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中国药房 2017年第34期28卷 4776-4780页

作者：龚梦鹃巫圣乾岳贺王淑美梁生旺邹忠杰广东药科大学中药学院广州510006 国家中医药管理局中药数字化质量评价技术重点研究室广州510006 广东高校中药质量工程技术研究中心广州510006

目的:从代谢通路角度阐明护肝片保肝作用的药效及作用机制。方法:将36只雄性SD大鼠随机分成正常组(0.5%羧甲基纤维素钠)、模型组(0.5%羧甲基纤维素钠)和护肝片组(1.7 g/kg),每组12只,每天ig给药1次,连续给药9 d。末次给药后1 h,模型组... 详细信息

目的:从代谢通路角度阐明护肝片保肝作用的药效及作用机制。方法:将36只雄性SD大鼠随机分成正常组(0.5%羧甲基纤维素钠)、模型组(0.5%羧甲基纤维素钠)和护肝片组(1.7 g/kg),每组12只,每天ig给药1次,连续给药9 d。末次给药后1 h,模型组和护肝片组大鼠ip 50%四氯化碳(CCl_4)花生油溶液1 mL/kg诱导肝损伤。造模24 h后,检测大鼠肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;利用核磁共振氢谱(~1H-NMR)代谢组学技术建立大鼠血清和肝代谢物谱,分析护肝片对CCl_4致急性肝损伤大鼠血清和肝代谢轮廓变化和潜在生物标志物的影响。结果:与正常组比较,模型组大鼠肝组织中MDA水平显著升高(P<0.05),SOD、GSH-Px水平显著降低(P<0.05);大鼠机体生理及物质代谢均发生了明显的改变,11种血清代谢潜在生物标志物和14种肝代谢潜在生物标志物水平均显著升高/降低(P<0.05)。与模型组比较,护肝片组大鼠肝组织中MDA水平显著降低(P<0.05),SOD、GSH-Px水平显著升高(P<0.05)。大鼠血清和肝代谢趋于正常,6种血清代谢潜在生物标志物(异亮氨酸、亮氨酸、3-羟基丁酸、丙酮、乙酰乙酸、胆碱)和8种肝代谢潜在生物标志物(3-羟基丁酸、丙氨酸、谷氨酸、丙酮酸、琥珀酸、胆碱、乳酸、葡萄糖)得到显著回调(P<0.05)。结论:护肝片保肝的机制可能与抗氧化应激及调控脂质代谢、糖代谢和氨基酸代谢有关。

关键词：护肝片急性肝损伤代谢组学核磁共振潜在生物标志物大鼠

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脑得生固体分散体胶囊的质量控制研究

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时珍国医国药 2017年第7期28卷 1551-1554页

作者：罗兰李明丽康家珍王淑美梁生旺广东药科大学中药学院国家中医药管理局中药数字化质量评价技术重点研究室广东高校中药质量工程技术研究中心广东广州510006

目的建立脑得生固体分散体胶囊(三七、川芎、红花、葛根、山楂)的质量控制方法。方法采用薄层色谱法对该复方制剂中三七、川芎、红花、葛根、山楂进行定性鉴别,同时采用比色法测定三七总皂苷的含量,并采用高效液相法测定羟基红花黄色素... 详细信息

目的建立脑得生固体分散体胶囊(三七、川芎、红花、葛根、山楂)的质量控制方法。方法采用薄层色谱法对该复方制剂中三七、川芎、红花、葛根、山楂进行定性鉴别,同时采用比色法测定三七总皂苷的含量,并采用高效液相法测定羟基红花黄色素A的含量。结果供试品色谱中,在与对照品、对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性样品无干扰;三七总皂苷对照品在0.042~0.119mg·ml^(-1)(r=0.9995)范围内线性关系良好,加样回收率均值为99.47%,RSD为2.43%;羟基红花黄色素A在0.259~1.554μg(r=0.9999)范围内线性关系良好,加样回收率均值为99.33%,RSD为1.03%。结论所建立的方法操作简便,准确,重复性好,能够有效地控制脑得生固体分散体胶囊的质量。

关键词：脑得生固体分散体胶囊质量标准薄层色谱三七总皂苷羟基红花黄色素A

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D-最优设计响应面法优选复方脑得生提取工艺

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时珍国医国药 2017年第1期28卷 1-3页

作者：朱雨薇陈超王淑美梁生旺成金乐广东药科大学中药学院广东广州510006 国家中医药管理局中药数字化质量评价技术重点研究室广东广州510006 广东高校中药质量工程技术研究中心广东广州510006 中山市中智药业集团有限公司广东中山528437 国家中医药管理局中药破壁饮片技术与应用重点研究室广东中山528437

目的采用D-最优设计响应面法,优选脑得生方提取工艺。方法以脑得生方提取工艺的关键参数乙醇浓度、乙醇用量和提取时间为自变量,进行D-最优设计;采用可见分光光度法和高效液相色谱法,测定脑得生方中主要指标成分总皂苷、总黄酮和阿魏酸... 详细信息

目的采用D-最优设计响应面法,优选脑得生方提取工艺。方法以脑得生方提取工艺的关键参数乙醇浓度、乙醇用量和提取时间为自变量,进行D-最优设计;采用可见分光光度法和高效液相色谱法,测定脑得生方中主要指标成分总皂苷、总黄酮和阿魏酸的含量,并以它们的加权含量为因变量,进行响应面分析,优选出脑得生方提取的最佳工艺。结果以10.81倍用量、浓度为80%的乙醇回流提取45 min,作为提取的最佳工艺。结论利用D-最优设计响应面法能够优选脑得生方提取工艺参数,提高了有效成分的提取效率,有助于脑得生方的质量标准研究。

关键词：脑得生方提取工艺 D-最优设计响应面法

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香菇多糖对人肺腺癌细胞A549免疫原性死亡相关分子表达的影响

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转化医学电子杂志 2018年第4期5卷 16-20页

作者：吴小清陈鸿策芮雯游思远李婵艺陈宏远广东药科大学基础学院病原生物学与免疫学系广东广州510006 广东药科大学中心实验室广东广州510006 广东省局部精准药物递药制剂工程技术研究中心国家中医药管理局中药数字化质量评价技术重点研究室广东广州510006

目的:探究香菇多糖对人肺腺癌细胞A549免疫原性死亡相关分子、免疫检测点相关分子及抗原提呈分子表达的影响。方法:采用CCK8法检测与分析0.4~12.8μg/μL的香菇多糖分别处理A549细胞24 h、48 h后对其存活率的影响;分别采用0.5~2.0μg/μ... 详细信息

目的:探究香菇多糖对人肺腺癌细胞A549免疫原性死亡相关分子、免疫检测点相关分子及抗原提呈分子表达的影响。方法:采用CCK8法检测与分析0.4~12.8μg/μL的香菇多糖分别处理A549细胞24 h、48 h后对其存活率的影响;分别采用0.5~2.0μg/μL及0.4~8.0μg/μL香菇多糖处理A549细胞48 h后流式细胞术检测与分析其对细胞周期及细胞凋亡的影响;0.5~4.0μg/μL香菇多糖分别处理24 h及48 h后,流式细胞术检测与分析其对A549细胞免疫原性细胞死亡相关分子,免疫检测点相关分子和抗原呈递分子表达量的影响。结果:香菇多糖可抑制A549细胞增殖且具有时间和浓度依赖性,24 h和48 h的IC_(50)分别为15.823μg/μL和6.258μg/μL。香菇多糖可促进细胞凋亡显著增加,阻滞细胞周期于S期;香菇多糖可诱导免疫原性死亡相关蛋白钙网蛋白、热休克蛋白70表达量上升,免疫检测点分子Galectin9蛋白表达量明显下降,CD_(270)、CD_(39)及共刺激分子CD_(80)的表达量明显上升,MHC-Ⅱ表达量明显上升。结论:香菇多糖体外抗肿瘤作用可能与调节免疫原性死亡相关分子、免疫检测点分子及抗原提呈分子表达量有关。

关键词：香菇多糖抗肿瘤免疫原性死亡免疫检测点

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钩藤总生物碱对HepG_2细胞增殖和凋亡的影响及机制研究

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中药材 2017年第3期40卷 707-710页

作者：黄宝媛曾常青曾宇杨再刚广东药科大学中药学院/国家中医药管理局中药数字化质量评价技术重点研究室广东广州510006 贵州省剑河县科技局钩藤研究所贵州剑河556400

目的:研究钩藤总生物碱(TAU)对体外培养HepG_2细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:MTT法检测不同浓度TAU对HepG_2细胞增殖的影响;流式细胞术检测不同浓度TAU对HepG_2细胞周期和凋亡的影响;Western Blot法分析其可能的分子机... 详细信息

目的:研究钩藤总生物碱(TAU)对体外培养HepG_2细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:MTT法检测不同浓度TAU对HepG_2细胞增殖的影响;流式细胞术检测不同浓度TAU对HepG_2细胞周期和凋亡的影响;Western Blot法分析其可能的分子机制。结果:TAU对HepG_2细胞有显著的增殖抑制及促凋亡率作用,其作用呈浓度依赖性;中、高浓度TAU处理后HepG_2细胞发生周期阻滞,G0/G1期细胞比例降低,S期细胞比例升高;Bcl-2、Casepase-3、Casepase-7、Casepase-9及PARP蛋白表达量显著下调,Bax、cleaved-Casepase-3、cleaved-Casepase-7、cleaved-Casepase-9及cleaved-PARP蛋白表达量显著上调。结论:钩藤总生物碱对HepG_2细胞有明显的增殖抑制作用,并能诱导HepG_2细胞凋亡,细胞周期阻滞可能是其作用机制之一,线粒体调节通路可能是其调节细胞凋亡的重要途径。

关键词：钩藤总生物碱 HepG2细胞凋亡 Casepase PARP

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广藿香对耐药哈维氏弧菌生物膜形成及相关基因的影响研究

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广东药科大学学报 2018年第2期34卷 239-243页

作者：纪佳丽刘广锋冯娟杨文斌管淑玉广东药科大学中药学院广东广州510006 国家中医药管理局中药数字化质量评价技术重点实验室广东广州510006 广东高校中药质量工程技术研究中心广东广州510006 中国水产科学研究院南海水产研究所广东广州510300

目的研究广藿香对耐药哈维氏弧菌生物膜形成的抑制作用及其对成膜相关基因表达的影响等,尝试从分子水平阐释其抑制菌膜形成的机理.方法以耐药哈维氏弧菌X140701为实验菌株,通过二倍稀释法测定广藿香对菌株的最低抑菌浓度(MIC);采用结晶... 详细信息

目的研究广藿香对耐药哈维氏弧菌生物膜形成的抑制作用及其对成膜相关基因表达的影响等,尝试从分子水平阐释其抑制菌膜形成的机理.方法以耐药哈维氏弧菌X140701为实验菌株,通过二倍稀释法测定广藿香对菌株的最低抑菌浓度(MIC);采用结晶紫染色法测定生物膜形成量;采用qRT-PCR检测广藿香对生物膜相关基因表达的影响.结果广藿香对X140701 MIC为31.25 mg/m L(以生药计).0.782 mg/m L广藿香水提物对X140701生物膜抑制率达37.6%;广藿香水提物可使X140701生物膜相关基因lux R、fla B基因表达量上调,lux S、hfq、omp W基因表达量下调.结论广藿香能有效抑制耐药哈维氏弧菌生物膜的形成,其抑制作用与5个成膜相关基因中的表达密切相关.

关键词：生物膜广藿香哈维氏弧菌成膜相关基因荧光定量PCR

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脑得生固体分散体胶囊的HPLC指纹图谱研究

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中国药房 2017年第27期28卷 3828-3831页

作者：罗兰李明丽康家珍王淑美梁生旺广东药科大学中药学院广州510006 广东药科大学国家中医药管理局中药数字化质量评价技术重点研究室广州510006 广东药科大学广东高校中药质量工程技术研究中心广州510006

目的:建立脑得生固体分散体胶囊的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法:采用HPLC法。色谱柱为Hyspersil ODS2,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 m L/min,检测波长为210 nm(葛根素)、345 nm(羟基红花黄色素A),柱温为30℃,... 详细信息

目的:建立脑得生固体分散体胶囊的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法:采用HPLC法。色谱柱为Hyspersil ODS2,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 m L/min,检测波长为210 nm(葛根素)、345 nm(羟基红花黄色素A),柱温为30℃,进样量为10μL。以葛根素、羟基红花黄色素A为参照,测定10批样品的HPLC图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)进行相似度评价,共有峰指认及其化学成分确认。结果:在210、345 nm波长处,10批样品的HPLC图谱分别有29、23个共有峰;相似度均>0.90;各共有峰药材归属分别为三七、川芎、红花、葛根、山楂;在210、345 nm波长处各确认了7种化学成分。结论:该研究所建HPLC指纹图谱可为脑得生固体分散体胶囊的鉴别和质量评价提供参考。

关键词：脑得生固体分散体胶囊高效液相色谱法指纹图谱

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HPLC测定脑得生固体分散体胶囊中葛根异黄酮类成分的含量

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中华中医药学刊 2017年第11期35卷 2816-2818页

作者：罗兰李明丽康家珍陈雨王淑美梁生旺广东药科大学中药学院广东广州510006 广东药科大学国家中医药管理局中药数字化质量评价技术重点研究室广东广州510006 广东药科大学广东高校中药质量工程技术研究中心广东广州510006

目的:建立脑得生固体分散体胶囊中葛根异黄酮类成分(葛根素、大豆苷、大豆苷元、染料木素)的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,Hyspersil ODS-2色谱柱(5μm,250 mm×4.6 mm),柱温25℃,流动相甲醇-水系统梯度洗脱,流速0.8 mL&#... 详细信息

目的:建立脑得生固体分散体胶囊中葛根异黄酮类成分(葛根素、大豆苷、大豆苷元、染料木素)的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,Hyspersil ODS-2色谱柱(5μm,250 mm×4.6 mm),柱温25℃,流动相甲醇-水系统梯度洗脱,流速0.8 mL·min^(-1),检测波长250 nm。结果:葛根素在0.540 8~3.244 8μg(r=0.999 9)范围,大豆苷在0.130 0~0.780 0μg(r=0.999 9)范围,大豆苷元在0.073 2~0.439 2μg(r=0.999 9)范围,染料木素在0.044 8~0.268 8μg(r=0.999 9)范围均呈良好的线性关系;平均回收率分别为99.08%,98.10%,97.91%,99.26%;RSD分别为1.67%,1.57%,2.43%,2.92%。结论:所建立方法简便、准确、重复性好,可有效控制该制剂质量。

关键词：脑得生固体分散体胶囊 HPLC 葛根素大豆苷大豆苷元染料木素

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广东紫荆皮的质量标准研究及其易混品辨析

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广东药科大学学报 2017年第4期33卷 471-474页

作者：黄燕俊张伟贤曾常青广东药科大学中药学院/国家中医药管理局中药数字化质量评价技术重点研究室广东广州510006

目的研究广东紫荆皮的质量标准。方法采用2015年版《中国药典》中方法对广东紫荆皮药材中的水分、灰分及浸出物进行了测定,对广东紫荆皮药材薄层鉴别的条件及指标成分的质量分数测定条件进行了优化。结果测得广东紫荆皮药材中水分不得超... 详细信息

目的研究广东紫荆皮的质量标准。方法采用2015年版《中国药典》中方法对广东紫荆皮药材中的水分、灰分及浸出物进行了测定,对广东紫荆皮药材薄层鉴别的条件及指标成分的质量分数测定条件进行了优化。结果测得广东紫荆皮药材中水分不得超过15.5%,总灰分不得超过9.24%,70%(体积分数)乙醇热浸出物不得少于27.5%;以羽扇豆醇、没食子酸为对照品的薄层鉴别斑点清晰、分离度好。羽扇豆醇的质量分数测定在0.216 0~10.80μg内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 9,平均回收率为96.9%(RSD=2.1%,n=6),样品平均质量分数为12.40 mg/g;而其混淆品未检出此成分。结论本方法简便、专属性强、重复性好,能区分广东紫荆皮及其混淆品,为评价广东紫荆皮药材的质量标准提供科学依据。

关键词：广东紫荆皮质量标准羽扇豆醇没食子酸混淆品

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槟榔标准饮片均匀化方法研究

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亚太传统医药 2017年第9期13卷 15-18页

作者：窦珮丹李克宁龙琴王淑美梁生旺孟江广东药科大学中药学院广东广州510006 国家中医药管理局中药数字化质量评价技术重点研究室广东广州510006

目的:优选槟榔标准饮片的均匀化方法,并建立一种同时测定槟榔饮片中4种生物碱含量的HPLC分析方法。方法:采用HPLC方法同时测定槟榔标准饮片中4种生物碱的含量,采用正交设计综合评分法,以出粉率、水溶性浸出物、粉末径距以及4种生物碱含... 详细信息

目的:优选槟榔标准饮片的均匀化方法,并建立一种同时测定槟榔饮片中4种生物碱含量的HPLC分析方法。方法:采用HPLC方法同时测定槟榔标准饮片中4种生物碱的含量,采用正交设计综合评分法,以出粉率、水溶性浸出物、粉末径距以及4种生物碱含量为参考指标,优化槟榔标准饮片的单次粉碎时间、粉碎次数及投料量,从而确定均匀化方法。结果:优化所得均匀化方法为每次投料150g,粉碎2次,单次粉碎时间50s。4种生物碱成分含量呈良好的线性关系,回收率分别为:去甲槟榔碱98.69%、槟榔次碱105.74%、去甲槟榔次碱99.48%、槟榔碱100.00%。结论:优化所得槟榔标准饮片均匀化方法合理稳定,建立的同时测定槟榔饮片中4种生物碱的含量的方法稳定可行。

关键词：槟榔标准饮片含量测定正交设计均匀化方法

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