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长链非编码RNA AW112010通过miR-204/POU2F2轴改善衰老小鼠脂肪细胞的胰岛素抵抗

中华内分泌代谢杂志 2024年第1期40卷 44-52页

作者：王锐王淑文张一凡胡雅琪原琪温媛陈晓玲卢婷郑颖林志勇薛梦珍王雅琦夏芳奇朱蕾奇袁成福三峡大学基础医学院国家中医药管理局中药药理(肿瘤)科研三级实验室宜昌443002

目的探讨长链非编码RNA AW112010(lncRNA AW112010)是否可能通过miR-204/POU类同源盒2(POU2F2)信号通路改善衰老脂肪细胞的胰岛素抵抗。方法体内实验:将C57BL/6小鼠按体重分成年轻对照组(4月龄)、衰老模型组(18月龄);实时荧光定量PCR及W... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA AW112010(lncRNA AW112010)是否可能通过miR-204/POU类同源盒2(POU2F2)信号通路改善衰老脂肪细胞的胰岛素抵抗。方法体内实验:将C57BL/6小鼠按体重分成年轻对照组(4月龄)、衰老模型组(18月龄);实时荧光定量PCR及Western印迹法检测附睾脂肪组织中lncRNA AW112010、miR-204-5p、POU2F2、衰老相关指标(p16、p21)及胰岛素信号通路基因[胰岛素受体(INSR)、胰岛素受体底物1(IRS1)、磷脂酰肌醇激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)]的表达量。体外实验:用阿霉素诱导3T3-L1衰老脂肪细胞模型,β-gal染色观察细胞衰老,成功构建miR-204抑制剂及miR-204模拟物的小干扰RNA,转染3T3-L1脂肪细胞。结果实时荧光PCR与Western印迹结果表明,与年轻小鼠比较,衰老小鼠附睾脂肪组织中AW112010的表达水平增高,而miR-204-5p的表达水平降低;衰老小鼠附睾脂肪组织中POU2F2、p16、p21的表达水平增高,而INSR、IRS1、PI3K、GLUT4 mRNA及蛋白的表达水平降低。β-gal染色结果表明,阿霉素诱导的3T3-L1衰老脂肪细胞数量明显增多,且与对照组相比,阿霉素诱导的衰老脂肪细胞中AW112010、POU2F2、p16、p21的表达量增高,而miR-204-5p、INSR、IRS1、PI3K、GLUT4的表达量降低,培养基中葡萄糖的剩余量增多。与对照组相比,miR-204过表达后,衰老指标p16、p21及靶基因POU2F2的表达量降低;INSR、GLUT4的表达量增高。结论衰老小鼠脂肪细胞中上调的lncRNA AW112010可能通过靶向miR-204-5p/POU2F2/IRS1导致胰岛素抵抗。

关键词：衰老 LncRNA AW112010 miR-204-5p POU2F2 胰岛素抵抗

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五味子化学成分及抗2型糖尿病活性研究进展

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中草药 2019年第7期50卷 1739-1744页

作者：黄妍刘秀陶薇潘广涛梅志刚三峡大学医学院国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北宜昌443002

五味子为木兰科(Magnoliaceae)五味子属Schisandra Michx.植物,在我国东南部和东北三省分布广泛。五味子主要化学成分为木脂素类、挥发油类、多糖类和有机酸类等,临床常被用于治疗2型糖尿病,疗效显著。研究显示,五味子具有抗胰岛素抵抗... 详细信息

五味子为木兰科(Magnoliaceae)五味子属Schisandra Michx.植物,在我国东南部和东北三省分布广泛。五味子主要化学成分为木脂素类、挥发油类、多糖类和有机酸类等,临床常被用于治疗2型糖尿病,疗效显著。研究显示,五味子具有抗胰岛素抵抗、抗炎、抗细胞凋亡、抗氧化应激、抑制血管病变、保护血管内皮等作用,能较好地改善糖尿病及其并发症。对近40年国内外有关五味子化学成分及其抗2型糖尿病活性研究进展进行综述,为五味子治疗糖尿病相关药物的研发提供参考。

关键词：五味子木脂素 2型糖尿病胰岛素抵抗代谢综合征

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肝纤维化病程中Kupffer细胞分泌的细胞因子对肝星状细胞活化增殖、凋亡的调控

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中国药理学通报 2010年第1期26卷 9-13页

作者：黄艳黄成李俊安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级实验室国家中医药管理局中医药科研三级实验室"中药药理实验室"安徽合肥230032

肝纤维化是对慢性肝损伤的愈合反应,为一个可逆的过程。肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)是肝脏分泌细胞外基质(extra cellular matrixc,ECM)的主要细胞,在肝纤维化的发展机制中占有重要的地位。如何控制HSC的活性并逆转肝纤维化... 详细信息

肝纤维化是对慢性肝损伤的愈合反应,为一个可逆的过程。肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)是肝脏分泌细胞外基质(extra cellular matrixc,ECM)的主要细胞,在肝纤维化的发展机制中占有重要的地位。如何控制HSC的活性并逆转肝纤维化的进程是抗肝纤维化研究的重点之一。在肝纤维化病程中,一系列细胞因子通过旁分泌和自分泌方式作用于邻近的HSC,影响其增殖、趋化、代谢及凋亡。鉴于Kupffers细胞为细胞因子的主要来源,其在肝纤维化病程中对HSC细胞的活化增殖、凋亡发挥着重要的调控作用。HSC、Kupffers细胞及细胞因子与肝纤维化的发生发展关系极为密切,阐明其关系,有助于以HSC为靶点的肝纤维化方面的研究,现就其关系综述如下。

关键词：肝星状细胞枯否细胞细胞因子肝纤维化增殖凋亡

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抗菌肽R9对小鼠急性毒性及肾毒性的研究

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中国临床药理学杂志 2018年第10期34卷 1218-1221页

作者：蔡香菊马骏王志晓何润泽马兰甘肃中医药大学国家中医药管理局中医药科研三级实验室中药药理实验室兰州瑞贝药物研发有限公司

目的观察抗菌肽R9对小鼠的急性毒性和肾毒性。方法半数致死量(LD50)测定:给小鼠一次腹腔注射抗菌肽R9,观察7 d,按Bliss法计算LD50及95%的可信限。R9肾毒性实验:小鼠随机分为4组,空白对照组（0.9%NaCl）和低、中、高3个剂量(抗菌肽R9:6.7... 详细信息

目的观察抗菌肽R9对小鼠的急性毒性和肾毒性。方法半数致死量(LD50)测定:给小鼠一次腹腔注射抗菌肽R9,观察7 d,按Bliss法计算LD50及95%的可信限。R9肾毒性实验:小鼠随机分为4组,空白对照组（0.9%NaCl）和低、中、高3个剂量(抗菌肽R9:6.7,10.0,15.0 mg·kg-1)实验组,分别一次腹腔注射。于给药第2天,测定血液学指标;检测肌酸酐、尿素氮、总蛋白;计算肾系数。结果R9的LD50为21.3 mg·kg-1,95%可信限为19.1～23.5mg·kg-1。给药第2天,与空白对照组比较,高剂量实验组小鼠的白细胞（4.07×10～9/L）和红细胞(8.96×1012/L)明显减少而肌酸酐(19.99μmol·L-1)和尿素氮(8.07 mmol·L-1)升高,差异均有统计学意义（P<0.05,P<0.01）;同时,总蛋白(54.18 g·L-1)降低而肾系数(13.40 mg·g-1)升高,差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论抗菌肽R9对小鼠有一定毒性,肾是主要毒性靶器官。肾毒性与给药剂量呈正相关,停药后有可逆性好转趋势。

关键词：抗菌肽R9 急性毒性靶器官肾毒性与给药剂量呈正相关

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民族药蓝布正化学成分及药理作用研究进展

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中草药 2018年第1期49卷 233-238页

作者：陶薇王凯王金凤冯知涛梅志刚三峡大学医学院国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北宜昌443002

蓝布正为我国民间传统药物,常用于治疗头痛头晕、小儿惊风、高血压、腰腿疼痛、月经不调等疾病,然而其潜在的药理作用机制尚不明了。截至目前,蓝布正中已发现的化学成分主要有萜类(主要为单萜、倍半萜和三萜类)、鞣质类、苯丙素类等。... 详细信息

蓝布正为我国民间传统药物,常用于治疗头痛头晕、小儿惊风、高血压、腰腿疼痛、月经不调等疾病,然而其潜在的药理作用机制尚不明了。截至目前,蓝布正中已发现的化学成分主要有萜类(主要为单萜、倍半萜和三萜类)、鞣质类、苯丙素类等。研究显示,蓝布正具有抗凝血、抗高血压、抗炎、抗肿瘤和治疗缺血性疾病等多种药理作用。对近40年来国内外关于蓝布正的活性成分、药理作用的研究进展进行综述,为蓝布正临床合理推广应用与相关新药的研发提供参考。

关键词：蓝布正萜类鞣质类苯丙素类抗凝血活性抗高血压活性抗炎活性

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CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型肝纤维化逆转与MAPK信号通路的研究

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中国药理学通报 2011年第6期27卷 809-814页

作者：李政通李俊黄成李浩章圣鹏黄艳陶辉安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级重点实验室国家中医药管理局中医药三级实验室“中药药理实验室”安徽合肥230032

目的通过检测CCl4诱导肝纤维化大鼠逆转恢复各时期MAPK信号通路蛋白动态变化,研究其在肝纤维化恢复期可能的调控作用。方法采用CCl4皮下注射SD大鼠12周,复制肝纤维化模型,分别于注射12周,停药后2、4、6、8周取材。通过检测各组ALT、AST... 详细信息

目的通过检测CCl4诱导肝纤维化大鼠逆转恢复各时期MAPK信号通路蛋白动态变化,研究其在肝纤维化恢复期可能的调控作用。方法采用CCl4皮下注射SD大鼠12周,复制肝纤维化模型,分别于注射12周,停药后2、4、6、8周取材。通过检测各组ALT、AST、Hyp、LN、PⅢNP的含量变化和肝脏病理组织切片Masson染色,加以验证。采用West-ern blot法检测各组肝组织中MAPK通路蛋白表达。结果 ALT、AST、Hyp、LN、PⅢNP等反映肝损伤和纤维化进程的指标在第12周最高,即模型组最高,并且随着肝纤维化逆转而含量逐渐降低,Masson染色结果与之一致,表明大鼠肝纤维化模型期与各恢复期模型建立完成。p-ERK1/2在模型组表达明显降低,与正常组相比差异有显著性(P<0.01),恢复4周表达明显升高,与模型组相比差异有显著性(P<0.01),以后逐渐降低。p-JNK1/2在模型组表达明显降低(P<0.01),恢复期逐渐升高(P<0.05)。p-p38在模型组表达明显升高(P<0.01),恢复期逐渐降低(P<0.05)。p-ERK/ERK与Hyp相关系数r=-0.46,P=0.003;p-JNK/JNK与Hyp相关系数r=-0.53,P=0.0004;p-p38/p38与Hyp相关系数r=0.81,P=0.0001。结论 MAPK信号通路中的ERK、JNK和p38信号通路在肝纤维化逆转中发挥重要作用。

关键词：肝纤维化有丝分裂原活化蛋白激酶细胞外信号调节激酶 c-Jun氨基末端激酶 p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路

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大黄-桃仁药对调控子宫腺肌病在位内膜线粒体稳态的机制研究

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中草药 2022年第15期53卷 4709-4718页

作者：易永丽雷娅王坤付先芸蔡三金三峡大学医学院国家中医药管理局中药药理肿瘤科研三级实验室湖北宜昌443000

目的探索大黄-桃仁药对对子宫腺肌病(adenomyosisi,AM)在位内膜线粒体稳态的调控机制。方法同种异体垂体移植法构建AM小鼠模型,光镜及透射电镜(TEM)观察大黄-桃仁药对治疗前后子宫组织病理及超微结构改变;免疫荧光检测线粒体自噬通路P... 详细信息

目的探索大黄-桃仁药对对子宫腺肌病(adenomyosisi,AM)在位内膜线粒体稳态的调控机制。方法同种异体垂体移植法构建AM小鼠模型,光镜及透射电镜(TEM)观察大黄-桃仁药对治疗前后子宫组织病理及超微结构改变;免疫荧光检测线粒体自噬通路PTEN诱导的推定激酶1(PTEN-induced putative kinase 1,PINK1)/帕金森蛋白(Parkinson protein,Parkin)蛋白表达。培养人永生化子宫内膜异位症在位内膜间质细胞hEM15A,观察大黄-桃仁药对处理前后细胞增殖能力、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、抗氧化酶系、线粒体膜电位、线粒体自噬小体、线粒体自噬蛋白的变化。结果病理切片显示,经大黄-桃仁药对治疗后,中、重度的浸润比例较模型组减少。TEM观察发现模型组子宫内膜上皮细胞及间质细胞线粒体肿胀、线粒体脊消失,部分形成线粒体自噬体;经大黄-桃仁药对治疗后子宫内膜上皮细胞及间质细胞线粒体数量增加,无明显肿胀、线粒体脊清晰可见。与对照组比较,造模后子宫内膜层PINK1、Parkin表达显著上调(P<0.001);经大黄-桃仁药对治疗后,PINK1、Parkin表达显著下降(P<0.05、0.001)。体外实验结果表明,hEM15A细胞线粒体膜电位下降,ROS呈较高水平;经大黄-桃仁药对处理后,hEM15A细胞的增殖及侵袭能力下降(P<0.05、0.001),线粒体膜电位升高,ROS水平下降(P<0.001),抗氧化酶系统Cu-Zn超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、Mn-SOD和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性上调(P<0.01、0.001),氧化损伤指标丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平下调(P<0.01)。hEM15A细胞线粒体与溶酶体之间存在较强的共定位关系,经大黄-桃仁药对处理后,线粒体与溶酶体共定位的数量显著减少(P<0.05),PINK1、Parkin及其下游视神经蛋白(Optineurin,OPTIN)、核点蛋白52(nuclear dot protein 52,NDP52)经大黄-桃仁药对处理后显著下调(P<0.01、0.001)。结论大黄-桃仁药对可通过改善线粒体抗氧化酶系、调控线粒体自噬水平、恢复线粒体膜电位等多途径维护AM在位内膜细胞乏氧线粒体稳态,从而减轻氧化应激损伤。

关键词：大黄-桃仁药对子宫腺肌病在位内膜线粒体稳态线粒体自噬氧化应激

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老鹳草提取物对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

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中国新药杂志 2011年第16期20卷 1554-1557页

作者：丁云录柳怀玉李庆杰陈声武吉林天药科技有限公司国家中医药管理局三级中药药理实验室吉林大学实验动物中心

目的:考察老鹳草提取物对免疫性肝损伤小鼠的保护作用。方法:分别采用卡介苗(BCG)+脂多糖(LPS)、刀豆蛋白A(ConA)诱导建立小鼠免疫性肝损伤模型,灌胃给予老鹳草提取物(100,200,***-1),观察小鼠血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基... 详细信息

目的:考察老鹳草提取物对免疫性肝损伤小鼠的保护作用。方法:分别采用卡介苗(BCG)+脂多糖(LPS)、刀豆蛋白A(ConA)诱导建立小鼠免疫性肝损伤模型,灌胃给予老鹳草提取物(100,200,***-1),观察小鼠血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性及血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、细胞因子γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)含量变化;检测肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;进行肝脏病理组织检查。结果:不同剂量老鹳草提取物均可明显降低小鼠血清中AST,ALT活性及肝组织匀浆MDA含量(P<0.05或0.01),并能使降低的SOD活性升高;中、高剂量老鹳草提取物(200,400 ***-1)可不同程度降低血清中IFN-γ和IL-4含量及LDH活性(P<0.05)。不同剂量老鹳草提取物可使血清蛋白含量维持正常比例,肝组织损伤均有不同程度减轻。结论:老鹳草提取物对小鼠免疫性肝损伤具有一定的保护作用。

关键词：老鹳草提取物免疫性肝损伤卡介苗脂多糖刀豆蛋白A

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甲嘎松汤对肝损伤的保护作用研究

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中药药理与临床 2013年第1期29卷 132-135页

作者：熊天琴李红侠陈元元赵玉民广州中医药大学.国家中医药管理局中药药理三级科研实验室广州510006

目的:研究藏药甲嘎松汤对整体动物急慢性肝损伤模型及体外L02细胞氧化应激损伤模型的保护作用,并进行初步机制研究。方法:制备5种小鼠急性肝损伤模型、1种大鼠慢性肝损伤模型,观察甲嘎松汤对动物血清AST、ALT活性及四氯化碳致小鼠急性... 详细信息

目的:研究藏药甲嘎松汤对整体动物急慢性肝损伤模型及体外L02细胞氧化应激损伤模型的保护作用,并进行初步机制研究。方法:制备5种小鼠急性肝损伤模型、1种大鼠慢性肝损伤模型,观察甲嘎松汤对动物血清AST、ALT活性及四氯化碳致小鼠急性肝损伤的肝组织中CAT、GSH活性;采用RT-PCR技术,测定慢性酒精性肝损伤肝脏缺氧诱导因子-1 mRNA的表达。先给予Nrf2激活剂t-BHQ干预12h,再给予甲嘎松汤的含药血清作用12h后,利用终浓度为100mU/ml的葡萄糖氧化酶(Glucose Oxi-dase,GO)诱导人肝细胞L02氧化应激损伤模型,检测细胞培养上清液中AST、ALT活性;四甲基氮唑(MTT)比色法检测细胞活力。结果:在6种肝损伤动物中均可见甲嘎松汤在0.66g/kg剂量下的AST、ALT活性比模型组显著降低;显著升高四氯化碳引起的小鼠急性肝损伤模型中抗氧化酶CAT、抗氧化剂GSH活性;在一定程度上降低模型组HIF-1α因子mRNA表达,但与模型组比较无统计学差异。在细胞模型中,20%甲嘎松汤含药血清组与t-BHQ组均能于不同时间点显著升高细胞活力;显著降低AST,ALT活性;与t-BHQ组比较,20%甲嘎松汤含药血清+t-BHQ组于不同时间点上述指标有明显改善,并且对单用t-BHQ作用8小时后表现出的肝细胞活力降低有改善作用。结论:甲嘎松汤有一定的保肝作用,与Nrf2激活剂t-BHQ有协同效应,能纠正Nrf2持续激活导致的细胞损伤,说明甲嘎松汤保肝作用可能与维持Nrf2在细胞内的动态平衡有关。

关键词：甲嘎松汤 t-BHQ 人肝细胞氧化应激

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卒中后焦虑发生机制的研究进展

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生理学报 2022年第4期74卷 648-656页

作者：舒渝茜吴凡章帆鲁娇赵航王清何治三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室宜昌443002 三峡大学医学院宜昌443002

随着卒中发病率的增加,其已成为影响人类生命健康的重要疾病。部分卒中幸存者在后期出现不同程度的情绪和运动障碍,如卒中后焦虑(post-stroke anxiety,PSA)、卒中后抑郁(post-stroke depression,PSD)等,严重危害患者和家属的生活质量。... 详细信息

随着卒中发病率的增加,其已成为影响人类生命健康的重要疾病。部分卒中幸存者在后期出现不同程度的情绪和运动障碍,如卒中后焦虑(post-stroke anxiety,PSA)、卒中后抑郁(post-stroke depression,PSD)等,严重危害患者和家属的生活质量。当前对于PSA的发病机制研究尚不完全清楚,研究认为其主要与下丘脑-垂体-肾上腺素(hypothalamic-pituitary-adrenergic,HPA)轴失衡、神经递质紊乱、神经元兴奋性改变和细胞因子水平失衡,以及卒中发生脑区和心理生理等因素相关。本文对近年来PSA发病机制的研究进展进行综述。

关键词：卒中焦虑发病机制

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