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生物衍生肌腱双侧关节突交叉固定动力重建颈椎后柱动态稳定性的体外生物力学研究

中国修复重建外科杂志 2012年第4期26卷 396-400页

作者：王贝宇刘浩侯伟光解慧琪宋跃明洪瑛石锐马立泰四川大学华西医院骨科成都610041 成都363医院骨科四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室成都610041 四川大学华西医院手术室成都610041

目的对于颈椎后柱不稳定进行动态稳定性重建研究鲜有报道。探讨采用冻干处理的生物衍生肌腱动力重建颈椎后柱动态稳定性的生物力学性能。方法收集死亡捐献者残肢掌长屈肌腱及掌伸肌腱制备生物衍生肌腱。20个新鲜成年山羊颈椎标本(C1～7)... 详细信息

目的对于颈椎后柱不稳定进行动态稳定性重建研究鲜有报道。探讨采用冻干处理的生物衍生肌腱动力重建颈椎后柱动态稳定性的生物力学性能。方法收集死亡捐献者残肢掌长屈肌腱及掌伸肌腱制备生物衍生肌腱。20个新鲜成年山羊颈椎标本(C1～7),随机分为4组,每组5个标本。A组为完整标本组,B组为损伤模型组,C组为后柱钉棒固定组,D组为肌腱动力重建组。B、C、D组通过破坏颈椎后方韧带复合体制作屈曲分离型损伤模型,C组用侧块螺钉经后路固定,D组用生物衍生肌腱行侧块经关节突交叉固定。用脊柱三维运动测量系统测算各组标本C3、C4节段前屈、后伸、侧屈、旋转的运动范围(range of motion,ROM)。结果前屈运动:C组ROM明显小于其他3组,差异有统计学意义(P<0.05);B组ROM较A、D组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);A、D组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。后伸、侧屈、旋转运动:C组ROM明显小于其他3组,差异有统计学意义(P<0.05);其他3组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论新鲜成年山羊颈椎标本行生物衍生肌腱侧块经关节突交叉固定,能够限制颈椎过度前屈,完全保留后伸运动,不限制侧屈和旋转运动,重建屈曲分离型损伤下颈椎的动态稳定性。

关键词：颈椎后方韧带复合体生物力学动态稳定性生物衍生肌腱

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脱钙皮质骨基质的拉伸力学性能研究

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中国修复重建外科杂志 2012年第4期26卷 501-505页

作者：刘国明张忆江燕林黄富国秦廷武四川大学华西医院骨科成都6100411 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室成都6100411 四川大学华西医院再生医学研究中心成都6100411

目的探讨脱钙皮质骨基质厚度与拉伸力学性能的关系,为将其作为组织工程支架材料奠定实验基础。方法取市售新鲜小牛胫骨,常规快速脱钙制备脱钙皮质骨基质,大体观察其颜色、质地等物理性状,并进行脱钙检测。将脱钙皮质骨基质沿径向纵切成... 详细信息

目的探讨脱钙皮质骨基质厚度与拉伸力学性能的关系,为将其作为组织工程支架材料奠定实验基础。方法取市售新鲜小牛胫骨,常规快速脱钙制备脱钙皮质骨基质,大体观察其颜色、质地等物理性状,并进行脱钙检测。将脱钙皮质骨基质沿径向纵切成不同厚度的片材,并根据厚度分为4组(n=16),分别为A组100～300μm,B组300～500μm,C组500～700μm,D组700～1 000μm;对每组标本进行拉伸性能和组织学观测。结果大体观察显示脱钙皮质骨基质经H2O2处理后呈乳白色,柔韧性好,富有弹性。脱钙皮质骨基质的脱钙率达97.6%。A组强度及弹性模量明显小于B、C、D组(P<0.05),B、C、D组间比较差异均无统计学意义(P>0.05);脱钙皮质骨基质刚度随厚度增加呈逐渐增大趋势,A组刚度显著低于B、C、D组(P<0.05),B、C组低于D组(P<0.05),B、C组间差异无统计学意义(P>0.05);各组极限应变差异均无统计学意义(P>0.05)。组织学观察各组均可见典型骨单位结构,其最大直径范围为102～325μm,平均最大直径为182μm。结论骨单位的完整性对脱钙皮质骨基质的力学性能有重要影响;脱钙皮质骨基质作为组织工程支架材料,在厚度>300μm时可保持其拉伸力学性能。

关键词：脱钙皮质骨基质力学性能组织工程支架

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音猬因子调控BMSCs表达和分泌VEGF及bFGF的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2012年第1期26卷 112-116页

作者：蔡加琴黄益洲陈晓禾谢红蕾黄永灿邓力四川大学华西药学院药理系成都610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室四川大学华西医院再生医学研究中心.干细胞与组织工程研究室

目的音猬因子(Sonic hedgehog,Shh)介导的信号参与调控血管生成的重要环节。研究不同浓度的重组Shh-N(recombinant Shh N-termitant,rShh-N)对BMSCs表达和分泌VEGF和bFGF的影响。方法取健康3日龄SD大鼠骨髓分离培养BMSCs,体外扩增至第3... 详细信息

目的音猬因子(Sonic hedgehog,Shh)介导的信号参与调控血管生成的重要环节。研究不同浓度的重组Shh-N(recombinant Shh N-termitant,rShh-N)对BMSCs表达和分泌VEGF和bFGF的影响。方法取健康3日龄SD大鼠骨髓分离培养BMSCs,体外扩增至第3代,分别用含0、10、100、200 ng/mL rShh-N的L-DMEM培养BMSCs,作为A、B、C、D组。培养12、24、48、72 h后行ELISA法检测各组上清液中VEGF和bFGF的浓度,实时荧光定量PCR法检测各组VEGF和bFGF mRNA的表达水平。结果在基因表达水平上,D组各时间点的VEGF和bFGF mRNA表达量均明显高于A组(P<0.05),且在12、48 h表达量高于24、72 h(P<0.01);C组在各时间点均促进bFGF mRNA表达(P<0.05),在24～72 h促进VEGF mRNA表达(P<0.05),且在72 h时表达量均最高(P<0.01);B组在12 h抑制VEGF mRNA表达(P<0.05),48 h和72 h表现出促进作用(P<0.05),在12～48 h明显促进bFGF mRNA表达(P<0.05),且在48 h时的表达量最高(P<0.01)。在蛋白水平上,D组各时间点VEGF和bFGF分泌量均高于A组(P<0.01);C组在24～72 h VEGF和bFGF分泌量明显多于A组(P<0.05);B组在12 h和48 h抑制VEGF的分泌(P<0.05),24 h增加其分泌作用(P<0.05),而在24 h和48 h促进bFGF的分泌(P<0.05)。各组在48 h和72 h时的VEGF和bFGF分泌量明显多于12 h和24 h(P<0.05)。结论 rShh-N可促进BMSCs表达和分泌VEGF和bFGF,为进一步探讨rShh-N和MSCs联合应用于治疗缺血性相关疾病以及促进骨修复重建的可行性提供了实验依据。

关键词：音猬因子 BMSCs 缺血性相关疾病骨修复 VEGF bFGF 大鼠

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真皮多潜能细胞体外分化为成肌细胞的初步研究

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医学研究杂志 2012年第9期41卷 122-125页

作者：薛斯亮张珏四川大学华西医院皮肤科成都610041 遵义医药高等专科学校贵州563000 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室成都610041

目的观察真皮来源多潜能细胞(dermal multipotent cells,DMCs)在体外经诱导剂诱导为成肌细胞的能力。方法将从新生BALB/c小鼠真皮中分离获得DMCs,由成肌诱导液诱导,观察DMCs在体外是否能被诱导成肌细胞。结果 DMCs在诱导剂中培养后出现... 详细信息

目的观察真皮来源多潜能细胞(dermal multipotent cells,DMCs)在体外经诱导剂诱导为成肌细胞的能力。方法将从新生BALB/c小鼠真皮中分离获得DMCs,由成肌诱导液诱导,观察DMCs在体外是否能被诱导成肌细胞。结果 DMCs在诱导剂中培养后出现肌形态细胞,由免疫组织化学技术检测,平滑肌细胞特异性抗体alpha actin阳性。结论 DMCs可以在体外分化为肌细胞,可能作为肌细胞来源。

关键词： DMCs 多潜能分化

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玻璃化冷冻保存组织工程肌腱植入大鼠体内的组织学变化

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中国组织工程研究 2012年第40期16卷 7460-7464页

作者：彭蔷朱明华孙涛曾怡王林刘程俊秦廷武四川省疾病预防控制中心四川省成都市610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室四川省成都市610041

背景:应用玻璃化冷冻方法保存组织工程肌腱具有可行性和应用前景,有待进一步研究。目的:探讨应用玻璃化冷冻保存组织工程肌腱体内植入对大鼠跟腱缺损修复的影响。方法:选用成年SD大鼠64只,于大鼠跟腱中段制备5mm肌腱缺损模型,随机摸球... 详细信息

背景:应用玻璃化冷冻方法保存组织工程肌腱具有可行性和应用前景,有待进一步研究。目的:探讨应用玻璃化冷冻保存组织工程肌腱体内植入对大鼠跟腱缺损修复的影响。方法:选用成年SD大鼠64只,于大鼠跟腱中段制备5mm肌腱缺损模型,随机摸球法均分为2组,分别植入玻璃化冷冻保存组织工程肌腱和新鲜非冷冻保存组织工程肌腱。植入后2,4,6,8周,观察植入肌腱材料及周围组织的大体形态和组织学变化。结果与结论:两组肌腱材料体内植入后的大体形态和组织学反应无明显差异。植入后2,4周,植入的肌腱材料发生降解,材料中间及周围有大量炎性细胞浸润和纤维结缔组织增生。植入后6,8周,大量新生胶原纤维组织长入并替代降解的植入材料,形态和排列方式趋近于正常肌腱组织,大鼠跟腱缺损基本修复。结果表明玻璃化冷冻保存组织工程肌腱体内植入可修复大鼠跟腱缺损。

关键词：组织工程肌腱玻璃化冷冻保存植入组织学

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Notch信号通道对角质形成细胞中RPTP-κ的影响

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医学研究杂志 2012年第8期41卷 130-133页

作者：薛斯亮王晓珊张珏四川大学华西医院皮肤科成都610041 四川省医学科学院四川省人民医院肿瘤科成都610041 遵义医药高等专科学校 563000 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室成都610041

目的探讨Notch信号通路对角质形成细胞中RPTP-κ的影响。方法采用体外细胞培养,分别激活和抑制Notch信号通道后,抽提RNA,实时荧光定量RNA检测RPTP-κmRNA含量。结果角质形成细胞在覆盖率为40%和80%的情况下,RPTP-κmRNA表达量后者为前者... 详细信息

目的探讨Notch信号通路对角质形成细胞中RPTP-κ的影响。方法采用体外细胞培养,分别激活和抑制Notch信号通道后,抽提RNA,实时荧光定量RNA检测RPTP-κmRNA含量。结果角质形成细胞在覆盖率为40%和80%的情况下,RPTP-κmRNA表达量后者为前者的3.4倍(P<0.05,n=3),Hes-1则为2.9倍(P<0.01,n=6);激活Notch信号通道后,RPTP-κmRNA在1、2、4、8、24h分别是对照组的1.2、1.5、5.1(P<0.01,n=3)、2.3(P<0.05,n=3)、1.1倍。而Notch信号的目的基因Hes-1的表达在上述时间点分别为对照组的1.2、1.6(P<0.01,n=3)、2.2(P<0.01,n=3)、1.8(P<0.01,n=3)、1.3倍;覆盖率为80%角质形成细胞RPTP-κmRNA为40%者的2.3倍(P<0.01,n=4)。而抑制Notch信号后,则变为0.6倍(P<0.05,n=4)。结论①在角质形成细胞不同覆盖率的时候,Hes-1和RPTP-κ表达量有所不同,细胞覆盖率越大,细胞越多,越需要抑制细胞生长的时候,Notch信号的下游因子Hes-1表达就越多,与之相同的是RPTP-κ这一TGF-β信号的下游因子表达同样增多;②Notch信号通道激活的时候,同时会增大其自身下游因子Hes-1的表达,同时也可增加RPTP-κ的表达;③在高覆盖率的角质形成细胞中抑制Notch,本该出现升高的RPTP-κ表达反而降低了。

关键词： RPTP-κ Notch NICD

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巨大肩袖撕裂的治疗及研究进展

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中国修复重建外科杂志 2011年第1期25卷 61-65页

作者：刘国明黄富国秦廷武四川大学华西医院骨科成都 610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室·干细胞与组织工程研究室成都610041

目的总结巨大肩袖撕裂的治疗及研究进展。方法查阅巨大肩袖撕裂临床治疗及实验研究的相关文献,并进行综合分析。结果巨大肩袖撕裂的治疗方法主要有非手术治疗、清创减压术、直接修复术、肌腱转移术以及各种材料修复,其疗效各异。近年来... 详细信息

目的总结巨大肩袖撕裂的治疗及研究进展。方法查阅巨大肩袖撕裂临床治疗及实验研究的相关文献,并进行综合分析。结果巨大肩袖撕裂的治疗方法主要有非手术治疗、清创减压术、直接修复术、肌腱转移术以及各种材料修复,其疗效各异。近年来,出现了许多有关巨大肩袖撕裂治疗的实验研究,如基因治疗、细胞治疗和组织工程技术,有望为临床医生提供新的治疗策略。结论巨大肩袖撕裂的治疗对临床医生是一个挑战,治疗方案的选择需要从多方面考虑;传统手术方法修复断裂肩袖效果有限,巨大肩袖撕裂的研究和治疗技术尚需进行深入研究。

关键词：巨大肩袖撕裂修复重建研究进展

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以小肠黏膜下层为支架体外构建组织工程软骨的实验研究

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生物医学工程学杂志 2011年第3期28卷 521-525页

作者：孔清泉高博幸嵘项舟杨志明罗静聪李秀群四川大学华西医院骨科成都610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室成都610041

联合应用机械法和去垢剂-酶消化法制备小肠黏膜下层(SIS),并以其作为支架材料,将体外培养扩增的软骨细胞接种于支架,体外构建组织工程软骨。体外培养3周,观察软骨细胞在支架材料上的生长分布情况。结果显示软骨细胞在制备的SIS上可较好... 详细信息

联合应用机械法和去垢剂-酶消化法制备小肠黏膜下层(SIS),并以其作为支架材料,将体外培养扩增的软骨细胞接种于支架,体外构建组织工程软骨。体外培养3周,观察软骨细胞在支架材料上的生长分布情况。结果显示软骨细胞在制备的SIS上可较好地黏附、增殖,并且分泌大量Ⅱ型胶原和GAG;但软骨细胞不能长入到SIS内部,只能在其表层和表面的结构中生长。结论认为SIS支架材料均具有良好的细胞相容性和表面活性,并且促进软骨细胞增殖和维持软骨细胞表型。但需要进一步了解SIS结构和成分对软骨细胞游走趋化能力的影响,促进软骨细胞均匀分布在材料上。

关键词：小肠黏膜下层软骨细胞 Ⅱ型胶原组织工程软骨

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低氧预处理对大鼠BMSCs葡萄糖代谢的影响

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中国修复重建外科杂志 2011年第8期25卷 1004-1007页

作者：朱鸿明陈晓禾邓力四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室成都610041 四川大学华西医院再生医学研究中心.干细胞与组织工程研究室成都610041

目的观察低氧预处理对BMSCs葡萄糖代谢的影响,探讨其潜在机制,为干细胞疗法的优化提供理论依据。方法取1～3日龄SD大鼠骨髓,采用密度梯度离心法获得BMSCs,取第4代细胞用于实验。根据处理方法不同将细胞分为4组:A组采用常氧培养24 h;B组... 详细信息

目的观察低氧预处理对BMSCs葡萄糖代谢的影响,探讨其潜在机制,为干细胞疗法的优化提供理论依据。方法取1～3日龄SD大鼠骨髓,采用密度梯度离心法获得BMSCs,取第4代细胞用于实验。根据处理方法不同将细胞分为4组:A组采用常氧培养24 h;B组以1%低氧浓度培养24 h;C组于低氧预处理前用20μmol/L甲氧雌二醇处理24 h;D组于低氧预处理前用50μmol/L缺氧诱导因子1(hypoxia-inducible factor 1,HIF-1)特异的siRNA处理12 h。采用MTT法、生化分析仪及实时荧光定量PCR检测各组BMSCs活力、葡萄糖代谢以及HIF-1αmRNA及葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,Glut-1)mRNA的表达。结果 MTT检测示A、B、C、D组吸光度(A)值分别为387.67±58.92、322.50±50.60、297.00±53.00、286.00±41.00,各组间差异无统计学意义(P>0.05)。与A组相比,B组葡萄糖摄取量和乳酸生成量显著增加(P<0.05);C、D组略高于A组,但差异无统计学意义(P>0.05),但显著低于B组,差异有统计学意义(P<0.05);C、D组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。与A组相比,B组HIF-1αmRNA和Glut-1 mRNA表达均显著上调(P<0.05);C、D组HIF-1αmRNA和Glut-1 mRNA表达较B组大幅度降低(P<0.05),但仍显著高于A组(P<0.05);C、D组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论低氧预处理可上调大鼠BMSCs的葡萄糖摄取和代谢能力,其机制涉及HIF-1 mRNA及其下游基因Glut-1 mRNA的表达上调。

关键词： BMSCs 低氧预处理缺氧诱导因子1 葡萄糖转运蛋白1 大鼠

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丹参注射液对血管内皮细胞低氧损伤的保护作用

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时珍国医国药 2011年第5期22卷 1112-1114页

作者：唐莉邓力四川大学华西药学院四川成都610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室四川成都610041

目的探讨丹参注射液对血管内皮细胞低氧损伤的保护作用及可能的机制。方法将体外培养的人脐静脉内皮细胞株(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)分为3组,即常氧培养组、低氧培养组及低氧培养+丹参组,通过倒置相差显微镜观察... 详细信息

目的探讨丹参注射液对血管内皮细胞低氧损伤的保护作用及可能的机制。方法将体外培养的人脐静脉内皮细胞株(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)分为3组,即常氧培养组、低氧培养组及低氧培养+丹参组,通过倒置相差显微镜观察并比较各组细胞的形态变化;MTT法检测细胞活性;AO/EB染色和AnnexinⅤ-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡;利用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧水平;并取各组细胞上清液进行总抗氧化能力检测。结果丹参能够显著减少低氧引起的细胞凋亡,提高细胞存活率,降低细胞内活性氧水平,并调节细胞总抗氧化能力。结论低氧条件下,丹参对HUVEC有保护作用,其机制可能与清除自由基有关。

关键词：低氧丹参注射液血管内皮细胞

来源：评论

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