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华西医科大学学报 2002年第3期33卷 372-374页

作者：杨志梅王玉芳张霁顾玲王树人四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室成都610041 四川大学华西基础医学与法医医学院物证教研室

目的　探讨三种还原性巯基氨基酸对培养人脐静脉内皮细胞的损伤效应。方法　将人脐静脉内皮细胞暴露于三种还原性巯基氨基酸 2 4小时后 ,测定细胞的乳酸脱氢酶释放率、总蛋白含量、凋亡及脂质过氧化的程度。结果　 1同型半胱氨酸 (Hcy)... 详细信息

目的　探讨三种还原性巯基氨基酸对培养人脐静脉内皮细胞的损伤效应。方法　将人脐静脉内皮细胞暴露于三种还原性巯基氨基酸 2 4小时后 ,测定细胞的乳酸脱氢酶释放率、总蛋白含量、凋亡及脂质过氧化的程度。结果　 1同型半胱氨酸 (Hcy)不仅促进脂质过氧化 ,而且可诱导细胞凋亡并可致细胞坏死。 2谷胱甘肽(GSH)呈还原性 ,对细胞有全面的保护作用。 3Hcy的氧化性最强 ,GSH则呈现出完全的还原性 ,半胱氨酸 (Cys)可能处于二者之间。结论　同型半胱氨酸可能是通过特异的抑制谷光甘肽过氧化物酶并减弱了细胞内的还原缓冲能力等机制 ,发挥与 Cys和 GSH不同的生物学效应 ,从而导致内皮细胞出现坏死和凋亡等损伤性的改变。

关键词：同型半胱氨酸半胱氨酸谷胱甘肽内皮细胞脐静脉

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黑素皮质素受体1基因多态性与成都汉族人群雀斑的关联分析

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中华医学遗传学杂志 2013年第3期30卷 352-356页

作者：曹利平叶懿丛瑞娟吴谨李英碧廖淼颜静四川大学华西基础医学与法医学院法医遗传学教研室成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院法医毒物分析教研室成都610041

目的探讨黑素皮质素受体1（melanocortin一1receptor，MCIR）基因单核苷酸多态性（singlenucleotidepolymorphism，SNP）与成都地区汉族人群中雀斑发病的相关性。方法随机抽取20份无血缘关系个体血液样本，测序筛查MCIR基因用于与雀斑... 详细信息

目的探讨黑素皮质素受体1（melanocortin一1receptor，MCIR）基因单核苷酸多态性（singlenucleotidepolymorphism，SNP）与成都地区汉族人群中雀斑发病的相关性。方法随机抽取20份无血缘关系个体血液样本，测序筛查MCIR基因用于与雀斑发生进行关联分析的SNPs。收集111例雀斑患者和124名正常对照个体的外周血样本，焦磷酸技术结合DNA池对筛查到12个SNPs位点的等位基因频率进行定量分析，选择能引起氨基酸改变和多态性较好的位点，分别应用焦磷酸技术和聚合酶链反应一限制性片段长度多态技术进行单个样本基因型鉴定。结果经焦磷酸技术结合DNA池初筛，从测序所得到的12个SNPs位点中，选择rs2228479、rs885479、rs33932559和rs2228478这4个SNP位点进行单个样本基因型鉴定。4个SNPs位点基因型频率和等位基因频率分布与dbSNP数据库中国北京汉族人群的数据一致，rs33932559位点以T等位基因为主，在雀斑组与对照组中的频率分别为90．09％、91．94％，两组间差异无统计学意义（P〉0．05）。rs2228479位点G等位基因频率和rs2228478位点A等位基因频率均占77％左右，rs885479位点T等位基因频率占60％左右，这3个位点等位基因频率与基因型频率分布在雀斑组与对照组间的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论在成都汉族人群中尚未发现MCIR基因单核苷多态性与雀斑发生的相关性。

关键词：黑素皮质素受体1基因雀斑单核苷酸多态性遗传关联研究

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血浆中游离还原型及氧化型谷胱甘肽的荧光测定法

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光谱学与光谱分析 2005年第11期25卷 1834-1838页

作者：王秋林王浩毅丁怡乔小蓉彭克军林霞王树人四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室四川大学分析测试中心四川成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院法医病理教研室四川成都610041

文章建立了快速、可同时检测血浆中游离的还原型和氧化型谷胱甘肽(即GSH和GSSG)的方法,并评价了血浆中GSH/GSSG的氧化还原状态。利用二硫苏糖醇将GSSG还原成两分子的GSH,使GSH在pH8.0时与邻苯二甲醛(OPA)结合生成荧光产物GSH-OPA,用荧... 详细信息

文章建立了快速、可同时检测血浆中游离的还原型和氧化型谷胱甘肽(即GSH和GSSG)的方法,并评价了血浆中GSH/GSSG的氧化还原状态。利用二硫苏糖醇将GSSG还原成两分子的GSH,使GSH在pH8.0时与邻苯二甲醛(OPA)结合生成荧光产物GSH-OPA,用荧光分光光度仪测定其荧光值,从而对GSH和GSSG进行定量分析。并运用此方法测量青年健康志愿者静脉血中的游离GSH和GSSG。该法最低可检测出测定管中11.4 pmol.L-1GSH以及5.7 pmol.L-1GSSG。测量GSH批内和批间变异系数分别4.6%和3.9%,GSSG批内和批间变异系数分别为3.5%和4.1%,GSH,GSSG加标准品后的回收率分别为(99.77±5.70)%和(99.28±4.73)%。测定健康青年志愿者血浆中游离GSH,GSSG的含量分别为(16.5±2.4)***-1和(1.7±0.35)***-1。

关键词：血浆 GSH GSSG 荧光测定法

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PKCι对CIK杀伤胰腺癌细胞的影响及作用机制探讨

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四川大学学报（医学版） 2019年第6期50卷 821-826页

作者：张红梅王怡人杨金河冷小红王佩佩李宗显朱彤波四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室

目的研究非典型蛋白激酶C异构体ι(protein kinase C,PKCι)对细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cell,CIK)作用于胰腺癌细胞的杀伤作用的影响,并探讨其作用机制。方法用白介素-2(IL-2)、干扰素(IFN)、分化抗原簇三分子... 详细信息

目的研究非典型蛋白激酶C异构体ι(protein kinase C,PKCι)对细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cell,CIK)作用于胰腺癌细胞的杀伤作用的影响,并探讨其作用机制。方法用白介素-2(IL-2)、干扰素(IFN)、分化抗原簇三分子单克隆抗体(CD3 mAb)等细胞因子诱导健康人外周血中单个核细胞,制备成CIK细胞。将胰腺癌细胞MiaPaCa、PANC-1和胰腺上皮细胞HPDE6-C7分为对照组、化学抑制剂硫代苹果酸钠(ATM组)、与CIK共培养组、ATM+CIK共培养组。采用细胞计数检测各组细胞1~8 d的生长情况;各组细胞培养48 h后采用流式仪检测细胞死亡率;使用针对人PKCι的小发夹RNA(small hairpin RNA,shRNA)敲低胰腺癌细胞中PKCι的表达,胰腺细胞转染过表达PKCι的重组质粒,分别采用免疫印迹检测PKCι蛋白表达和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测PKCι对下游信号分子中转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)基因表达的影响;并在MiaPaCa和PANC-1与CIK共培养中加入不同质量浓度TGF-β(1、10、20 ng/mL),48 h后流式仪检测细胞死亡情况,以探讨PKCι影响CIK细胞杀伤活性的相关机制。结果 ATM和CIK可抑制胰腺癌细胞MiaPaCa、PANC-1的生长,诱导癌细胞凋亡和死亡,ATM可增强CIK对癌细胞的杀伤作用。敲低胰腺癌细胞中PKCι的表达,可下调其下游信号分子TGF-β基因的表达,而胰腺细胞过表达PKCι,可上调TGF-β mRNA表达,并且在胰腺癌细胞中加入TGF-β10、20 ng/mL,癌细胞的死亡率较对照组下降(P<0.05)。结论降低胰腺癌细胞中PKCι的表达可以抑制胰腺癌细胞的生长,增强CIK对癌细胞的杀伤作用。PKCι的作用机制可能是通过调控TGF-β水平影响肿瘤细胞的免疫逃逸。

关键词： CIK细胞胰腺癌 PKCι TGF-β

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蔓越莓抗菌作用研究进展

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中国抗生素杂志 2012年第8期37卷 575-578页

作者：杨晓龙黄宁四川大学华西基础医学与法医学院病理生理教研室成都610041

蔓越莓(Vaccinium macrocarpon Ait.)是北美三大水果之一。一直以来,蔓越莓因其预防泌尿道感染的功能而受到广泛关注。大量的研究表明蔓越莓具有抑菌、抗细菌黏附等作用。本综述主要涉及其化学成分、抑菌作用、抗黏附作用及其机制。

关键词：蔓越莓抑菌作用抗黏附作用

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嗜肺军团菌mip/flaA二联优势抗原表位基因融合表达载体的构建及表达

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四川大学学报（医学版） 2016年第1期47卷 1-6页

作者：何金蕾彭冉张俊荣余泽英李娜丽莎龚艳菊陈莹陈达丽陈建平四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院成都610041

目的选取嗜肺军团菌mip和flaA优势抗原表位基因,构建mip/flaA二联优势抗原表位基因融合表达载体,并在原核系统中表达,为后续制备嗜肺军团菌蛋白疫苗提供初步的实验基础。方法运用生物信息学方法对Mip和FlaA蛋白的二级结构和表面特性如... 详细信息

目的选取嗜肺军团菌mip和flaA优势抗原表位基因,构建mip/flaA二联优势抗原表位基因融合表达载体,并在原核系统中表达,为后续制备嗜肺军团菌蛋白疫苗提供初步的实验基础。方法运用生物信息学方法对Mip和FlaA蛋白的二级结构和表面特性如理化性质、亲水性、可塑性、抗原指数以及胞外区等方面进行分析,选择其活性表位可能存在的区域为优势抗原表位区。通过PCR扩增和T4连接酶构建pET-mip、pET-flaA和pET-mip/flaA优势抗原表位基因融合表达载体,并诱导其在大肠杆菌中表达。结果 Mip和FlaA都存在多个潜在的抗原表位位点,选取其优势抗原表位区域进行克隆和表达获得成功,并成功表达了mip/flaA二联优势抗原表位融合蛋白。结论 DNA Star软件和Expasy在线蛋白分析系统能够成功预测嗜肺军团菌Mip和FlaA抗原的表位;选取其优势抗原表位成功构建了pET-mip/flaA二联原核表达载体,并高效表达。

关键词：嗜肺军团菌优势抗原表位 mip基因 flaA基因融合表达

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雷公藤多甙对实验性重症肌无力动物骨骼肌复合动作电位的影响

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四川大学学报（医学版） 2004年第3期35卷 379-381页

作者：王涛张云吕广能李克勇徐建国四川大学华西基础医学与法医学院生理学教研室成都610041

目的　观察雷公藤多甙 (TWP)对实验性自身免疫性重症肌无力 (EAMG)动物肌肉活动的直接效应。方法　将筛选出的 EAMG小鼠腓肠肌和旋前圆肌标本置于 TWP恒温浴液中 ,观察给药前后骨骼肌复合动作电位衰减百分率变化。结果　 14 0 mg/ L TWP... 详细信息

目的　观察雷公藤多甙 (TWP)对实验性自身免疫性重症肌无力 (EAMG)动物肌肉活动的直接效应。方法　将筛选出的 EAMG小鼠腓肠肌和旋前圆肌标本置于 TWP恒温浴液中 ,观察给药前后骨骼肌复合动作电位衰减百分率变化。结果　 14 0 mg/ L TWP对 EAMG小鼠腓肠肌复合动作电位衰减百分率有明显影响 (P<0 .0 5 ) ,用药 1.5 h后衰减百分率明显降低〔用药前 (14± 36 ) % ,用药后 (- 4 0± 2 4 ) %〕;2 4 0 m g/ L TWP对 EAMG小鼠旋前圆肌复合动作电位衰减百分率有明显影响 (P<0 .0 5 ) ,用药 1.5 h后衰减百分率明显降低〔用药前 (17±2 5 ) % ,用药后 (- 17± 10 ) %〕;340 mg/ L TWP对 EAMG小鼠腓肠肌和旋前圆肌复合动作电位衰减百分率的影响无明显差异。结论　 TWP具有直接增强 EAMG动物骨骼肌兴奋收缩的效应。

关键词：雷公藤多甙重症肌无力复合动作电位

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黄连素对L-甲状腺素诱发大鼠心肌肥厚的保护作用

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四川大学学报（医学版） 2004年第2期35卷 223-225页

作者：杨静周祖玉徐建国四川大学华西基础医学与法医学院生理学教研室成都610041

目的　研究黄连素对 L-甲状腺素 (L- Thy)诱发大鼠发生心肌肥厚的保护作用。方法　 SD大鼠腹腔注射 (ip) L-甲状腺素 0 .5 mg/(kg· d)× 10 d,造成心肌肥厚模型 ,同时用黄连素 30 mg/(kg· d)× 10 d灌胃 ,观察大鼠的... 详细信息

目的　研究黄连素对 L-甲状腺素 (L- Thy)诱发大鼠发生心肌肥厚的保护作用。方法　 SD大鼠腹腔注射 (ip) L-甲状腺素 0 .5 mg/(kg· d)× 10 d,造成心肌肥厚模型 ,同时用黄连素 30 mg/(kg· d)× 10 d灌胃 ,观察大鼠的心肌肥厚指数 ,心肌细胞膜 Na+ - K+ - ATP酶和肌浆网 Ca2 + - ATP酶活力 ,心肌 NO含量 ,心肌钙调神经磷酸酶 (Ca N)活力的变化。结果　与正常对照组相比 ,心肌肥厚组心肌肥厚指数、Ca N活力明显升高 (P<0 .0 1) ,而心肌NO含量、Na+ - K+ - ATP酶活力和 Ca2 + - ATP酶活力均显著降低 (P<0 .0 1)。黄连素治疗组心肌肥厚指数 ,Ca N活力显著低于肥厚组 (P<0 .0 1) ,心肌 NO含量、Na+ - K+ - ATP酶活力和 Ca2 + - ATP酶活力则显著高于肥厚组 (P<0 .0 1)。结论　黄连素对 L-甲状腺素诱导的大鼠心肌肥厚具有保护作用。

关键词： L-甲状腺素心肌肥厚黄连素保护作用

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酸敏感离子通道在大鼠脑干斜方体核和旁巨细胞外侧核的表达及间歇性缺氧对其表达的影响

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四川大学学报（医学版） 2009年第4期40卷 662-666页

作者：曹性玲陈祁周华唐玉红徐建国郑煜四川大学华西基础医学与法医学院生理学教研室成都610041

目的探讨酸敏感离子通道(ASICs)的3种亚型(ASIC1b、ASIC2a和ASIC3)在大鼠脑干斜方体核(Tz)和旁巨细胞外侧核(LPGi)的表达以及在间歇性缺氧情况下三者表达的变化。方法制备间歇性缺氧大鼠模型,12d后抽血进行血气分析,采用常规免疫组化法(... 详细信息

目的探讨酸敏感离子通道(ASICs)的3种亚型(ASIC1b、ASIC2a和ASIC3)在大鼠脑干斜方体核(Tz)和旁巨细胞外侧核(LPGi)的表达以及在间歇性缺氧情况下三者表达的变化。方法制备间歇性缺氧大鼠模型,12d后抽血进行血气分析,采用常规免疫组化法(SABC法),观察正常大鼠及间歇性缺氧大鼠脑干Tz和LPGi神经元ASIC1b、ASIC2a和ASIC3的表达。结果正常大鼠脑干Tz和LPGi等神经核团,均可见到呈胞浆阳性的ASIC1b、ASIC2a和ASIC3表达的神经元。间歇性缺氧组大鼠,ASIC1b阳性神经元数密度(个/mm3)在Tz中减小(P<0.05),在LPGi中变化不明显(P>0.05),灰度值在Tz和LPGi中均无明显变化(P>0.05);ASIC2a阳性神经元数密度(个/mm3)在Tz和LPGi中改变均不明显(P>0.05),灰度值在Tz中增加(P<0.05),在LPGi中改变不明显(P>0.05);ASIC3阳性神经元数密度(个/mm3)在Tz中改变不明显(P>0.05),在LPGi中减小(P<0.05),灰度值在Tz和LPGi中改变均不明显(P>0.05)。结论正常大鼠脑干Tz和LPGi等呼吸相关神经核团神经元均表达ASIC1b、ASIC2a和ASIC3等ASICs;间歇性缺氧大鼠不同部位不同亚型ASICs表达的变化有所不同,提示不同部位不同亚型ASICs在呼吸调节中的作用可能有所不同。

关键词：呼吸调节间歇性缺氧酸敏感离子通道大鼠

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结直肠癌中K-ras基因突变与TAK1、MAP4K2蛋白表达的相关性研究

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四川大学学报（医学版） 2019年第1期50卷 61-65页

作者：马其钊杨以文马岩林廖诗平郑焱江张姝曹悦岩张霁王玉芳四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院法医物证学教研室成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院机能学实验室成都610041

目的分析K-ras基因突变、转化生长因子激酶1(TAK1)蛋白和MAP4K2蛋白的表达与结直肠癌临床病理特征的关系,并分析K-ras基因突变与TAK1、MAP4K2蛋白表达的相关性。方法应用DNA测序法检测76例结直肠癌样本中K-ras基因突变情况,应用免疫组... 详细信息

目的分析K-ras基因突变、转化生长因子激酶1(TAK1)蛋白和MAP4K2蛋白的表达与结直肠癌临床病理特征的关系,并分析K-ras基因突变与TAK1、MAP4K2蛋白表达的相关性。方法应用DNA测序法检测76例结直肠癌样本中K-ras基因突变情况,应用免疫组化法检测样本中TAK1和MAP4K2蛋白表达情况。结果76例结直肠癌中,K-ras基因突变率为32.89%(25例),K-ras基因突变与肿瘤分化程度有关(P<0.05),与浸润深度、是否有淋巴结转移无关;TAK1阳性率为48.68%,MAP4K2阳性率为46.05%,TAK1蛋白表达和MAP4K2蛋白表达均与肿瘤分化程度、是否有淋巴结转移有关(P<0.05),与浸润深度无关。在76例结直肠癌中,K-ras基因突变与TAK1蛋白表达、MAP4K2蛋白表达均无相关性(P>0.05),TAK1蛋白表达与MAP4K2蛋白表达之间无相关性;在25例K-ras基因突变的结直肠癌中,TAK1蛋白表达与MAP4K2蛋白表达之间呈正相关(r=0.402,P<0.028)。结论 K-ras基因突变、TAK1和MAP4K2蛋白表达均与结直肠癌的肿瘤分化程度有关,与浸润深度无关;在K-ras基因突变的结直肠癌中,TAK1蛋白表达与MAP4K2蛋白表达之间呈正相关。

关键词：结直肠癌 K-ras TAK1 MAP4K2

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