检索结果-内蒙古大学图书馆

生物医学工程学杂志 2006年第1期23卷 159-165页

作者：朱肖奇杨志明解慧琪秦廷武四川大学华西医院教育部重点实验室干细胞与组织工程研究室

对肌腱种子细胞进行深低温保存,研究保存过程中多个环节的影响因素对细胞存活率的影响及深低温保存对种子细胞生物学特性、胶原分泌功能的影响。实验结果表明二甲基亚砜是肌腱种子细胞深低温保存中比较好的抗冻保护剂;冻存后使用与培养... 详细信息

对肌腱种子细胞进行深低温保存,研究保存过程中多个环节的影响因素对细胞存活率的影响及深低温保存对种子细胞生物学特性、胶原分泌功能的影响。实验结果表明二甲基亚砜是肌腱种子细胞深低温保存中比较好的抗冻保护剂;冻存后使用与培养时不同的营养血清处理对细胞有损害,可降低细胞存活率;在冷冻保存过程中,细胞存活率与细胞浓度有一定关系,浓度太低可能降低细胞存活率;细胞在冷冻保存时,降温速度对细胞存活率有影响,慢速的分步降温组细胞存活率明显高于直接入液氮的快速降温组;采用10%二甲基亚砜加15%小牛血清加75%DM EM配方保存肌腱种子细胞,对其分泌胶原功能无明显影响,对其生长曲线、细胞周期及染色体众数无明显改变,适于肌腱种子细胞的保存。

关键词：深低温保存肌腱种子细胞组织工程抗冻保护剂流式细胞分析

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离心管培养软骨作为半月板移植替代物的可能性研究

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中国修复重建外科杂志 2004年第5期18卷 426-430页

作者：王建杨志明解慧琪秦廷武四川大学华西医院人类疾病生物治疗教育部重点实验室:干细胞与组织工程研究室

目的　比较培养关节软骨和半月板软骨细胞的生物学特性 ,探讨培养软骨作为半月板移植替代物的可能性。　方法　分别自 3周龄大耳白兔关节软骨和半月板分离软骨细胞 ,行单层传代培养和离心管培养。将离心管培养形成的软骨和 6周龄兔半月... 详细信息

目的　比较培养关节软骨和半月板软骨细胞的生物学特性 ,探讨培养软骨作为半月板移植替代物的可能性。　方法　分别自 3周龄大耳白兔关节软骨和半月板分离软骨细胞 ,行单层传代培养和离心管培养。将离心管培养形成的软骨和 6周龄兔半月板行组织学和透射电镜观察 ,比较关节软骨细胞和半月板纤维软骨细胞的生长曲线。流式细胞术检测第 2、4代关节软骨细胞和半月板纤维软骨细胞周期。　结果　第 4代关节软骨细胞呈去分化 ,似成纤维细胞。离心管关节软骨细胞培养能形成软骨 ,半月板纤维软骨细胞不能形成软骨。培养软骨和半月板的组织学及超微结构差异显著 ,培养软骨中软骨细胞 5 %呈现凋亡。第 2、4代关节软骨细胞中亚二倍体细胞比例明显多于第 2、4代半月板纤维软骨细胞 ( P<0 .0 5 )。　结论　半月板来源的软骨细胞经离心管培养不能形成软骨组织 ,关节软骨细胞离心培养形成软骨不能作为半月板的移植物。

关键词：半月板移植关节软骨细胞离心管培养软骨软骨组织组织学养形传代培养去分化生长曲线

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大鼠失神经靶肌肉注射异体不同细胞对神经再生影响的研究

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中国修复重建外科杂志 2004年第3期18卷 225-228页

作者：刘明辉杨志明解慧琪李秀群四川大学华西医院人类疾病生物治疗教育部重点实验室:干细胞与组织工程研究室成都610041

目的　研究注射异体不同细胞于大鼠失神经靶肌肉对神经再生的影响。　方法　SD成年大鼠 36只 ,雌性 ,体重 12 0～ 15 0 g,随机分为 4组 ,每组 9只。无菌条件下切断左侧坐骨神经 ,一期神经外膜缝合。术后即于小腿三头肌处注射相应细胞 ,... 详细信息

目的　研究注射异体不同细胞于大鼠失神经靶肌肉对神经再生的影响。　方法　SD成年大鼠 36只 ,雌性 ,体重 12 0～ 15 0 g,随机分为 4组 ,每组 9只。无菌条件下切断左侧坐骨神经 ,一期神经外膜缝合。术后即于小腿三头肌处注射相应细胞 ,7天注射 1次 ,共 4次。 A组注射单纯雪旺细胞 1× 10 6 / ml 1ml,B组注射雪旺细胞加成肌细胞 (雪旺细胞∶成肌细胞为 1∶ 1) 1× 10 6 / ml 1ml,C组注射肾内皮细胞提取液 1ml,D组注射无血清培养液 1ml作对照。术后 3个月取手术侧坐骨神经及坐骨神经所支配的小腿三头肌 ,进行大体和组织形态学观察、神经鞘细胞密度及单位面积靶肌肉 (小腿三头肌 )运动终板计数。　结果　术后 3个月 ,各组近端神经鞘细胞均数为 A组 0 .1345± 0 .0 2 98,B组0 .0 931± 0 .0 2 5 6 ,C组 0 .0 72 4± 0 .0 2 37,D组 0 .1877± 0 .0 5 4 2 ;A组∶D组 P值 <0 .0 5 ,B组∶D组、C组∶D组及 A组∶ B组 P值均 <0 .0 1,B组∶ C组 P值 >0 .0 5。术后 3个月各组远端神经鞘细胞密度均数为 A组 0 .186 0± 0 .0 4 2 5 ,B组 0 .15 5 1± 0 .0 32 1,C组 0 .10 4 7± 0 .0 133,D组 0 .2 4 0 9± 0 .0 5 6 8;A组∶ D组 P值 <0 .0 5 ,B组∶ D组、C组∶ D组及B组∶ C组 P值 <0 .0 1,A组∶ B组 P值 >0 .0 5。术?

关键词：大鼠神经再生雪旺细胞成肌细胞神经鞘细胞运动终板

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硬组织切片技术在组织工程骨研究中的应用

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中国修复重建外科杂志 2004年第3期18卷 239-240页

作者：李秀群邓力罗静聪黄云四川大学华西医院人类疾病生物治疗教育部重点实验室:干细胞与组织工程研究室成都610041

目的　改进硬组织切片技术以适应骨组织工程研究。　方法　组织工程骨修复兔桡骨的术后标本和四环素标记大鼠股骨标本的观察。通过对硬组织切片中组织包埋、切片的方法、步骤及染色法 ,确定操作过程中的关键技术和需注意的问题 ,重点解... 详细信息

目的　改进硬组织切片技术以适应骨组织工程研究。　方法　组织工程骨修复兔桡骨的术后标本和四环素标记大鼠股骨标本的观察。通过对硬组织切片中组织包埋、切片的方法、步骤及染色法 ,确定操作过程中的关键技术和需注意的问题 ,重点解决硬组织切片易于脱片的缺点。　结果　经改进后的硬组织切片技术能保持其原有组织结构 ,可进行 HE、Masson法以及免疫组织化学染色 ,染色后组织结构完整 ,细胞形态清晰 ,切片质量好。荧光显微镜观察骨组织结构完整。克服了普通硬组织切片技术容易发生脱片的缺点。　结论　改进的硬组织切片技术适合骨组织工程研究。

关键词：硬组织切片技术组织工程骨免疫组织化学染色 Masson法

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骨髓基质干细胞与生物衍生骨复合修复山羊胫骨缺损的影像学研究

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中国修复重建外科杂志 2004年第2期18卷 83-87页

作者：戚超黄富国杨志明罗静聪李秀群蔡琰四川大学华西医院人类疾病生物治疗教育部重点实验室:干细胞与组织工程研究室成都610041

目的　探讨骨髓基质干细胞 (MSCs)与生物衍生骨复合修复山羊胫骨的长段骨 -骨膜缺损 ,以及修复负重骨缺损的可行性。　方法　将 18只 12月龄健康杂种青山羊 (雌雄不限 ) ,制备成双侧胫骨中段 2 0 mm骨 -骨膜缺损模型 ,常规钢板螺钉固定 ... 详细信息

目的　探讨骨髓基质干细胞 (MSCs)与生物衍生骨复合修复山羊胫骨的长段骨 -骨膜缺损 ,以及修复负重骨缺损的可行性。　方法　将 18只 12月龄健康杂种青山羊 (雌雄不限 ) ,制备成双侧胫骨中段 2 0 mm骨 -骨膜缺损模型 ,常规钢板螺钉固定 ;MSCs与生物衍生骨于体外复合培养 ;对同一只山羊将复合物植入右侧胫骨缺损处作为实验组 ,以单纯材料植入左侧胫骨缺损处作为对照组 ,空白组不植入任何材料 ;在 8、12、16和 2 4周各时间点分别行标本的大体观察、X线片观察和骨密度测试 ,比较其修复骨缺损的能力。　结果　大体观察、X线片和骨密度测试显示 :实验组 8周骨缺损部分修复 ,12、16周骨缺损完全修复 ,8、12和 16周其骨密度较对照组高 ,差异有统计学意义 (P<0 .0 5 ) ;2 4周实验组与对照组骨密度差异无统计学意义 ;空白组骨缺损未修复。　结论　组织工程骨早期修复骨缺损能力较强 ,且较单纯材料成骨量大、迅速 ,能够对负重骨缺损进行有效的修复。

关键词：骨髓基质干细胞生物衍生骨修复山羊胫骨缺损影像学组织工程骨

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脱细胞羊膜的制备及其生物相容性研究

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中国修复重建外科杂志 2004年第2期18卷 108-111页

作者：罗静聪李秀群杨志明邓力四川大学华西医院人类疾病生物治疗教育部重点实验:干细胞与组织工程研究室

目的　制备脱细胞人羊膜 (HAAM) ,检测其细胞相容性和组织相容性 ,探讨其作为组织工程支架材料的可行性。　方法　新鲜人羊膜经漂洗后戊二醛交联 ,0 .5 % SDS震摇 2 4小时 ,胰蛋白酶消化 4小时 ,充分漂洗 ,冷冻干燥 ,分装 ,环氧乙烷消... 详细信息

目的　制备脱细胞人羊膜 (HAAM) ,检测其细胞相容性和组织相容性 ,探讨其作为组织工程支架材料的可行性。　方法　新鲜人羊膜经漂洗后戊二醛交联 ,0 .5 % SDS震摇 2 4小时 ,胰蛋白酶消化 4小时 ,充分漂洗 ,冷冻干燥 ,分装 ,环氧乙烷消毒备用。倒置相差显微镜和扫描电镜观察表面结构 ,测量孔径 ,并作 HE、Mallory染色。体外培养人成纤维细胞并复合于 HAAM,倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞的黏附、生长 ,四甲基偶氮唑盐 (MTT)法测定 HAAM浸提液对培养的人成纤维细胞的细胞毒性。将 HAAM植入 SD大鼠背部皮下 ,观察其组织相容性。　结果　 HAAM的一面为网状结构 ,孔径为 10～ 80 nm,另一面为致密纤维结构。HE、Mallory染色表明材料无细胞残留 ,均为胶原组成。成纤维细胞能在 HAAM上黏附、增殖。 MTT示材料细胞毒性为 0或 1级 ,动物埋置实验无异常反应。　结论　应用去垢剂 -酶消化法处理新鲜人羊膜 ,能有效去除组织中的细胞和可溶性成分 ,可进一步降低其免疫原性 ,保留基质及网状结构 ,有良好的细胞相容性和组织相容性 ,可作为组织缺损的修复材料及组织工程的膜支架材料。

关键词：脱细胞羊膜制备生物相容性检测细胞相容性组织相容性

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生物衍生羊膜对大鼠跟腱粘连影响的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2004年第5期18卷 431-434页

作者：罗静聪杨志明李秀群四川大学华西医院人类疾病生物治疗教育部重点实验室:干细胞与组织工程研究室成都610041

目的　研究生物衍生羊膜预防 SD大鼠跟腱粘连的效果 ,并为临床预防术后跟腱粘连提供实验数据。方法　以 2 8只 SD大鼠后肢跟腱为实验模型 ,切断并缝合跟腱 ,实验侧跟腱包裹生物衍生羊膜 ,对侧不包裹作为对照 ,术后 1、2、4、6、8和 12... 详细信息

目的　研究生物衍生羊膜预防 SD大鼠跟腱粘连的效果 ,并为临床预防术后跟腱粘连提供实验数据。方法　以 2 8只 SD大鼠后肢跟腱为实验模型 ,切断并缝合跟腱 ,实验侧跟腱包裹生物衍生羊膜 ,对侧不包裹作为对照 ,术后 1、2、4、6、8和 12周分别取跟腱 ,大体及组织学观察跟腱的粘连、愈合情况。　结果　术后各时间点两侧跟腱吻合处炎性细胞浸润情况、跟腱愈合进程无明显差别 ,跟腱粘连的半定量评分表明实验侧和对照侧差异有统计学意义 ( P<0 .0 5 )。　结论　生物衍生羊膜能有效预防跟腱粘连 ,是一种较为理想的预防跟腱粘连的生物材料。

关键词：跟腱粘连羊膜术后预防 SD大鼠对照生物组织学观察实验数据

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组织工程肌腱保存过程中细胞存活率研究方法初步探讨

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中国修复重建外科杂志 2004年第2期18卷 123-126页

作者：朱肖奇杨志明林凡秦廷武邓力李秀群解慧琪罗静聪四川大学华西医院人类疾病生物治疗教育部重点实验室:干细胞与组织工程研究室成都610041

目的　探讨组织工程肌腱保存过程中细胞存活率研究的方法。　方法　采用碘化丙啶 (PI)将第 4代人成纤维细胞的死细胞染色 ,双苯并咪唑染料 (Ho)染色活细胞后经适当波长紫外光激发 ,分别产生红色荧光和蓝色荧光 ,利用流式细胞仪区分活细... 详细信息

目的　探讨组织工程肌腱保存过程中细胞存活率研究的方法。　方法　采用碘化丙啶 (PI)将第 4代人成纤维细胞的死细胞染色 ,双苯并咪唑染料 (Ho)染色活细胞后经适当波长紫外光激发 ,分别产生红色荧光和蓝色荧光 ,利用流式细胞仪区分活细胞和死亡细胞 ;将组织工程化肌腱种子细胞悬液 4 ml(6 .0× 10 5个 / ml)平分成两管 ,其中一管反复冻融 ,将细胞冻死 ;另一管不冻。再将两管细胞按不同比例混合 ,采用荧光染色流式细胞仪分析 ,研究其量效关系 ;并用荧光摄影 ,图像分析 ,即刻及 2小时荧光标记到流式细胞仪 ,检测对细胞存活率的影响。　结果　荧光染色流式细胞分析可反映加入冻融死细胞比例与存活细胞的量效关系 ,即细胞存活率与未冻融细胞和冻融细胞比例分别成正、负相关 ,相关系数 r=0 .970 (P<0 .0 5 ) ;荧光摄影后图像分析也显示了同样的量效关系 ,r=0 .982 (P<0 .0 5 ) ;荧光标记后 2小时检测比即刻检测细胞存活率降低 ,但差异无统计学意义 (P>0 .0 5 ) ;通过荧光显微镜可直接观察组织工程化肌腱上的细胞。　结论　PI和 Ho荧光染色后流式细胞仪分析及荧光摄影是组织工程肌腱保存过程中细胞存活率研究的较好方法。

关键词：组织工程肌腱细胞存活率低温保存流式细胞仪实验保存过程

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离心力在体外构建组织工程软骨中的作用

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中华实验外科杂志 2005年第3期22卷 281-283,i003页

作者：孔清泉杨志明项舟罗静聪四川大学华西医院人类疾病生物治疗教育部重点实验室干细胞与组织工程研究室成都610041

目的探讨离心力对软骨细胞功能表达和组织工程软骨结构的影响。方法采用组织化学和免疫组织化学观察组织工程软骨结构以及Ⅱ型胶原表达情况,应用DMMB分光法测定组织工程软骨硫酸化糖胺多糖(GAG)的含量。结果体外培养2、4、8周时,静态培... 详细信息

目的探讨离心力对软骨细胞功能表达和组织工程软骨结构的影响。方法采用组织化学和免疫组织化学观察组织工程软骨结构以及Ⅱ型胶原表达情况,应用DMMB分光法测定组织工程软骨硫酸化糖胺多糖(GAG)的含量。结果体外培养2、4、8周时,静态培养的组织较离心培养的组织Ⅱ胶原免疫组织化学染色弱;并且其GAG含量低于离心培养组织GAG含量,各组差异均有统计学意义(F分别为12.3、10.2、9.1,P<0.05)。离心培养的组织工程软骨GAG含量于第4周达到高峰,均值为(7.60±0.79)%。结论离心力刺激软骨细胞分泌GAG和Ⅱ型胶原,并且影响组织工程软骨结构的排列。

关键词：组织工程软骨骨结构 Ⅱ型胶原体外软骨细胞含量色弱静态培养功能表达分泌

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三种生物骨衍生材料修复节段性骨缺损的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2005年第2期19卷 118-123页

作者：李彦林杨浩韩睿李林芝李秀群李世和赵晓霞昆明医学院第一附属医院骨科昆明650032 四川大学华西医院人类疾病生物治疗教育部重点实验室:干细胞与组织工程研究室

目的　评价 3种生物骨衍生材料修复节段性骨缺损的成骨作用。　方法　将 6 0只健康日本大耳白兔双侧桡骨中段制成 10 mm节段性骨缺损 ,并随机分为 A、B、C、D和 E组 ,每组 12只 ,其中 A组植入复合型完全脱蛋白骨 (composite fully depro... 详细信息

目的　评价 3种生物骨衍生材料修复节段性骨缺损的成骨作用。　方法　将 6 0只健康日本大耳白兔双侧桡骨中段制成 10 mm节段性骨缺损 ,并随机分为 A、B、C、D和 E组 ,每组 12只 ,其中 A组植入复合型完全脱蛋白骨 (composite fully deproteinised bone,CFDB)、B组植入部分脱蛋白骨 (partially deproteinised bone,PDPB)、C组植入部分脱钙骨 (partially decalcified bone,PDCB)修复兔桡骨节段性缺损 ,D组自体髂骨移植 ,E组以空白缺损为对照 ,于术后4、8、12及 2 4周取材 ,通过 X线摄片和不脱钙硬组织切片检测 ,评价 3种材料的成骨作用。　结果　 X线摄片观察 :A、B与 C组 4周时材料密度较高 ;8周时材料与宿主骨交界处模糊 ;12周时材料边缘部分区域密度接近宿主骨 ;2 4周时 B组髓腔再通 ,C组缺损区域密度大部分接近宿主骨 ,有少许高密度影 ,A组缺损区域有较多高密度影。 X线片评分 4周和8周时各材料组无统计学差异 (P>0 .0 5 ) ;12周时 B组和 C组高于 A组 (P<0 .0 5 ) ;2 4周时 D组 >B组 >C组 >A组(P<0 .0 5 )。经组织学形态观察可见 4周和 8周时新骨贴附材料生长 ;以后新骨增多 ;材料随着时间的推移逐渐降解吸收 ;2 4周时成骨量 D组 >B组 >C组 >A组 (P<0 .0 5 )。　结论　 PDPB修复节段性骨缺损的效果佳 ,

关键词：节段性骨缺损植入修复桡骨 X线摄片成骨作用宿主生物蛋白硬组织

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