检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中药杂志 2024年第9期49卷 2273-2280页

作者：华桦田韦韦刘俐曾瑾魏平谭蕊蓉王剑波赵军宁四川省中医药转化医学中心国家中医药管理局中药质量生物评价重点研究室中医药转化医学四川省重点实验室四川省道地药材系统开发工程技术研究中心四川省道地药材形成原理与品质评价工程研究中心四川成都610041 国家药品监督管理局药品监管科学全国重点实验室北京100037

小核酸药物主要包括小干扰核糖核酸(small interfering RNA,siRNA)、反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASO)、微小RNA(microRNA,miRNA)、信使RNA(messenger RNA,mRNA)以及核酸适配体(aptamer)等,可通过与靶分子的RNA结合,抑制其翻译或调控,具有高度特异性、持久性和可治愈性,近年来颇受关注。新近发现中药动植物来源的miRNA自身稳定并可稳定存在于动物或人体的血液与组织器官,而且可通过参与调控多种靶蛋白的表达发挥药理作用。该文概述了源自中药及天然药物的小核酸药物发现及其跨界调控机制,探讨这类新兴药品带来的技术挑战与监管问题,可为中药复杂性作用机制阐释、中药及天然药物来源的小核酸新药研制及监管科学研究提供新的思路和方法。

关键词：小核酸中药天然药物新药发现监管科学

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桂枝茯苓丸对子宫腺肌病小鼠肠道菌群和代谢物的调节作用研究

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中华中医药学刊 2025年第4期43卷 155-161,I0031-I0036页

作者：刘士丹陈佩佩付先芸魏绍斌王坤陈敏敏成都中医药大学附属医院代谢性疾病中医药调控四川省重点实验室四川成都610072 三峡大学国家中医药管理局中药药理三级实验室三峡大学健康医学院湖北宜昌443002 成都中医药大学附属医院四川成都610072

目的联合肠道菌群组学和代谢组学技术探索桂枝茯苓丸(Guizhi Fuling Pill,GFW)干预子宫腺肌病(adenomyosis,AM)的潜在机制。方法7周龄雌性ICR小鼠随机分为对照组、模型组和GFW组,采用同种异体垂体移植法造模,3组分别灌胃给药8周后处死... 详细信息

目的联合肠道菌群组学和代谢组学技术探索桂枝茯苓丸(Guizhi Fuling Pill,GFW)干预子宫腺肌病(adenomyosis,AM)的潜在机制。方法7周龄雌性ICR小鼠随机分为对照组、模型组和GFW组,采用同种异体垂体移植法造模,3组分别灌胃给药8周后处死。评价小鼠子宫组织病理学变化并检测离体子宫收缩频率和波幅。采用16S rRNA基因测序技术对比GFW干预前后肠道菌群Alpha及Beta多样性变化,筛选差异肠道菌群。采用液相色谱-质谱(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)技术探索GFW干预后肠道代谢产物的变化。对差异菌群及差异代谢物进行相关性分析,寻找GFW调控AM的可能机制,并进行实验验证。结果HE染色结果证实成功形成AM模型。与模型组相比,给予GFW治疗后体外子宫收缩波幅明显降低(P<0.05),收缩频率呈下降趋势。肠道菌群Alpha多样性显示3组样本间的Observed species指数、Ace指数差异均无统计学意义;Beta多样性结果表明,对照组和模型组样本肠道菌群分布有显著差异,GFW治疗后能一定程度回调AM小鼠的肠道菌群组成。进一步研究表明,AM小鼠肠道中拟杆菌门、拟杆菌属丰度显著下调(P<0.01,P<0.01),厚壁菌门、柔壁菌门相对丰度显著升高(P<0.05,P<0.05)。经GFW干预后,柔壁菌门、支原体属以及肠杆菌属丰度显著降低(P<0.05,P<0.05,P<0.01),而副拟杆菌属相对丰度显著升高(P<0.05)。代谢组学筛选结果证实AM模型小鼠具有22种与氧化应激、免疫及子宫平滑肌收缩等相关的肠道差异代谢物,如前列腺素D_(3)、谷氨酸、色氨酸、羟基二十碳四烯酸、粪胆素等。相关性分析显示,部分肠道菌群与代谢物之间存在显著相关性。实验验证结果证实,AM小鼠子宫组织中存在活性氧(reactive oxygen species,ROS)及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白介素-17(interleukin 17,IL-17)表达水平的上调,经GFW治疗后ROS及TNF-α的表达水平回调。结论GFW可改善AM小鼠子宫平滑肌收缩、氧化应激和免疫反应,其作用可能与调控AM小鼠肠道菌群及肠道代谢物有关。其具体调控机制尚待进一步的研究证实。

关键词：子宫腺肌病桂枝茯苓丸肠道菌群组学代谢组学

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lncRNA SNHG1调控铁死亡减轻HIV-1 gp120 V3环所致小胶质细胞炎症的分子机制研究

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中国病理生理杂志 2024年第5期40卷 806-814页

作者：王琳琳左勤李心怡颜学勤潘锐付咏梅董军暨南大学基础医学与公共卫生学院病理生理学系国家中医药管理局病理生理实验室粤港澳中枢神经再生研究院广东广州510632 暨南大学附属第一医院骨科广东广州510630

目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)SNHG1调控铁死亡改善HIV-1 gp120 V3环致CHME-5人源小胶质细胞炎症的分子机制。方法:体外培养CHME-5人源小胶质细胞,设立空白组、随机肽段组、HIV-1 gp120V3环组(HIV-1 gp120组)、HIV-1 gp120+shCon组、H... 详细信息

目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)SNHG1调控铁死亡改善HIV-1 gp120 V3环致CHME-5人源小胶质细胞炎症的分子机制。方法:体外培养CHME-5人源小胶质细胞,设立空白组、随机肽段组、HIV-1 gp120V3环组(HIV-1 gp120组)、HIV-1 gp120+shCon组、HIV-1 gp120+SNHG1 sh2组、HIV-1 gp120+SNHG1 sh2+ferrostatin-1(Fer-1;铁死亡抑制剂)组和HIV-1 gp120+SNHG1 sh2+EX527(Sirt1抑制剂)组。随机肽段和gp120 V3环分别处理正常CHME-5细胞24 h;抑制剂预处理SNHG1 sh2细胞2 h后,gp120 V3环处理24 h。ELISA法检测细胞上清中炎症因子水平;Western blot法检测铁死亡相关蛋白[溶质载体家族7成员11(SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)]、Sirt1和p53蛋白表达水平;酶标仪检测细胞内亚铁离子(Fe^(2+))和丙二醛(MDA)含量。结果:(1)ELISA结果显示:较空白组,HIV-1 gp120组炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和IL-1β表达水平显著提高(P<0.05);较HIV-1 gp120组,HIV-1 gp120+SNHG1 sh2组炎症因子表达水平显著降低(P<0.05);较HIV-1 gp120+SNHG1 sh2组,HIV-1 gp120+SNHG1 sh2+Fer-1组炎症因子表达水平显著降低(P<0.05),HIV-1 gp120+SNHG1 sh2+EX527组炎症因子表达水平显著升高(P<0.01)。(2)Western blot结果显示:较空白组,HIV-1 gp120组铁死亡相关蛋白SLC7A11和GPX4表达水平显著下调(P<0.01);较HIV-1 gp120组,HIV-1 gp120+SNHG1 sh2组SLC7A11和GPX4表达水平显著上调(P<0.01);较HIV-1 gp120+SNHG1 sh2组,HIV-1 gp120+SNHG1 sh2+Fer-1组SLC7A11和GPX4表达水平明显上调(P<0.05),HIV-1 gp120+SNHG1 sh2+EX527组SLC7A11和GPX4表达水平显著下调(P<0.01),p53表达水平显著上调(P<0.05)。(3)较空白组,HIV-1 gp120组Fe^(2+)和MDA含量显著提高(P<0.05);较HIV-1 HIV-1 gp120组,HIV-1 gp120+SNHG1 sh2组Fe^(2+)和MDA含量显著降低(P<0.01);较HIV-1 gp120+SNHG1 sh2组,HIV-1gp120+SNHG1 sh2+Fer-1组Fe^(2+)和MDA含量显著降低(P<0.05),HIV-1 gp120+SNHG1 sh2+EX527组Fe^(2+)和MDA含量显著提高(P<0.05)。结论:敲减SNHG1可减轻HIV-1 gp120 V3环介导的小胶质细胞炎症反应,其机制可能是通过Sirt1/p53信号通路调控铁死亡相关信号分子实现的。

关键词： HIV相关神经认知障碍神经炎症铁死亡长链非编码RNA SNHG1 Sirt1/p53信号通路

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龙葵愈伤组织生长特性及次生代谢产物积累研究

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中草药 2022年第16期53卷 5170-5178页

作者：陈媛媛刘秀岩刘福顺杨世海吉林农业大学中药材学院国家中医药管理局药用植物栽培与育种实验室吉林长春130118

目的建立龙葵Solanum nigrum愈伤组织最优培养体系,研究愈伤组织在不同培养时间下各生理指标变化和澳洲茄碱、澳洲茄边碱的积累,为工业化制备澳洲茄碱和澳洲茄边碱奠定基础。方法研究不同外植体及培养基对龙葵愈伤组织诱导的影响,采用... 详细信息

目的建立龙葵Solanum nigrum愈伤组织最优培养体系,研究愈伤组织在不同培养时间下各生理指标变化和澳洲茄碱、澳洲茄边碱的积累,为工业化制备澳洲茄碱和澳洲茄边碱奠定基础。方法研究不同外植体及培养基对龙葵愈伤组织诱导的影响,采用响应面试验设计方法优化愈伤组织诱导的激素配比,运用考马斯亮蓝G-250法测定可溶性蛋白含量,TTC还原法测定细胞活力,邻苯二酚法测定多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)活性,氮蓝四唑光化还原法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,愈创木酚比色法测定过氧化物酶(peroxidase,POD)活性,硫代巴比妥酸显色法测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,高效液相色谱法测定澳洲茄碱及澳洲茄边碱含量。结果愈伤组织诱导最佳外植体为龙葵茎段,最适培养基为MS+1.43 mg/L NAA+2.15 mg/L 6-BA+2.48 mg/L KT,愈伤组织增殖最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。愈伤组织鲜质量增长量呈“S”型趋势,20 d时细胞活力达到最高峰值,可溶性蛋白含量与POD活性均呈先升高后降低的趋势,SOD活性在20 d与30 d出现2个峰值,MDA含量呈先降低后升高的变化趋势,在培养后期PPO活性下降,可能与愈伤组织褐化有关,澳洲茄碱与澳洲茄边碱含量变化趋势一致,在第30天时达到峰值。结论龙葵愈伤组织生长期为25 d,同时也为最适的愈伤组织鲜质量收获期,25 d后会出现不同程度褐化。其愈伤组织中的次生代谢产物积累和细胞生长过程通常是负相关的,次生代谢产物的合成大多在愈伤组织的生长后期。

关键词：龙葵愈伤组织增殖生理特性次生代谢产物澳洲茄碱澳洲茄边碱

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基于药效物质基础的中药药物发现策略及其迭代发展

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Acupuncture and Herbal Medicine 2023年第3期3卷 158-179页

作者：葛楠闫广利孙晖杨乐孔玲孙野韩莹赵琦琦康舒宇王喜军黑龙江中医药大学经方与现代中药融合创新全国重点实验室国家中医药管理局中医方证代谢组学研究中心中药血清药物化学重点研究室广州中医药大学第二附属医院省部共建中医湿证国家重点实验室天津中医药大学现代中医药海河实验室

中药药效物质基础发现是中药新药创制的重要途径,青蒿素、黄连素和麻黄碱等国际知名药物均是由此途径陆续被发现及开发出来。然而,由于中医药理论及实践的复杂性,中药药效物质基础发现技术仍然不能完全满足创新药物的需要,仍然是制约中... 详细信息

中药药效物质基础发现是中药新药创制的重要途径,青蒿素、黄连素和麻黄碱等国际知名药物均是由此途径陆续被发现及开发出来。然而,由于中医药理论及实践的复杂性,中药药效物质基础发现技术仍然不能完全满足创新药物的需要,仍然是制约中药创新药物的关键科学问题。中医临床是以多味中药组成方剂作为药物针对证候而表达临床疗效,而方剂的复杂性和证候的模糊性使得与临床疗效相关的中药体内药效物质基础发现充满挑战性。几十年来,中医药研究人员不断地建立及发展多项交叉学科的技术和方法,努力去发现发挥疗效的中药药效物质基础。本文回顾总结了中药药效物质基础发现的策略及其迭代发展历史,主要包括植物化学方法,即经典的系统分离筛选法(提取、分离、纯化、结构鉴定和药理活性测试);生物活性导向分离;中药血清药物化学方法;以及将体内成分与证候生物标志物关联分析的中医方证代谢组学方法。而中医方证代谢组学是近年来出现的一种符合中医药理论与特点的药效物质基础发现策略,该方法基于证候标记物与方剂体内显效成分关联分析,揭示方剂发挥疗效的体内药效物质及作用靶点与通路,推动基于临床疗效的创新药物研发及先导化合物的发现,促进中医药的现代化及产业化发展。

关键词：中医方证代谢组学中药药效物质基础新药开发策略中药血清药物化学中医药现代化

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基于数据挖掘技术探讨针灸治疗卒中后癫痫的选穴规律

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中国针灸 2023年第6期43卷 715-720页

作者：徐志杰吴林纳徐帆李桂平王舒叶旸真天津中医药大学第一附属医院天津300381 国家中医针灸临床医学研究中心天津300381 天津市针灸学重点实验室天津市中医药研究院附属医院天津300120 国家中医药管理局脑病针刺疗法重点研究室天津300381

目的:采用数据挖掘技术分析针灸治疗卒中后癫痫的选穴规律。方法:检索中国期刊全文数据库(CNKI)、维普资讯中文期刊服务平台(VIP)、万方数据知识服务平台(Wanfang)、中国生物医学文献数据库(SinoMed)、PubMed自建库至2022年8月1日收录... 详细信息

目的:采用数据挖掘技术分析针灸治疗卒中后癫痫的选穴规律。方法:检索中国期刊全文数据库(CNKI)、维普资讯中文期刊服务平台(VIP)、万方数据知识服务平台(Wanfang)、中国生物医学文献数据库(SinoMed)、PubMed自建库至2022年8月1日收录的针灸治疗卒中后癫痫的相关文献。采用Microsoft Excel 2019软件建立数据库并对腧穴进行描述性分析;采用SPSS Modeler 18.0 Apriori算法进行关联规则分析;采用Cytoscape3.9.0软件绘制高频腧穴共现网络图;采用SPSS Statistics 25.0软件对高频腧穴进行层次聚类分析并绘制树状图。结果:共纳入39篇文献,提取针灸处方63条,涉及腧穴56个,总频次516次;腧穴使用频次居前3位的为百会、丰隆、内关;所选经脉主要为督脉、手足阳明经;选穴多分布在头项部及下肢部;在腧穴配伍方面,合谷-水沟与内关的置信度最高;前20位高频腧穴可分为4个有效聚类群。结论:现代针灸治疗卒中后癫痫重视阳经及多气多血之经的使用,核心处方为水沟-内关-合谷-百会,重视远近配穴以提高临床疗效。

关键词：卒中后癫痫针灸选穴规律数据挖掘

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硫化汞纳米颗粒对秀丽隐杆线虫不同神经递质类型神经元的影响

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中国药理学与毒理学杂志 2024年第5期38卷 344-352页

作者：李璐迪李盈姿王旗北京大学公共卫生学院毒理学系北京100191 国家中医药管理局中药配伍减毒重点研究室北京100191 食品安全毒理学研究与评价北京市重点实验室北京100191

目的探究硫化汞纳米颗粒(HgS-NP)暴露对秀丽隐杆线虫(简称线虫)不同神经递质类型神经元的影响。方法采用野生型N2线虫以及绿色荧光蛋白特异性标记转运蛋白或生物合成酶的γ-氨基丁酸(GABA)能、谷氨酸(Glu)能、多巴胺(DA)能、乙酰胆碱(... 详细信息

目的探究硫化汞纳米颗粒(HgS-NP)暴露对秀丽隐杆线虫(简称线虫)不同神经递质类型神经元的影响。方法采用野生型N2线虫以及绿色荧光蛋白特异性标记转运蛋白或生物合成酶的γ-氨基丁酸(GABA)能、谷氨酸(Glu)能、多巴胺(DA)能、乙酰胆碱(ACh)能和5-羟色胺(5-HT)能神经元的转基因线虫(EG1285,DA1240,BZ555,LX929和GR1366),通过固体暴露的方式,将同步化后的L4期线虫经不同浓度HgS-NP处理。(1) 5种转基因线虫暴露于HgS-NP 0(溶剂对照组),250,500和1000 mg·L^(-1)72 h,采用荧光显微镜观察转基因线虫不同神经递质类型神经元绿色荧光的表达。(2)野生型N2线虫暴露于HgS-NP 0(溶剂对照组)和1000 mg·L^(-1)72 h,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测33种GABA能和Glu能神经递质系统相关基因mRNA表达水平。结果 (1)与同基因型溶剂对照组线虫相比,暴露于不同浓度HgS-NP后,EG1285线虫出现GABA能神经元胞体缩小、树突断裂和神经元缺失,神经元相对荧光强度显著降低(P<0.05);暴露于HgS-NP 1000 mg·L^(-1)后,DA1240线虫头部Glu能神经元缺失,相对荧光强度显著降低(P<0.01);然而,暴露于不同浓度HgS-NP后,BZ555、LX929和GR1366线虫的DA能、ACh能和5-HT能神经元形态及相对荧光强度均无明显改变。(2)与溶剂对照组相比,野生型N2线虫暴露于HgS-NP 1000 mg·L^(-1)后,仅编码非N-甲基-D-天冬氨酸类Glu受体的glr-7和glr-8的mRNA表达水平升高(P<0.05),其余31种GABA能和Glu能神经递质系统相关基因mRNA表达水平均无明显改变。结论较高剂量的HgS-NP暴露72 h可损伤线虫的GABA能和Glu能神经元,而对DA能、ACh能和5-HT能神经元无明显影响。

关键词：硫化汞纳米颗粒神经元神经递质秀丽隐杆线虫

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基于免疫-炎症-衰老探讨八子补肾胶囊对自然衰老小鼠老化过程的延缓作用

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中国实验方剂学杂志 2023年第9期29卷 146-155页

作者：宋亚辉马坤张雅萍王丹东毛昕菁张少兰魏聪河北中医学院石家庄050091 河北医科大学石家庄050017 南京中医药大学南京210046 络病研究与创新中药国家重点实验室石家庄050035 河北省络病重点实验室石家庄050035 国家中医药管理局中医络病学重点学科石家庄050035

目的:探讨八子补肾胶囊延缓自然衰老小鼠老化过程的功效作用及作用机制。方法:以13月龄自然衰老小鼠为实验研究对象,将其按体质量随机分为4组,即自然衰老组,八子补肾低、高剂量组(1、2 g·kg^(-1)),雷帕霉素组(0.002 g·kg^(-1)... 详细信息

目的:探讨八子补肾胶囊延缓自然衰老小鼠老化过程的功效作用及作用机制。方法:以13月龄自然衰老小鼠为实验研究对象,将其按体质量随机分为4组,即自然衰老组,八子补肾低、高剂量组(1、2 g·kg^(-1)),雷帕霉素组(0.002 g·kg^(-1))。通过行为学实验检测小鼠的衰弱表征并测定其虚弱指数;流式细胞术检测小鼠脾脏T和B淋巴细胞、效应性T细胞(TE)、记忆性T细胞(TM)、幼稚性T细胞(TN)、辅助性T细胞(Th)、细胞毒性T细胞(Tc)、Th1细胞、Th2细胞和调节性T细胞(Treg)比例;细胞增殖与活性检测(CCK-8)试剂盒检测小鼠淋巴细胞的增殖能力;苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠脾脏组织病理学变化;免疫组化法(IHC)检测细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A(p16)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(p21)的表达情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测衰老相关蛋白p16和p21的mRNA表达情况;Luminex检测小鼠外周血血清炎症因子:肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-1β、IL-2、IL-4、IL-10、IL-12 p70水平。结果:与自然衰老组比较,八子补肾组和雷帕霉素组小鼠的衰弱表征明显改善,虚弱指数评分明显降低(P<0.05,P<0.01);脾脏中T细胞、TN细胞、Tc细胞、Th2细胞和Treg细胞比例升高,TE细胞、TM细胞、Th细胞和Th1细胞比例下降(P<0.05,P<0.01);脾淋巴细胞增殖能力增强(P<0.05,P<0.01);脾脏红髓和白髓边缘区结构清晰,白髓面积增大,红髓面积相应减小;脾脏中衰老相关蛋白p16和p21蛋白表达量减少(P<0.01);p16和p21的mRNA表达量降低(P<0.01);血清中促炎细胞因子IL-1β、IL-2、IL-12 p70、IFN-γ和TNF-α水平降低,抗炎因子IL-4和IL-10水平升高(P<0.05,P<0.01)。结论:八子补肾胶囊具有调节自然衰老小鼠衰弱表征,调节机体免疫稳态及炎症水平,减少免疫细胞衰老的作用,起到了延缓衰老的作用功效。

关键词：八子补肾胶囊炎症免疫衰老淋巴细胞亚群衰老相关蛋白

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基于机械化学辅助-低共熔溶剂的人参皂苷绿色提取新方法研究

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中国中药杂志 2022年第23期47卷 6409-6416页

作者：屠羽佳李林楠范文翔范林宏王峥涛杨莉上海中医药大学、中药研究所、中药标准化教育部重点实验室、国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中医药大学交叉科学研究院上海201203

人参皂苷是人参的主要活性成分,研究表明人参皂苷具有抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、益智、保护心血管等多种药理作用,其开发和利用一直备受关注。目前,人参皂苷的提取以使用有机溶剂提取为主,绿色提取方法的研究相对较少。该研究通过加热搅... 详细信息

人参皂苷是人参的主要活性成分,研究表明人参皂苷具有抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、益智、保护心血管等多种药理作用,其开发和利用一直备受关注。目前,人参皂苷的提取以使用有机溶剂提取为主,绿色提取方法的研究相对较少。该研究通过加热搅拌法合成不同的低共熔溶剂(deep eutectic solvents,DESs),结合机械化学辅助提取(mechanochemical-assisted extraction,MCAE)技术提取人参皂苷,以建立人参皂苷的绿色提取方法。对可能影响提取效果的实验参数进行优化,以确定最优条件,并进行方法学验证。将所建立的方法与目前常用的提取方法(如70%乙醇超声辅助提取法)作进一步比较,以评估新方法的提取效果。实验结果表明,基于DES-MCAE法的最优提取条件:提取溶剂中DES最优组成为氯化胆碱∶尿素1∶2,溶剂与水的体积比为6∶4,料液比为0.05 g·mL^(-1),线性振动速率为4.0 m·s^(-1),提取时间为40 s,提取次数为2次。该方法提取时间仅为80 s,而提取率较70%乙醇超声提取法提升36.22%。该研究建立了基于DES的人参皂苷的分析前处理方法,实现了人参皂苷的快速、绿色、高效提取,为进一步研究其他中药活性成分的绿色提取提供了新思路、新方法。

关键词：低共熔溶剂人参皂苷绿色提取机械化学辅助提取

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祛寒逐风合剂对寒湿痹阻证类风湿关节炎大鼠及其Th17/Treg平衡的影响

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时珍国医国药 2024年第8期35卷 1823-1827页

作者：马骏郭影苏小军王怀弟朱文菊包强马富海杨会军刘亚鹏甘肃中医药大学甘肃兰州730000 国家中医药管理局三级科研实验室中药药理实验室甘肃兰州730000 甘肃省中医院甘肃兰州730000 兰州市食品药品检验检测研究院甘肃兰州730000

目的观察祛寒逐风合剂对寒湿痹阻证类风湿关节炎大鼠模型的作用以及对其Th17/Treg相关细胞因子与转录因子平衡的影响。方法 SD大鼠随机分出12只作为正常对照组,其余65只大鼠通过尾根部皮下注射Ⅱ型胶原乳剂并人工模拟寒湿刺激制备寒湿... 详细信息

目的观察祛寒逐风合剂对寒湿痹阻证类风湿关节炎大鼠模型的作用以及对其Th17/Treg相关细胞因子与转录因子平衡的影响。方法 SD大鼠随机分出12只作为正常对照组,其余65只大鼠通过尾根部皮下注射Ⅱ型胶原乳剂并人工模拟寒湿刺激制备寒湿痹阻型RA大鼠模型。选取造模成功的60只大鼠随机分为模型对照组、甲氨喋呤组(1.4 mg·kg^(-1))、祛寒逐风合剂低、中、高剂量组(20.1、40.2、80.5 g·kg^(-1)),各组灌胃给予相应药物,正常对照组和模型对照组给予等容量生理盐水,连续28 d。实验过程中,观察各组大鼠的一般状况,于造模前、造模后、给药后每周测量各组大鼠踝关节周长。给药结束后,检测胸腺和脾脏指数,HE检测踝关节病理学变化,ELISA检测血清Th17/Treg相关细胞因子TNF-α、IL-6、IL-17、IL-10的含量,RT-qPCR检测滑膜组织中Th17/Treg相关转录因子维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)、叉状头/翅膀状螺旋转录因子3(Foxp3)mRNA的表达量。结果与正常对照组比较,模型对照组大鼠关节肿胀明显,脾脏指数和胸腺指数升高(P<0.01),踝关节炎性细胞浸润、滑膜细胞增生严重,血清TNF-α、IL-6、IL-17水平显著升高(P<0.01),IL-10水平显著降低(P<0.01),RORγt mRNA表达升高(P<0.01),Foxp3 mRNA表达降低(P<0.01);与模型对照组比较,祛寒逐风合剂低、中、高剂量组均能抑制关节肿胀(P<0.05或P<0.01),祛寒逐风合剂中、高剂量组大鼠胸腺和脾脏指数显著降低(P<0.05或P<0.01),祛寒逐风合剂低、中、高剂量组均能改善踝关节病理损伤,降低TNF-α、IL-6、IL-17水平,升高IL-10水平(P<0.01),祛寒逐风合剂中、高剂量组RORγt mRNA表达显著降低(P<0.01),Foxp3 mRNA表达显著升高(P<0.01)。结论祛寒逐风合剂具有调节Th17/Treg平衡的作用,其机制可能与其调控Th17/Treg相关细胞因子及转录因子有关。

关键词：祛寒逐风合剂寒湿痹阻型类风湿关节炎 CIA大鼠 Th17/Treg平衡

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