检索结果-内蒙古大学图书馆

人脂肪干细胞复合猪小肠黏膜下层脱细胞基质/壳聚糖温敏凝胶体内构建组织工程脂肪的研究

中国修复重建外科杂志 2015年第8期29卷 1028-1033页

作者：张舒罗静聪吕青邓雪琴熊炳钧四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室成都610041 四川大学华西医院乳腺外科成都610041

目的探讨人脂肪干细胞(human adipose-derived stem cells,h ADSCs)与猪小肠黏膜下层脱细胞基质微粉(small intestinal submucosa powder,SISP)/壳聚糖温敏水凝胶复合构建组织工程脂肪的可行性。方法取乳癌患者自愿捐赠脂肪组织,Ⅰ型胶... 详细信息

目的探讨人脂肪干细胞(human adipose-derived stem cells,h ADSCs)与猪小肠黏膜下层脱细胞基质微粉(small intestinal submucosa powder,SISP)/壳聚糖温敏水凝胶复合构建组织工程脂肪的可行性。方法取乳癌患者自愿捐赠脂肪组织,Ⅰ型胶原酶消化分离h ADSCs。取第3代细胞与SISP/壳聚糖温敏水凝胶混匀,制成浓度为1×106个/m L的液态凝胶。将24只5周龄健康雌性裸鼠随机分为实验组及对照组(n=12),于颈背部皮下分别注射1 m L h ADSCs+SISP/壳聚糖温敏水凝胶或SISP/壳聚糖温敏水凝胶。注射后0、1、2、4、8周测量植入物体积,评价其降解情况;注射后1、2、4、8周两组各处死3只裸鼠,大体观察后取材行组织学及免疫组织化学染色观察,评价植入物成分构成变化(HE染色)、成脂能力(油红O染色)、血管形成情况(CD31标记)及材料内h ADSC存活分化(人波形蛋白标记)。结果注射后随时间延长,两组植入物均逐渐缩小;但各时间点实验组植入物体积均大于对照组,且8周时差异有统计学意义(t=3.348,P=0.029)。大体观察示各时间点两组植入物均边界清楚、无粘连,至8周时均可见黄色新生组织,且表面有毛细血管包裹。组织学观察示,注射后植入物结构逐渐变紧密,SISP逐渐降解,且实验组降解速度较对照组慢,脂肪逐渐形成,至8周时实验组中央出现少量成熟脂肪组织;各时间点实验组油红O染色阳性面积均大于对照组,且8周时差异有统计学意义(t=3.411,P=0.027)。免疫组织化学染色示,各时间点实验组均有h ADSCs存活;植入物有新生血管生成,2周时达峰值,各时间点两组CD31阳性面积比较差异无统计学意义(P>0.05),但实验组植入物中血管化更均匀。结论 SISP/壳聚糖温敏水凝胶可作为载体,复合h ADSCs植入裸鼠体内后可构建组织工程脂肪。

关键词：仿生脊髓支架 3-D打印神经干细胞生物相容性

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小肠黏膜下层-蚕丝复合前交叉韧带重建支架的初步研究

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中国修复重建外科杂志 2015年第12期29卷 1534-1540页

作者：曹杰王旻解慧琪魏人前南方医科大学第三临床医学院广州510515 佛山市第二人民医院骨科四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室

目的制备小肠黏膜下层(small intestin al submucosa,SIS)-蚕丝复合支架用于前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)重建,并对其力学性能、细胞相容性、组织相容性以及体内重建减缓胫骨隧道关节液渗入作用进行评价。方法蚕丝脱胶... 详细信息

目的制备小肠黏膜下层(small intestin al submucosa,SIS)-蚕丝复合支架用于前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)重建,并对其力学性能、细胞相容性、组织相容性以及体内重建减缓胫骨隧道关节液渗入作用进行评价。方法蚕丝脱胶后编织成蚕丝支架,将膜状SIS呈圆筒状包绕在蚕丝支架外围构建复合支架,采用生物力学测试仪评价支架生物力学性能;支架复合BMSCs培养后,以活死细胞染色及细胞计数试剂盒8法评价支架的细胞相容性。取30只6周龄SD大鼠随机分为蚕丝支架组(S组)与复合支架组(SS组),每组15只,分别将两组支架材料移植于大鼠皮下,2、4、8周取材行HE染色观察组织相容性。取20只28周龄新西兰大白兔双侧后肢随机分为S组与SS组(n=20),分别用蚕丝支架与复合支架行双膝ACL重建,胫骨隧道开窗,5 m L 10%Na Cl和墨水溶液分别行关节腔内注射,不同时间点测量骨窗内移植物的电阻值并记录骨窗处墨水渗出时间。结果支架大体观察见复合支架内部为双股螺旋蚕丝束,外围SIS呈圆筒状包绕。蚕丝支架与复合支架最大载荷分别为(138.62±11.41)、(137.05±16.95)N,刚度分别为(24.65±2.62)、(24.21±2.39)N/mm,差异均无统计学意义(P>0.05)。活死细胞染色显示蚕丝支架和复合支架上细胞活力均良好,其中复合支架上细胞伸展性更好。细胞增殖曲线示蚕丝支架组、复合支架组及正常细胞对照组各时间点吸光度(A)值差异均无统计学意义(P>0.05)。大鼠皮下埋植标本HE染色观察示,材料植入后SS组与周围组织相容性好,炎性细胞和新生血管数与S组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。兔关节腔灌注后SS组电阻值开始下降时间点和墨水渗出时间均明显晚于S组(P<0.05),且墨水渗出持续时间明显长于S组(P<0.05)。结论制备的SIS-蚕丝复合支架生物力学性能及细胞、组织相容性好,体内移植能早期血管化,并对ACL重建早期胫骨隧道关节液渗入有较好的减缓作用,有望成为较理想的ACL重建材料。

关键词：前交叉韧带重建小肠黏膜下层蚕丝复合支架大鼠兔

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腺病毒介导RNA干扰抑制核心结合因子α1表达阻断软骨细胞的肥大分化

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中国组织工程研究 2015年第2期19卷 187-191页

作者：高博幸嵘孔清泉项舟杨婧蔡加琴黄益州李秀群陈晓禾德阳市人民医院骨科四川省德阳市618000 四川大学华西医院骨科四川省成都市610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室·干细胞与组织工程研究室四川省成都市610041

背景:软骨细胞肥大分化是软骨内骨化启动的标志,也是软骨内骨化必不可少的步骤,它是一种级联反应,一旦启动就很难阻断,最终结果是形成骨骼结构。RNA干扰技术是一种转录后水平的基因沉默,相关研究显示采用RNA干扰技术阻断核心结合因子α... 详细信息

背景:软骨细胞肥大分化是软骨内骨化启动的标志,也是软骨内骨化必不可少的步骤,它是一种级联反应,一旦启动就很难阻断,最终结果是形成骨骼结构。RNA干扰技术是一种转录后水平的基因沉默,相关研究显示采用RNA干扰技术阻断核心结合因子α1表达能够有效地抑制异位骨化形成。目的:利用RNA干扰技术抑制核心结合因子α1表达,从而阻断大鼠软骨细胞肥大分化。方法:构建沉默SD大鼠核心结合因子基因的腺病毒Ad-Cbfa1-si RNA。利用维甲酸及白细胞介素1α促进软骨细胞肥大分化,观察Ad-Cbfa1-si RNA对核心结合因子α1表达的抑制作用。利用核心结合因子α1免疫组化方法比较各组核心结合因子α1的表达从而分析软骨细胞的肥大分化情况。结果与结论:经维甲酸和白细胞介素1α诱导后,阴性对照病毒组软骨细胞出现肥大分化,核心结合因子α1的表达呈阳性反应;Ad-Cbfa1-si RNA组软骨细胞中未见核心结合因子α1明显表达。提示利用RNA干扰技术能够明显抑制核心结合因子α1的表达,从而阻断软骨细胞的肥大分化。

关键词：组织构建软骨组织工程软骨细胞肥大分化核心结合因子 RNA干扰腺病毒国家自然科学基金

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适用于内镜修复食管溃疡的可注射水凝胶补片

适用于内镜修复食管溃疡的可注射水凝胶补片

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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会

作者：龚梅笪琳萃袁奇娟解慧琪四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室?干细胞与组织工程研究室成都 610041 四川大学华西医院再生医学研究中心·干细胞与组织工程研究室成都 610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室?干细胞与组织工程研究室成都 610041 四川大学华西医院再生医学研究中心·干细胞与组织工程研究室成都 610041

目的：内镜下粘膜剥离术(Endoscopic mucosal dissection,ESD)是治疗早期食管癌的首选方案,然而对于其术后出现的多种并发症,如大而深的溃疡导致的穿孔、创面出血、术后疼痛、狭窄等尚无有效的治疗手段.若能在ESD术后即时采用胃镜微创... 详细信息

目的：内镜下粘膜剥离术(Endoscopic mucosal dissection,ESD)是治疗早期食管癌的首选方案,然而对于其术后出现的多种并发症,如大而深的溃疡导致的穿孔、创面出血、术后疼痛、狭窄等尚无有效的治疗手段.若能在ESD术后即时采用胃镜微创手术对创面进行有效修复,将极大减轻病人的痛苦,避免二次手术.猪小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)具有良好的生物相容性.本实验将SIS与聚氨酯(polyurethane,PU)复合,制备可注射型水凝胶,经胃镜植入食管粘膜溃疡面,达到修复目的.方法：通过自乳化法制备两种PU胶体,分别带有正负电荷.将SIS预先包被于阳离子PU胶束中,在体内离子凝胶化形成水凝胶补片.采用傅里叶变换红外光谱仪(fourier transform infrared spectrometer,FTIR)对PU材料进行结构分析.采用CCK-8法测定人胃黏膜上皮细胞(Human gastric mucosal epithelial cell line GES-1)的生长增殖情况.采用Calcein-AM/PI双染观察细胞形态及生长粘附情况.将可注射型水凝胶植入大鼠皮下,分别在2周、4周和8周取材,进行组织学观察.构建比格犬食管溃疡模型,大体观察可注射水凝胶植入食管溃疡面后在创面修复过程中的粘附情况.结果：本实验成功合成了两种带有不同电荷的PU胶体,并与SIS复合制备出可注射水凝胶.CCK-8检测结果显示,可注射水凝胶促进GES-1的生长增殖能力与空白对照组相当.Calcein-AM/PI双染结果显示,GES-1细胞以绿染的活细胞为主.皮下植入结果显示,可注射水凝胶植入后炎性细胞侵润较轻,有较多新生毛细血管长入,材料的降解速率较快,2M基本已经降解完毕.可注射水凝胶植入比格犬食管溃疡面后与创面黏附紧密.结论：SIS与聚氨酯的复合,能显著改善其植入困难、降解时间过快、遇水变形等问题.细胞实验及动物实验表明可注射水胶材料具有良好的细胞相容性与生物相容性,为内镜下治疗ESD术后食管溃疡和预防并发症奠定材料学基础.

关键词：内镜下粘膜剥离术聚氨酯小肠黏膜下层可注射水凝胶

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小鼠干细胞成骨和成软骨分化特异性微小RNA的初步研究

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中国修复重建外科杂志 2014年第8期28卷 1009-1016页

作者：幸嵘孔清泉项舟杨婧罗静聪邓力解慧琪四川大学华西医院骨科成都610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室成都610041

目的通过对C3H10T1/2细胞进行成骨及成软骨分化,利用微小RNA(microRNA,miRNA)芯片技术筛选成骨分化和成软骨分化中差异miRNA,以期寻找调节C3H10T1/2细胞成骨及成软骨分化的特异性miRNA。方法取C3H10T1/2细胞系,分别行成骨和成软骨诱导分... 详细信息

目的通过对C3H10T1/2细胞进行成骨及成软骨分化,利用微小RNA(microRNA,miRNA)芯片技术筛选成骨分化和成软骨分化中差异miRNA,以期寻找调节C3H10T1/2细胞成骨及成软骨分化的特异性miRNA。方法取C3H10T1/2细胞系,分别行成骨和成软骨诱导分化,对诱导组和对照组进行鉴定。然后通过miRNA芯片技术筛选分化前后2倍变化幅度且平均标准化信号值>2的差异miRNA,并行实时荧光定量PCR(real-time fl uorescence quantitative PCR,RT-qPCR)验证。结果诱导7 d成骨诱导组较对照组有明显ALP表达(P<0.05);诱导7、14、21 d,RT-qPCR检测成骨诱导组成骨标志物Runx2、丝氨酸蛋白酶7(serine protease 7,Sp7)、Ⅰ型胶原、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)mRNA相对表达量均显著高于诱导0 d时(P<0.05);诱导21 d,Western blot检测成骨诱导组Runx2、Sp7、Ⅰ型胶原、OPN蛋白表达量明显高于对照组(P<0.05)。成软骨诱导5、10、15 d,RT-qPCR检测成软骨诱导组软骨标志物SOX9、Ⅱ型胶原、蛋白多糖(Aggrecan)、透明质酸合成酶(Has2)mRNA相对表达量均显著高于诱导0 d时(P<0.05);诱导15 d,Western blot检测成软骨诱导组SOX9、Ⅱ型胶原、Aggrecan、Has2蛋白表达量明显高于对照组(P<0.05)。通过miRNA芯片技术分别筛选出10个成骨和3个成软骨2倍变化幅度且平均标准化信号值>2的差异miRNA。除miR-455-3p之外,其余差异miRNA验证结果与芯片结果比较有较好一致性。结论通过miRNA芯片技术对C3H10T1/2细胞系以及其诱导成骨和成软骨分化细胞进行检测对比,发现部分miRNA表达量在诱导后细胞中发生变化,为进一步挑选成骨和成软骨特异性miRNA进行功能验证和靶基因预测奠定了基础。

关键词： C3H10T1 2细胞成骨分化成软骨分化微小RNA

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脂肪脱细胞基质的制备和初步评价

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中国修复重建外科杂志 2014年第3期28卷 377-383页

作者：范雪娇田春祥傅月荷李秀群邓力吕青四川大学华西医院甲状腺乳腺外科成都610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室成都610041

目的制备人脂肪脱细胞基质并初步评价其细胞相容性，为构建组织工程脂肪寻找理想的支架材料。方法以接受乳腺癌根治术或乳腺癌改良根治术患者自愿捐赠的腹壁皮下脂肪组织作为实验标本，取其中一部分经反复冻融、有机溶剂抽提以及酶... 详细信息

目的制备人脂肪脱细胞基质并初步评价其细胞相容性，为构建组织工程脂肪寻找理想的支架材料。方法以接受乳腺癌根治术或乳腺癌改良根治术患者自愿捐赠的腹壁皮下脂肪组织作为实验标本，取其中一部分经反复冻融、有机溶剂抽提以及酶消化处理制备脂肪脱细胞基质，大体观察其性状，行组织学、免疫组织化学、DAPI荧光染色及扫描电镜观察材料脱细胞效果、重要组成成分（Ⅳ型胶原、层粘连蛋白、纤连蛋白）保留情况及微观结构。取另一部分脂肪组织采用酶消化法分离培养人脂肪干细胞（human adipose-derived stem cells，hADSCs），取第3代细胞分别与脂肪脱细胞基质及浓度为100%、75%、50%、25%的浸提液复合培养。采用MTT法检测细胞毒性，扫描电镜观察细胞黏附情况，活/死细胞染色评价细胞增殖情况。结果脂肪脱细胞基质基本保持原组织外形；无细胞残留且保留较完整细胞外基质成分，含丰富的Ⅰ型胶原，无DNA、脂质残留；其以胶原纤维为主，含丰富的层粘连蛋白和纤连蛋白。脂肪脱细胞基质不同浓度浸提液与细胞复合培养1、3、5 d，细胞毒性均为0～1级。hADSCs在脂肪脱细胞基质中黏附、增殖良好。结论利用反复冻融、有机溶剂抽提以及酶处理法所制备的脂肪脱细胞基质保留了较完整的细胞外基质成分，细胞相容性好，有望成为组织工程脂肪支架材料。

关键词：脂肪组织工程脱细胞基质人脂肪干细胞支架材料

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人脱细胞羊膜治疗下肢静脉性溃疡的初步报告

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中国修复重建外科杂志 2014年第11期28卷 1449-1450页

作者：袁丁罗晗黄斌解慧琪赵纪春四川大学华西医院血管外科成都610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室成都610041

目的初步探讨人脱细胞羊膜(human acellular amniotic membranes,HAAM)治疗下肢静脉性溃疡(venous ulcers,VU)的安全性和有效性。方法 2013年1月-4月应用HAAM治疗4例左下肢VU男性患者。患者年龄60~65岁,平均62.3岁。病程4~13个月,平均7... 详细信息

目的初步探讨人脱细胞羊膜(human acellular amniotic membranes,HAAM)治疗下肢静脉性溃疡(venous ulcers,VU)的安全性和有效性。方法 2013年1月-4月应用HAAM治疗4例左下肢VU男性患者。患者年龄60~65岁,平均62.3岁。病程4~13个月,平均7个月。溃疡范围3.0 cm×1.0 cm^5.0 cm×2.5 cm。疼痛视觉模拟评分(VAS)为6~8分,平均6.75分。结果治疗后3 d HAAM与溃疡创面贴附率达100%;治疗后1周均表现为促进创面愈合。2例创面完全愈合,2例经再次补充HAAM后创面面积及深度均改善。治疗期间疼痛VAS评分均逐渐降至0分。患者无局部皮肤炎症和全身过敏反应症状,随访3个月无复发。结论 HAAM治疗下肢VU操作简便,初步结果提示治疗安全且能较快有效改善创面。

关键词：人脱细胞羊膜下肢静脉性溃疡有效性安全性

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大鼠BMSCs自发钙化过程中成骨相关基因表达谱的分析

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中国修复重建外科杂志 2014年第2期28卷 133-141页

作者：焦雪峰黄永灿黄益洲吴诚光邓力四川大学华西药学院药理系成都610041 香港大学李嘉诚医学院矫形与创伤外科四川大学华西医院再生医学研究中心生物治疗国家重点实验室·干细胞与组织工程研究室

目的分析大鼠BMSCs自发钙化过程中成骨相关基因表达谱的改变。方法取健康3日龄SD大鼠骨髓分离培养BMSCs并扩增至第4代,体外构建自发钙化模型。于培养7、14 d,倒置相差显微镜观察细胞生长状况及自发钙化进程,并行茜素红染色观察。分别于... 详细信息

目的分析大鼠BMSCs自发钙化过程中成骨相关基因表达谱的改变。方法取健康3日龄SD大鼠骨髓分离培养BMSCs并扩增至第4代,体外构建自发钙化模型。于培养7、14 d,倒置相差显微镜观察细胞生长状况及自发钙化进程,并行茜素红染色观察。分别于培养0、7、14 d时收集细胞进行基因芯片分析,并对差异表达基因进行生物信息学分析。实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)验证芯片分析结果。结果大鼠BMSCs在体外发生了自发钙化,并于培养7 d后细胞开始堆集,茜素红染色为弱阳性;培养14 d后细胞堆积明显并形成典型的茜素红染色阳性钙结节样结构。自发钙化过程中共检测到576个差异表达的基因探针,对应378个大鼠基因。其中0 d和7 d相比有359个差异表达的基因探针,而7 d和14 d相比只有13个差异表达的基因探针。差异表达基因依据表达模式不同可分为6类;依据生物学功能亲和关系,与骨细胞生物学密切关联的差异表达基因又可分为7大类,即血管生成、细胞凋亡、骨相关基因、细胞周期、发育、细胞通讯和成骨信号通路。基因功能关联性分析显示有12个在功能上联系密切的细胞周期类基因在自发钙化过程中发生了下调;此外,基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,Mmp13)、分泌型磷酸蛋白1(secreted phosphoprotein 1,Spp1)、Cxcl12、Mmp2、Mmp3、Apoe和Itga7与较多的差异表达基因存在功能上的联系。Spp1、Mgp、Mmp13、Wnt抑制因子1、Cxcl12和细胞周期素A2的RT-qPCR验证结果与基因芯片结果一致。结论细胞接种后的前7 d是决定大鼠BMSCs自发钙化的关键期。BMSCs自发钙化过程受细胞通讯类基因、骨相关基因、细胞周期类基因、TGF-β信号通路、丝裂原活化蛋白激酶信号通路和Wnt信号通路等多方面的共同调控。

关键词： BMSCs 自发钙化基因芯片基因表达谱生物信息学大鼠

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简易大鼠挤压伤-挤压综合征模型建立的实验研究

简易大鼠挤压伤-挤压综合征模型建立的实验研究

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第二届海峡两岸医药卫生交流协会骨科学术论坛暨四川省医学会第十八次骨科学术会议

作者：陈曦刘跃洪徐巍张忆秦廷武刘树平谭鸿周宇德阳市人民医院骨科四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室·干细胞与组织工程实验室

目的建立一种简单有效、便于重复操作的大鼠挤压伤-挤压综合征实验模型,为进一步研究CS奠定基础.方法 2月龄健康雌性SD大鼠42只,体重160～180 g,随机分为对照组(n=6)和实验组(n=36).实验组采用自制挤压伤模具挤压大鼠双下肢,制各挤压... 详细信息

目的建立一种简单有效、便于重复操作的大鼠挤压伤-挤压综合征实验模型,为进一步研究CS奠定基础.方法 2月龄健康雌性SD大鼠42只,体重160～180 g,随机分为对照组(n=6)和实验组(n=36).实验组采用自制挤压伤模具挤压大鼠双下肢,制各挤压伤模型.挤压后观察大鼠存活情况,分别于挤压2、4、8、12、24、48 h观察大鼠下肢改变及血尿情况,心脏采血行血生化检测;取挤压部位肌肉、肾脏、心脏进行组织学观察.对照组大鼠不作处理,同上法采血及取相同部位组织进行检测比较.结果挤压期间实验组共7只大鼠死亡,10只大鼠出现血尿.挤压后存活大鼠双下肢肿胀,肌肉组织水肿.肝功能检测,实验组各时间点谷丙转氨酶与谷草转氨酶均显著高于对照组(P＜0.05).肾功能检测,实验组挤压2h后血尿素氮均显著增高,其中12、24、48 h血尿素氮与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);实验组挤压4、8、12、24 h肌酐高于对照组,其中8、12、24 h肌酐与对照组比较有统计学意义(P＜0.05).(P＜0.05).心肌损伤检测中,实验组挤压后肌酸激酶呈上升趋势,其中4、8、12、24 h肌酸激酶与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).组织学观察示,与对照组相比,实验组各时间点肌肉有明显水肿、坏死表现;肾脏出现肾小球充血肿胀,肾小管上皮细胞变性、水肿、坏死、肌红蛋白管型等;心肌结构无明显变化.结论采用自制挤压模具制备SD大鼠挤压伤模型,操作简便,各项检测结果稳定,符合挤压伤标准,是建立CS动物实验模型的一种有效方法.

关键词：挤压伤-挤压综合征动物模型大鼠

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加快发展3-D打印技术、扩展修复重建外科应用领域

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中国修复重建外科杂志 2014年第3期28卷 265-265页

作者：杨志明四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室成都610041

3-D打印技术是一种制造技术。与机械制造、模具制造不同，它是添加剂制造（或叠层制造）的一种形式，是通过分层加工、叠加成型生产三维实体，具有快速、价廉、易用、高精度、可进一步加工等特点。白1986年首次出现至今，3-D打印技术已... 详细信息

3-D打印技术是一种制造技术。与机械制造、模具制造不同，它是添加剂制造（或叠层制造）的一种形式，是通过分层加工、叠加成型生产三维实体，具有快速、价廉、易用、高精度、可进一步加工等特点。白1986年首次出现至今，3-D打印技术已涉及到衣、食、住、行、医、科、音、史、航空、航天及国防等各个领域，它将会像信息技术一样改变世界，也将对医疗卫生事业带来巨大冲击。

关键词： 3-D打印技术修复重建

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