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第八届全国免疫学学术大会

作者：李霞王丽赵向忠周宪宾郭钰琪张巧凤姜国胜姚成芳山东省医学科学院基础医学研究所山东省医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室山东省罕少见病重点实验室卫生部生物技术药物重点实验室国家中医药管理局免疫药理(三级)实验室

研究背景:米非司酮药物流产(药流)是终止非意愿早期妊娠的重要方法,但药流后异常子宫出血是临床常见的药流副反应,严重影影响患者健康及药流的接受性。由于药流后异常子宫出血发病机制尚未完全明确,因此缺乏疗效满意的治疗方案,尤其是... 详细信息

研究背景:米非司酮药物流产(药流)是终止非意愿早期妊娠的重要方法,但药流后异常子宫出血是临床常见的药流副反应,严重影影响患者健康及药流的接受性。由于药流后异常子宫出血发病机制尚未完全明确,因此缺乏疗效满意的治疗方案,尤其是缺乏特异性的靶向治疗手段。研究发现米非司酮能诱导Th17/Treg亚群向Th17偏移,诱导母胎免疫排斥而导致流产;因此,推测Th17/Treg偏移状态与药流后子宫出血量密切相关,靶向诱导Th17/Treg偏移有可能有效减轻药流后子宫出血。宫清方秉承"产后多虚多瘀"病机理论,由益母草、马齿苋、蒲黄、当归等药物组成,具有益气养血,清热化瘀功效,临床观察证实该方能明显减少药流后子宫出血量,但其治疗靶点与机制尚不明确。本研究通过建立药流出血小鼠模型,重点探讨Th17/Treg亚群偏移与药流后子宫出血量之间的相关性及宫清方靶向诱导Th17/Treg偏移减轻药流出血的作用机制,为临床治疗提供新的靶点与方法。目的:探讨米非司酮药物流产中Th17/Treg亚群偏移与子宫出血量的相关性及宫清方诱导Th17/Treg亚群偏移减轻药物流产后子宫出血的作用与机制。方法:孕小鼠30只,随机分为正常妊娠组、米非司酮大(1.5 mg·kg-1·d-1×3d,ig)、小剂量组(0.88mg·kg-1·d-1×3d,ig),每组10只,改良碱性正铁血红素法检测子宫出血量,流式细胞术双染色法检测子宫组织Th17(CD3+CD4+IL-17A+)、Treg(CD4+CD25+Foxp3+)亚群比例。孕小鼠40只,随机分为米非司酮组(1.5 mg·kg-1·d-1×3d,ig)和宫清大、中、小剂量组(米非司酮1.5 mg·kg-1·d-1×3d+宫清方308.16、154.08、77.04 kg-1·d-1×5 d,ig),每组10只,检测子宫出血量及子宫组织Th17、Treg亚群比例, RT-PCR法检测子宫组织白细胞介素-17A(IL-17A)、白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)mRNA转录水平。结果:药物流产小鼠子宫出血量与Th17亚群比例、Th17/Treg比值呈负相关(r=–0.700、r=–0.867,P<0.05),与Treg亚群比例呈正相关(r=0.554,P<0.05)。宫清方作用后小鼠子宫出血量明显减少;Th17亚群比例升高,Treg亚群比例降低,Th17/Treg比值升高(均P<0.05);IL-17A mRNA表达升高,IL-10、TGF-βmRNA表达降低,均P<0.05。结论:米非司酮药物流产中Th17/Treg亚群偏移与子宫出血量密切相关,宫清方优势诱导Th17亚群偏移,进而减轻子宫出血。

关键词：宫清方药物流产子宫出血 T淋巴细胞亚群 Th17 Treg

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老鹳草提取物对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

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中国新药杂志 2011年第16期20卷 1554-1557页

作者：丁云录柳怀玉李庆杰陈声武吉林天药科技有限公司国家中医药管理局三级中药药理实验室吉林大学实验动物中心

目的:考察老鹳草提取物对免疫性肝损伤小鼠的保护作用。方法:分别采用卡介苗(BCG)+脂多糖(LPS)、刀豆蛋白A(ConA)诱导建立小鼠免疫性肝损伤模型,灌胃给予老鹳草提取物(100,200,***-1),观察小鼠血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基... 详细信息

目的:考察老鹳草提取物对免疫性肝损伤小鼠的保护作用。方法:分别采用卡介苗(BCG)+脂多糖(LPS)、刀豆蛋白A(ConA)诱导建立小鼠免疫性肝损伤模型,灌胃给予老鹳草提取物(100,200,***-1),观察小鼠血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性及血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、细胞因子γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)含量变化;检测肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;进行肝脏病理组织检查。结果:不同剂量老鹳草提取物均可明显降低小鼠血清中AST,ALT活性及肝组织匀浆MDA含量(P<0.05或0.01),并能使降低的SOD活性升高;中、高剂量老鹳草提取物(200,400 ***-1)可不同程度降低血清中IFN-γ和IL-4含量及LDH活性(P<0.05)。不同剂量老鹳草提取物可使血清蛋白含量维持正常比例,肝组织损伤均有不同程度减轻。结论:老鹳草提取物对小鼠免疫性肝损伤具有一定的保护作用。

关键词：老鹳草提取物免疫性肝损伤卡介苗脂多糖刀豆蛋白A

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复方贞术调脂胶囊对动脉粥样硬化兔脂质过氧化及内皮功能的影响

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中国中西医结合杂志 2011年第6期31卷 816-819页

作者：韦燕萍江涛唐春萍杨超燕陈芳超姚红霞王亮郭姣广东药学院中药药理教研室广州510062 广东药学院实验动物中心广州510063 国家中医药管理局高脂血症/调肝降脂重点研究室国家中医药管理局脂代谢三级实验室广州510006

目的观察复方贞术调脂胶囊(Modified Zhenzhu Tiaozhi Capsule,MZTC)抗兔动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的作用并探讨其可能机制。方法取50只家兔分为正常组、模型组、辛伐他汀组(3 mg/kg)、MZTC高剂量组(1.6 g生药/kg)、MZTC低剂量... 详细信息

目的观察复方贞术调脂胶囊(Modified Zhenzhu Tiaozhi Capsule,MZTC)抗兔动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的作用并探讨其可能机制。方法取50只家兔分为正常组、模型组、辛伐他汀组(3 mg/kg)、MZTC高剂量组(1.6 g生药/kg)、MZTC低剂量组(0.8 g生药/kg),每组10只。采用高脂饮食法建立兔AS模型,药物组在高脂饮食的基础上每天给予相应的药物,连续喂养12周。检测血脂水平、血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和NO水平,测定主动脉内膜斑块面积比,观察主动脉病理形态学变化。结果 MZTC组血清TC、TG、LDL-C、MDA水平及动脉粥样硬化指数(AI)较模型组显著降低(P<0.05,P<0.01),HDL-C、SOD和NO水平明显升高(P<0.05,P<0.01);但MZTC组的TC、TG、LDL-C水平和AI明显高于辛伐他汀组(P<0.01),其他指标差异无统计学意义。各用药组主动脉内膜斑块面积占内膜总面积比均显著低于模型组(P<0.01)。光镜观察结果显示,各给药组主动脉病变程度均明显减轻。结论 MZ-TC能抑制AS斑块的形成和发展,其作用机制可能与其调节脂质代谢、抗脂质过氧化和改善内皮功能有关。

关键词：复方贞术调脂胶囊动脉粥样硬化脂质过氧化内皮功能

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CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型肝纤维化逆转与MAPK信号通路的研究

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中国药理学通报 2011年第6期27卷 809-814页

作者：李政通李俊黄成李浩章圣鹏黄艳陶辉安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级重点实验室国家中医药管理局中医药三级实验室“中药药理实验室”安徽合肥230032

目的通过检测CCl4诱导肝纤维化大鼠逆转恢复各时期MAPK信号通路蛋白动态变化,研究其在肝纤维化恢复期可能的调控作用。方法采用CCl4皮下注射SD大鼠12周,复制肝纤维化模型,分别于注射12周,停药后2、4、6、8周取材。通过检测各组ALT、AST... 详细信息

目的通过检测CCl4诱导肝纤维化大鼠逆转恢复各时期MAPK信号通路蛋白动态变化,研究其在肝纤维化恢复期可能的调控作用。方法采用CCl4皮下注射SD大鼠12周,复制肝纤维化模型,分别于注射12周,停药后2、4、6、8周取材。通过检测各组ALT、AST、Hyp、LN、PⅢNP的含量变化和肝脏病理组织切片Masson染色,加以验证。采用West-ern blot法检测各组肝组织中MAPK通路蛋白表达。结果 ALT、AST、Hyp、LN、PⅢNP等反映肝损伤和纤维化进程的指标在第12周最高,即模型组最高,并且随着肝纤维化逆转而含量逐渐降低,Masson染色结果与之一致,表明大鼠肝纤维化模型期与各恢复期模型建立完成。p-ERK1/2在模型组表达明显降低,与正常组相比差异有显著性(P<0.01),恢复4周表达明显升高,与模型组相比差异有显著性(P<0.01),以后逐渐降低。p-JNK1/2在模型组表达明显降低(P<0.01),恢复期逐渐升高(P<0.05)。p-p38在模型组表达明显升高(P<0.01),恢复期逐渐降低(P<0.05)。p-ERK/ERK与Hyp相关系数r=-0.46,P=0.003;p-JNK/JNK与Hyp相关系数r=-0.53,P=0.0004;p-p38/p38与Hyp相关系数r=0.81,P=0.0001。结论 MAPK信号通路中的ERK、JNK和p38信号通路在肝纤维化逆转中发挥重要作用。

关键词：肝纤维化有丝分裂原活化蛋白激酶细胞外信号调节激酶 c-Jun氨基末端激酶 p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路

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牡荆素对大鼠实验性心肌缺血损伤的保护作用及其机制

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中草药 2011年第7期42卷 1378-1383页

作者：董六一邵旭江勤陈志武抗炎免疫药理学省部共建教育部重点实验室国家中医药管理局中药药理三级实验室安徽医科大学药理学教研室安徽合肥230032 合肥七星医药科技有限公司安徽合肥230088

目的研究牡荆素对实验性心肌缺血大鼠心肌损伤的保护作用及对其能量代谢的影响。方法采用在体结扎大鼠心脏冠状动脉前降支法及舌下iv给予垂体后叶素(Pit)法建立大鼠心肌缺血损伤模型。在体大鼠缺血再灌注模型上,TTC染色法检测大鼠心肌... 详细信息

目的研究牡荆素对实验性心肌缺血大鼠心肌损伤的保护作用及对其能量代谢的影响。方法采用在体结扎大鼠心脏冠状动脉前降支法及舌下iv给予垂体后叶素(Pit)法建立大鼠心肌缺血损伤模型。在体大鼠缺血再灌注模型上,TTC染色法检测大鼠心肌梗死面积,并测定大鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性;Pit致大鼠心肌缺血损伤模型上,检测大鼠心电图(ECG)、血清中LDH、CK、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及大鼠心肌组织中ATP酶活性,并观察大鼠心肌组织病理学改变。结果牡荆素6、3、1.5 mg/kg可显著降低大鼠心肌梗死面积(P<0.05、0.01),并能不同程度地降低血清中LDH和CK的活性。注射Pit后,模型组大鼠各时间点ECG的ST段变化值与对照组比较显著升高(P<0.01);葛根素与牡荆素(6、3 mg/kg)能显著降低Pit致大鼠心肌缺血升高的ST段(P<0.05、0.01)。牡荆素(6、3 mg/kg)降低血清中LDH和CK的活性(P<0.05、0.01),同时升高血清中SOD及GSH-Px的活性(P<0.05、0.01);牡荆素6、3、1.5 mg/kg和葛根素能明显升高缺血心肌组织中Na+,K+-ATP酶,Ca2+,Mg2+-ATP酶及总ATP酶的活性(P<0.05、0.01)。牡荆素(6、3 mg/kg)可明显改善缺血心肌的病理损伤程度。结论牡荆素对大鼠急性心肌缺血损伤具有明显保护作用,其作用与提高心肌组织抗氧化能力,改善心肌能量代谢有关。

关键词：牡荆素心肌缺血能量代谢垂体后叶素抗氧化能力

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补阳还五汤有效部位对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制

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中草药 2011年第1期42卷 114-117页

作者：吴常青汪春彦邵旭董六一抗炎免疫药理学省部共建教育部重点实验室国家中医药管理局中药药理三级实验室安徽医科大学药理学教研室安徽合肥230032 合肥七星医药科技有限公司安徽合肥230088

目的研究补阳还五汤有效部位(总苷和黄酮)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法采用改良的线栓法,建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)脑缺血再灌注模型。将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、银杏叶提取物(100 mg/kg)组和... 详细信息

目的研究补阳还五汤有效部位(总苷和黄酮)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法采用改良的线栓法,建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)脑缺血再灌注模型。将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、银杏叶提取物(100 mg/kg)组和补阳还五汤有效部位高、中、低剂量(200、100、50 mg/kg)组。缺血再灌注24 h后进行神经功能缺失症状评分;TTC染色法检测脑梗死体积;腹主动脉取血并离心,检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)活性和丙二醛(MDA)水平,ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平。结果与模型组相比,补阳还五汤有效部位能明显改善脑缺血再灌注大鼠的神经功能障碍,减少大鼠脑组织梗死体积,显著抑制LDH活性,降低MDA和TNF-α、IL-1β、IL-6水平(P<0.01、0.05)。结论补阳还五汤有效部位对大鼠脑缺血再灌注损伤具有明显保护作用,其机制可能与抑制炎症因子的分泌和表达及减轻脑组织的炎症反应有关。

关键词：补阳还五汤脑缺血再灌注损伤肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-1β 白细胞介素-6

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金荞麦对克雷伯杆菌肺炎大鼠肺组织中TLR2／4，MyD88 mRNA和IκB-α表达的影响

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中国中药杂志 2011年第2期36卷 200-204页

作者：董六一汪春彦吴常青江勤张志芬抗炎免疫药理学省部共建教育部重点实验室国家中医药管理局中药药理三级实验室安徽医科大学药理学教研室安徽合肥230032 南通精华制药股份有限公司江苏南通226005

目的:研究金荞麦对克雷伯杆菌肺炎大鼠肺组织损伤的保护作用机制。方法:复制克雷伯杆菌肺炎大鼠模型。随机将雄性SD大鼠分成对照组、模型组、金荞麦高、中、低剂量组(6,3,1.5 ***-1)、左氧氟沙星(25 ***-1)组、金荞麦(***-1)+左氧氟沙星... 详细信息

目的:研究金荞麦对克雷伯杆菌肺炎大鼠肺组织损伤的保护作用机制。方法:复制克雷伯杆菌肺炎大鼠模型。随机将雄性SD大鼠分成对照组、模型组、金荞麦高、中、低剂量组(6,3,1.5 ***-1)、左氧氟沙星(25 ***-1)组、金荞麦(***-1)+左氧氟沙星组(25 ***-1)。测大鼠肺组织匀浆中IL-1β,ICAM-1,INF-γ;电镜观察肺组织的超微结构改变,RT-PCR检测肺组织TLR2/4,MyD88 mRNA表达;采用Western Blot方法分析IκB-α的表达。结果:模型组大鼠的肺脏组织损伤明显,模型组大鼠肺组织匀浆中IL-1β,ICAM-1及INF-γ含量升高(P<0.05或P<0.01),模型组大鼠肺组织中TLR2/4,MyD88 mRNA和IκB-α蛋白异常高表达(P<0.05或P<0.01)。与模型组相比,金荞麦各剂量均能明显降低肺组织匀浆中IL-1β和ICAM-1(P<0.05或P<0.01),金荞麦高剂量可明显降低肺组织匀浆中INF-γ含量(P<0.05),金荞麦高、中剂量可明显降低肺组织中TLR2/4,MyD88 mRNA和IκB-α的表达。结论:TLR2/4,MyD88 mRNA和IκB-α蛋白的表达上调参与了肺炎大鼠肺脏组织的损伤,金荞麦可通过下调其表达来保护肺炎大鼠肺组织的损伤作用。

关键词：金荞麦肺炎细胞因子大鼠

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橙皮苷抗大鼠肝纤维化作用的实验研究

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安徽医科大学学报 2011年第4期46卷 358-361页

作者：吴芙蓉李俊任丹阳陶辉贾丽莎安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级重点实验室国家中医药管理局中医药科研三级实验室“中药药理实验室”合肥230032

目的观察橙皮苷(HDN)抗大鼠肝纤维化作用。方法 60只SD大鼠,随机分为正常组、模型组、HDN(50、100、200 mg/kg)3个剂量组和秋水仙碱(0.1 mg/kg)组,每组10只。除正常组外,其余各组采用50%四氯化碳(CCl4)皮下注射,每周2次,连续12周诱导肝... 详细信息

目的观察橙皮苷(HDN)抗大鼠肝纤维化作用。方法 60只SD大鼠,随机分为正常组、模型组、HDN(50、100、200 mg/kg)3个剂量组和秋水仙碱(0.1 mg/kg)组,每组10只。除正常组外,其余各组采用50%四氯化碳(CCl4)皮下注射,每周2次,连续12周诱导肝纤维化大鼠模型。于造模第7周起,治疗组分别灌胃给予HDN(50、100、200 mg/kg)、秋水仙碱(0.1 mg/kg),正常组和模型组给予等容量生理盐水,共6周。实验结束后,股动脉采血,测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原氨端肽(PⅢNP)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、转化生长因子(TGF)-β1和肝匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量;肝组织HE染色,RT-PCR法测定肝组织中TGF-β1 mRNA的表达。结果 HDN各剂量组均能明显降低肝纤维化大鼠血清中ALT、AST、HA、LN、PⅢNP、CIV、TGF-β1和肝组织中MDA含量,升高SOD水平,抑制肝组织中TGF-β1 mRNA的表达;同时,病理组织学检查结果显示HDN各剂量组大鼠肝纤维化增生程度明显减轻。结论 HDN对CCl4诱导的肝纤维化大鼠有一定的保护作用,其机制可能与抗机体脂质过氧化、调节TGF-β1的产生有关。

关键词：肝硬化橙皮苷大鼠转化生长因子β1 脂质过氧化作用

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金荞麦对克雷伯杆菌肺炎大鼠心肌损伤中炎症细胞因子表达的影响

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安徽医科大学学报 2011年第1期46卷 44-48页

作者：汪春彦吴常青江勤董六一安徽医科大学药理学教研室抗炎免疫药理学省部共建教育部重点实验室国家中医药管理局中药药理三级实验室合肥230032

目的研究金荞麦对克雷伯杆菌肺炎大鼠心肌组织损伤的保护作用机制。方法随机将♂SD大鼠分成正常对照组、模型组、金荞麦(6、3、1.5g生药/kg)3个剂量组、左氧氟沙星(25mg/kg)组。计数外周血中白细胞(WBC)和中性粒细胞(PMN),观察肺和心肌... 详细信息

目的研究金荞麦对克雷伯杆菌肺炎大鼠心肌组织损伤的保护作用机制。方法随机将♂SD大鼠分成正常对照组、模型组、金荞麦(6、3、1.5g生药/kg)3个剂量组、左氧氟沙星(25mg/kg)组。计数外周血中白细胞(WBC)和中性粒细胞(PMN),观察肺和心肌组织的病理改变,免疫组化检测大鼠心肌组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及细胞黏附因子-1(ICAM-1)蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠外周血中的WBC和PMN明显升高,肺脏和心肌组织损伤明显,并且模型组大鼠心肌组织中TNF-α和ICAM-1蛋白表达显著增强(P<0.01)。与模型组比较,金荞麦组和左氧氟沙星组大鼠外周血中的WBC和PMN明显降低,心肌组织损伤明显改善,大鼠心肌组织中TNF-α和ICAM-1蛋白表达明显减弱(P<0.05或P<0.01)。结论 TNF-α和ICAM-1蛋白表达上调参与了肺炎大鼠心肌组织的损伤,金荞麦可通过下调其表达来保护肺炎大鼠心肌组织的损伤作用。

关键词：克雷伯雷肺炎肿瘤坏死因子α 细胞间黏附分子-1 金荞麦

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地塞米松和淀粉样β蛋白片段25-35对PC12细胞损伤和凋亡的影响

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中国药理学与毒理学杂志 2011年第5期25卷 430-435页

作者：李维祖张文李侠尹艳艳李卫平安徽医科大学药理学教研室抗炎免疫药理学省部共建教育部重点实验室国家中医药管理局中药药理三级实验室安徽合肥230032 皖南医学院弋矶山医院药剂科安徽芜湖230000 安庆医药高等专科学校安徽安庆246003

目的探讨地塞米松(DEX)和淀粉样β蛋白片段25-35(Aβ25-35)联合作用对PC12细胞损伤和凋亡的影响。方法采用单独或联合应用DEX 0.1～10μmol.L-1和Aβ25-35 1～5μmol.L-1作用PC12细胞24 h,MTT法测定细胞活力;膜联蛋白-Ⅴ,PI双染流式细... 详细信息

目的探讨地塞米松(DEX)和淀粉样β蛋白片段25-35(Aβ25-35)联合作用对PC12细胞损伤和凋亡的影响。方法采用单独或联合应用DEX 0.1～10μmol.L-1和Aβ25-35 1～5μmol.L-1作用PC12细胞24 h,MTT法测定细胞活力;膜联蛋白-Ⅴ,PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率,PI单染流式细胞仪检测细胞凋亡峰;逆转录-PCR检测胱天蛋白酶3 mRNA的表达水平。结果 MTT结果显示,与正常对照组相比,DEX 5和10μmol.L-1,Aβ25-35 1,5和10μmol.L-1,DEX 5+Aβ25-35 1,5和10μmol.L-1及DEX 10+Aβ25-35 5,10μmol.L-1组均可明显降低PC12细胞存活率,而DEX联合Aβ25-35能明显减少PC12细胞数(P<0.01)。流式细胞仪结果显示,DEX 5μmol.L-1和Aβ25-35 1μmol.L-1单独作用对PC12细胞凋亡率和亚二倍体凋亡峰有一定的增加作用(P<0.05),两者联合作用能明显增加PC12细胞早期和中晚期凋亡率,增加亚二倍体凋亡峰(P<0.01);RT-PCR结果显示,DEX 5μmol.L-1和Aβ25-35 1μmol.L-1单独作用对PC12细胞胱天蛋白酶3 mRNA的表达水平没有明显影响,它们联合作用能明显增加PC12细胞胱天蛋白酶3mRNA的表达水平(P<0.05)。结论 DEX和Aβ25-35联合作用能明显增加对PC12细胞的损伤,促进胱天蛋白酶3 mRNA表达,诱导PC12细胞凋亡。

关键词：地塞米松淀粉样β蛋白阿尔茨海默病细胞凋亡

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