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新型维甲酸衍生物ATPR对神经母细胞瘤增殖及分化的影响

新型维甲酸衍生物ATPR对神经母细胞瘤增殖及分化的影响

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中国药理学会第十一次全国学术会议

作者：吴菲陈飞虎洪凡青安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级实验室安徽省天然药物活性成分工程技术研究中心国家中医药管理局中医药科研三级实验室“中药药理实验室”

目的本探究探讨新型维甲酸衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯(ATPR)对神经母细胞瘤体外增殖及分化的作用。方法用不同浓度的ATPR作用SHSY5Y细胞后,用MTT法检测细胞增殖状况;吉姆萨染色法在倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化;免疫... 详细信息

目的本探究探讨新型维甲酸衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯(ATPR)对神经母细胞瘤体外增殖及分化的作用。方法用不同浓度的ATPR作用SHSY5Y细胞后,用MTT法检测细胞增殖状况;吉姆萨染色法在倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化;免疫细胞化学法检测神经元特异性分化标志物NSE;流式细胞仪测定细胞周期的变化;采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测ATPR作用后TrkA mRNA的表达情况。结果 ATPR呈浓度依赖性抑制SHSY5Y细胞增殖;倒置显微镜下观察细胞形态趋于成熟分化;NSE水平上升;细胞G0/G1期表达量增加,S期减少,细胞周期进程受影响,细胞阻滞在G0/G1期。功能性神经生长因子受体TrkA表达量增加。结论 ATPR对SHSY5Y细胞具有抑制增殖和一定的诱导分化作用。

关键词：神经母细胞瘤维甲酸衍生物

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咖啡因对酒精性肝纤维化大鼠肝星状细胞cAMP-PKA-CREB信号通路的作用

咖啡因对酒精性肝纤维化大鼠肝星状细胞cAMP-PKA-CREB信号通路的...

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中国药理学会第十一次全国学术会议

作者：杨万枝吕雄文管文婕翟丹丹王和代雪飞李俊安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级实验室安徽省天然药物活性成分工程技术研究中心国家中医药管理局中医药科研三级实验室“中药药理实验室”

目的探讨咖啡因对酒精性肝纤维化大鼠肝星状细胞（HSC）cAMP-PKA-CREB信号通路的作用。方法采用酒精每天2次灌胃,连续12周,制备大鼠酒精性肝纤维化模型,将大鼠随机分为正常组、模型组、咖啡因5,10和20 mg·kg组、阳性对照药秋水仙碱... 详细信息

目的探讨咖啡因对酒精性肝纤维化大鼠肝星状细胞（HSC）cAMP-PKA-CREB信号通路的作用。方法采用酒精每天2次灌胃,连续12周,制备大鼠酒精性肝纤维化模型,将大鼠随机分为正常组、模型组、咖啡因5,10和20 mg·kg组、阳性对照药秋水仙碱组0.1 mg·kg组,在常规造模的同时按相应药物给药剂量灌胃给药;12周末处死大鼠CollagenaseⅣ原位肝灌注分离大鼠HSC,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色分析法测定细胞的增殖,免疫组织化学方法测定α-SMA的表达,Real TimePCR法和Western blot法分别检测a1（Ⅰ）前胶原和a1（Ⅲ）前胶原mRNA水平和蛋白表达,放射疫分析法测定HSC内cAMP含量,RT-PCR法测定PKA和CREB mRNA水平。结果咖啡因5,10和20 mg·kg对酒精性肝纤维化大鼠HSC增殖具有显著的抑制作用,且明显降低HSC中α-SMA的表达和Ⅰ型及Ⅲ型前胶原mRNA水平咖啡因10和20 mg·kg显著降低酒精性肝纤维化大鼠HSC内cAMP含量,并且能明显下调PKA和CREB mRNA水平。结论咖啡因对酒精性肝纤维化大鼠HSC增殖和活化具有一定的抑制作用,其机制可能与其抑制HSC内cAMP-PKA-CREB信号通路有关。

关键词： PKA cAMP-PKA-CREB 酒精性肝纤维化信号通路咖啡因大鼠肝星状细胞

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菊花和野菊花中9中黄酮类化合物的含量

菊花和野菊花中9中黄酮类化合物的含量

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中国药理学会第十一次全国学术会议

作者：吴婷妮李俊余长柱安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级实验室安徽省天然药物活性成分工程技术研究中心国家中医药管理局中医药科研三级实验室“中药药理实验室”

目的研究菊花、野菊花黄酮含量。方法建立菊花、野菊花中9种黄酮类化合物-蒙花苷、木犀草苷、金合欢素、表儿茶素、儿茶素、香叶木素、木犀草素、芹菜素和山奈酚的毛细管电泳分析方法,优化的缓冲溶液是硼砂20 mmol·L-磷酸二氢钠50 ... 详细信息

目的研究菊花、野菊花黄酮含量。方法建立菊花、野菊花中9种黄酮类化合物-蒙花苷、木犀草苷、金合欢素、表儿茶素、儿茶素、香叶木素、木犀草素、芹菜素和山奈酚的毛细管电泳分析方法,优化的缓冲溶液是硼砂20 mmol·L-磷酸二氢钠50 mmol·L,pH=9.6,检测波长是330 nm,并将该方法应用于三大药用菊花（贡菊,杭菊,亳菊）和来自主产区（安徽六安、湖北、安徽亳州）的三种野菊花的含量测定。结果不同产地的菊花、野菊花,同产地的菊花和野菊花之间黄酮含量差异很大。结论不同产地的菊花、野菊花,同产地的菊花和野菊花药理作用各有侧重,临床用药时应区别对待。

关键词：菊花野菊花黄酮

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咖啡因对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞中腺苷A2A受体介导的cAMP-PKA信号通路的影响

咖啡因对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞中腺苷A2A受体介导的cAMP-PKA...

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中国药理学会第十一次全国学术会议

作者：管文婕吕雄文杨万枝张磊黄成李俊安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级实验室安徽省天然药物活性成分工程技术研究中心国家中医药管理局中医药科研三级实验室“中药药理实验室”

目的观察咖啡因（caffeine）对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞（hepatic stellate cell,HSC）中腺苷A2A受体介导的cAMP-PKA信号通路的调控作用。方法体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6,给予不同浓度的caffeine,腺苷A2A受体拮抗剂ZM241385,腺苷... 详细信息

目的观察咖啡因（caffeine）对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞（hepatic stellate cell,HSC）中腺苷A2A受体介导的cAMP-PKA信号通路的调控作用。方法体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6,给予不同浓度的caffeine,腺苷A2A受体拮抗剂ZM241385,腺苷A2A受体激动剂CGS21680共同培养1 h后,除正常组外给予终浓度为200μmol·L的乙醛刺激,48h后采用放射免疫分析法测定细胞内cAMP含量,RT-PCR检测每组细胞中PKA活性,Β型前胶原氨端肽（procollagenⅠN-terminalpeptide,PⅠNP）、Ⅲ型前胶原氨端肽（procollagenⅢN-terminal peptide,PⅢNP）mRNA水平,Western blot检测各组细胞中结缔组织生长因子（Connective tissue growth factor,CTGF）蛋白表达水平。结果 caffeine及ZM241385可显著降低乙醛刺激的HSC内cAMP含量,并且能明显下调PKA活性,以及ProcollagenⅠ,ProcollagenⅢmRNA,CTGF蛋白过度表达,而CGS21680的作用则相反。caffeine及ZM241385合用CGS21680与单用CGS21680相比,作用可有所逆转。结论 caffeine能显著降低乙醛刺激的HSC内Ⅰ型胶原,Ⅲ型胶原,CTGF的表达水平,其机制可能与其对腺苷A2A受体cAMP-PKA信号通路的抑制有关。

关键词：咖啡因乙醛 HSC 腺苷受体 cAMP-PKA信号通路

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siRNA介导的佐剂性关节炎大鼠关节软骨细胞中ASIC1a表达沉默模型的构建

siRNA介导的佐剂性关节炎大鼠关节软骨细胞中ASIC1a表达沉默模型...

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中国药理学会第十一次全国学术会议

作者：江晟陈飞虎荣超胡伟张晨晨葛金芳安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级实验室安徽省天然药物活性成分工程技术研究中心国家中医药管理局中医药科研三级实验室“中药药理实验室”

目的评价siRNA技术诱导佐剂性关节炎(AA)大鼠关节软骨细胞中ASIC1a表达沉默模型的可行性。方法通过化学合成法合成特异性荧光短链ASIC1 a siRNA-FAM,使用Lipofectamine 2000转染试剂盒将ASIC1 a siRNA转染入关节软骨细胞,采用荧光显微镜... 详细信息

目的评价siRNA技术诱导佐剂性关节炎(AA)大鼠关节软骨细胞中ASIC1a表达沉默模型的可行性。方法通过化学合成法合成特异性荧光短链ASIC1 a siRNA-FAM,使用Lipofectamine 2000转染试剂盒将ASIC1 a siRNA转染入关节软骨细胞,采用荧光显微镜,流式细胞术,实时荧光定量PCR(q-RT-PCR)及Western Blot法检测ASIC1a mRNA和蛋白表达抑制的效果。结果 ASIC1a siRNA能顺利转入软骨细胞,q-RT-PCR检测软骨细胞中ASIC1a mRNA的表达量,实验组与对照组差异具有显著性(P<0.01);Western Blot结果显示转染特异性siRNA后ASIC1a蛋白表达受到抑制,最大抑制率为96.4%,远高于对照组(P<0.01)。结论 siRNA介导的佐剂性关节炎大鼠关节软骨细胞中ASIC1a表达沉默模型是研究酸敏感离子通道对软骨细胞代谢影响的可靠模型。

关键词：佐剂性关节炎大鼠关节软骨细胞 ASIC1a siRNA

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内质网应激与TRAIL在HSC-T6细胞凋亡中的相互关系探讨

内质网应激与TRAIL在HSC-T6细胞凋亡中的相互关系探讨

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中国药理学会第十一次全国学术会议

作者：谢加力李俊黄成黄艳章圣朋林珍安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级实验室安徽省天然药物活性成分工程技术研究中心国家中医药管理局中医药科研三级实验室“中药药理实验室”

目的研究内质网应激与TRAIL在HSC-T6细胞凋亡中的相互关系。方法体外培养的大鼠肝星状细胞HSC-T6,以毒胡萝卜素(thapsigargin)作为内质网应激诱导剂,熊去氧胆酸(UDCA)为内质网应激抑制剂。以不同浓度的thapsigargin诱导HSC-T6细胞发生... 详细信息

目的研究内质网应激与TRAIL在HSC-T6细胞凋亡中的相互关系。方法体外培养的大鼠肝星状细胞HSC-T6,以毒胡萝卜素(thapsigargin)作为内质网应激诱导剂,熊去氧胆酸(UDCA)为内质网应激抑制剂。以不同浓度的thapsigargin诱导HSC-T6细胞发生内质网应激,同时,应用小分子RNA干扰技术将CHOP基因沉默,并给予JNK抑制剂SP600125,MTT法检测thapsigargin对HSC增殖的影响,流式细胞仪检测thapsigargin对HSC细胞凋亡的影响,RT-PCR方法检测各组TRAIL受体DR5和胱天蛋白酶8 mRNA表达变化,Western blot法检测DR5及胱天蛋白酶8蛋白的表达情况。结果 Thapsigargin诱导HSC发生内质网应激后,发现其标志性蛋白CHOP可诱导TARIL受体DR5的表达明显上调。并且siCHOP及JNK抑制剂SP600125的应用,均可使HSC细胞中DR5的表达随之减少。提示CHOP和JNK可能是调节DR5表达的潜在因子,对于TRAIL受体DR5的调控发挥着重要的作用。

关键词：细胞凋亡内质网应激 TRAIL DR5 胱天蛋白酶8

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5,7,3′-三乙酰橙皮素在大鼠体内的药代动力学

5,7,3′-三乙酰橙皮素在大鼠体内的药代动力学

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中国药理学会第十一次全国学术会议

作者：秦娣李俊李荣陈昭琳安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级实验室安徽省天然药物活性成分工程技术研究中心国家中医药管理局中医药科研三级实验室“中药药理实验室”

目的建立高效液相色谱法测定5,7,3′-三乙酰橙皮素（TAHP）在大鼠血浆中活性代谢物橙皮素的浓度,并研究其在大鼠体内的药动学。方法单剂量灌胃给予大鼠3个剂量的TAHP,血浆样品经β-葡萄糖醛酸酶水解后用HPLC法测定。采用C反相色谱柱,以... 详细信息

目的建立高效液相色谱法测定5,7,3′-三乙酰橙皮素（TAHP）在大鼠血浆中活性代谢物橙皮素的浓度,并研究其在大鼠体内的药动学。方法单剂量灌胃给予大鼠3个剂量的TAHP,血浆样品经β-葡萄糖醛酸酶水解后用HPLC法测定。采用C反相色谱柱,以甲醇-0.5%冰醋酸为流动相线性梯度洗脱。结果橙皮素在0.05～25μg·ml范围内线性关系良好（r=0.9994）,各样品的提取回收率均大于80%,日内、日间精密度RSD均小于10%。TAHP(50,100和200 mg·kg)的代谢物橙皮素的血药经时过程均符合一级吸收的二室模型,其主要药动学参数T（h）:1.13±1.30,1.80±1.30和3.17±0.41;c(mg·L):0.90±0.13,1.65±0.34和4.27±0.84;AUC(mg·h·L):7.57±1.51,17.84±1.81和61.67±19.04。结论该方法专属性强,准确可靠,适用于TAHP在大鼠体内的药代动力学研究。单剂量口服TAHP3个剂量组的代谢物均呈线性关系,血药浓度-时间曲线符合一级吸收的二室模型。

关键词： 5,7,3'-三乙酰橙皮素橙皮素高效液相色谱大鼠血浆药动学

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5,7,3′-三乙酰橙皮素对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用及其对JAK2/STAT3通路的作用

5,7,3′-三乙酰橙皮素对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用及其对JAK2/S...

引用

中国药理学会第十一次全国学术会议

作者：任丹阳李俊黄成李荣王亚丽徐涛黄艳安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级实验室安徽省天然药物活性成分工程技术研究中心国家中医药管理局中医药科研三级实验室“中药药理实验室”

目的研究5,7,3′-三乙酰橙皮素（5,7,3′-teiacetyl hesperidin,TAHP）对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用及部分机制。方法用弗氏完全佐剂（FCA）诱导大鼠AA模型;选取60只造模成功的大鼠随机分为5组:模型组;来氟米特（LEF）对照组;TAHP低剂... 详细信息

目的研究5,7,3′-三乙酰橙皮素（5,7,3′-teiacetyl hesperidin,TAHP）对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用及部分机制。方法用弗氏完全佐剂（FCA）诱导大鼠AA模型;选取60只造模成功的大鼠随机分为5组:模型组;来氟米特（LEF）对照组;TAHP低剂量组;TAHP中剂量组;TAHP高剂量组。采用多发性关节炎指数评分（PI）法对大鼠关节炎症程度进行评分;足容积法测量继发侧足肿胀度;免疫后28 d取材,观察关节组织病理学变化。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法测定各组大鼠血清中产生IL-6水平。采用免疫组织化学法检测滑膜组织中JAK2,STAT3及其磷酸化的表达水平。采用蛋白免疫印迹法测定p-STAT3的蛋白表达水平。结果 AI评分:低剂量TAHP组与模型组比较差异无统计学意义;高剂量TAHP组低于中、低剂量组（P<0.01）。LEF组低于3组TAHP组（P<0.01）;致炎后d 12,大鼠继发性关节炎出现,同时灌胃给予不同剂量的TAHP(33,66和132 mg·kg),连续12 d,从致炎后d 20开始,TAHP(66和132 mg·kg)对AA大鼠继发性炎症有明显抑制作用;TAHP能减轻关节滑膜、软骨和骨的组织病理学变化;TAHP各剂量可不同程度的降低AA大鼠外周血清白细胞介素6（IL-6）的水平;JAK2/STAT3信号通路在关节滑膜组织中蛋白表达明显。结论 TAHP对AA大鼠继发性炎症具有治疗作用,其作用机制可能是通过调控JAK2/STAT3信号通路以及血清IL-6水平来发挥抗关节炎作用的。

关键词：大鼠佐剂性关节炎 JAK2/STAT3 治疗作用橙皮素

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夏枯草三萜酸对四氯化碳致急性肝损伤大鼠的保护作用

夏枯草三萜酸对四氯化碳致急性肝损伤大鼠的保护作用

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中国药理学会第十一次全国学术会议

作者：章圣朋李俊黄成谢加力何勇安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级实验室安徽省天然药物活性成分工程技术研究中心国家中医药管理局中医药科研三级实验室“中药药理实验室”

目的研究夏枯草三萜酸对大鼠急性肝损伤的预防保护作用及其可能机制。方法建立CCl诱导大鼠急性肝损伤模型,将雄性SD大鼠60只随机分为正常组、模型组、夏枯草三萜酸62.5,125和250 mg·kg及联苯双酯0.2 g·kg组,每组10只,灌胃给药... 详细信息

目的研究夏枯草三萜酸对大鼠急性肝损伤的预防保护作用及其可能机制。方法建立CCl诱导大鼠急性肝损伤模型,将雄性SD大鼠60只随机分为正常组、模型组、夏枯草三萜酸62.5,125和250 mg·kg及联苯双酯0.2 g·kg组,每组10只,灌胃给药6 d,末次给药1 h后除正常组外一次性腹腔注射CCl(0.1 ml·100 g),造成急性肝损伤模型。禁食不禁水16 h,腹股动脉取血,处死大鼠,剖取肝脏。观察夏枯草三萜酸对大鼠血清中丙氨酸氨基转换酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转换酶（AST）水平的影响以及对肝匀浆中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）水平的影响,计算肝指数并同时对肝组织进行病理学检查,采用RT-PCR,Western blot法检测组织中CYP2E1表达变化。结果夏枯草三萜酸各剂量组可减弱急性肝损伤大鼠血清中ALT,AST的活性,降低肝匀浆MDA的水平,升高SOD的水平,此外,RT-PCR,Western blot结果显示夏枯草三萜酸能明显降低大鼠体内CYP2E1表达,呈剂量依赖关系。结论夏枯草三萜酸对CCl致大鼠急性肝损伤具有明显的保护作用,其机制可能与抗脂质过氧化有关。

关键词：夏枯草三萜酸急性肝损伤

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人急性早幼粒细胞白血病模型的建立

人急性早幼粒细胞白血病模型的建立

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中国药理学会第十一次全国学术会议

作者：王新群陈飞虎陈慧慧吴繁荣安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级实验室安徽省天然药物活性成分工程技术研究中心国家中医药管理局中医药科研三级实验室“中药药理实验室”

目的建立人急性早幼粒细胞白血病细胞(NB4)动物转移模型。方法 NOD-SCID小鼠给予2.5 Gy的X线全身照射后,24 h内腹腔接种3×10～6个NB4细胞,待小鼠出现衰竭体征濒临死亡时,处死解剖检查。结果接种细胞约3周后,小鼠腹部隆起有腹水形成... 详细信息

目的建立人急性早幼粒细胞白血病细胞(NB4)动物转移模型。方法 NOD-SCID小鼠给予2.5 Gy的X线全身照射后,24 h内腹腔接种3×10～6个NB4细胞,待小鼠出现衰竭体征濒临死亡时,处死解剖检查。结果接种细胞约3周后,小鼠腹部隆起有腹水形成,此后动物逐渐消瘦,活动受限,平均生存期约(34.5±1.6)d,病理学检查肝、脾等内脏器官转移率100%;流式细胞仪检查肝、脾、肾、肺的CD45,CD33等抗原可知肝的浸润性15.23±0.91、脾浸润性4.415±0.54、肾浸润性20.30±2.6、肺浸润性2.853±0.19。结论人急性早幼粒细胞接种于NOD-SCID小鼠腹腔,能较好地重现早幼粒细胞白血病的临床转移过程,为人类白血病生长、转移机制及抗转移治疗方面的研究提供了一种较理想的动物模型。

关键词：急性早幼粒细胞 NOD-SCID小鼠动物模型

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