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淫羊藿苷通过调节mTORC1和mTORC2平衡改善衰老所致小鼠睾丸支持细胞紧密连接损伤

中国药理学通报 2025年

作者：程窈婷张长城付国庆王坦毛剑敏孙建明赵海霞三峡大学国家中医药管理局中医药理科研三级实验室三峡大学基础医学院三峡大学健康医学院上海中医药大学附属第七人民医院

目的探究淫羊藿苷对自然衰老小鼠睾丸支持细胞紧密连接损伤的保护作用及机制。方法将15月龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为衰老模型组、淫羊藿苷低剂量(5mg·kg-1)和高剂量(20mg·kg-1)给药组，另设1月龄小鼠为青年对照组，10只/组... 详细信息

目的探究淫羊藿苷对自然衰老小鼠睾丸支持细胞紧密连接损伤的保护作用及机制。方法将15月龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为衰老模型组、淫羊藿苷低剂量(5mg·kg-1)和高剂量(20mg·kg-1)给药组，另设1月龄小鼠为青年对照组，10只/组。青年对照组与衰老模型组小鼠接受0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃作为溶媒对照，淫羊藿苷给药组小鼠则分别接受不同浓度淫羊藿苷灌胃，连续给药3个月后，检测小鼠睾丸和附睾重量、脏器指数、精子活率和浓度，HE染色观察睾丸组织形态，电镜观察睾丸支持细胞紧密连接超微结构，Westernblot检测睾丸支持细胞紧密连接相关蛋白ZO-1、Occludin和Claudin11表达水平，免疫荧光检测睾丸ZO-1、Occludin、Raptor、Rictor、p-70S6K和p-rps6定位和表达。结果与衰老模型组相比，淫羊藿苷可明显增加衰老小鼠睾丸重量、睾丸指数、附睾指数，提高精子活率和浓度，改善睾丸组织形态及紧密连接超微结构损伤。Westernblot结果显示，淫羊藿苷上调ZO-1和Occludin表达，但对Claudin11的表达无显著影响。免疫荧光结果显示，淫羊藿苷能上调ZO-1、Occludin及Rictord的表达，下调p-70S6K、p-rps6及Raptor的表达。结论淫羊藿苷可改善自然衰老小鼠睾丸支持细胞紧密连接损伤，其机制可能与恢复mTORC1和mTORC2的平衡有关。

关键词：淫羊藿苷衰老睾丸支持细胞紧密连接功能 mTORC1和mTORC2平衡

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基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS技术的竹节参提取物血清药物化学研究

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中国中药杂志 2024年第23期49卷 6490-6499页

作者：温媛刘畅原琪王锐李雪晴袁丁袁成福何毓敏三峡大学国家中医药管理局药理科研三级实验室湖北宜昌443002 三峡大学健康医学院湖北宜昌443002 三峡大学基础医学院湖北宜昌443002

该研究运用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)技术对竹节参提取物及其入血成分进行分析。采用Waters UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈为流动相,梯度... 详细信息

该研究运用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)技术对竹节参提取物及其入血成分进行分析。采用Waters UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈为流动相,梯度洗脱,电喷雾离子源正、负离子模式下得到高分辨多级质谱数据后与对照品保留时间、高分辨精确相对分子质量、二级碎片信息及相关文献比对,阐明竹节参提取物化学成分。通过大鼠灌胃给予竹节参提取物后腹主动脉取血分离血清,扫描鉴定入血成分。最终在竹节参提取物中检测出43个化学成分,包括22个三萜皂苷类、9个氨基酸类、5个多糖类、2个挥发油类、5个核苷类。在竹节参提取物含药血清中检测出18个入血成分,包括10个原型成分、6个代谢产物和2个未知成分。该研究分析了竹节参提取物及入血成分,为明确竹节参的药效物质基础提供线索。

关键词：竹节参提取物血清药物化学原型成分代谢产物 UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS

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淫羊藿苷通过激活ATF6/c-fos信号通路改善自然衰老大鼠睾丸支持细胞功能减退的研究

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中国药学杂志 2022年第23期57卷 2004-2012页

作者：朱凯丽张长城刘尚雨赵雪怡邬小平袁丁赵海霞三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北宜昌443002 三峡大学医学院湖北宜昌443002

目的探究淫羊藿苷对自然衰老大鼠睾丸支持细胞(Sertoli细胞)功能减退的改善作用及可能的作用机制。方法将SPF级Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠按体重随机分成青年对照组(2月龄)、衰老模型组(17月龄)、淫羊藿苷低和高剂量组(2、6 mg·kg... 详细信息

目的探究淫羊藿苷对自然衰老大鼠睾丸支持细胞(Sertoli细胞)功能减退的改善作用及可能的作用机制。方法将SPF级Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠按体重随机分成青年对照组(2月龄)、衰老模型组(17月龄)、淫羊藿苷低和高剂量组(2、6 mg·kg^(-1),17月龄),各组大鼠分别给予普通饲料或含药饲料持续喂养4个月。苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠睾丸组织形态学改变。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠睾丸组织闭锁小带蛋白1(ZO-1)、闭锁蛋白(occludin)、β-连环蛋白(β-catenin)、早幼粒细胞白血病锌指蛋白(PLZF)、骨形成蛋白4(BMP4)、激活转录因子6(ATF6)和c-fos的蛋白表达和定位。结果HE染色结果发现,淫羊藿苷可明显改善自然衰老大鼠睾丸组织形态学变化。Western blot结果显示,与青年对照组相比,衰老模型组大鼠睾丸组织中ZO-1、occludin、β-catenin、PLZF和BMP4蛋白表达水平均显著下降,而淫羊藿苷可显著上调衰老大鼠睾丸组织中上述蛋白的表达水平。免疫荧光结果显示,与衰老模型组相比,淫羊藿苷能明显上调衰老大鼠睾丸Sertoli细胞中occludin和β-catenin以及通路相关指标ATF6和c-fos蛋白表达水平。结论淫羊藿苷可减轻衰老所致大鼠睾丸Sertoli细胞功能减退,机制可能与激活Sertoli细胞ATF6/c-fos信号通路有关。

关键词：淫羊藿苷激活转录因子6/转录因子c-fos通路衰老睾丸支持细胞血睾屏障

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竹节参总皂苷减轻高脂饮食诱导的小鼠睾丸支持细胞连接功能损伤

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南方医科大学学报 2023年第7期43卷 1145-1154页

作者：周本文张长城邓何陈思敏常言语杨焱娜付国庆袁丁赵海霞三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北宜昌443002 三峡大学基础医学院湖北宜昌443002 三峡大学健康医学院湖北宜昌443002

目的探究竹节参总皂苷(TSPJ)对高脂饮食诱导的小鼠睾丸支持细胞功能损伤的保护作用及机制。方法将40只C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常饮食组、高脂饮食组、TSPJ低剂量(25 mg/kg)组和TSPJ高剂量(75 mg/kg)组,10只/组。正常饮食组给予普通... 详细信息

目的探究竹节参总皂苷(TSPJ)对高脂饮食诱导的小鼠睾丸支持细胞功能损伤的保护作用及机制。方法将40只C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常饮食组、高脂饮食组、TSPJ低剂量(25 mg/kg)组和TSPJ高剂量(75 mg/kg)组,10只/组。正常饮食组给予普通饲料喂养,其余组均给予高脂饲料喂养,TSPJ连续灌胃给药5月,小鼠称重处死,取出睾丸和附睾组织称重并计算其指数;取附睾组织进行精液分析;HE染色观察小鼠睾丸组织形态变化,测量统计生精上皮厚度与生精小管直径;Western blot检测睾丸支持细胞紧密连接功能蛋白ZO-1、Occludin和Claudin11以及外质特化功能蛋白N-cadherin、E-cadherin和β-catenin的表达水平;免疫荧光法检测睾丸组织中ZO-1和β-catenin蛋白定位及表达;免疫荧光双标法检测睾丸支持细胞中LC3B、p-AKT和p-mTOR表达变化。结果与高脂饮食组相比,TSPJ能明显减轻高脂饮食小鼠体质量(P<0.001),增加睾丸和附睾指数(P<0.05,P<0.01),提高精子浓度与精子活率(P<0.05,P<0.01),改善睾丸组织形态异常,增加生精上皮厚度(P<0.05,P<0.001),但对生精小管直径无明显影响。Western blot结果显示,TSPJ能增加ZO-1、Occludin、N-cadherin、E-cadherin和β-catenin的蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001),但对Claudin11的表达无显著性影响;免疫荧光结果显示,TSPJ能增加睾丸组织中ZO-1和β-catenin蛋白的表达(P<0.001),下调睾丸支持细胞中LC3B的表达,上调p-AKT和p-mTOR蛋白表达。结论TSPJ能减轻高脂饮食诱导的睾丸支持细胞连接功能损伤,改善小鼠生精功能减退,其机制可能与激活支持细胞AKT/mTOR信号通路抑制自噬有关。

关键词：总皂苷,竹节参高脂饮食睾丸支持细胞自噬

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糖原合酶激酶-3β:炎症性肠病的潜在重要调节靶点

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生命科学 2022年第5期34卷 565-572页

作者：马成全顿耀艳刘雨李艳丽熊正国张长城郭煜晖三峡大学医学院三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室宜昌443002

炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是一种慢性非特异性肠道炎症性疾病,主要包括溃疡性结肠炎和克罗恩病,具有难治愈、易复发、癌变率高和易引起肠道反复损伤等特点。据报道IBD与遗传、环境及自身免疫等因素有关,但其具体发病... 详细信息

炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是一种慢性非特异性肠道炎症性疾病,主要包括溃疡性结肠炎和克罗恩病,具有难治愈、易复发、癌变率高和易引起肠道反复损伤等特点。据报道IBD与遗传、环境及自身免疫等因素有关,但其具体发病机制仍不明确。近年来研究发现,糖原合酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)参与了炎症反应的多条调控途径,其激活状态可增强炎症反应调控相关信号,促进肠道炎症反应。该文从细胞因子调控、NF-κB信号通路、内质网应激等多个方面综述了GSK-3β在IBD发病机制中的潜在作用,以期为IBD的治疗和药物研发提供新思路和有益线索。

关键词：炎症性肠病糖原合酶激酶-3β NF-κB信号通路内质网应激细胞因子

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Dcf1在学习记忆及焦虑样行为中的作用

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生命科学 2022年第9期34卷 1168-1174页

作者：鲁娇舒渝茜章帆吴凡赵航王清何治三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室宜昌443002 三峡大学医学院宜昌443002

焦虑症可表现出焦虑样行为,其发病机制错综复杂且受多方面因素的影响,一线药物治疗效果也不甚理想。近年来发现,在自闭症、阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的发展中发挥作用的树突状细胞因子1(dendritic cell factor 1,Dcf1)也称... 详细信息

焦虑症可表现出焦虑样行为,其发病机制错综复杂且受多方面因素的影响,一线药物治疗效果也不甚理想。近年来发现,在自闭症、阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的发展中发挥作用的树突状细胞因子1(dendritic cell factor 1,Dcf1)也称TMEM59(transmembrane protein 59,TMEM59),在焦虑中也起着重要的作用。Dcf1通过调节N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartic acid receptor,NMDAR)和α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionic acid receptor,AMPAR)影响学习记忆和焦虑样行为的发生,但具体的作用机制仍不明确。Dcf1是当前研究热点之一,在神经系统中发挥重要作用,与帕金森症、焦虑症及脑缺血等神经系统疾病密切相关,然而,这些疾病的发生不可避免地对学习记忆产生影响。因此,Dcf1研究不仅具有实际意义,且为临床更为精确地治疗神经系统疾病提供研究基础,其理论价值在于探索大脑的功能机制。该文就Dcf1在学习记忆及焦虑样行为中的作用做一综述。

关键词：焦虑样行为树突状细胞因子1 NMDA AMPA 学习记忆

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祖师麻皮肤刺激性观察和基于生物信息学的机制预测

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世界中医药 2024年第2期19卷 147-154,160页

作者：赵苗苗马骏孙涛朱仁愿刘兴国田悦毛鸿段海婧魏舒畅甘肃中医药大学兰州730000 国家中医药管理局中医药科研三级实验室中药药理实验室兰州730000 兰州市食品药品检验检测研究院兰州730020 甘肃泰康制药有限责任公司武威733000

目的:观察祖师麻干浸膏粉及不同萃取部位的皮肤刺激性,并基于生物信息学预测其刺激性成分及作用机制。方法:将斯泼累格·多雷(SD)大鼠随机分为完整皮肤组和破损皮肤组,观察连续给药7 d和停药后3 d皮肤状况。运用中药系统药理学数据... 详细信息

目的:观察祖师麻干浸膏粉及不同萃取部位的皮肤刺激性,并基于生物信息学预测其刺激性成分及作用机制。方法:将斯泼累格·多雷(SD)大鼠随机分为完整皮肤组和破损皮肤组,观察连续给药7 d和停药后3 d皮肤状况。运用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)查询祖师麻刺激性成分和作用靶点。通过GeneCards数据库、在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)等数据库收集疾病靶点。运用Metascape平台进行基因本体(GO)富集以及京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析,将核心靶点与祖师麻刺激性成分进行分子对接。结果:祖师麻干浸膏粉低、中剂量组对破损皮肤有轻微红斑、水肿反应;祖师麻干浸膏粉高剂量组、石油醚部位和二氯甲烷部位对完整皮肤和破损皮肤均有轻微红斑、水肿反应;乙酸乙酯部位和水层部位均无红斑、水肿反应。2)从祖师麻活性成分中筛选出7种刺激性成分,通路富集的主要通路为磷酸肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-AKT)信号通路、细胞增殖的肉瘤基因(Ras)信号通路、促分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)信号通路、端粒结合蛋白(Rap1)信号通路和松弛素(Relaxin)信号通路等。分子对接结果中瑞香毒素、木犀草素以及大黄素甲醚与核心靶点的结合最稳定。结论:祖师麻干浸膏粉高剂量下有轻微皮肤刺激性,可能是存在于石油醚和二氯甲烷部位中的瑞香毒素、木犀草素以及大黄素甲醚等通过多靶点、多通路的复杂作用促进炎症介质的生成,引起皮肤轻微红斑和水肿。

关键词：祖师麻萃取部位皮肤刺激性生物信息学瑞香毒素木犀草素大黄素甲醚网络药理学

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茯苓三萜生物合成过程调控研究进展

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中华中医药杂志 2023年第9期38卷 4278-4285页

作者：邓丹刘媛唐泽群占慧慧孟俊华崔培梧湖南中医药大学药学院长沙410208 国家中医药管理局中药药性与药效三级科研实验室长沙410208 湖南中医药大学菌物药研究室长沙410208

茯苓三萜是茯苓的重要活性成分,具有抑菌、抗炎、抗肿瘤等功效,但其在茯苓菌核中含量极低,限制了茯苓三萜的开发应用。伴随着医药、食品行业对茯苓资源需求的持续增长与茯苓栽培过程对松材过度消耗、栽培周期长等矛盾的日益突出,探索茯... 详细信息

茯苓三萜是茯苓的重要活性成分,具有抑菌、抗炎、抗肿瘤等功效,但其在茯苓菌核中含量极低,限制了茯苓三萜的开发应用。伴随着医药、食品行业对茯苓资源需求的持续增长与茯苓栽培过程对松材过度消耗、栽培周期长等矛盾的日益突出,探索茯苓三萜生物合成的过程调控将对缓解茯苓资源供需矛盾具有重要意义。因此,文章围绕茯苓三萜的结构、生物活性、生物合成途径及其过程调控等进行综述,进而探讨强化茯苓三萜生物合成过程的调控策略,以期为实现茯苓三萜的高效合成提供参考。

关键词：茯苓三萜生物合成甲羟戊酸途径氧化鲨烯环化酶细胞色素P450 代谢调控茯苓研究进展

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食欲素系统在情绪障碍中的研究进展

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生命科学 2024年第7期36卷 906-916页

作者：田睿吴杰陈秋萍陆永利李自成三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室宜昌443002 三峡大学健康医学院宜昌443002 三峡大学基础医学院机能学系宜昌443002

情绪障碍包括创伤后应激障碍、抑郁、焦虑等。近年来情绪障碍的发病率呈现出显著上升的趋势。目前,针对情感障碍的药物治疗效果不佳,且存在较多不良反应。食欲素通过作用于食欲素受体参与学习记忆、睡眠-觉醒及情感的调控。随着对食欲... 详细信息

情绪障碍包括创伤后应激障碍、抑郁、焦虑等。近年来情绪障碍的发病率呈现出显著上升的趋势。目前,针对情感障碍的药物治疗效果不佳,且存在较多不良反应。食欲素通过作用于食欲素受体参与学习记忆、睡眠-觉醒及情感的调控。随着对食欲素受体拮抗剂在失眠治疗中的研究不断深入,发现这些药物不仅显示出改善失眠的潜力,同时在情绪调节方面的作用也逐渐受到了广泛关注。本综述旨在通过梳理并汇总近期的动物实验和部分临床试验,系统性总结食欲素系统在情绪障碍中的研究进展及作用机制。

关键词：食欲素系统情绪障碍焦虑抑郁创伤后应激障碍

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链霉菌次级代谢产物生物合成的调控研究进展

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中草药 2024年第14期55卷 4917-4929页

作者：孟俊华张少航鲁曼霞厉晓龚婕王炜崔培梧湖南中医药大学药学院菌物药研究室湖南长沙410208 国家中医药管理局中药药性与药效三级科研实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学药学院中药民族药物创新发展国际实验室湖南长沙410208 河北省平山县农业农村局河北石家庄050400

链霉菌属微生物是生产抗生素的优势菌群,也是一些维生素和酶的重要来源,具有广阔的开发前景;然而,链霉菌代谢网络和调控机制的复杂性,及大量基因簇的沉默限制了其次级代谢产物的高效合成。快速发展的代谢工程技术为人为干预、调控链霉... 详细信息

链霉菌属微生物是生产抗生素的优势菌群,也是一些维生素和酶的重要来源,具有广阔的开发前景;然而,链霉菌代谢网络和调控机制的复杂性,及大量基因簇的沉默限制了其次级代谢产物的高效合成。快速发展的代谢工程技术为人为干预、调控链霉菌代谢途径或代谢通量提供了新的手段,并已成为实现链霉菌源目标产物高产和成药性天然产物挖掘的重要途径。通过对以强化链霉菌次级代谢产物合成为目标的非靶向和靶向调控技术的相关研究进展进行综述,为链霉菌次级代谢产物的高效挖掘及生物合成过程强化提供参考。

关键词：链霉菌次级代谢产物代谢调控生物合成基因簇非靶向调控靶向调控

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