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D7S817、D10S1432、D10S1213及D18S865分型标准物的制备及其遗传多态性研究

四川大学学报（医学版） 2003年第4期34卷 610-613页

作者：贾怡饶莉周斌陈国弟廖淼张林四川大学基础医学与法医学院教育部人类疾病生物治疗重点实验室成都610041 四川大学华西医院内科

目的　利用重组质粒制备四个新的 STR基因座 (D7S817、D10 S14 32、D10 S12 13及 D18S86 5 )的分型标准物 ,并进行群体遗传学研究。方法　从聚丙烯酰胺凝胶中分离出经 PCR扩增后的等位基因片段 ,二次扩增后纯化的等位基因片段被分别插入... 详细信息

目的　利用重组质粒制备四个新的 STR基因座 (D7S817、D10 S14 32、D10 S12 13及 D18S86 5 )的分型标准物 ,并进行群体遗传学研究。方法　从聚丙烯酰胺凝胶中分离出经 PCR扩增后的等位基因片段 ,二次扩增后纯化的等位基因片段被分别插入到 PU C质粒载体中。利用 DNA测序证实插入片段大小及结构的正确性后 ,用国际标准将插入的等位基因片段进行命名。再转染到适当的 *** DH5αTM细胞内选择培养 ,以纯化质粒为模板 ,扩增出各基因座的等位基因片段后混合。结果　得到四个 STR基因座 (D7S817、D10 S14 32、D10 S12 13及 D18S86 5 )分型标准物 ,应用所制备的分型标准物研究汉族和东乡族群体中的基因型分布频率。结论　制备出的四个 STR基因座的分型标准物在法科学领域中有很高的应用价值。

关键词：法医学分型标准物重组质控短串联重复序列遗传多态性

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早期停育胚胎的滋养层细胞相关基因与特征分析

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遗传 2020年第10期42卷 1004-1016页

作者：张悦冯颖马芳四川大学华西第二医院教育部“妇儿疾病与出生缺陷”重点实验室成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院成都610041 四川大学华西第二医院妇产科成都610041

滋养层细胞对维持正常胚胎植入、生长发育有重要作用。研究停育胚胎的滋养层细胞的基因表达差异有助于了解胚胎发育停止或不良妊娠结局的发生发展机制。本研究通过对26例正常妊娠、胚胎停育妇女的绒毛组织进行全转录组测序和初步生物信... 详细信息

滋养层细胞对维持正常胚胎植入、生长发育有重要作用。研究停育胚胎的滋养层细胞的基因表达差异有助于了解胚胎发育停止或不良妊娠结局的发生发展机制。本研究通过对26例正常妊娠、胚胎停育妇女的绒毛组织进行全转录组测序和初步生物信息学分析,发现胚胎停育组存在436个差异基因,其中406个mRNA为显著上调基因,32个mRNA为显著下调基因。基因富集分析显示这些基因显著富集于免疫相关功能、细胞间黏附等方面,如淋巴细胞激活、髓系细胞激活、细胞外基质及胶原连接等,其潜在调控通路富集到补体及凝血级联反应和细胞外基质降解等条目。此外,本研究利用WGCNA共表达分析得到和差异基因存在共表达关系的lncRNA。根据模块功能不同,绘制了两个网络图,可得4个关键基因,分别为VSIG4、C1QC、CD36和SPP1。本研究得到的这些差异基因可作为对胚胎停育具有潜在影响的关键分子,所富集到的条目可为深入了解胚胎发育停止或不良妊娠结局的病因及机制提供理论依据及方向。

关键词：滋养层细胞 RNA测序富集分析基因特征

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缺氧再给氧对内皮细胞免疫功能的影响及益生注射液干预效果初探

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中国中西医结合杂志 2003年第6期23卷 451-454页

作者：蒋红梅李胜富李幼平张立蔡美英吴大蓉四川大学华西医院移植工程与移植免疫实验室四川大学基础医学与法医学院免疫学教研室成都药物制剂研究所

目的:探讨缺血再灌注(缺氧再给氧)对内皮细胞免疫功能的影响及益生注射液的干预效果.方法:用人脐静脉内皮细胞株ECV304缺氧再给氧模型模拟体内缺血再灌注对血管内皮细胞的损伤,并用益生注射液干预其缺氧再给氧过程.间接免疫荧光染色显... 详细信息

目的:探讨缺血再灌注(缺氧再给氧)对内皮细胞免疫功能的影响及益生注射液的干预效果.方法:用人脐静脉内皮细胞株ECV304缺氧再给氧模型模拟体内缺血再灌注对血管内皮细胞的损伤,并用益生注射液干预其缺氧再给氧过程.间接免疫荧光染色显示胞内核因子-κB(NF-κB),流式细胞术检测细胞表面HLA-ABC、HLA-DR、CD86和CD54,并将内皮细胞与同种异体淋巴细胞混合培养(MELR),检测淋巴细胞增殖程度、IL-2的产生及凋亡淋巴细胞百分率.结果:缺氧再给氧使ECV304细胞变圆、收缩、脱落,胞浆NF-κB表达增高,且由胞浆阳性为主转为胞核阳性为主,细胞表面HLA-ABC、HLA-DR、CD86增高,CD54无显著变化,MELR中3H-TdR掺入量、IL-2生成量显著增多,凋亡淋巴细胞百分率降低.益生注射液干预后ECV304细胞形态基本恢复正常,NF-κB表达未下调,但核阳性细胞百分率降低,以核浆阳性为主,其他多项检测指标的改变得以逆转.结论:缺氧再给氧影响了ECV304细胞几种重要免疫相关分子的表达,益生注射液可发挥拮抗作用,使内皮细胞保持相对正常的免疫学功能.

关键词：缺血再灌注损伤内皮细胞免疫功能益生注射液中药制剂

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脂质体介导nm23-h1质粒体内转染腺样囊性癌可行性

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华西口腔医学杂志 2005年第6期23卷 471-473页

作者：李文温玉明彭文珍四川大学华西医院耳鼻喉科四川大学华西口腔医学院口腔颌面外科学教研室四川大学华西基础医学与法医学院分子生物学实验室四川成都610041

目的研究阳离子脂质体介导nm23_h1质粒体内转染腺样囊性癌的可行性。方法将腺样囊性癌细胞株体外培养后移植入40只裸鼠体内。ACC瘤体长至直径1 cm左右时,用脂质体包裹nm23_h1质粒进行瘤体内注射,每次注入质粒-脂质体复合物0.1 ml,其中1... 详细信息

目的研究阳离子脂质体介导nm23_h1质粒体内转染腺样囊性癌的可行性。方法将腺样囊性癌细胞株体外培养后移植入40只裸鼠体内。ACC瘤体长至直径1 cm左右时,用脂质体包裹nm23_h1质粒进行瘤体内注射,每次注入质粒-脂质体复合物0.1 ml,其中10只裸鼠每只注射2次,10只裸鼠注射1次,10只作空白对照,10只裸鼠多针道注射0.2 ml质粒及脂质体复合物。注射后2、3、7 d处死动物,获取肿瘤标本作常规组织学及免疫组化研究。结果瘤体内注射质粒-脂质体复合物3 d后肿瘤细胞内均有nm23_h1表达,7 d后表达增加,肿瘤细胞外间质增加,2次注射较1次注射、多针道注射较单一针道注射有更多的细胞呈阳性表达。结论脂质体介导nm23_h1质粒体内转染腺样囊性癌可获得小范围阳性表达,但还不具备临床实施的可能性。

关键词：基因治疗 nm23 阳离子脂质体腺样囊性癌

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抗菌肽的抗肿瘤作用

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生命的化学 2006年第2期26卷 181-183页

作者：韩玉萍翟朝阳四川大学华西基础医学与法医学院分子生物学实验室成都610041

抗菌肽是宿主免疫防御系统的重要成分,具有广谱杀菌、相对分子量较小、热稳定性及水溶性好等优点,更重要的是抗菌肽能选择性杀灭肿瘤细胞,对人畜毒副作用小。因此,抗菌肽在生物和医药等方面,尤其是抗肿瘤方面有很好的开发前景。

关键词：抗菌肽抗肿瘤

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胰岛素及其受体在肾缺血再灌注损伤中的作用

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四川大学学报（医学版） 2003年第4期34卷 660-662页

作者：何涛李蓉晖甘淋杨烨刘佳佳陈曼玲泸州医学院基础部生物化学教研室泸州646000 四川大学华西基础医学与法医学院生物化学教研室泸州医学院分子生物学实验室

目的　探讨肾缺血再灌注 (IR)过程中胰岛素及其受体的作用。方法　采用钳夹肾动脉的方法建造急性缺血再灌注肾损伤模型。将大耳白兔分为对照组、单纯缺血再灌注组 (IR组 )、胰岛素处理组 (Ins+IR组 ) 3组 ,Ins+IR组再灌注的同时给予胰... 详细信息

目的　探讨肾缺血再灌注 (IR)过程中胰岛素及其受体的作用。方法　采用钳夹肾动脉的方法建造急性缺血再灌注肾损伤模型。将大耳白兔分为对照组、单纯缺血再灌注组 (IR组 )、胰岛素处理组 (Ins+IR组 ) 3组 ,Ins+IR组再灌注的同时给予胰岛素溶液 (Ins3U/ ***) ,而对照组和 IR组则给予等量生理盐水。测定各组动物的血糖、血清胰岛素水平及肾组织胰岛素受体高、低亲和力常数 (Kd1 ,Kd2 )和高、低亲和力受体最大结合容量(Bmax1 ,Bmax2 )。结果　缺血再灌注 2 h后 ,3组动物血糖值、血清胰岛素水平均较术前显著升高 (P<0 .0 5 ) ,IR组尤为显著 ,IR组 Kd1 、Kd2 、Bmax1 、Bmax2 均较对照组显著降低 (P<0 .0 5 ) ,Ins+IR组仅 Bmax2 较对照组显著降低 (P<0 .0 5 ) ;4 8h后 ,3组动物血糖值恢复至正常水平 ,对照组胰岛素水平恢复至正常水平 ,IR组也较 2 h时明显下降(P<0 .0 5 ) ,但仍明显高于对照组 (P<0 .0 5 ) ,3组动物 Kd1 、Bmax1 值无差异 ,Ins+IR组 Bmax2 仍维持较低水平 (P<0 .0 5 ) ,Ins组 Kd2 明显高于对照组 (P<0 .0 5 )。结论　在肾 IR过程中 ,内源性胰岛素的作用减弱 ,外源性胰岛素对肾组织高亲和力受体位点无下降调节作用 ,但胰岛素可引起低亲和力受体数目的下调。胰岛素减轻 IR肾损伤的作用主要是?

关键词：胰岛素胰岛素受体缺血再灌注肾损伤

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小皱蝽抗菌物质的诱导及抗菌肽AMP-2的分离纯化和特性

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应用与环境生物学报 2006年第2期12卷 210-214页

作者：杨泽宏杨星勇罗克明董玉梅四川大学华西基础医学与法医学院生物分子实验室成都610041 西南大学生物技术中心重庆400716

针刺小皱蝽成虫腹部,诱导免疫防御反应,小皱蝽成虫组织经过浸提、浸提液TFA酸化、超速离心、超滤、固相萃取等分离步骤,平板生长抑制试验检测抗菌活性.在C18Sep-Pak固相萃取柱上,40%ACN洗脱组分为初样品,经RP-HPLC、GPC-HPLC及填料孔径... 详细信息

针刺小皱蝽成虫腹部,诱导免疫防御反应,小皱蝽成虫组织经过浸提、浸提液TFA酸化、超速离心、超滤、固相萃取等分离步骤,平板生长抑制试验检测抗菌活性.在C18Sep-Pak固相萃取柱上,40%ACN洗脱组分为初样品,经RP-HPLC、GPC-HPLC及填料孔径更小的反相色谱柱纯化,得到0.452mgAMP2样品.琼脂孔扩散法检测AMP2抗菌活性,回收率为4.04%.抗菌肽AMP2在SuperdexPeptide凝胶过滤柱上测得分子量(Mr)为3.2×103,茚三酮反应紫色.AMP2具有一定热稳定性,在pH3～8的乙酸铵缓冲液中抗菌活性强,对检测的动植物病原菌具有广谱抗菌活性,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌D22、枯草芽孢杆菌的MIC值为2.5μg/mL,对四联球菌的MIC值为5.0μg/mL,AMP2可能为富含脯氨酸的小分子抗菌肽.

关键词：小皱蝽抗菌肽诱导分离纯化

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脑囊尾蚴病诊疗技术研究进展

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中国病原生物学杂志 2022年第7期17卷 844-847,851页

作者：赵晨宇吴悠陈琦伟四川大学华西基础医学与法医学院四川成都610041 四川大学生物治疗国家重点实验室

脑囊尾蚴病是指猪带绦虫的囊尾蚴寄生于人体脑部组织引发的一种中枢神经系统感染。WHO报道全球每年约有250~830万脑囊尾蚴病患者,为中低收入国家的地方病,是导致癫痫的主要原因之一,目前尚无有效疫苗用于防治。该病临床表现复杂多样,易... 详细信息

脑囊尾蚴病是指猪带绦虫的囊尾蚴寄生于人体脑部组织引发的一种中枢神经系统感染。WHO报道全球每年约有250~830万脑囊尾蚴病患者,为中低收入国家的地方病,是导致癫痫的主要原因之一,目前尚无有效疫苗用于防治。该病临床表现复杂多样,易误诊和漏诊。该病在我国主要分布于东北、华北、西南及西北等地区,好发于农村青壮年。本文概述了脑囊尾蚴病的临床特征、诊断方法及治疗情况等相关研究新进展。

关键词：脑囊尾蚴病临床特征诊断与治疗综述

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中国人妊娠高血压综合征患者血管紧张素Ⅱ受体1基因变异的研究

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华西医科大学学报 2002年第3期33卷 332-335页

作者：白怀刘瑞刘兴会刘宇李敏淑刘秉文四川大学华西基础医学与法医学院生物化学教研室及载脂蛋白研究室成都610041 四川大学华西医院内科实验室四川大学华西第二医院产科

目的　探讨血管紧张素的 1型受体 (AT1 R)基因变异是否与妊娠高血压综合征 (简称妊高征 )有关联。方法　采用 AT1 R基因限制性片断长度多态性方法 ,对成都地区 81例中国人汉族妊高征及 2 0 5例正常孕妇对照进行了检测。结果　妊高征... 详细信息

目的　探讨血管紧张素的 1型受体 (AT1 R)基因变异是否与妊娠高血压综合征 (简称妊高征 )有关联。方法　采用 AT1 R基因限制性片断长度多态性方法 ,对成都地区 81例中国人汉族妊高征及 2 0 5例正常孕妇对照进行了检测。结果　妊高征及正常孕妇等位基因的频率分别为 :AT1 R573 C为 0 .30 0、0 .2 85 ;AT1 R1 1 66C为0 .0 14、0 .0 43。两组之间各等位基因频率分布无显著差异 ;与白种人相比 ,AT1 R573 C及 AT1 R1 1 66C等位基因频率白种人均高于中国人 (P<0 .0 0 1) ;日本人在这两个位点中仅 AT1 R1 1 66C的频率高于中国人 (0 .10 1与 0 .0 43,P<0 .0 0 1)。此外 ,还发现妊高征患者 AT1 R1 1 66位点 A/ C基因型携带者其收缩压及舒张压均较 A/ A基因型者有增高趋势 ,但无显著性差异。结论　本研究未发现 AT1 R基因的变异与中国人 (成都地区 )妊高征发病有关联。

关键词：妊娠高血压综合征先兆子痫 AT1R基因基因变异

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问号赖型钩体与七日热型钩体内鞭毛蛋白基因的克隆及序列分析

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华西医科大学学报 2002年第4期33卷 518-521页

作者：何泼戴保民乔中东游自立方之茂四川大学华西基础医学与法医学院钩端螺旋体病研究室成都610041 山西医科大学中心实验室

目的　筛选钩体核酸疫苗的候选株 ,并从基因水平解释钩体血清型的特异性。方法　通过 PCR方法扩增赖型 0 17株及七日热型 5 6 6 10株钩体的内鞭毛蛋白 (fla B)基因 ;经 T/A快速克隆法将 PCR产物连接于PGEM- T Easy Vector载体。用 α-... 详细信息

目的　筛选钩体核酸疫苗的候选株 ,并从基因水平解释钩体血清型的特异性。方法　通过 PCR方法扩增赖型 0 17株及七日热型 5 6 6 10株钩体的内鞭毛蛋白 (fla B)基因 ;经 T/A快速克隆法将 PCR产物连接于PGEM- T Easy Vector载体。用 α-互补法、PCR法及酶切分析鉴定重组质粒 ,获得了重组质粒 p DHTF0 17和p DHTF6 10 ;双脱氧终止法对两个重组质粒中的克隆化 fla B基因进行测序。结果　两型 fla B基因长 85 2 bp,编码2 83个氨基酸。两个基因的限制性内切酶位点相似 ,含多个常见酶切位点。基因编码的蛋白质预测相对分子质量为31.3× 10 3。结论　几个血清型的 fla B基因同源性达 90 %～ 99%。

关键词：赖型钩体七日热型钩体内鞭毛蛋白基因钩端螺旋体病

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