检索结果-内蒙古大学图书馆

中国修复重建外科杂志 2013年第1期27卷 77-82页

作者：陈曦刘跃洪徐巍秦廷武赵鲁平刘树平张忆谭鸿周宇德阳市人民医院骨科四川德阳618000 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室

目的建立一种简单有效、便于重复操作的大鼠挤压伤-挤压综合征(crush syndrome,CS)实验模型,为进一步研究CS奠定基础。方法 2月龄健康雌性SD大鼠42只,体重160～180 g,随机分为实验组(n=36)和对照组(n=6)。实验组采用自制挤压伤模具挤压... 详细信息

目的建立一种简单有效、便于重复操作的大鼠挤压伤-挤压综合征(crush syndrome,CS)实验模型,为进一步研究CS奠定基础。方法 2月龄健康雌性SD大鼠42只,体重160～180 g,随机分为实验组(n=36)和对照组(n=6)。实验组采用自制挤压伤模具挤压大鼠双下肢,制备挤压伤-CS模型;挤压后观察大鼠存活情况,分别于挤压2、4、8、12、24、48 h观察大鼠下肢改变及血尿情况,心脏采血行血生化检测;取挤压部位肌肉、肾脏、心脏行组织学观察。对照组不作处理,同上法采血及取相同部位组织进行检测比较。结果挤压期间实验组共7只大鼠死亡,15只出现血尿。挤压后存活大鼠双下肢肿胀,肌肉组织水肿。肝功能检测示,实验组各时间点谷丙转氨酶与谷草转氨酶均显著高于对照组(P<0.05)。肾功能检测示,实验组挤压2 h后血尿素氮均显著增高,其中12、24、48 h与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);实验组挤压4、8、12、24 h肌酐高于对照组,其中8、12、24 h与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),实验组各时间点血清钾均高于对照组,除挤压2 h外其余各时间点与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。心肌损伤检测示,实验组挤压后肌酸激酶呈上升趋势,其中4、8、12、24 h与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。组织学观察示,与对照组相比,实验组各时间点肌肉有明显水肿、坏死表现;肾脏出现肾小球充血肿胀,肾小管上皮细胞变性、水肿、坏死、肌红蛋白管型等;心肌结构无明显变化。结论采用自制挤压伤模具制备SD大鼠挤压伤-CS模型,操作简便,各项检测结果稳定,符合挤压伤标准,是建立挤压伤-CS动物实验模型的一种有效方法。

关键词：挤压伤-挤压综合征动物模型大鼠

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脱细胞小牛肌腱组织形态学和生物力学特性研究

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中国修复重建外科杂志 2013年第5期27卷 565-570页

作者：江燕林张忆杨洁亮罗静聪秦廷武四川大学华西医院再生医学研究中心成都610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室成都610041

目的研究反复冻融结合核酸酶处理小牛肌腱脱细胞效果以及对肌腱组织形态、结构、生化成分和力学特性的影响。方法取新鲜1日龄西门塔尔小牛跟腱48根,随机分为3组(n=16):A组为正常对照组,B组采用液氮冷冻/37℃复温反复冻融5次,C组在反复... 详细信息

目的研究反复冻融结合核酸酶处理小牛肌腱脱细胞效果以及对肌腱组织形态、结构、生化成分和力学特性的影响。方法取新鲜1日龄西门塔尔小牛跟腱48根,随机分为3组(n=16):A组为正常对照组,B组采用液氮冷冻/37℃复温反复冻融5次,C组在反复冻融基础上结合核酸酶处理24 h。每组取2根跟腱用于扫描电镜观察,3根用于、组织学及免疫组织化学染色观察,3根用于DNA残留量检测,8根用于生物力学检测。结果扫描电镜观察示A、B组胶原纤维排列致密有序,形态完整,未见断裂;C组胶原纤维排列松散,几乎无断裂。阿利新蓝、天狼星红染色及免疫组织化学染色示C组糖胺聚糖、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤维连接蛋白大部分被保留;HE染色和DAPI染色示A、B组胶原纤维间可见较多完整的细胞核,而C组胶原纤维之间未见完整细胞核,但腱内膜上仍有部分细胞核残留。A、B、C组的DNA残留量分别为(0.24±0.12)、(0.16±0.07)、(0.05±0.02)μg/mg,C组显著低于A、B组(P<0.05);A、B组间差异无统计学意义(P>0.05)。生物力学检测显示,A、B、C组间拉伸强度、断裂应变、刚度和弹性模量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论反复冻融结合核酸酶处理小牛肌腱,可有效去除细胞成分,同时基本保留肌腱原始胶原纤维结构、形态、大部分细胞外基质成分和力学特性。

关键词：脱细胞肌腱形态学组织学生物力学小牛

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脱细胞肌腱片促进兔肩袖损伤腱-骨愈合的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2013年第9期27卷 1070-1075页

作者：潘娟刘国明宁良菊罗静聪黄富国秦廷武四川大学华西医院康复医学科成都610041 四川大学华西医院康复医学四川省重点实验室成都610041 四川大学华西医院骨科成都610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室·干细胞与组织工程研究室成都610041 四川大学华西医院再生医学研究中心成都610041

目的评价犬脱细胞肌腱片(decellularized tendon slices,DTSs)对兔肩袖损伤腱-骨愈合的作用。方法取成年比格犬跟腱经反复冻融5次结合核酸酶处理12 h制备DTSs,体外对DTSs行组织学观察和细胞相容性评价。取成年雄性新西兰大白兔24只,体重... 详细信息

目的评价犬脱细胞肌腱片(decellularized tendon slices,DTSs)对兔肩袖损伤腱-骨愈合的作用。方法取成年比格犬跟腱经反复冻融5次结合核酸酶处理12 h制备DTSs,体外对DTSs行组织学观察和细胞相容性评价。取成年雄性新西兰大白兔24只,体重2.5～3.0 kg,随机选取一侧肩关节自冈下肌腱止点处纵向作宽大于正常肌腱50%、长为8 mm的U形缺损,用犬DTSs修复冈下肌腱缺损并重建腱-骨止点(实验组);对侧肩关节不作任何处理(对照组)。术后4、8、12周取两组标本行组织学观察和生物力学测试。结果体外组织学观察示犬DTSs胶原结构保留完整,无细胞残留;细胞相容性实验示成纤维细胞与DTSs良好黏附。生物力学测试示,随时间延长,实验组最大载荷和刚度均呈增加趋势,12周时显著高于4周及8周(P<0.05);除12周实验组最大载荷与对照组比较差异无统计学意义(t=0.969,P=0.361)外,其余各时间点实验组最大载荷及刚度均显著小于对照组(P<0.05)。组织学观察示,对照组可见腱-骨止点的4层结构。实验组术后4周腱-骨界面由肉芽组织填充,少量类似Sharpey纤维连接于腱-骨间;随时间延长肉芽组织界面消失,成纤维细胞、Sharpey纤维、新生软骨和软骨细胞数量增多,腱-骨界面逐渐成熟,但未见位于矿化纤维软骨与非矿化纤维软骨间的潮线。结论经反复冻融5次结合核酸酶处理12 h制备的犬DTSs可促进兔肩袖损伤腱-骨愈合,提高肩袖损伤修复的生物力学性能。

关键词：脱细胞肌腱片肩袖损伤腱-骨愈合犬兔

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京尼平交联改性SIS促消化道粘膜修复材料的制备和检测

京尼平交联改性SIS促消化道粘膜修复材料的制备和检测

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第六届全国组织工程与再生医学大会

作者：王旻李顺刘宏银范美荣龚梅陈曦解慧琪四川大学华西医院再生医学研究中心干细胞与组织工程研究室成都 610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室成都 610041

目的:使用猪小肠粘膜下层(SIS)有望促进消化道粘膜的修复,如何提高SIS的抗酸、抗酶解能力是材料发挥修复效果的关键.尝试使用京尼平作为交联剂对SIS进行改性. 方法:使用京尼平对SIS进行交联,对交联后SIS的交联特征(交联指数、溶胀率... 详细信息

目的:使用猪小肠粘膜下层(SIS)有望促进消化道粘膜的修复,如何提高SIS的抗酸、抗酶解能力是材料发挥修复效果的关键.尝试使用京尼平作为交联剂对SIS进行改性. 方法:使用京尼平对SIS进行交联,对交联后SIS的交联特征(交联指数、溶胀率)进行检测,采用人工胃液评价其抗酸、抗酶解性能,同时对京尼平交联后材料的力学性能、生长因子含量、生物相容性等进行综合评价. 结果:京尼平交联后的SIS抗酸、抗酶解性能显著增强，力学性能明显提高，同时保留了其作为天然细胞外基质材料生长活性因子丰富、生物相容性好等优势。结论:京尼平交联后的SIS有望成为一种有效地促进消化道粘膜修复的材料。

关键词：消化道粘膜修复材料京尼平交联改性处理

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人角质形成细胞Notch信号通路与转化生长因子β调控受体蛋白的作用

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中国组织工程研究 2013年第2期17卷 296-300页

作者：薛斯亮王晓珊李东川张珏四川大学华西医院皮肤科四川省成都市610041 四川省医学科学院四川省人民医院肿瘤科四川省成都市610041 成都市363医院妇产科四川省成都市610041 遵义医药高等专科学校贵州省遵义市563000 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室四川省成都市610041

背景:在皮肤中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的调控至关重要,而转化生长因子β似乎是其调控的上游因子,既然Notch信号和转化生长因子β信号通道如此相关,那么Notch是不是也参加了转化生长因子β信号对受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的调控呢?目... 详细信息

背景:在皮肤中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的调控至关重要,而转化生长因子β似乎是其调控的上游因子,既然Notch信号和转化生长因子β信号通道如此相关,那么Notch是不是也参加了转化生长因子β信号对受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的调控呢?目的:探讨Notch信号通道在人角质形成细胞中对转化生长因子β调控受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的作用的影响。方法:在分别用Jagged-1激活和用Γ-分泌酶抑制剂抑制Notch信号通道后,加入转化生长因子β,同时设立对照组,用Real-timePCR测试人角质形成细胞中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappamRNA表达量。结果与结论:覆盖率为40%的角质形成细胞在加入了转化生长因子β后,受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappamRNA量在各时间点均高于对照组。在用Jagged-1激活Notch通道的角质形成细胞中,单独加入Jagged-1、转化生长因子β及两者都加入时均高于对照组(P<0.05,P<0.01)。在用γ-分泌酶抑制剂抑制Notch通道的角质形成细胞中,只加入转化生长因子β显著高于对照组(P<0.01),只加入γ-分泌酶抑制剂和两者均加入时与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。说明加入转化生长因子β导致角质形成细胞中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa表达增加,而分别对Notch信号进行激活和抑制后发现,受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa信号分别显著增加和显著被抑制。所以在转化生长因子β升高受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa表达过程中Notch信号通道是非常重要且不可或缺的。

关键词：组织构建组织构建细胞学实验转化生长因子β 受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa 人角质形成细胞 Notch NICD

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脱细胞小牛肌腱组织形态学和生物力学特性研究

脱细胞小牛肌腱组织形态学和生物力学特性研究

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第六届全国组织工程与再生医学大会

作者：江燕林张忆杨洁亮罗静聪秦廷武四川大学华西医院再生医学研究中心干细胞与组织工程实验室成都市高新区高朋大道科园四路1号 610041 四川大学生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程实验室成都市高新区高朋大道科园四路1号 610041 四川大学华西医院再生医学研究中心干细胞与组织工程实验室成都市高新区高朋大道科园四路1号 610041 四川大学生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程实验室成都市高新区高朋大道科园四路1号 6100

目的:研究反复冻融结合核酸酶处理对小牛跟腱脱细胞效果以及肌腱组织形态、结构、生化成分和力学特性的影响. 方法:取新鲜新生小牛跟腱48根,随机分为3组(n=16):新鲜正常肌腱作为对照组1(A组),反复冻融5次(液氮冷冻/37℃复温)作为对照... 详细信息

目的:研究反复冻融结合核酸酶处理对小牛跟腱脱细胞效果以及肌腱组织形态、结构、生化成分和力学特性的影响. 方法:取新鲜新生小牛跟腱48根,随机分为3组(n=16):新鲜正常肌腱作为对照组1(A组),反复冻融5次(液氮冷冻/37℃复温)作为对照组2(B组),反复冻融结合核酸酶处理24h作为实验组(C组).每组4根用于形态学、组织学以及免疫组化观察,其余12根用于DNA含量和生物力学特性检测. 结果:SEM观察结果显示A,B组胶原纤维排列致密有序，形态完整，未见断裂或缺损;C组的胶原纤维排列松散，几乎没有断裂或缺损。阿利新蓝、天狼星红染色以及免疫组化结果显示C组糖胺聚糖、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤维连接蛋白大部分被保留。H&E和DAPI染色结果显示A,B组胶原纤维之间较多完整的细胞核清晰可见，而C组胶原纤维之间未见完整细胞核，但腱内膜上仍有部分细胞核残留。DNA定量检测结果证实C组DNA含量明显低于A,B组(P＜0.05)。生物力学测定结果显示，各组拉伸强度、断裂应变、刚度和弹性模量数值均有差异，但差异均无统计学意义(P＞0.05)。结论:反复冻融结合核酸酶处理完整的小牛跟腱，可有效地去除细胞成分，同时基本保留跟腱原始的胶原纤维结构、形态、大部分胞外基质成分和力学特性，可望用于肌腱/韧带缺损的修复材料。

关键词：肌腱脱细胞组织形态学生物力学性能

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脱钙脱细胞皮质骨支架的制备及其组织形态学和力学性能表征

脱钙脱细胞皮质骨支架的制备及其组织形态学和力学性能表征

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第六届全国组织工程与再生医学大会

作者：杨洁亮张忆江燕林秦廷武四川大学生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程实验室成都市高新区高朋大道科园四路1号 610041 四川大学生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程实验室成都市高新区高朋大道科园四路1号 610041 四川大学华西医院再生医学研究中心干细胞与组织工程实验室成都市高新区高朋大道科园四路1号 6100 四川大学华西医院再生医学研究中心干细胞与组织工程实验室成都市高新区高朋大道科园四路1号 610041

目的:生物来源的支架材料用于组织修复成为生物材料研究和应用的热点之一.目前,临床上常使用自体或异体来源的髌腱、腘绳肌腱、股四头肌腱和髂胫束等生物来源材料修复韧带缺损,但仍存在来源受限、修复后膝关节稳定性差、手术并发症等缺... 详细信息

目的:生物来源的支架材料用于组织修复成为生物材料研究和应用的热点之一.目前,临床上常使用自体或异体来源的髌腱、腘绳肌腱、股四头肌腱和髂胫束等生物来源材料修复韧带缺损,但仍存在来源受限、修复后膝关节稳定性差、手术并发症等缺点.因此,探索使用来源更加广泛、手术固定简便的脱钙脱细胞皮质骨(主要成分是Ⅰ型胶原)作为韧带修复的替代物具有潜在的应用价值.本实验对异种脱钙脱细胞皮质骨的组织学、形态学及力学性能进行表征,旨在为研发修复韧带缺损的材料提供实验依据. 方法:取新鲜新生小牛四肢骨，沿力线方向加工成长5cm，宽4mm的全厚皮质骨。利用0.5NHCl对其脱钙，甲醇:乙醇(1:1)脱脂，1％TritonX-100, 0.5%脱氧胆酸钠脱细胞，制备脱钙脱细胞皮质骨支架。使用原子吸收方法检测支架的脱钙率;H&E和DAPI观察支架脱细胞效果，进一步用Quant-iTTM PicoGreen(R)dsDNA Assay Kit定量检测支架中DNA残留量;SEM,TEM观测其形态变化;生物力学试验机行单轴拉伸实验测定其力学特性。结果:皮质骨经脱钙处理后，脱钙率达99%;脱细胞处理后，组织学上未见明显的细胞残留，DNA检测证实脱细胞效果明显;形态学检测表明支架材料结构未发生明显变化;支架的力学性能满足韧带修复的基本要求。结论:脱钙脱细胞皮质骨支架不但具备基本的力学性能，而且脱除了原有的钙含量和细胞残留，可望用于韧带修复的支架材料。

关键词：韧带缺损脱钙脱细胞皮质骨支架制备工艺组织形态力学性能

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可注射CSCl-GP-HEC/SIS微粒温敏型复合材料的研制

可注射CSCl-GP-HEC/SIS微粒温敏型复合材料的研制

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第六届全国组织工程与再生医学大会

作者：邓雪琴晁宁宁王玮罗静聪四川大学华西医院再生医学中心干细胞与组织工程研究室四川省成都市高朋大道科园四路1号 610041 四川大学生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室四川省成都市高朋大道科园四路1号 610041 四川大学华西医院再生医学中心干细胞与组织工程研究室四川省成都市高朋大道科园四路1号 610041 四川大学生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室四川省成都市高朋大道科园四路1号 610041

目的:氯化壳聚糖-β甘油磷酸二钠-羟乙基纤维素(CSCl-GP-HEC)具有良好的温敏特性,小肠粘膜下层(SIS)含有多种生物活性因子,均具有良好的生物相容性并广泛用于临床及组织工程.本研究将二者制备为可注射温敏复合材料,以期获得具有生物活... 详细信息

目的:氯化壳聚糖-β甘油磷酸二钠-羟乙基纤维素(CSCl-GP-HEC)具有良好的温敏特性,小肠粘膜下层(SIS)含有多种生物活性因子,均具有良好的生物相容性并广泛用于临床及组织工程.本研究将二者制备为可注射温敏复合材料,以期获得具有生物活性的新型软组织修复材料. 方法:多步法制备SIS并低温粉碎为微粒,将其与CSCl-GP-HEC按适当比例混合制成复合材料,流变仪检测其相变特性,傅里叶变换红外光谱(FT-IR)分析各组分在相变过程中其特征是否改变,扫描电子显微镜(SEM)检测凝胶孔径.ELISA法测材料生长因子体外释放,MTT实验研究其与NIH 3T3成纤维细胞细胞相容性. 结果:复合材料具有CSCI-GP-HEC及SIS特征吸收峰，37℃从液态转变为不流动的凝胶。其孔径结构适合细胞的生存，具有良好的细胞相容性，体外检测表明bFGF, VEGF可释放至30天。结论:该复合材料具有良好的温敏凝胶特性、良好的细胞相容性，可持续释放生长因子，有望成为新型软组织修复材料。

关键词：软组织修复材料生物活性小肠粘膜下层氯化壳聚糖 β甘油磷酸二钠羟乙基纤维素

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可注射CSCl-GP-HEC/SIS微粒温敏复合材料软组织填充初步实验

可注射CSCl-GP-HEC/SIS微粒温敏复合材料软组织填充初步实验

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第六届全国组织工程与再生医学大会

作者：晁宁宁邓雪琴王玮罗静聪四川大学华西医院再生医学中心干细胞与组织工程研究室四川省成都市高朋大道科园四路1号 610041 四川大学生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室四川省成都市高朋大道科园四路1号 610041 四川大学华西医院再生医学中心干细胞与组织工程研究室四川省成都市高朋大道科园四路1号 610041 四川大学生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室四川省成都市高朋大道科园四路1号 610041

目的:细胞外基质微粒如人脱细胞真皮微粒已用于软组织填充,但植入体内后降解快而易被吸收,本研究将氯化壳聚糖-β甘油磷酸二钠-羟乙基纤维素(CSCl-GP-HEC)/小肠粘膜下层(SIS)微粒温敏复合材料植入动物皮下,探讨其作为软组织修复材料的... 详细信息

目的:细胞外基质微粒如人脱细胞真皮微粒已用于软组织填充,但植入体内后降解快而易被吸收,本研究将氯化壳聚糖-β甘油磷酸二钠-羟乙基纤维素(CSCl-GP-HEC)/小肠粘膜下层(SIS)微粒温敏复合材料植入动物皮下,探讨其作为软组织修复材料的可能性. 方法:将复合材料注射至大鼠皮下,以单纯SIS微粒作为对照,术后1,3,5,7,14,28天取材.组织学、CD68、CD163和CCR7免疫组化检测材料的炎症反应及体内降解情况.B超观察材料体内的形状维持情况. 结果:二组材料注射入SD大鼠皮下后，其炎性反应随植入时间延长而减弱，各时间点组间炎性反应评价无显著差异，复合材料组较单纯SIS微粒降解慢，可维持其形状至2个月，显著高于SIS微粒组1个月。结论:复合材料具有良好的生物相容性，延缓SIS微粒的吸收，有望作为软组织填充材料。

关键词：温敏生物材料小肠粘膜壳聚糖软组织填充

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骨骼肌无细胞基质的制备及其生物相容性研究

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中国修复重建外科杂志 2012年第6期26卷 749-754页

作者：田春祥范雪娇陈晓禾邓力秦廷武罗静聪李秀群吕青四川大学华西医院甲状腺乳腺外科成都610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室成都610041

目的细胞外基质是脂肪组织工程材料的研究热点之一。通过探讨骨骼肌无细胞基质的制作方法及生物相容性,为其在脂肪组织工程中的应用奠定基础。方法取健康成年小香猪新鲜骨骼肌组织,横切成厚2～3 mm的组织块,采用低渗-去垢剂法脱细胞处... 详细信息

目的细胞外基质是脂肪组织工程材料的研究热点之一。通过探讨骨骼肌无细胞基质的制作方法及生物相容性,为其在脂肪组织工程中的应用奠定基础。方法取健康成年小香猪新鲜骨骼肌组织,横切成厚2～3 mm的组织块,采用低渗-去垢剂法脱细胞处理。处理后采用HE染色、Masson三色染色、免疫组织化学染色及扫描电镜检测骨骼肌无细胞基质是否有细胞成分残留,并观察其基本结构;应用MTT法检测骨骼肌无细胞基质细胞毒性。取乳腺癌患者自愿捐赠脂肪组织,分离培养人脂肪干细胞(human adipose-derived stem cells,hADSCs),从形态学、流式细胞学和成脂、成骨分化能力方面进行鉴定。将骨骼肌无细胞基质与第3代hADSCs共培养,于培养后第1、3、5、7天通过细胞活性检测材料上细胞黏附、扩散和增殖情况,了解其与细胞之间的相互作用。结果 HE、Masson、免疫组织化学染色及扫描电镜观察显示骨骼肌无细胞基质肌纤维去除完全,无细胞核残留,基质结构保留完整;大量连接成网状的胶原纤维呈多孔隙样结构,规则排列。MTT检测示骨骼肌无细胞基质细胞毒性为1级,细胞相容性好。细胞活性检测示hADSCs在骨骼肌无细胞基质上能很好地伸展,且能与周围基质黏附,进入基质内部并相互交织。结论经脱细胞处理的骨骼肌无细胞基质具有良好生物相容性,可能作为脂肪组织工程的支架材料。

关键词：脂肪组织工程骨骼肌无细胞基质人脂肪干细胞支架材料

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