检索结果-内蒙古大学图书馆

中国修复重建外科杂志 2009年第7期23卷 836-839页

作者：卿泉秦廷武四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室成都610041

目的探讨SD大鼠骨骼肌脱细胞的优化处理方法。方法SD大鼠16只,雌雄不限,体重180～200g。取其中10只大鼠36条骨骼肌肌束,随机分为3组,正常组(A组,n=4):不作脱细胞处理;时间组(T组)及浓度组(C组)按照低渗-去垢剂方法进行脱细胞处理(n=16)... 详细信息

目的探讨SD大鼠骨骼肌脱细胞的优化处理方法。方法SD大鼠16只,雌雄不限,体重180～200g。取其中10只大鼠36条骨骼肌肌束,随机分为3组,正常组(A组,n=4):不作脱细胞处理;时间组(T组)及浓度组(C组)按照低渗-去垢剂方法进行脱细胞处理(n=16),其中T组十二烷基磺酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)浓度均为1.0%,根据处理时间不同(24、48、72、96h),分为T1、T2、T3、T4组(n=4);C组处理时间均为48h,根据SDS浓度不同(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%)分为C1、C2、C3、C4组(n=4)。取各组材料行HE染色观察及羟脯氨酸含量检测,并根据结果筛选最优脱细胞处理条件。另取6只SD大鼠14条完整肌束,随机取7条按照最优条件进行脱细胞处理(实验组),余7条作为正常对照(对照组),对肌束行大体观察、Masson染色及生物力学检测。结果HE染色显示T1、T2、C1、C2、C3组肌纤维与A组无差异;C4组肌纤维部分脱除;T3组肌纤维完全脱除且基膜结构保留完整;T4组肌纤维完全脱除但基膜结构部分被破坏。羟脯氨酸含量检测:A组与C1、C2、C3、T1及T2组比较,差异无统计学意义(P>0.05);A组与C4、T3和T4组比较,差异有统计学意义(P<0.05);C4组与T3、T4组比较,差异有统计学意义(P<0.05);T3组和T4组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。根据HE染色及羟脯氨酸含量检测实验结果筛选出最优脱细胞处理条件为4℃、1.0%SDS、72h。大体观察:实验组与对照组比较肌束颜色变浅,呈半透明状,且结构相对较松散。Masson染色观察:实验组胶原纤维连续性良好,较对照组结构疏松。生物力学测试:实验组及对照组最大破坏载荷分别为(1.38±0.35)N及(1.98±0.77)N,最大拉伸位移分别为(3.19±3.23)mm及(3.56±2.17)mm,两组以上指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论应用1.0%SDS,于4℃条件下对大鼠骨骼肌经震荡处理72h可得到完全去除肌纤维且ECM保留完好的脱细胞基质。

关键词：骨骼肌脱细胞羟脯氨酸生物力学大鼠

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工程化人工肌腱玻璃化保存的实验研究

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生物医学工程学杂志 2009年第4期26卷 847-851页

作者：刘程俊秦廷武王治陈曦杨志明四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室成都610041

为了摸索工程化人工肌腱玻璃化保存的简易方法,采用3种不同的深低温冻存剂探讨不同的冻存保护剂对工程化人工肌腱的影响。将工程化人工肌腱保存实验分为21%DMSO组、DP6组和VS55组。通过扫描电镜、流式细胞术检测和激光共聚焦显微镜等研... 详细信息

为了摸索工程化人工肌腱玻璃化保存的简易方法,采用3种不同的深低温冻存剂探讨不同的冻存保护剂对工程化人工肌腱的影响。将工程化人工肌腱保存实验分为21%DMSO组、DP6组和VS55组。通过扫描电镜、流式细胞术检测和激光共聚焦显微镜等研究冻存后细胞存活率及在支架材料上的黏附特性。结果显示:DP6组与VS55组之间,细胞存活率无显著差异(P>0.05);而21%DMSO组分别与DP6组、VS55组之间,细胞存活率差异有统计学意义(P<0.05);且21%DMSO组在冻存前后,细胞均与支架材料特异性黏附。提示,在现有实验室操作条件下,21%DMSO比DP6与VS55更适合作为工程化人工肌腱的玻璃化冷冻保存液。

关键词：组织工程肌腱玻璃化深低温冻存冻存保护剂

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NGF对人真皮成纤维细胞增殖、细胞周期、胶原合成及迁移影响的体外研究

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中国修复重建外科杂志 2009年第11期23卷 1350-1354页

作者：甘桦丽解慧琪陈晓禾罗静聪四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室成都610041

目的研究NGF对人真皮成纤维细胞增殖、细胞周期、胶原合成和迁移的影响,探讨NGF在创伤修复中的作用。方法采用酶消化法体外分离培养人真皮成纤维细胞,取第3代细胞进行实验。分别加入0、25、50、100、200、400ng/mLNGF,培养48h采用MTT法... 详细信息

目的研究NGF对人真皮成纤维细胞增殖、细胞周期、胶原合成和迁移的影响,探讨NGF在创伤修复中的作用。方法采用酶消化法体外分离培养人真皮成纤维细胞,取第3代细胞进行实验。分别加入0、25、50、100、200、400ng/mLNGF,培养48h采用MTT法检测细胞增殖;加入0、100ng/mLNGF,培养48h采用流式细胞仪分析细胞有丝分裂周期,采用羟脯氨酸法检测培养液胶原含量,实时荧光定量PCR测定细胞ColⅠ、ColⅢmRNA表达水平;建立体外细胞划痕创伤模型,加入0、50、100、200ng/mLNGF,培养24h观察细胞迁移。结果MTT法检测结果显示,各浓度组间细胞增殖的吸光度值比较差异均无统计学意义(P>0.05)。在0、100ng/mLNGF作用下,细胞周期显示两组的G0/G1期、S期、G2/M期细胞百分率差异均无统计学意义(P>0.05),羟脯氨酸法测得两组细胞培养液胶原含量和实时荧光定量PCR测定细胞ColⅠ、ColⅢmRNA表达水平差异均无统计学意义(P>0.05)。细胞迁移实验结果显示,培养24h后0、50、100、200ng/mLNGF浓度组细胞迁移率分别为52.12%±6.50%、80.67%±8.51%、66.33%±3.58%和61.19%±0.97%,50、100ng/mLNGF可显著促进细胞迁移(P<0.05)。结论NGF对人真皮成纤维细胞增殖、细胞周期及ColⅠ、ColⅢmRNA表达无影响,不能促进胶原合成,但能促进人真皮成纤维细胞迁移。

关键词： NGF 人真皮成纤维细胞细胞增殖细胞周期胶原合成细胞迁移

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肩关节置换术现状及进展

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中国修复重建外科杂志 2009年第9期23卷 1143-1147页

作者：张伟项舟黄富国段鑫四川大学华西医院骨科成都610041 生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室

目的综述肩关节置换术应用于肩关节疾病的现状和研究进展,展望可能的研究方向。方法广泛查阅关于肩关节置换术应用于肩关节疾病的文献,从肩关节假体系统的应用解剖、假体设计、假体类型、假体固定技术等方面进行总结分析。结果肩关节置... 详细信息

目的综述肩关节置换术应用于肩关节疾病的现状和研究进展,展望可能的研究方向。方法广泛查阅关于肩关节置换术应用于肩关节疾病的文献,从肩关节假体系统的应用解剖、假体设计、假体类型、假体固定技术等方面进行总结分析。结果肩关节置换术在治疗许多肩关节创伤和疾病中能够较好地解除疼痛和重建功能,已成为许多肩关节疾病终末期的治疗方式之一。结论目前研究多集中于关节盂假体设计和中青年患者的临床应用,对于肩关节置换术临床应用中选用何种置换技术、固定方式、材料尚需进一步研究。

关键词：肩关节置换术现状进展

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SIS修复重建兔气管缺损的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2009年第3期23卷 328-331页

作者：黄光平项舟杨志明梁新刚李秀群解慧琪邓力四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室成都610041 四川大学华西医院骨科

目的探讨SIS覆盖的聚丙烯补片(polypropylene mesh,PPM)修复重建兔气管缺损的可行性,及SIS在促进气管纤毛柱状上皮再生、减少术后并发症等方面的作用。方法取12只新西兰大白兔,体重1.8～2.0kg,制备大小为1.2cm×0.6cm的气管前壁、侧... 详细信息

目的探讨SIS覆盖的聚丙烯补片(polypropylene mesh,PPM)修复重建兔气管缺损的可行性,及SIS在促进气管纤毛柱状上皮再生、减少术后并发症等方面的作用。方法取12只新西兰大白兔,体重1.8～2.0kg,制备大小为1.2cm×0.6cm的气管前壁、侧壁4～6环全层缺损模型。根据修复材料不同,随机分为两组,每组6只。PPM修复组采用大小为1.4cm×0.8cm的单纯PPM修复缺损;SIS-PPM修复组采用预先紧密缝合的大小为1.4cm×0.8cm的SIS和PPM修复缺损。术后观察动物一般情况,于4、8、12周取材进行大体观察、HE染色及扫描电镜观察重建区域情况。结果术后SIS-PPM修复组动物均存活至实验完成,无感染、皮下气肿、呼吸困难发生。PPM修复组分别于术后6d及18d因气道感染及气道分泌物潴留死亡1只兔,其余动物均出现不同程度的颈部皮下气肿。两组动物重建气管均无塌陷、狭窄。组织学观察:术后各时间点两组动物气管腔内均未见明显肉芽及瘢痕,8、12周时重建气管表面有气管黏膜覆盖,SIS-PPM修复组纤毛组织和杯状细胞多于PPM修复组。扫描电镜观察:术后8周SIS-PPM修复组重建气管中心区域大部分被较成熟的纤毛覆盖,PPM修复组重建中心区域大部分为幼稚纤毛覆盖;12周时SIS-PPM修复组纤毛方向性好,纤毛无明显分泌物附着;PPM修复组纤毛凌乱,纤毛表面有大量分泌物附着。结论SIS和PPM修复重建气管缺损能充分维持修复重建后的气道形态和生理功能,并能获得良好的上皮化。SIS具有促进气管黏膜修复愈合,减少术后皮下气肿、气管狭窄的作用,有望用于临床修复重建气管组织缺损。

关键词： SIS 聚丙烯补片气管缺损气管上皮化修复重建兔

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雷洛昔芬对兔骨折愈合的影响

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中国修复重建外科杂志 2009年第6期23卷 683-689页

作者：李璋郑虎李秀群翁玲玲芦小燕李莉钟颖邓力四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室四川成都610041 华西药学院

目的研究雷洛昔芬(raloxifene,RLX)对兔骨折愈合的影响。方法健康新西兰大白兔80只,雌性44只,雄性36只,体重1.9～2.1kg。取72只动物制备左前肢桡骨中段0.5cm骨缺损模型,按给药不同分为4组,每组18只(雌性10只,雄性8只)。A、B、C组分别于... 详细信息

目的研究雷洛昔芬(raloxifene,RLX)对兔骨折愈合的影响。方法健康新西兰大白兔80只,雌性44只,雄性36只,体重1.9～2.1kg。取72只动物制备左前肢桡骨中段0.5cm骨缺损模型,按给药不同分为4组,每组18只(雌性10只,雄性8只)。A、B、C组分别于术后第2天给予7.5、15.0、30.0mg(/kg·d)RLX至50d,D组不作处理。剩余8只不作任何处理,作为血清骨钙素检测正常对照。于术后不同时间点行骨密度、生物力学测定、X线片组织学和免疫组织化学染色观察,测定血清雌二醇、血浆胆固醇含量、血清骨钙素水平及子宫干重/体重比。结果术后20d各组骨密度达峰值,A、B、C组骨密度均高于D组(P<0.05);但A、B、C组间差异无统计学意义(P>0.05)。术后30、50d,A、B、C组最大破坏载荷和最大位移均较D组大(P<0.05);A、B、C组间差异无统计学意义(P>0.05)。术后7、20、30d,A、B、C组骨折X线评分较D组高(P<0.05);50d时B、C组与D组间及A、C组间比较差异均有统计学意义(P<0.05),B、C组间差异无统计学意义(P>0.05)。术后30、50d,A、B、C组骨折愈合处新骨面积百分比均高于D组(P<0.05)。术后30d,B、C组骨折愈合处ColⅡ蛋白分泌较D组增多(P<0.05),A、D组差异无统计学意义(P>0.05);50d时各组间差异均无统计学意义(P>0.05)。术后10、30及50d各组血清骨钙素水平均较正常对照动物明显增高(P<0.05);B、C组均较D组高(P<0.05);A组与D组比较,A、B、C组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。术后30d,各组血浆胆固醇含量无明显变化(P>0.05);50d时A、B、C组均明显降低,与D组比较差异有统计学意义(P<0.05)。术后30、50d,B、C组血清雌二醇含量与D组比较差异有统计学意义(P<0.05),余各组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。术后30、50d,B、C组子宫干重/体重小于D组(P<0.05),A、D组差异无统计学意义(P>0.05)。结论以7.5mg(/kg·d)剂量口服RLX可安全有效促进兔桡骨缺损骨折模型骨折愈合。

关键词：雷洛昔芬骨折愈合兔

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缺氧对hBMSCs和胎盘来源MSCs增殖的影响

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中国修复重建外科杂志 2009年第2期23卷 136-139页

作者：王佳陈晓禾黄永灿李秀群张珏邓力四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室·干细胞与组织工程研究室成都610041 四川大学华西药学院药理系

目的比较hBMSCs和人胎盘基蜕膜MSCs(human placental decidua basalis-MSCs,hPDB-MSCs)在化学缺氧条件下的增殖情况,为寻找组织工程新的种子细胞提供理论依据。方法采用密度梯度离心法分离培养hBMSCs与hPDB-MSCs,流式细胞仪检测细胞表... 详细信息

目的比较hBMSCs和人胎盘基蜕膜MSCs(human placental decidua basalis-MSCs,hPDB-MSCs)在化学缺氧条件下的增殖情况,为寻找组织工程新的种子细胞提供理论依据。方法采用密度梯度离心法分离培养hBMSCs与hPDB-MSCs,流式细胞仪检测细胞表面标志物;CoCl2建立化学缺氧模型,MTT法检测两种细胞在不同CoC12浓度(0、50、75、100、125、150、175、200μmol/L)和不同时间(6、12、24、48、72和96 h)的增殖情况。结果流式细胞仪检测显示hPDB-MSCs与hBMSCs均表达CD9、CD29、CD44、CD105、CD106、人类白细胞抗原ABC(human leucocyte antigen ABC,HLA-ABC),不表达CD34、CD40L和HLA-DR;但与hBMSCs相比,hPDB-MSCs阶段特异表达的胚胎抗原1(stage-specifi c embryonic antigen 1,SSEA-1)、SSEA-3、SSEA-4、肿瘤排斥抗原(tumor rejection autigen,TRA)-1-60、TRA-1-81表达更高。化学缺氧12 h内,hBMSCs与hPDB-MSCs增殖均被抑制,12 h后均能促进增殖;与对照组比较,hBMSCs经150μmol/L CoCl2作用24 h出现显著增殖(P<0.05),hPDB-MSCs在75μmol/L CoCl2作用12 h后出现显著增殖(P<0.05)。结论与hBMSCs相比,hPDB-MSCs表达更高的胚胎干细胞特有表面抗原,同时对化学缺氧所致的增殖影响更为敏感,可能成为一种新的组织工程种子细胞来源。

关键词：组织工程种子细胞hBMSCs 胎盘来源MSCs 化学缺氧细胞增殖

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加强再生医学研究,推动再生医学产业化

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中国修复重建外科杂志 2009年第2期23卷 129-130页

作者：杨志明四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室成都610041

再生医学是在上世纪90年代继组织工程之后提出来的一个新概念。其基本含义是利用人工材料、生物活性因子、细胞／干细胞等多种方法，促进机体自身组织／器官再生，达到结构、功能、形态的完美修复。事实上，人体的再生潜能是巨大的，如... 详细信息

再生医学是在上世纪90年代继组织工程之后提出来的一个新概念。其基本含义是利用人工材料、生物活性因子、细胞／干细胞等多种方法，促进机体自身组织／器官再生，达到结构、功能、形态的完美修复。事实上，人体的再生潜能是巨大的，如创伤皮肤平均每天再生0．45mm，周围神经每天再生1～2mm等。但这种再生能力又是有限的，如关节软骨不能再生，

关键词：再生医学医学研究产业化生物活性因子组织工程人工材料器官再生自身组织

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成骨细胞条件培养液对BMSCs诱导分化作用研究

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中国修复重建外科杂志 2009年第2期23卷 145-150页

作者：周昆鹏陈晓禾常丽李秀群李驯虎张珏邓力四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室·干细胞与组织工程研究室成都610041 北京德得创业科技有限公司四川大学华西药学院药理系

目的探讨大鼠成骨细胞条件培养液对同种大鼠BMSCs的成骨诱导分化作用,为骨组织工程种子细胞的获得寻找一种新方法。方法健康1周龄SD大鼠10只,雌雄不限,体重20～30 g,采用贴壁法和酶消化法分别获得BMSCs和成骨细胞,并进行鉴定。无菌条件... 详细信息

目的探讨大鼠成骨细胞条件培养液对同种大鼠BMSCs的成骨诱导分化作用,为骨组织工程种子细胞的获得寻找一种新方法。方法健康1周龄SD大鼠10只,雌雄不限,体重20～30 g,采用贴壁法和酶消化法分别获得BMSCs和成骨细胞,并进行鉴定。无菌条件收集第1～5代成骨细胞培养液上清,与完全培养基1∶1混合,制备成骨细胞条件培养液,与第2代BMSCs共培养为诱导组,相同代次BMSCs与完全培养液共培养为对照组。倒置相差显微镜下观察共培养后BMSCs形态变化,MTT法检测BMSCs生长情况,免疫组织化学染色检测共培养后BMSCs的ALP、ColⅠ、骨钙素(osteocalcin,OCN)蛋白的表达,采用RT-PCR检测ColⅠ、OCN mRNA的表达。结果诱导组共培养7 d BMSCs体积变大,细胞由长梭形展开为扁平形和多边形,并带有突起;9 d细胞呈集落状生长。细胞生长曲线示BMSCs数量随培养时间延长而增加,对照组增殖能力较诱导组强;诱导培养4～7 d,对照组细胞数量与诱导组比较差异有统计学意义(P<0.05)。诱导组培养12 d,ALP染色呈阳性表达;18 d出现钙结节;21 d ColⅠ和OCN呈阳性表达;对照组均呈阴性表达。RT-PCR检测示诱导组培养21 d有ColⅠ、OCN mRNA表达,对照组未见表达。结论体外大鼠成骨细胞条件培养液有明显的诱导同种大鼠BMSCs向成骨样细胞分化的作用。

关键词：成骨细胞条件培养液 BMSCs 诱导分化大鼠

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组织工程食管

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中华胃肠外科杂志 2009年第1期12卷 7-9页

作者：魏人前杨志明解慧琪四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室成都610041

我国是食管癌的高发地区．全世界一半的食管癌患者在中国。目前食管癌的治疗主要依靠手术切除加食管重建。重建所需的替代组织主要有两大类：一类是用自体其他组织或器官，另一类是人工食管的替代。自体组织如胃、空肠、结肠等是临床应... 详细信息

我国是食管癌的高发地区．全世界一半的食管癌患者在中国。目前食管癌的治疗主要依靠手术切除加食管重建。重建所需的替代组织主要有两大类：一类是用自体其他组织或器官，另一类是人工食管的替代。自体组织如胃、空肠、结肠等是临床应用最多的重建方式．然而其手术创伤大．并发症多．死亡率高．从而使学者们积极寻找人工食管的替代材料。这些替代材料多为不可降解高分子材料．其本身组织相容性差，腔内无法完全内皮化，使得其临床应用受限。

关键词：组织工程食管可降解高分子材料人工食管自体组织替代材料临床应用组织相容性高发地区

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