检索结果-内蒙古大学图书馆

航天医学与医学工程 2006年第2期19卷 125-128页

作者：叶珊汪宇辉胡丽娟刘延友王晓佳王正荣四川大学华西医学中心基础与法医学院生物医学工程研究室四川成都610041

目的构建高效的针对hper1(人类period1基因)的干扰质粒,并对hper1的功能进行初步研究。方法选择4个hper1的干扰位点,根据位点序列合成构建4个pTER-hper1干扰质粒,并通过测序验证。将4种干扰质粒分别转染至SH-SY5Y细胞,经马血清休克诱导... 详细信息

目的构建高效的针对hper1(人类period1基因)的干扰质粒,并对hper1的功能进行初步研究。方法选择4个hper1的干扰位点,根据位点序列合成构建4个pTER-hper1干扰质粒,并通过测序验证。将4种干扰质粒分别转染至SH-SY5Y细胞,经马血清休克诱导后,提取细胞总RNA,RT-PCR检测hper1mRNA的表达,鉴定干扰效果。提取细胞总蛋白,Western Blot检测P-p44/42丝裂原活化蛋白激酶(mitagen-actinated pratein kinase,MAPK)表达。结果RT-PCR鉴定显示pTER-hper1-Ⅱ干扰质粒干扰效率最高,hper1表达量降低84.9%。Western Blot显示hper1表达受抑制后,P-p44/42MAPK水平升高。结论成功构建并筛选到具有显著干扰效率的pTER-hper1干扰质粒,为进一步研究hper1的功能奠定了基础,并发现hper1对MAPK通路具有负相调控作用。

关键词：生物节律干扰质粒 RNA干扰人类近日节律基因1 P—p44/42丝裂原活化蛋白激酶

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表面化学修饰纳米金粒子对肝癌细胞增殖和迁移的影响

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生物医学工程学杂志 2015年第2期32卷 373-379页

作者：洪锦勇尹红梅沈阳闫志平刘静霞周法庭夏庆刘肖珩四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室成都610041 四川大学华西药学院成都610041

由于具有高强度的靶向性与优良的生物相容性等优势,纳米载药颗粒已被广泛应用于癌症的诊断和治疗中。然而当纳米颗粒被癌细胞识别并内吞后,其对癌细胞迁移行为的影响却鲜有报道。在本研究中,我们采用自组装技术(SAMs)成功制备了具有不... 详细信息

由于具有高强度的靶向性与优良的生物相容性等优势,纳米载药颗粒已被广泛应用于癌症的诊断和治疗中。然而当纳米颗粒被癌细胞识别并内吞后,其对癌细胞迁移行为的影响却鲜有报道。在本研究中,我们采用自组装技术(SAMs)成功制备了具有不同化学官能团(CH3、OH、COOH和NH2)的纳米金颗粒(Au NPs),通过透射电镜观察Au NPs在人肝癌细胞株HepG2细胞内的分布情况,采用MTT法检测其对该细胞增殖的影响,同时利用划痕损伤实验模型和Transwell小室模型法观察Au NPs对该细胞迁移的影响。结果显示,不同化学官能团修饰的纳米金颗粒被细胞内吞后主要分布在囊泡边缘或胞间连接处。此外,我们发现不同化学官能团修饰的纳米金均会对HepG2细胞的活性起到一定的抑制作用,且随着纳米金粒子浓度的升高,其细胞增殖能力逐渐降低。划痕模型和Transwell模型结果证实不同表面化学官能团修饰的纳米金颗粒对细胞迁移的影响均有差异,与对照组比较,NH2-NPs、OH-NPs组显著抑制了人肝癌细胞株HepG2的迁移行为。

关键词：表面化学纳米金人肝癌细胞细胞毒性细胞迁移

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血管支架植入损伤后的再内皮化修复研究

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医用生物力学 2019年第A1期34卷 121-122页

作者：汪小力许博闻冯唐刘肖珩沈阳四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室

目的血管支架植入对血管造成力学损伤,其再内皮化修复主要依赖于血管内皮细胞(VECs)迁移和内皮祖细胞(EPCs)归巢黏附。流体剪切力(fluid shear stress,FSS)、不同血管损伤程度和尺度如何介导VECs和EPCs的相互作用及其贡献尚未明确。本... 详细信息

目的血管支架植入对血管造成力学损伤,其再内皮化修复主要依赖于血管内皮细胞(VECs)迁移和内皮祖细胞(EPCs)归巢黏附。流体剪切力(fluid shear stress,FSS)、不同血管损伤程度和尺度如何介导VECs和EPCs的相互作用及其贡献尚未明确。本研究拟探讨不同血管损伤程度和尺度对VECs迁移、EPCs黏附及其相互作用完成再内皮化修复的影响,并明确VECs迁移、EPCs黏附的各自贡献。方法(1)构建体外支架植入损伤载玻片模型,并对各损伤模型的血流动力学和流场分布进行数值模拟和计算。(2)分别转染绿色和红色荧光蛋白标记的VECs,用以观察邻近VECs的迁移和循环系统中VECs的黏附。(3)施加15.27 dyn/cm2FSS模拟支架植入后的局部力学环境,测定不同损伤程度和尺度模型中再内皮化修复的细胞来源,并明确VECs迁移和黏附的各自贡献。结果(1)数值模拟结果显示,支架植入不改变支架近心端的流场,而在远心端产生流体分离区域,出现扰动流,依赖于损伤尺度和凸起高度。(2)静态条件下,在损伤尺度为2 mm的不同程度血管损伤模型(平面/凹槽/凸起,Flat2mm/Groove2mm/Bulge2mm)中,再内皮化修复的细胞主要来源于VECs黏附。(3)FSS促进邻近VECs的迁移,抑制循环系统中VECs的黏附,伴随着细胞骨架重排,迁移相关蛋白Rac1、RhoA、Cdc42的表达上调。(4)在Flat2mm/Groove2mm/Bulge2mm模型中,FSS介导的再内皮化修复细胞主要来源于邻近VECs迁移,循环系统中的VECs黏附贡献较少;而随着损伤尺度的增加(2 mm/5 mm/10 mm),黏附贡献增加,呈现损伤尺度依赖性。结论(1)成功构建了体外支架植入损伤模型,其下游产生扰动流,依赖于凸起的尺度和高度。(2)不同损伤程度和尺度模型下,再内皮化修复的细胞主要来源于邻近VECs迁移,但随着损伤尺度的增加,黏附贡献增加,呈现尺度依赖性。

关键词：再内皮化修复细胞迁移血管支架

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脱氧核酶对Period1基因表达及其对小鼠吗啡精神依赖的影响

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四川大学学报（医学版） 2006年第5期37卷 734-737页

作者：周薇刘延友王跃 汪宇錡肖静朱彬彭文珍王正荣四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室

目的研究脱氧核酶在细胞水平调节Period1基因表达的作用及注射脱氧核酶对小鼠吗啡精神依赖的影响。方法设计合成Period1mRNA的10-23型脱氧核酶(DRz164),将pcDNA3-Per1和DRz164在脂质体介导下转染NIH3T3细胞,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-... 详细信息

目的研究脱氧核酶在细胞水平调节Period1基因表达的作用及注射脱氧核酶对小鼠吗啡精神依赖的影响。方法设计合成Period1mRNA的10-23型脱氧核酶(DRz164),将pcDNA3-Per1和DRz164在脂质体介导下转染NIH3T3细胞,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),流式细胞术(FCM)检测转染细胞内Period1基因表达水平。脑室注射DRz164,建立小鼠条件位置偏爱模型,观察对吗啡精神依赖的影响。结果转染DRz164后,RT-PCR半定量检测Period1mRNA与对照组相比减少42.4%。细胞内PER1蛋白表达减少57.2%。给予DRz164后小鼠未能形成对吗啡的位置偏爱。结论脱氧核酶DRz164在胞内能够切割Period1mRNA,抑制Period1基因表达,小鼠脑室注射DRz164可拮抗吗啡所引起的奖赏效应,缓解其对吗啡的精神依赖。

关键词： Period 1基因脱氧核酶基因表达吗啡条件位置偏爱

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外泌体调控血管钙化的研究进展

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中国科学：生命科学 2020年第9期50卷 973-982页

作者：苏冠月汪小力裴童杨帆刘肖珩沈阳四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室成都610041

血管钙化是钙、磷等矿物质在血管壁的异常沉积,是一个主动的、活跃的、被高度调控的生物学过程,受到钙磷代谢紊乱、氧化应激、机械应力和炎症等多种因素的影响.作为胞间通讯的重要载体,外泌体已被证实与血管钙化的发生密切相关.一方面,... 详细信息

血管钙化是钙、磷等矿物质在血管壁的异常沉积,是一个主动的、活跃的、被高度调控的生物学过程,受到钙磷代谢紊乱、氧化应激、机械应力和炎症等多种因素的影响.作为胞间通讯的重要载体,外泌体已被证实与血管钙化的发生密切相关.一方面,外泌体可以通过在细胞间传递蛋白质、microRNAs等信息,促进血管平滑肌细胞发生成骨样表型转化以及矿物质沉积;另一方面,外泌体还可以诱导血管内皮细胞发生内皮-间充质转化,进而调控血管钙化的进程.但是,外泌体在内皮细胞和平滑肌细胞参与血管钙化进程中的具体作用及机制目前尚不完全清楚.本文就外泌体在调节平滑肌细胞的成骨样表型转化、矿物质沉积、microRNA转运以及内皮细胞的内皮-间充质转化中的作用进行了综述,以期为血管钙化的防治提供新思路.

关键词：血管钙化外泌体平滑肌细胞内皮细胞表型转化

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心肌缺血再灌注损伤时心肌肌球蛋白ATP酶活性的改变

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四川大学学报（医学版） 2004年第2期35卷 179-181页

作者：朱彬万朝敏郭慧玲肖静王正荣四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室成都610041 四川大学华西第二医院儿科

目的　探讨心肌缺血再灌注损伤时心肌肌球蛋白 ATP酶活性的改变。方法　从正常兔及心肌缺血再灌注损伤模型兔心肌中提取肌球蛋白 ,根据酶反应 ATP分解释放的无机磷含量分别检测 Ca2 + 激活的肌球蛋白ATP酶的米氏常数 (Km)值及最大反应速... 详细信息

目的　探讨心肌缺血再灌注损伤时心肌肌球蛋白 ATP酶活性的改变。方法　从正常兔及心肌缺血再灌注损伤模型兔心肌中提取肌球蛋白 ,根据酶反应 ATP分解释放的无机磷含量分别检测 Ca2 + 激活的肌球蛋白ATP酶的米氏常数 (Km)值及最大反应速度 (Vmax) ,并对两组蛋白酶活性进行比较。结果　对照组兔心肌肌球蛋白ATP酶的 Vmax为 (1.15± 0 .17)μm ol/ (mg· m in)、Km 为 (5 .4 3± 2 .18) mm ol;实验组心肌肌球蛋白 ATP酶的 Vmax为 (1.17± 0 .2 1)μmol/ (mg· min)、Km 为 (6 .0 2± 2 .0 1) m mol,两组心肌酶活性无显著性差异 (P>0 .0 5 )。结论　心肌缺血再灌注损伤时 ,肌球蛋白

关键词：心肌缺血再灌注损伤肌球蛋白 ATP酶

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体内蛋白转导的研究进展

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中国药科大学学报 2003年第5期34卷 477-480页

作者：彭涛刘英辉杨春蕾肖静郭慧玲王正荣四川大学基础和法医学院生物医学工程研究室成都610041

简要综述了几种能够携带药物跨越血脑屏障和细胞生物膜屏障的蛋白结构域的研究进展。

关键词：蛋白转导域跨膜转运 Tat ANTP VP22

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植入微囊化hANP cDNA转染细胞治疗大鼠高血压的观察

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航天医学与医学工程 2005年第3期18卷 173-176页

作者：刘荣韬陈立国幸浩洋尹华虎万朝敏王正荣四川大学华西基础与法医学院生物医学工程研究室四川成都610041 四川大学华西第二医院四川成都610041

目的研究植入微囊化的人类心房肽(hANP)cDNA转染细胞对高血压大鼠的治疗效果,为临床应用基因工程细胞治疗高血压提供新方法。方法将转染有hANPcDNA的CHO细胞包被在具有免疫隔离作用的聚己内酯(PCL)管内形成微囊化基因转染细胞,其后移植... 详细信息

目的研究植入微囊化的人类心房肽(hANP)cDNA转染细胞对高血压大鼠的治疗效果,为临床应用基因工程细胞治疗高血压提供新方法。方法将转染有hANPcDNA的CHO细胞包被在具有免疫隔离作用的聚己内酯(PCL)管内形成微囊化基因转染细胞,其后移植至二肾一夹(2K1C)高血压大鼠腹腔内,检测微囊植入对高血压大鼠的血压及多项生理生化指标的影响,并用放射免疫分析法(RIA)检测血浆hANP水平,用免疫组化结合图像分析法半定量检测肾脏心房肽A型受体(NPRA)的表达。结果微囊化的hANPcDNA转染细胞移植10d后,血浆hANP水平显著升高;移植30d后高血压大鼠的血压明显降低,而尿量、尿钠排出量(USO)和尿cGMP明显增加;移植45d后肾小球滤过率(GFR)和肾血流量(RBF)明显增加,同时高血压大鼠肾脏NPRA的表达下调被抑制。结论植入的微囊化hANPcDNA转染细胞能产生和向囊外排出hANP,引起明显的利尿利钠和降血压效应;本研究结果为高血压的心房肽基因治疗提供了新途径。

关键词：基因转染细胞心房肽高血压基因治疗

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嗜尸性苍蝇mtDNA中COⅠ和COⅡ基因序列检测及法医学应用

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四川大学学报（医学版） 2005年第3期36卷 393-396页

作者：蔡继峰廖玍刘敏应斌武张林陶涛邓振华潘洪富邓建强廖志钢四川大学华西基础医学与法医学院法医病理学教研室成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室四川大学华西基础医学与法医学院法医物证学教研室

目的　利用线粒体DNA(m t DNA)上细胞色素氧化酶辅酶和 (CO 、CO )中2 78bp和6 35 bp基因序列对嗜尸性苍蝇及其幼虫、卵进行种属鉴定。方法　随机采集放置在呼和浩特地区室外草地兔尸体和甘肃敦煌戈壁滩猪尸体上的嗜尸性苍蝇、幼虫、... 详细信息

目的　利用线粒体DNA(m t DNA)上细胞色素氧化酶辅酶和 (CO 、CO )中2 78bp和6 35 bp基因序列对嗜尸性苍蝇及其幼虫、卵进行种属鉴定。方法　随机采集放置在呼和浩特地区室外草地兔尸体和甘肃敦煌戈壁滩猪尸体上的嗜尸性苍蝇、幼虫、苍蝇腹中的卵,提取苍蝇m t DNA进行PCR扩增;并进行扩增结果检测;PCR胶回收纯化、测序并进行序列分析和构建系统发育树。结果　上述嗜尸性苍蝇mt DNA上CO 和(或) CO 基因序列在双翅目嗜尸性苍蝇的种内基因差异均数小于1% ,种间差异均数大于3% ,成虫与幼虫、卵之间几乎没有明显差异,表明在嗜尸性苍蝇种内和种间序列差异均数百分比范围内无重叠,并由此根据CO 和(或) CO 序列差异判断两个个体是否同种。结论　mt DNA上CO 和(或) CO 序列分析均能有效地对嗜尸性苍蝇及其幼虫、卵进行种属鉴定,CO +CO 和CO 的检验效能要高于CO 。

关键词：嗜尸性苍蝇 mtDNA COⅠ CoⅡ 基因序列法医学线粒体DNA 细胞色素氧化酶辅酶Ⅰ 细胞色素氧化酶辅酶Ⅱ

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肾血管性高血压大鼠肾脏A型心房肽受体的表达及意义

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四川大学学报（医学版） 2005年第6期36卷 776-778,811页

作者：刘荣韬肖静郭慧玲邱敦国尹华虎王正荣四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室成都610041 四川大学图像图形研究所

目的研究高血压大鼠肾脏A型心房肽受体(ANPR-A)的蛋白表达并探讨其意义。方法采用狭窄单侧肾动脉的方法建立二肾一夹(2K 1C)肾血管性高血压大鼠模型。用尾套法测血压,免疫组织化学染色法观察缩窄术后不同时期肾脏组织各部位ANPR-A蛋白... 详细信息

目的研究高血压大鼠肾脏A型心房肽受体(ANPR-A)的蛋白表达并探讨其意义。方法采用狭窄单侧肾动脉的方法建立二肾一夹(2K 1C)肾血管性高血压大鼠模型。用尾套法测血压,免疫组织化学染色法观察缩窄术后不同时期肾脏组织各部位ANPR-A蛋白的表达,并用计算机图像分析系统半定量检测ANPR-A蛋白的表达水平。结果肾动脉缩窄术后4周,模型组大鼠肾脏ANPR-A蛋白在肾小球表达增加,在肾小管表达降低,与对照组的差异有统计学意义(P<0.01),在髓质集合管表达无明显改变(P>0.05)。缩窄术后8周,模型组大鼠肾脏ANPR-A蛋白在肾小管和髓质集合管的表达均降低,与对照组的差异有统计学意义(P<0.01),在肾小球有微弱表达,与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论随着高血压的发展,肾脏组织中的ANPR-A表达显著减少,提示高血压的发展与肾脏ANPR-A的表达下降有关。

关键词：高血压肾脏 A型心房肽受体

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