素2(HBD2)与人乳头瘤病毒HPV16E6羧基端编码基因的克隆及其在真核细胞中的表达

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西部医学 2003年第4期1卷 289-292页

作者：孙艳李明黄宁吴琦王伯瑶四川大学华西医学中心感染免疫研究室成都610041

目的　构建人β防御素与人乳头瘤病毒 HPV16 E6羧基端基因的真核表达质粒 ,并检测其在真核细胞中的表达情况 ,探讨其作为 DNA疫苗治疗宫颈癌的可行性。方法　利用分子克隆技术 ,将 HBD2基因片段与 HPV16 E6羧基端基因片段连接 ,插入真... 详细信息

目的　构建人β防御素与人乳头瘤病毒 HPV16 E6羧基端基因的真核表达质粒 ,并检测其在真核细胞中的表达情况 ,探讨其作为 DNA疫苗治疗宫颈癌的可行性。方法　利用分子克隆技术 ,将 HBD2基因片段与 HPV16 E6羧基端基因片段连接 ,插入真核表达质粒 pc DNA3.1,经测序鉴定后 ,用阳离子脂质体法转染真核细胞 COS7,RT- PCR及免疫组化法检测其表达。结果　重组质粒 pc DNA3.1/ HBD2 - HPV16 E6 C转染 COS7细胞 4 8小时后 ,RT- PCR扩增出插入的 HBD2 - HPV16 E6 C片段 ,免疫组化染色呈棕黄色阳性反应。结论　人 β防御素与人乳头瘤病毒 HPV16 E6羧基端融合基因能在真核细胞中有效表达 ,为今后进行整体动物 DNA免疫试验奠定了基础。

关键词：人β防御素2 人乳头瘤病毒分子克隆真核细胞

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超抗原SEB或SEC对T细胞分泌IL-2和杀伤HcaF细胞的影响

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广东医学 2005年第9期26卷 1201-1203页

作者：李明邢飞跃李岩四川大学华西医学中心感染免疫研究室成都610041 暨南大学教育部组织移植与免疫重点实验室广州510632

目的探讨超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)和金黄色葡萄球菌肠毒素C(SEC)在体外刺激T细胞分泌IL-2和杀伤肿瘤细胞的作用。方法不同浓度SEB或SEC在体外刺激T细胞,采用流式细胞术检测T细胞受刺激后不同时间分泌IL-2的水平,用MTT法检测活... 详细信息

目的探讨超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)和金黄色葡萄球菌肠毒素C(SEC)在体外刺激T细胞分泌IL-2和杀伤肿瘤细胞的作用。方法不同浓度SEB或SEC在体外刺激T细胞,采用流式细胞术检测T细胞受刺激后不同时间分泌IL-2的水平,用MTT法检测活化的T细胞及其上清对肝细胞癌HcaF细胞的杀伤效应。结果SEB或SEC能刺激T细胞大量分泌IL-2,刺激剂量以100μg/L时活化T细胞的能力最强,最佳刺激时间为3～4d。SEB或SEC活化的T细胞对肝细胞癌HcaF细胞具有很强的杀伤效应,两者对T细胞分泌IL-2和杀伤HcaF细胞的作用无明显差异。结论SEB或SEC具有很强的刺激T细胞分泌和增强T细胞杀伤肿瘤细胞的能力,为其应用于肿瘤免疫治疗奠定了一定基础。

关键词：超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素C 超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B T细胞白介素-2 杀伤HcaF细胞肿瘤免疫治疗

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