目的:基于明亮发光杆菌502和青海弧菌Q67的Microtox微毒测试体系比较研究,明确两者适宜的反应条件。方法:1考察明亮发光杆菌502和青海弧菌Q67在15℃±1℃、20℃±1℃、25℃±1℃下的相对发光情况;2采用Plackett-Burman法优化设计影响明亮发光杆菌502和青海弧菌Q67发光的因素;3采用Plackett-Burman法优化得到的反应体系,考察不同p H复苏液对上述两种细菌相对发光强度的影响。结果:1明亮发光杆菌502的相对发光强度随温度的升高而增强,而青海弧菌Q67的相对发光强度随温度的升高先增强后减弱。2Plackett-Burman法得到最优发光条件为:明亮发光杆菌502冻干粉平衡10min后加入复苏液2ml,混匀15min,取100μl菌液测试初始发光度,随后立即加入1ml复苏液或待测样品,反应15min后再次测试相应发光强度;青海弧菌Q67冻干粉平衡10min后加入复苏液2ml,混匀10min,取100μl菌液测试初始发光度,随后立即加入2ml复苏液或待测样品,反应10min后再次测试相应发光强度。3复苏液p H 3.6-p H 3.8时对明亮发光杆菌502发光的影响由抑制转为增强;复苏液p H 4.5-p H 5.0时对青海弧菌Q67发光强度的影响<±15%。结论:与明亮发光杆菌502比较,青海弧菌Q67具有更宽的p H耐受范围并且在检测时无需调节待测样品渗透压。
目的:探索Microtox技术应用于红花注射液综合毒性检测。方法:以费氏弧菌为测试菌种,通过方法学考察确定最优检测体系及方法学可靠性;在最优检测体系条件下,对不同生产厂家所生产的红花注射液进行了发光菌综合毒性检测。结果:2 m L反应...
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目的:探索Microtox技术应用于红花注射液综合毒性检测。方法:以费氏弧菌为测试菌种,通过方法学考察确定最优检测体系及方法学可靠性;在最优检测体系条件下,对不同生产厂家所生产的红花注射液进行了发光菌综合毒性检测。结果:2 m L反应体系下,最优复苏液体积0.9 m L/支菌,每个待测样品加入最优的菌液体积50μL,最优检测时间10 min,最优p H范围5-10,且10 min时发光强度以80-120万为宜;重复性试验、中间精密度试验的相对标准偏差均小于15%;不同生产厂家A、B、C成品的EC50平均值分别为3.36%、5.58%、4.33%,具有显著性差异(P<0.05)。结论:红花注射液对费氏弧菌的毒性存在显著的浓度-效应关系,且不同生产厂家(包括原研单位在内)之间成品EC50值具有显著性差异,提示红花注射液成品生物学检测标准存在进一步提升的空间,应用Microtox技术检测红花注射液综合毒性并用于控制不同厂家成品质量的波动具有很好的应用前景。
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