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中华血液学杂志 2012年第6期33卷 453-456页

作者：周睿卿龚玉萍郭勇单卿卿杨曦四川大学华西医院血液科、生物治疗国家重点实验室成都610041

目的通过RNA干扰技术降低SCL／TAL-1mRNA的表达，探讨SCL／TAL-1在K562细胞红系分化中的作用。方法以EPO诱导白血病细胞系K562细胞向红系分化为模型，将靶向SCL／TAL-1基因的特异性短发夹RNA（shRNA）慢病毒质粒pTRIP—dU3-RNAiTALh—E... 详细信息

目的通过RNA干扰技术降低SCL／TAL-1mRNA的表达，探讨SCL／TAL-1在K562细胞红系分化中的作用。方法以EPO诱导白血病细胞系K562细胞向红系分化为模型，将靶向SCL／TAL-1基因的特异性短发夹RNA（shRNA）慢病毒质粒pTRIP—dU3-RNAiTALh—EF1a—GFP转染K562细胞，RT—PCR检测其SCL／TAL—l和红系相关基因RhD、血型糖蛋白A（GPA，即CD253a）、CD47mRNA表达水平变化，流式细胞术分析红系分化抗原CD71、CD253a的表达，并以空载体质粒pTRIP—dU3-RNAi—luc—EF1-GFP转染的K652细胞为对照。结果①通过慢病毒转染系统将含SCL／TAL．1shRNA的质粒及空载体质粒转染K562细胞48h，绿色荧光蛋白（GFP）＋细胞占总细胞的95％以上，表明感染率达到95％以上。②RT—PCR结果显示转染特异性shRNA的K562细胞SCL／TAL-1mRNA表达水平比空载体对照明显下调（P〈0．05），红系抗原CIM7和RhDmRNA水平也比对照组明显下调（P〈0．05），GPA有所下降，但没有CIM7和RhD下降程度大。③流式细胞术检测到SCL／TAL-1低表达组红系分化抗原CD71、CD235a表达降低，表达率分别是10．4％、76．5％，而在对照组的表达率分别为94．3％、83．6％。结论研究结果提示转录因子SCL／TAL．1参与了红系定向分化。

关键词：基因,SCL/TAL-1 细胞系,K562 细胞分化 RNA干扰

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烟酰胺单核苷酸改善二氧化硅诱导小鼠肺损伤的转录组学研究

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现代预防医学 2025年第8期 1476-1483页

作者：马子怡丁琼桦杜文周丁子张勤彭莉君谢永美姚于勤王礼群四川大学华西公共卫生学院/华西第四医院卫生毒理与病理学系四川大学华西公共卫生学院/华西第四医院尘肺科/呼吸与危重症医学科四川大学华西公共卫生学院/华西第四医院劳动卫生与环境卫生学系四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室成都川宇健维生物科技有限公司四川大学华西公共卫生学院/华西第四医院重大疾病医防融合研究所

目的研究烟酰胺单核苷酸（Nicotinamide mononucleotide, NMN）缓解二氧化硅（SiO2）诱导肺损伤的作用与机制，为矽肺的辅助治疗提供新的选择。方法雄性C57BL/6小鼠按体重随机分为对照组（Control组）、SiO2染尘组（SiO2组）、和NMN... 详细信息

目的研究烟酰胺单核苷酸（Nicotinamide mononucleotide, NMN）缓解二氧化硅（SiO2）诱导肺损伤的作用与机制，为矽肺的辅助治疗提供新的选择。方法雄性C57BL/6小鼠按体重随机分为对照组（Control组）、SiO2染尘组（SiO2组）、和NMN干预组（SiO2+NMN组）,每组10只。通过单次非暴露式气管滴注法向小鼠滴注SiO2悬液（50 mg/ml, 80μl）构建SiO2染尘模型；NMN干预组小鼠采用相同方法染尘后通过灌胃每日给予NMN（1 000 mg/kg）,分别持续7天、28天。通过组织病理学染色观察肺部病变情况；采用转录组学测序分析肺组织基因表达谱，筛选关键基因。结果 NMN干预减轻SiO2染尘小鼠的肺组织病变。基因聚类结果显示NMN干预能够在一定程度上改善染尘诱导的基因表达谱紊乱，在28天时改善效果更好。染尘7天和28天后，与对照组相比SiO2组上调、且与SiO2组相比NMN干预组下调的基因共有1 163个，其中445个为差异基因；染尘7天后和染尘28天后，与对照组相比SiO2组下调、且与SiO2组相比NMN干预组上调的基因共有1 657个，其中571个为差异基因。以上差异基因主要富集的GO条目为RNA聚合酶及转录调控等；KEGG通路为IL-17信号通路（P<0.001）、细胞因子-细胞因子受体相互作用（P<0.001）、Th17细胞分化（P<0.001）、TNF信号通路（P<0.001）等。按差异基因参与调控的通路数筛选出其中TOP 8的核心基因，为Mapk11、Mapk12、Il1b、H2-Ob、Csf2、Shc2、Mmp9、Ccl25。结论 NMN通过调节免疫缓解SiO2染尘小鼠的肺损伤。

关键词：矽肺烟酰胺单核苷酸转录组测序免疫调控

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多药耐药基因MDR1在Ph(+)急性淋巴细胞白血病伊马替尼耐药细胞株SUP-B15/RI耐药形成中的作用

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四川大学学报（医学版） 2012年第5期43卷 657-660,665页

作者：林娟邢宏运龚玉萍杨曦郭勇单卿卿周睿卿四川大学华西医院血液科生物治疗国家重点实验室成都610041

目的研究多药耐药基因MDR1在Ph(+)急性淋巴细胞白血病〔Ph(+)ALL〕伊马替尼(IM)耐药细胞株SUP-B15/RI耐药机制中的作用。方法 RT-PCR技术检测敏感细胞株SUP-B15和IM耐药细胞株SUP-B15/RI MDR1mRNA表达,改良MTT法测定IM、柔红霉素(DNR)... 详细信息

目的研究多药耐药基因MDR1在Ph(+)急性淋巴细胞白血病〔Ph(+)ALL〕伊马替尼(IM)耐药细胞株SUP-B15/RI耐药机制中的作用。方法 RT-PCR技术检测敏感细胞株SUP-B15和IM耐药细胞株SUP-B15/RI MDR1mRNA表达,改良MTT法测定IM、柔红霉素(DNR)、长春新碱(VCR)、依托泊甙(VP-16)单药及联合维拉帕米作用于SUP-B15细胞和SUP-B15/RI细胞72h后增殖活性的改变,计算抑制率为50%时的药物浓度(IC50),DNR药物外排实验检测MDR1表达产物P-gp功能。结果 MDR1基因在SUP-B15/RI中的表达是敏感细胞SUP-B15的(2.02±0.04)倍(P<0.05)。IM、DNR、VCR、VP-16单药作用于SUP-B15/RI细胞的IC50值较SUP-B15细胞增高(P<0.05),相对耐药倍数(RF)分别为(20.52±2.34)、(10.33±1.88)、(9.78±1.27)、(3.84±0.69)倍。IM、DNR、VCR、VP-16与维拉帕米联合作用于SUP-B15/RI细胞后IC50值较单药时降低(P<0.05),耐药逆转倍数分别为(1.44±0.43)、(3.20±0.17)、(1.44±0.12)、(1.33±0.14)。P-gp蛋白功能在SUP-B15/RI细胞强于SUP-B15细胞,DNR泵出率分别为10.27%、3.43%。结论 MDR1基因在SUP-B15/RI细胞中表达增加,其表达产物P-gp功能增强,P-gp抑制剂维拉帕米可以部分逆转IM耐药。说明MDR1参与SUP-B15/RI细胞IM耐药机制的形成。

关键词：伊马替尼耐药 MDR1/P-gp SUP-B15细胞株 Ph(+)急性淋巴细胞白血病

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丹参酮ⅡA对白血病细胞株K562增殖抑制及机制研究

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四川大学学报（医学版） 2014年第3期45卷 410-413页

作者：单卿卿郭勇龚玉萍四川大学华西医院血液科生物治疗国家重点实验室成都610041

目的探讨丹参酮ⅡA（TAT）对人白血病细胞株K562的生长抑制作用及其可能机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测TAT（终浓度1、10、15、30、50μmol／L）对K562细胞的增殖抑制作用，光学显微镜观察TAT（30μmol／L）作用24h后K562... 详细信息

目的探讨丹参酮ⅡA（TAT）对人白血病细胞株K562的生长抑制作用及其可能机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测TAT（终浓度1、10、15、30、50μmol／L）对K562细胞的增殖抑制作用，光学显微镜观察TAT（30μmol／L）作用24h后K562细胞的形态变化，流式细胞术检测细胞凋亡率，Westernblot法检测凋亡蛋白BCL-2、BAX的表达和蛋白激酶AKT／mTOR信号通路的变化。结果终浓度为10～50μmol／L的TAT对K562细胞的生长具有抑制作用，与对照组比较差异具有统计学意义（P〈0．05），TAT作用K562细胞96h的半数抑制浓度（IC50）值为（7．75±2．47）μmol／L。30μmol／LTAT作用K562细胞24h后显微镜下显示细胞破坏明显，部分细胞裂解成碎片。流式细胞仪检测发现30μmol／L TAT作用组凋亡细胞明显增多（P〈0．05）。Western blot结果提示，30μmol／LTAT作用K562细胞后AKT、mTOR、p70S6K、4-EBP1等信号通路关键点蛋白磷酸化表达水平减低，凋亡抑制蛋白BCL-2下调，而促凋亡蛋白BAX上调。结论TAT通过抑制AKT／m—TOR信号通路，下调BCL-2和上调BAx的表达，促进细胞凋亡，抑制白血病细胞株K562的生长。

关键词：丹参酮ⅡA 白血病细胞株K562 凋亡 AKT mTOR信号通路

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基于AAPM TG-218报告应用统计过程控制技术监测患者个体化容积旋转调强放疗质量保证过程的初步研究

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生物医学工程学杂志 2020年第5期37卷 842-847页

作者：肖青李光俊李治斌张祥斌戴谷宇柏森四川大学华西医院肿瘤中心-生物治疗国家重点实验室-放疗科成都610041

患者个体化容积旋转调强放疗(VMAT)质量保证(QA)过程是临床调强放疗实施流程中重要的一部分。计算剂量与实施剂量之间差异的容差限值和干预限值是AAPM TG-218报告认为的VMAT QA过程的关键部分,然而这两个值在各放疗中心之间尚无统一标... 详细信息

患者个体化容积旋转调强放疗(VMAT)质量保证(QA)过程是临床调强放疗实施流程中重要的一部分。计算剂量与实施剂量之间差异的容差限值和干预限值是AAPM TG-218报告认为的VMAT QA过程的关键部分,然而这两个值在各放疗中心之间尚无统一标准。本研究基于AAPM TG-218报告,应用统计过程控制(SPC)技术建立了采用ArcCHECK进行剂量验证下不同部位VMAT计划γ通过率的容差限值和干预限值。根据每个部位前25例处于受控状态的VMAT QA结果计算相应部位的容差限值和干预限值,绘制单值控制图持续监测了287例VMAT计划的调强剂量验证过程,并分析QA失控原因。脑部、头颈部、腹部和盆腔部VMAT QA过程的容差限值分别为94.56%、94.68%、94.34%和92.97%,干预限值分别为93.82%、92.54%、93.23%和90.29%。除盆腔部外,脑部、头颈部和腹部容差限值均接近TG-218通用容差限值(95%),所有部位干预限值均高于TG-218通用干预限值(90%)。通过单值图监测发现头颈部失控的VMAT QA为1例,腹部和盆腔部各2例,其中4例受摆位误差影响,1例受测量设备校准错误影响。结果显示SPC技术能有效监测IMRT/VMAT QA过程,根据不同部位设置相应的容差限值有助于探查QA失控原因。

关键词： TG-218报告容积旋转调强放疗统计过程控制患者个体化质量保证

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高糖饮食与炎症性疾病研究进展

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四川大学学报（医学版） 2022年第3期53卷 538-542页

作者：张伟马骁程浩张敦房四川大学华西医院生物治疗科成都610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室成都610041

高糖饮食会引起胰岛素耐受、糖尿病和非酒精性脂肪肝等多种疾病。近年来,随着对高糖饮食相关研究的深入,研究者们陆续发现和阐明了其对自身免疫性疾病和感染性疾病等炎症性疾病的影响。本综述通过总结目前关于高糖饮食与炎症性疾病相关... 详细信息

高糖饮食会引起胰岛素耐受、糖尿病和非酒精性脂肪肝等多种疾病。近年来,随着对高糖饮食相关研究的深入,研究者们陆续发现和阐明了其对自身免疫性疾病和感染性疾病等炎症性疾病的影响。本综述通过总结目前关于高糖饮食与炎症性疾病相关的研究进展,指出以高葡萄糖和高果糖摄入为代表的高糖饮食可能是慢性炎症性疾病恶化的重要诱导因素,并归纳了高糖饮食导致炎症性疾病恶化的调控机制。笔者认为,开展广泛的临床研究和真实世界研究,并深入揭示高葡萄糖饮食和高果糖饮食在免疫调节中的差异性,是未来的重点研究方向和亟待解决的关键科学问题。

关键词：高糖饮食葡萄糖果糖自身免疫性疾病慢性炎症

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成体干细胞与干细胞疾病

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中国修复重建外科杂志 2007年第7期21卷 759-762页

作者：莫显明四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.血液室成都610041

目的结合文献对成体干细胞的特性进行总结,描述干细胞疾病的定义及特性。方法广泛查阅近期相关文献,回顾成体干细胞及干细胞疾病。结果成体干细胞是一类位于成熟组织器官内、维持正常组织细胞数量和功能的原始细胞,具有自我更新和多潜... 详细信息

目的结合文献对成体干细胞的特性进行总结,描述干细胞疾病的定义及特性。方法广泛查阅近期相关文献,回顾成体干细胞及干细胞疾病。结果成体干细胞是一类位于成熟组织器官内、维持正常组织细胞数量和功能的原始细胞,具有自我更新和多潜能分化能力,随着生物个体生命周期增长,成体干细胞出现老化。起源于干细胞的疾病可视为干细胞疾病。当成体干细胞自我更新能力增强和/或分化障碍时,细胞增殖能力变强,引起增生性疾病特别是肿瘤疾病。当成体干细胞自我更新减弱,提前老化或分化不全时,可导致功能细胞形成减少,如不能满足组织器官功能的需要,将导致相应器官功能衰竭,形成退行性疾病。结论对成体干细胞自我更新、分化及老化的研究,在理论上将指导干细胞疾病的研究,并有助于发展干细胞疾病的诊断及治疗方法。

关键词：成体干细胞干细胞疾病综述

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个体化新抗原特异性T细胞过继免疫:任重道远,砥砺前行

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中国肿瘤生物治疗杂志 2022年第6期29卷 509-518页

作者：李青丁振宇魏于全四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室肿瘤中心生物治疗科

近年来,肿瘤新抗原掀开了个体化免疫治疗的新篇章,作为基于新抗原个体化免疫治疗的重要组成部分,新抗原特异性T细胞的过继输注(ACT)疗法备受瞩目。本文将首先从新抗原特异性T细胞ACT治疗应用策略及临床应用现状介绍新抗原特异性T细胞AC... 详细信息

近年来,肿瘤新抗原掀开了个体化免疫治疗的新篇章,作为基于新抗原个体化免疫治疗的重要组成部分,新抗原特异性T细胞的过继输注(ACT)疗法备受瞩目。本文将首先从新抗原特异性T细胞ACT治疗应用策略及临床应用现状介绍新抗原特异性T细胞ACT治疗这一新兴的精准免疫治疗的发展现状,然后从新抗原的预测、新抗原特异性T细胞筛选及扩增等方面系统地总结新抗原T细胞ACT治疗所面临的阻碍和挑战,最后从优化新抗原预测、增加新抗原特异性T细胞数量和多样性、防止新抗原特异性T细胞过度分化或死亡、缩短生产周期和减少生产成本及探索联合治疗方式等五个方面对该领域的未来发展机遇和研究方向进行重点阐述。

关键词：肿瘤新抗原 T细胞免疫治疗细胞过继输注

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维甲酸耐药细胞与敏感细胞的差异表达蛋白分析

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癌症 2006年第7期25卷 828-832页

作者：秦慧刘霆杨金亮黄欣柳斌宋鑫赵霞魏于全四川大学华西医院血液科四川成都610041 四川大学华西医院人类疾病生物治疗国家重点实验室四川成都610041

背景与目的:维甲酸耐药机制有待进一步的深入研究。蛋白质组学以所有蛋白质为研究对象,从细胞水平及整体水平研究蛋白质的组成及其变化规律。本实验应用蛋白组学技术整体比较维甲酸耐药细胞与敏感细胞蛋白表达谱,筛选差异表达蛋白,以期... 详细信息

背景与目的:维甲酸耐药机制有待进一步的深入研究。蛋白质组学以所有蛋白质为研究对象,从细胞水平及整体水平研究蛋白质的组成及其变化规律。本实验应用蛋白组学技术整体比较维甲酸耐药细胞与敏感细胞蛋白表达谱,筛选差异表达蛋白,以期获得维甲酸耐药相关蛋白。方法:提取维甲酸耐药细胞株MR2及维甲酸敏感细胞株NB4的总蛋白,通过双向凝胶电泳分离,获得二者高质量的蛋白表达谱,经PDQuestv7.1软件比较分析,筛选出二者间差异表达的蛋白质点,通过质谱仪鉴定表达差异的蛋白。结果:获得了分辨率高、重复性好的APL细胞的双向电泳图谱。PDQuestv7.1软件分析结果表明,MR2细胞及NB4细胞的pH4～7双向凝胶电泳所展示的蛋白点分别有(890±45)个和(912±56)个。二者间有57个差异显著的蛋白点,其中23个在MR2细胞中上调,34个下调。经质谱鉴定了10个蛋白,鉴定成功率达70%,鉴定的蛋白涉及癌蛋白、细胞周期调控和信号转导相关蛋白质。结论:应用双向凝胶电泳技术整体展示了维甲酸耐药细胞株MR2及敏感细胞株NB4的蛋白表达谱,并分析、鉴定、筛选出与维甲酸耐药相关的差异表达蛋白,为进一步从多因素角度研究认识维甲酸耐药机制提供了新的线索。

关键词：蛋白质组学双向凝胶电泳差异表达蛋白维甲酸耐药 MR2细胞株 NB4细胞株

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加权基因共表达网络分析在鉴定卵巢癌干细胞特性关键基因的应用

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四川大学学报（医学版） 2021年第2期52卷 248-258页

作者：骆梦曾皓马欣宇马学磊四川大学华西医学院生物治疗科成都610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室成都610041

目的探讨关键干细胞特性基因在卵巢癌的诊断和治疗中的意义。方法加权基因共表达网络分析(WGCNA)方法筛选出关键模块和基因;基因集富集分析(GSEA)和单细胞测序数据分析关键基因上调组高表达的信号通路;pRRophetic预测卵巢癌的化疗药物... 详细信息

目的探讨关键干细胞特性基因在卵巢癌的诊断和治疗中的意义。方法加权基因共表达网络分析(WGCNA)方法筛选出关键模块和基因;基因集富集分析(GSEA)和单细胞测序数据分析关键基因上调组高表达的信号通路;pRRophetic预测卵巢癌的化疗药物的敏感性;流式细胞术检测SKOV3细胞和肿瘤干细胞中CD44及CD117的表达情况;实时荧光定量(qRT)-PCR证实关键基因在卵巢癌干细胞中的表达;GeneMANIA分析鉴定出核心基因。结果WGCNA结果显示在转录水平上筛选出15个关键基因,其在多种肿瘤中高表达,参与细胞周期、DNA修复、E2靶点和G2M检查点通路,且与化疗药物敏感性有显著的关联性。CD44+CD117+细胞在SKOV3细胞和卵巢癌干细胞中的比例分别为(1.20±0.34)%、(37.17±1.80)%,差异有统计学意义(P<0.05)。qRT-PCR证实WGCNA结果中7个关键基因(BUB1、CDC20、CCNB2、DLGAP5、KIF4A、NEK2、NUSAP1)在卵巢癌干细胞中高表达,并且BUB1可能起着核心的作用。结论本研究通过构建基因共表达网络筛选出7个干细胞特性关键基因,尤其是BUB1,可能成为潜在的卵巢癌基因生物标志物。

关键词：卵巢癌肿瘤干细胞关键基因加权基因共表达网络分析(WGCNA)

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