检索结果-内蒙古大学图书馆

广东医学 2005年第9期26卷 1289-1290页

作者：李岩邢飞跃四川大学华西医学中心感染免疫研究室成都610041 暨南大学教育部组织移植与免疫重点实验室广州510632

固有免疫应答细胞表面有限的受体如何识别种类繁多的异己抗原，一直是困扰医学界的一个难题。机体识别微生物非己成分是基于对病原相关分子模式（pathogen associated molecular patterns，PAMP）的识别。PAMP是多种微生物所共有的一类... 详细信息

固有免疫应答细胞表面有限的受体如何识别种类繁多的异己抗原，一直是困扰医学界的一个难题。机体识别微生物非己成分是基于对病原相关分子模式（pathogen associated molecular patterns，PAMP）的识别。PAMP是多种微生物所共有的一类特殊的保守结构，其化学性质多属于糖脂结构，真核细胞一般不表达。目前已发现多种PAMP，包括G^-菌的脂多糖、G^＋菌的肽聚糖、磷壁酸和脂磷壁酸、分支杆菌的脂聚糖和酵母菌的甘露糖等。最近发现，细菌来源的非甲基化CDGDNA也是一种PAMP，其识别受体是Toll样受体（Toll like receptor，TLR）家族成员——TLR9。本文就TLR9介导的CpGDNA信号传导机制作简要综述。[第一段]

关键词： TLR9 CpG DNA 信号通路免疫应答特异性配体糖脂结构

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TNF及铜绿假单胞菌刺激呼吸道上皮细胞表达NOD2蛋白

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四川生理科学杂志 2005年第4期27卷 145-147页

作者：张娟魏桂花王念冯云黄宁王伯瑶吴琦四川大学华西医学中心感染免疫研究室四川成都610041

目的:通过对TNF及铜绿假单胞菌(PAO1)刺激肺上皮细胞株(A549)表达胞浆蛋白NOD2的研究,进一步了解NOD2在机体天然免疫病原体识别过程中的作用。方法:培养呼吸道肺癌上皮细胞株A549,以TNF、铜绿假单胞菌PAO1刺激细胞,并以未刺激组做对照,... 详细信息

目的:通过对TNF及铜绿假单胞菌(PAO1)刺激肺上皮细胞株(A549)表达胞浆蛋白NOD2的研究,进一步了解NOD2在机体天然免疫病原体识别过程中的作用。方法:培养呼吸道肺癌上皮细胞株A549,以TNF、铜绿假单胞菌PAO1刺激细胞,并以未刺激组做对照,通过半定量RT-PCR技术观察胞浆蛋白NOD2的表达变化。结果:与未刺激组比较,TNF、铜绿假单胞菌PAO1都能够上调A549细胞NOD2蛋白的表达。结论:TNFα与铜绿假单胞菌PAO1刺激能增强A549细胞胞浆蛋白NOD2的表达,提示细胞内受体NOD2在呼吸道天然免疫病原体识别过程中可能起重要作用。

关键词：呼吸道上皮细胞天然免疫 NOD2 铜绿假单胞菌呼吸道上皮 TNFα 2蛋白 NOD 细胞表达细胞株A549

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结核分枝杆菌Clp蛋白酶复合体研究进展

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微生物学免疫学进展 2015年第5期43卷 73-77页

作者：袁晋宁鲍朗四川大学华西医学中心感染免疫研究室四川成都610041

Clp蛋白酶复合体在结核分枝杆菌蛋白质的代谢调控过程中发挥着极其重要的作用,维持结核分枝杆菌感染宿主后的正常生存和繁殖的功能。对Clp蛋白酶复合体的组成、作用机制及其生物学功能等方面的最新研究进展进行综述。

关键词：结核分枝杆菌 Clp蛋白酶系统蛋白质代谢单核/巨噬细胞

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结核分枝杆菌Rv0901基因原核表达质粒的构建及其表达

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中国呼吸与危重监护杂志 2004年第2期3卷 103-106页

作者：吴悦涵鲍朗赵明才龙洋曾献武张会东四川大学华西医学中心感染免疫研究室四川成都610041

目的　为研究结核分枝杆菌基因Rv0 90 1的功能提供材料。方法　PCR扩增Rv0 90 1基因编码序列 ,定向克隆入融合蛋白原核表达载体pGEX 1λT获得重组表达质粒 ,转化大肠杆菌后用IPTG进行诱导表达 ,通过SDS PAGE、GST 纯化试剂盒鉴定并纯... 详细信息

目的　为研究结核分枝杆菌基因Rv0 90 1的功能提供材料。方法　PCR扩增Rv0 90 1基因编码序列 ,定向克隆入融合蛋白原核表达载体pGEX 1λT获得重组表达质粒 ,转化大肠杆菌后用IPTG进行诱导表达 ,通过SDS PAGE、GST 纯化试剂盒鉴定并纯化表达产物。结果　从结核杆菌H37Rv株基因组DNA中扩增出Rv0 90 1基因 ;成功构建了融合表达质粒pGEX Rv0 90 1;重组质粒经IPTG诱导后能在大肠杆菌中稳定表达 4 5kDa的GST Rv0 90 1融合蛋白。结论　本实验成功表达并纯化GST Rv0 90 1融合蛋白 ,为Rv0 90 1基因功能的研究打下了基础。

关键词：结核分枝杆菌 Rv0901基因原核表达质粒基因表达重组质粒

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膀胱上皮细胞对大肠杆菌抗菌作用观察

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四川生理科学杂志 2008年第2期30卷 51-52页

作者：隋鹏诺刘燕翔刘珍赵丽君刘伟刘行海王伯瑶黄宁吴琦四川大学华西医学中心感染免疫研究室四川成都610041

目的:了解膀胱上皮细胞和大肠杆菌的相互作用,观察其对大肠杆菌杀菌作用的动态变化。方法:采用人膀胱上皮细胞株T24和大肠杆菌标准株K12共同孵育,分别与作用后的15分钟、30分钟、60分钟、90分钟、120分钟,用Triton X-100释放粘附在细胞... 详细信息

目的:了解膀胱上皮细胞和大肠杆菌的相互作用,观察其对大肠杆菌杀菌作用的动态变化。方法:采用人膀胱上皮细胞株T24和大肠杆菌标准株K12共同孵育,分别与作用后的15分钟、30分钟、60分钟、90分钟、120分钟,用Triton X-100释放粘附在细胞上及细胞内的活菌,用平板菌落计数法计数活菌数。结果:T24对大肠杆菌K12有杀菌作用,在相互作用15分钟时即表现出来,且在30分钟时杀菌作用最强,与对照组相比细菌减少53%。结论:膀胱上皮细胞对大肠杆菌有杀菌作用,这可能是泌尿道抵抗外来细菌感染的一种天然防御机制。

关键词：膀胱上皮细胞大肠杆菌杀菌作用

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基因芯片技术在医学研究中的应用

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国外医学（生理病理科学与临床分册） 2002年第2期22卷 202-204页

作者：张万江四川大学华西医学中心感染免疫研究室四川成都610041

基因芯片技术是同时将大量的探针分子固定到固相支持物上 ,借助核酸分子杂交配对的特性对DNA样品的序列信息进行高效的解读和分析。它可用于基因表达谱的分析、突变检测 ,克隆选择和文库筛选等研究工作 ,同时在人类疾病的检测 ,预防等... 详细信息

基因芯片技术是同时将大量的探针分子固定到固相支持物上 ,借助核酸分子杂交配对的特性对DNA样品的序列信息进行高效的解读和分析。它可用于基因表达谱的分析、突变检测 ,克隆选择和文库筛选等研究工作 ,同时在人类疾病的检测 ,预防等方面也具有广阔的应用价值。

关键词：基因芯片 DNA擦针基因文库基因表达

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问号状赖型钩端螺旋体LAg42膜蛋白基因的克隆及真核表达研究

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四川生理科学杂志 2007年第1期29卷 6-8页

作者：刘鱼商正玲钟琪鲍朗四川大学华西医学中心感染免疫研究室四川成都610041

目的:构建赖型钩端螺旋体lag42基因真核表达载体并转染哺乳动物细胞,为进一步研究奠定基础。方法:分别以问号状赖型钩体017株,56601株及双曲钩体PatocI株基因组为模板PCR扩增目的基因。构建lag42基因与质粒pcDNA3.1A+的重组真核表达质粒... 详细信息

目的:构建赖型钩端螺旋体lag42基因真核表达载体并转染哺乳动物细胞,为进一步研究奠定基础。方法:分别以问号状赖型钩体017株,56601株及双曲钩体PatocI株基因组为模板PCR扩增目的基因。构建lag42基因与质粒pcDNA3.1A+的重组真核表达质粒,克隆筛选并测序;通过脂质体介导将重组质粒转染入COS7细胞,用RT-PCR检测转染结果。结果:不同毒力赖型钩体均能扩增出约1100 bp的片段,而PatocI株则未能扩增出目的片段;PCR、双酶切及测序证实pcDNA3.1A+-lag42构建成功;经RT-PCR检测证实重组质粒转染成功。结论:赖型钩体具有编码LAg42膜蛋白的基因,构建完成真核表达载体pcD-NA3.1A+-lag42,并成功转染COS7细胞。

关键词：钩端螺旋体 lag42基因克隆转染

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人表皮角质形成细胞桥粒芯糖蛋白4胞外区域基因片段的克隆

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中国临床康复 2006年第9期10卷 43-45页

作者：李薇冯云黎静宜李福民冉玉平四川大学华西医院皮肤性病科四川省成都市610041 四川大学华西医学中心感染免疫研究室四川省成都市610041 四川省人民医院皮肤性病科四川省成都市611830

目的:扩增人表皮角质形成细胞桥粒芯糖蛋白4胞外区域EC1,EC2,EC3和EC4的核酸序列。方法:实验于2004-11/2005-09在四川大学华西医学中心感染免疫研究室完成。通过反转录聚合酶链反应法从人正常皮肤组织表皮角质形成细胞中抽提RNA,反转录... 详细信息

目的:扩增人表皮角质形成细胞桥粒芯糖蛋白4胞外区域EC1,EC2,EC3和EC4的核酸序列。方法:实验于2004-11/2005-09在四川大学华西医学中心感染免疫研究室完成。通过反转录聚合酶链反应法从人正常皮肤组织表皮角质形成细胞中抽提RNA,反转录合成cDNA,聚合酶链反应扩增表皮角质形成细胞桥粒芯糖蛋白4胞外区域EC1,EC2,EC3和EC4目的基因;应用基因重组技术将目的基因分别与质粒pET32a在T4DNA连接酶作用下相连接,转化***5a感受态细菌,用含氨苄青霉素的LB培养基平板筛选转化菌,阳性重组子DNA序列测定鉴定。结果:反转录聚合酶链反应法扩增产物经凝胶电泳得到均约为350bp的4条条带;质粒载体pET32a连接的目的基因经序列测定后与在Genbank登录的桥粒芯糖蛋白4胞外区域EC1,EC2,EC3和EC4核酸序列完全一致,4个桥粒芯糖蛋白4胞外区域cDNA读码框架正确。结论:成功克隆得到的桥粒芯糖蛋白4胞外区域EC1,EC2,EC3和EC4多肽片断。

关键词：桥粒糖蛋白类逆转录聚合酶链反应基因扩增

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双黄连注射液对血管内皮细胞NF-κB信号通道靶分子活性抑制作用的研究

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中国病理生理杂志 2005年第8期21卷 1652-1653页

作者：李绚阎蓉华罗照田吴琦贺荣华王伯瑶四川大学华西医学中心基础医学与法医医学院病理生理教研室、感染免疫研究室、钩体病防治研究室四川成都610041 The UT MD Anderson cancer Center Box 354HoustonTX77030 MDACC

目的:探讨中药复方双黄连注射液对血管内皮细胞作用.方法:用双黄连注射液与人脐静脉血管内皮细胞株(ECV-304)共同培养后,采用MTT法及形态学法观察双黄连注射液对人脐静脉血管内皮细胞的作用及细胞脱氧酶的活性,用Sandwich ELISA法定量... 详细信息

目的:探讨中药复方双黄连注射液对血管内皮细胞作用. 方法:用双黄连注射液与人脐静脉血管内皮细胞株(ECV-304)共同培养后,采用MTT法及形态学法观察双黄连注射液对人脐静脉血管内皮细胞的作用及细胞脱氧酶的活性,用Sandwich ELISA法定量分析法和定量免疫细胞技术,检测NF-κB活性及胞浆内IκB含量.

关键词：人脐静脉血管内皮细胞双黄连注射液 NF-κB活性活性抑制作用信号通道靶分子定量分析法 ELISA法内皮细胞株

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重组人β-防御素-2基因的植物表达载体的建立

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四川大学学报（医学版） 2003年第3期34卷 385-389页

作者：蔡绍晖余懋群杨晓鹃杜军黄宁王伯瑶暨南大学药学院广州510632 中国科学院成都生物研究所农业高新技术与育种研究室日本名古屋大学医学部保健学科四川大学华西医学中心感染与免疫研究室

目的　运用植物转基因技术 ,探索构建表达人类 β-防御素 - 2 ( h BD- 2 )的植物生物反应器的可能性及技术路线。方法　将 C端带 myc和 6x His双标记的重组 h BD- 2基因插入植物真核表达载体 p CAMBIA13 0 4中 ,构建 C端带 m yc和 6x Hi... 详细信息

目的　运用植物转基因技术 ,探索构建表达人类 β-防御素 - 2 ( h BD- 2 )的植物生物反应器的可能性及技术路线。方法　将 C端带 myc和 6x His双标记的重组 h BD- 2基因插入植物真核表达载体 p CAMBIA13 0 4中 ,构建 C端带 m yc和 6x His双标记的重组 h BD- 2植物真核表达载体 rp CAMBIA13 0 4/ h BD- 2 / His。利用此载体转化根癌农杆菌 L BA44 0 4,经卡那霉素进行抗性基因筛选和 PCR检测 ,确定根癌农杆菌的阳性克隆。重组 h BD- 2通过转化阳性的根癌农杆菌被导入小麦幼胚愈伤组织细胞 ,经潮霉素进行抗性基因筛选 ,获得抗性愈伤组织。结果　酶切分析、PCR验证和 DNA测序等证据表明 :C端带 m yc和 6x His双标记的重组 h BD- 2已被正确地插入 p CAMBI-A13 0 4载体中 ,并位于 Ca MV 3 5 S与 Nos终止子之间 ,提示重组 h BD- 2 / His基因的植物表达载体 rp CAMBI-A13 0 4/ h BD- 2 / His已被成功构建。卡那霉素抗性基因筛选和 PCR检测显示 :rp CAMBIA13 0 4/ h BD- 2 / His已成功转化根癌农杆菌 L BA44 0 4,阳性克隆菌株已获得。潮霉素抗性筛选结果提示 :h BD- 2基因被导入小麦幼胚愈伤组织细胞。结论　本研究为进一步培育 h BD-

关键词：重组人β-防御素-2基因植物表达载体植物转基因技术可能性技术路线

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