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长链非编码RNA AW112010通过miR-204/POU2F2轴改善衰老小鼠脂肪细胞的胰岛素抵抗

中华内分泌代谢杂志 2024年第1期40卷 44-52页

作者：王锐王淑文张一凡胡雅琪原琪温媛陈晓玲卢婷郑颖林志勇薛梦珍王雅琦夏芳奇朱蕾奇袁成福三峡大学基础医学院国家中医药管理局中药药理(肿瘤)科研三级实验室宜昌443002

目的探讨长链非编码RNA AW112010(lncRNA AW112010)是否可能通过miR-204/POU类同源盒2(POU2F2)信号通路改善衰老脂肪细胞的胰岛素抵抗。方法体内实验:将C57BL/6小鼠按体重分成年轻对照组(4月龄)、衰老模型组(18月龄);实时荧光定量PCR及W... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA AW112010(lncRNA AW112010)是否可能通过miR-204/POU类同源盒2(POU2F2)信号通路改善衰老脂肪细胞的胰岛素抵抗。方法体内实验:将C57BL/6小鼠按体重分成年轻对照组(4月龄)、衰老模型组(18月龄);实时荧光定量PCR及Western印迹法检测附睾脂肪组织中lncRNA AW112010、miR-204-5p、POU2F2、衰老相关指标(p16、p21)及胰岛素信号通路基因[胰岛素受体(INSR)、胰岛素受体底物1(IRS1)、磷脂酰肌醇激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)]的表达量。体外实验:用阿霉素诱导3T3-L1衰老脂肪细胞模型,β-gal染色观察细胞衰老,成功构建miR-204抑制剂及miR-204模拟物的小干扰RNA,转染3T3-L1脂肪细胞。结果实时荧光PCR与Western印迹结果表明,与年轻小鼠比较,衰老小鼠附睾脂肪组织中AW112010的表达水平增高,而miR-204-5p的表达水平降低;衰老小鼠附睾脂肪组织中POU2F2、p16、p21的表达水平增高,而INSR、IRS1、PI3K、GLUT4 mRNA及蛋白的表达水平降低。β-gal染色结果表明,阿霉素诱导的3T3-L1衰老脂肪细胞数量明显增多,且与对照组相比,阿霉素诱导的衰老脂肪细胞中AW112010、POU2F2、p16、p21的表达量增高,而miR-204-5p、INSR、IRS1、PI3K、GLUT4的表达量降低,培养基中葡萄糖的剩余量增多。与对照组相比,miR-204过表达后,衰老指标p16、p21及靶基因POU2F2的表达量降低;INSR、GLUT4的表达量增高。结论衰老小鼠脂肪细胞中上调的lncRNA AW112010可能通过靶向miR-204-5p/POU2F2/IRS1导致胰岛素抵抗。

关键词：衰老 LncRNA AW112010 miR-204-5p POU2F2 胰岛素抵抗

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青钱柳叶醇提物的化学成分研究（英文）

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Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences 2025年第3期 195-209页

作者：许海龙杨娇王天霞邓改改张友波三峡大学健康医学院三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室北京大学药学院天然药物学系天然药物及仿生药物全国重点实验室兰州理工大学甘肃省高校中藏药筛选评价及深加工省级重点实验室

本研究旨在对青钱柳叶醇提物的乙酸乙酯和正丁醇萃取部位的化学成分进行提取和鉴定。运用硅胶、D101大孔吸附树脂、SephadexLH-20等柱色谱和高效液相色谱分离和纯化青钱柳叶醇提物的化学成分,并运用核磁共振、高分辨质谱等谱学技术鉴定... 详细信息

本研究旨在对青钱柳叶醇提物的乙酸乙酯和正丁醇萃取部位的化学成分进行提取和鉴定。运用硅胶、D101大孔吸附树脂、SephadexLH-20等柱色谱和高效液相色谱分离和纯化青钱柳叶醇提物的化学成分,并运用核磁共振、高分辨质谱等谱学技术鉴定所得化合物的结构。从青钱柳叶醇提物的乙酸乙酯和正丁醇萃取部位分离得到黄酮及其苷类、糖类、香豆素和有机酸等类化合物28个,分别鉴定为山奈酚(1)、拟雌内酯(2)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(3)、绿原酸甲酯(4)、黄连醛碱(5)、五味子苷(6)、山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(7)、绿原酸乙酯(8)、槲皮素(9)、木犀草素(10)、原儿茶酸(11)、山奈酚-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖(12)、反式对羟基肉桂酸(13)、蔗糖(14)、彼西丹醇(15)、绿原酸(16)、吡哆醇(17)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(18)、山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(19)、异槲皮苷(20)、mururinA(21)、柑橘苷A(22)、苄基-6-O-α-L-阿拉伯呋喃糖基-β-D-吡喃葡萄糖苷(23)、(+)-(6S,9R)-9-O-β-D-吡喃葡萄糖苷-6-羟基-3-O-α-紫罗兰醇(24)、杨梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷(25)、蚱蜢酮(26)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(27)和3,5-O-二咖啡酰奎尼酸(28)。其中化合物2,5, 6, 15, 21, 22, 23, 24, 26和28均系首次从青钱柳叶中分离得到。

关键词：青钱柳叶化学成分醇提物乙酸乙酯正丁醇

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松节方提取物对炎症动物模型的抗炎作用及机制探讨

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天然产物研究与开发 2018年第2期30卷 304-309页

作者：莫宗成梅小利黄文涛吴思澜王敏黄崇刚重庆市中药研究院国家中医药管理局中药药理三级实验室重庆400065

该文旨在评价松节方提取物(SJF)的抗炎镇痛作用,尤其是对关节炎的抑制作用,并初步探讨其作用机制。采用二甲苯诱导的小鼠耳肿胀模型、醋酸诱导的小鼠疼痛模型、鸡II型胶原(CCII)诱导的大鼠关节炎模型,观察松节方提取物的体内抗炎镇痛活... 详细信息

该文旨在评价松节方提取物(SJF)的抗炎镇痛作用,尤其是对关节炎的抑制作用,并初步探讨其作用机制。采用二甲苯诱导的小鼠耳肿胀模型、醋酸诱导的小鼠疼痛模型、鸡II型胶原(CCII)诱导的大鼠关节炎模型,观察松节方提取物的体内抗炎镇痛活性和抗关节炎的作用,检测大鼠血清TNF-α、INF-γ、IL-10、IL-1β含量,观察大鼠踝关节组织病理学变化。结果表明松节方提取物可减轻上述模型的炎症及疼痛症状,抑制CCII致关节炎大鼠滑膜组织炎性细胞浸润和滑膜组织增生,能显著降低关节炎大鼠血清TNF-α、INF-γ、IL-1β含量,升高血清IL-10含量。说明松节方提取物具有较好的抗炎镇痛作用,可明显抑制CCII所致大鼠关节炎,降低其关节组织损伤程度,其机制可能与调节炎症因子表达相关。

关键词：关节炎松节方提取物抗炎机制

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斑马鱼环状RNA研究进展

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中国医学科学院学报 2022年第4期44卷 693-698页

作者：周春红卢子滨南方医科大学中医药学院国家中医药管理局科研三级实验室中药药理实验室广州510515

环状RNA(circRNA)是一类由前体线性RNA通过反向剪接方式形成的具有环状闭合结构的小分子RNA。其具有结构稳定、高度保守等生物学特征,在各种生物不同发育阶段的生理病理过程中均表现出重要的调控作用。模式动物斑马鱼具有可用于高通量... 详细信息

环状RNA(circRNA)是一类由前体线性RNA通过反向剪接方式形成的具有环状闭合结构的小分子RNA。其具有结构稳定、高度保守等生物学特征,在各种生物不同发育阶段的生理病理过程中均表现出重要的调控作用。模式动物斑马鱼具有可用于高通量药物筛选、成本低等特点,circRNA及与其相关的发育和炎症疾病可在斑马鱼体内展开更高效的研究。近年来,斑马鱼中的circRNA不断得到鉴定并表征。研究发现,circRNA在斑马鱼的发育进程及炎症反应中扮演着重要的角色。本文就circRNA的分类和特点、生物学功能以及斑马鱼circRNA的研究进展进行综述。

关键词：斑马鱼环状RNA 生物学功能

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五味子化学成分及抗2型糖尿病活性研究进展

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中草药 2019年第7期50卷 1739-1744页

作者：黄妍刘秀陶薇潘广涛梅志刚三峡大学医学院国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北宜昌443002

五味子为木兰科(Magnoliaceae)五味子属Schisandra Michx.植物,在我国东南部和东北三省分布广泛。五味子主要化学成分为木脂素类、挥发油类、多糖类和有机酸类等,临床常被用于治疗2型糖尿病,疗效显著。研究显示,五味子具有抗胰岛素抵抗... 详细信息

五味子为木兰科(Magnoliaceae)五味子属Schisandra Michx.植物,在我国东南部和东北三省分布广泛。五味子主要化学成分为木脂素类、挥发油类、多糖类和有机酸类等,临床常被用于治疗2型糖尿病,疗效显著。研究显示,五味子具有抗胰岛素抵抗、抗炎、抗细胞凋亡、抗氧化应激、抑制血管病变、保护血管内皮等作用,能较好地改善糖尿病及其并发症。对近40年国内外有关五味子化学成分及其抗2型糖尿病活性研究进展进行综述,为五味子治疗糖尿病相关药物的研发提供参考。

关键词：五味子木脂素 2型糖尿病胰岛素抵抗代谢综合征

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民族药蓝布正化学成分及药理作用研究进展

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中草药 2018年第1期49卷 233-238页

作者：陶薇王凯王金凤冯知涛梅志刚三峡大学医学院国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北宜昌443002

蓝布正为我国民间传统药物,常用于治疗头痛头晕、小儿惊风、高血压、腰腿疼痛、月经不调等疾病,然而其潜在的药理作用机制尚不明了。截至目前,蓝布正中已发现的化学成分主要有萜类(主要为单萜、倍半萜和三萜类)、鞣质类、苯丙素类等。... 详细信息

蓝布正为我国民间传统药物,常用于治疗头痛头晕、小儿惊风、高血压、腰腿疼痛、月经不调等疾病,然而其潜在的药理作用机制尚不明了。截至目前,蓝布正中已发现的化学成分主要有萜类(主要为单萜、倍半萜和三萜类)、鞣质类、苯丙素类等。研究显示,蓝布正具有抗凝血、抗高血压、抗炎、抗肿瘤和治疗缺血性疾病等多种药理作用。对近40年来国内外关于蓝布正的活性成分、药理作用的研究进展进行综述,为蓝布正临床合理推广应用与相关新药的研发提供参考。

关键词：蓝布正萜类鞣质类苯丙素类抗凝血活性抗高血压活性抗炎活性

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红杉醇对2型糖尿病大鼠肝脏炎症损伤的保护作用

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中国病理生理杂志 2013年第4期29卷 632-636页

作者：陈祥攀杨解人郝伟刘艳李先伟皖南医学院国家中医药管理局中药药理三级实验室安徽芜湖241002

目的:观察红杉醇对2型糖尿病大鼠肝脏炎症损伤的保护作用及其机制。方法:制备高脂高糖饮食加腹腔注射小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病大鼠肝脏炎症损伤模型。取造模成功大鼠35只,每天灌服不同剂量红杉醇(12.5、25和50... 详细信息

目的:观察红杉醇对2型糖尿病大鼠肝脏炎症损伤的保护作用及其机制。方法:制备高脂高糖饮食加腹腔注射小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病大鼠肝脏炎症损伤模型。取造模成功大鼠35只,每天灌服不同剂量红杉醇(12.5、25和50 mg/kg)1次,连续6周。末次给药后取血,测空腹血糖、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和白蛋白(ALB);取肝脏称湿重,计算肝脏指数,测定肝组织C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)含量,real-time PCR检测肝脏TNF-αmRNA含量,HE染色观察病理变化。结果:模型组大鼠红杉醇治疗6周后,空腹血糖显著下降;肝功能改善,血清ALT和AST活性明显降低,ALB含量明显增加;CRP含量明显减少;肝组织中TNF-αmRNA和TNF-α、IL-6含量明显降低;肝脏指数下降,光镜下可见肝细胞病理改变(水肿、点状或灶状坏死及炎症细胞浸润)均有不同程度的改善。结论:红杉醇对2型糖尿病肝脏炎症损伤具有保护作用,其机制可能与其抑制TNF-α和IL-6有关。

关键词：红杉醇糖尿病,2型糖尿病肝损伤细胞因子类大鼠

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黄芩素对肥胖模型大鼠减肥作用及机制的研究

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中药药理与临床 2015年第4期31卷 42-46页

作者：李恒华黄崇刚罗金萍张莉重庆市中药研究院国家中医药管理局中药药理三级实验室重庆400065

目的:探讨黄芩素的减肥作用及其对瘦素表达、β-肾上腺素受体的影响。方法:建立大鼠营养性肥胖模型,观察黄芩素给药4周对肥胖大鼠体重、脂肪湿重、脂肪细胞个数及直径(光镜下)、血清瘦素含量(ELISA法)以及脂肪细胞瘦素表达等指标的影响... 详细信息

目的:探讨黄芩素的减肥作用及其对瘦素表达、β-肾上腺素受体的影响。方法:建立大鼠营养性肥胖模型,观察黄芩素给药4周对肥胖大鼠体重、脂肪湿重、脂肪细胞个数及直径(光镜下)、血清瘦素含量(ELISA法)以及脂肪细胞瘦素表达等指标的影响,同时应用放射配基结合实验观察黄芩素与β-肾上腺素受体及β3肾上腺素受体的结合情况。结果:黄芩素(100 mg/kg)能明显降低肥胖大鼠体重、Lee's指数、脂肪重量和脂体系数以及血清瘦素水平,黄芩素镜下脂肪细胞个数明显增加,细胞直径明显减小,黄芩素(100 mg/kg和50 mg/kg)模型动物脂肪细胞瘦素表达明显降低。黄芩素与β肾上腺素受体结合的K值为80.36nmol/L,与β3肾上腺素受体结合的K值为35.11nmol/L。结论:黄芩素对营养性肥胖大鼠模型具有减肥作用,并对营养饲料诱导的瘦素抵抗状态具有显著的改善作用,黄芩素对β-肾上腺素受体及β3肾上腺素受体均具有一定的亲和力。

关键词：黄芩素减肥瘦素 β-肾上腺素受体

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大黄-桃仁药对调控子宫腺肌病在位内膜线粒体稳态的机制研究

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中草药 2022年第15期53卷 4709-4718页

作者：易永丽雷娅王坤付先芸蔡三金三峡大学医学院国家中医药管理局中药药理肿瘤科研三级实验室湖北宜昌443000

目的探索大黄-桃仁药对对子宫腺肌病(adenomyosisi,AM)在位内膜线粒体稳态的调控机制。方法同种异体垂体移植法构建AM小鼠模型,光镜及透射电镜(TEM)观察大黄-桃仁药对治疗前后子宫组织病理及超微结构改变;免疫荧光检测线粒体自噬通路P... 详细信息

目的探索大黄-桃仁药对对子宫腺肌病(adenomyosisi,AM)在位内膜线粒体稳态的调控机制。方法同种异体垂体移植法构建AM小鼠模型,光镜及透射电镜(TEM)观察大黄-桃仁药对治疗前后子宫组织病理及超微结构改变;免疫荧光检测线粒体自噬通路PTEN诱导的推定激酶1(PTEN-induced putative kinase 1,PINK1)/帕金森蛋白(Parkinson protein,Parkin)蛋白表达。培养人永生化子宫内膜异位症在位内膜间质细胞hEM15A,观察大黄-桃仁药对处理前后细胞增殖能力、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、抗氧化酶系、线粒体膜电位、线粒体自噬小体、线粒体自噬蛋白的变化。结果病理切片显示,经大黄-桃仁药对治疗后,中、重度的浸润比例较模型组减少。TEM观察发现模型组子宫内膜上皮细胞及间质细胞线粒体肿胀、线粒体脊消失,部分形成线粒体自噬体;经大黄-桃仁药对治疗后子宫内膜上皮细胞及间质细胞线粒体数量增加,无明显肿胀、线粒体脊清晰可见。与对照组比较,造模后子宫内膜层PINK1、Parkin表达显著上调(P<0.001);经大黄-桃仁药对治疗后,PINK1、Parkin表达显著下降(P<0.05、0.001)。体外实验结果表明,hEM15A细胞线粒体膜电位下降,ROS呈较高水平;经大黄-桃仁药对处理后,hEM15A细胞的增殖及侵袭能力下降(P<0.05、0.001),线粒体膜电位升高,ROS水平下降(P<0.001),抗氧化酶系统Cu-Zn超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、Mn-SOD和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性上调(P<0.01、0.001),氧化损伤指标丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平下调(P<0.01)。hEM15A细胞线粒体与溶酶体之间存在较强的共定位关系,经大黄-桃仁药对处理后,线粒体与溶酶体共定位的数量显著减少(P<0.05),PINK1、Parkin及其下游视神经蛋白(Optineurin,OPTIN)、核点蛋白52(nuclear dot protein 52,NDP52)经大黄-桃仁药对处理后显著下调(P<0.01、0.001)。结论大黄-桃仁药对可通过改善线粒体抗氧化酶系、调控线粒体自噬水平、恢复线粒体膜电位等多途径维护AM在位内膜细胞乏氧线粒体稳态,从而减轻氧化应激损伤。

关键词：大黄-桃仁药对子宫腺肌病在位内膜线粒体稳态线粒体自噬氧化应激

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基于斑马鱼炎症模型的凉膈散及其组分甘草不同极性部位的抗炎活性评价及作用机制

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中国实验方剂学杂志 2022年第20期28卷 17-26页

作者：余景滔周红玲刘俊珊许霓珊全景羽卢子滨刘东依曹惠慧余林中南方医科大学中医药学院国家中医药管理局科研三级实验室中药药理实验室中药制剂实验室广州510515

目的:采用脂多糖(LPS)诱导斑马鱼炎症模型,通过浸泡给药方式,评价凉膈散及其组分甘草不同极性部位的抗LPS活性。方法:利用相似相溶原理分离得到凉膈散及其组分甘草的不同极性部位,随机选择受精后3 d的斑马鱼,暴露于不同浓度的药物提取物... 详细信息

目的:采用脂多糖(LPS)诱导斑马鱼炎症模型,通过浸泡给药方式,评价凉膈散及其组分甘草不同极性部位的抗LPS活性。方法:利用相似相溶原理分离得到凉膈散及其组分甘草的不同极性部位,随机选择受精后3 d的斑马鱼,暴露于不同浓度的药物提取物中,进行为期24、48、72 h的毒性观察;斑马鱼卵黄囊显微注射0.5 g·L^(-1)LPS造模,浸泡给予不同浓度的凉膈散及甘草提取物,统计72 h内斑马鱼的生存数目并在显微镜下观察12 h时斑马鱼卵黄囊中性粒细胞的聚集情况;苏木素-伊红(HE)染色对LPS显微注射斑马鱼卵黄囊进行组织病理学分析;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)进一步探讨凉膈散及甘草体内抗炎作用及其可能的机制。结果:凉膈散及甘草提取物毒性随着极性升高而降低,药物的毒性大小依次为石油醚部位>乙酸乙酯部位>正丁醇部位>水部位;与LPS模型组比较,各提取物均能提高LPS斑马鱼炎症模型的动物生存率,抑制斑马鱼卵黄囊中性粒细胞的聚集及炎症细胞浸润,其中凉膈散水部位与甘草乙酸乙酯部位的效果最为显著(P<0.01);此外,与LPS模型组比较,凉膈散水部位与甘草乙酸乙酯部位降低了斑马鱼炎症模型中促炎细胞因子白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA表达,抑制了LPS诱导的Toll样受体4(TLR4)和核转录因子-κB(NF-κB)的上调(P<0.01)。结论:凉膈散及其组分甘草的不同提取部位对LPS炎症均有保护作用,其机制可能与抑制TLR4和NF-κB信号通路相关;在斑马鱼模型中,浸泡给药方式适用于中药的抗LPS活性筛选,可用于单味中药、复方及其不同提取部位的抗内毒素活性评价。

关键词：凉膈散甘草斑马鱼内毒素炎症

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