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南京中医药大学学报 2018年第2期34卷 205-209页

作者：张海彬程海波沈卫星闫秋莹谭佳妮徐长亮范汇森苗筠杰孙东东南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京210023

中药天葵子是毛茛科植物天葵Semiaquilegia adoxoides(DC.)Makino的干燥块根,为我国常用中药品种。具有清热解毒,消肿散结之功效,其主要成分有生物碱、氰基和硝基类、酚酸类等。该文对天葵子化学成分的研究进行整理和总结,为进一步研究... 详细信息

中药天葵子是毛茛科植物天葵Semiaquilegia adoxoides(DC.)Makino的干燥块根,为我国常用中药品种。具有清热解毒,消肿散结之功效,其主要成分有生物碱、氰基和硝基类、酚酸类等。该文对天葵子化学成分的研究进行整理和总结,为进一步研究提供参考。

关键词：天葵子植物化学化学成分

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消癌解毒方联合顺铂通过调控组蛋白去甲基化酶抑制4T1荷瘤小鼠肿瘤生长

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中国实验方剂学杂志 2018年第13期24卷 78-84页

作者：孙浩沈卫星徐长亮孙东东谭佳妮许惠琴程海波南京中医药大学药学院南京210023 江苏省中药药效与安全性评价重点实验室南京210023 南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方与产业化工程实验室南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心南京210023

目的：观察消癌解毒方联合顺铂抑制4T1荷瘤小鼠肿瘤生长的作用及机制。方法：BALB/c小鼠皮下接种4T1乳腺癌细胞形成荷瘤模型,分别单独给予顺铂（2 mg·kg-1）、消癌解毒方（1×104mg·kg-1）及两者联合用药进行治疗,给药期... 详细信息

目的：观察消癌解毒方联合顺铂抑制4T1荷瘤小鼠肿瘤生长的作用及机制。方法：BALB/c小鼠皮下接种4T1乳腺癌细胞形成荷瘤模型,分别单独给予顺铂（2 mg·kg-1）、消癌解毒方（1×104mg·kg-1）及两者联合用药进行治疗,给药期间称量并记录小鼠体质量和瘤体积,15 d后脱颈处死,剥离并称量瘤块质量,计算抑瘤率,苏木素-伊红（HE）染色观察心、肝、脾、肾和瘤块的病理情况,原位末端转移酶标记技术（TUNEL）观察肿瘤细胞凋亡情况并统计凋亡率,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肿瘤组织中B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）,组蛋白去甲基化酶1（LSD1）,组蛋白H3（Histone H3）,组蛋白H3第4位赖氨酸二甲基化（Histone H3K4me2）,组蛋白H3第9位赖氨酸二甲基化（Histone H3K9me2）的表达水平。结果：与模型组相比,顺铂给药组小鼠体质量均有下降,其中消癌解毒方＋顺铂组较单用顺铂组体质量增加（P〈0.01）;消癌解毒方＋顺铂较单用顺铂更能缩小移植瘤体积,提高抑瘤率（P〈0.01）;更明显提高了肿瘤细胞凋亡率（P〈0.05,P〈0.01）;更明显下调肿瘤组织Bcl-2表达水平,上调Bax表达水平（P〈0.05,P〈0.01）;各给药组均能下调LSD1蛋白的表达,增加组蛋白H3K4,H3K9的二甲基化,消癌解毒方＋顺铂组作用最为明显（P〈0.05,P〈0.01）。结论：消癌解毒方＋顺铂用药对于4T1荷瘤小鼠抑瘤作用明显,其机制可能与下调组蛋白去甲基化酶水平有关。

关键词：消癌解毒方 4T1荷瘤小鼠顺铂组蛋白去甲基化酶

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UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中紫草氰苷、格列风内酯浓度

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南京中医药大学学报 2018年第1期34卷 91-95页

作者：范汇森闫秋莹张海彬程海波沈卫星王振中孙东东南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心江苏南京210023

目的建立使用UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中紫草氰苷、格列风内酯浓度的方法,并研究其药物代谢动力学特征。方法采用Aglient C18色谱柱(100mm×2.1mm,1.8μm),流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B),梯度洗脱(0~1min,5%~20%B;1~2min,20%~... 详细信息

目的建立使用UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中紫草氰苷、格列风内酯浓度的方法,并研究其药物代谢动力学特征。方法采用Aglient C18色谱柱(100mm×2.1mm,1.8μm),流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B),梯度洗脱(0~1min,5%~20%B;1~2min,20%~60%B;2~6min,60%~70%B;6~6.5min,70%~5%B;6.5~7.5min,5%B),流速0.3mL/min,柱温35℃。大鼠灌胃给药量为4g/(kg·d),使用液质联用色谱法测定给药后不同时间点紫草氰苷和格列风内酯的血药浓度,通过DAS 2.0软件模拟计算,得出相应的药物代谢动力学参数。结果在大鼠血浆中,紫草氰苷在0.701 9~140.4ng/mL,格列风内酯在1.120~240.4ng/mL内线性关系良好,两者日内、日间精密度和准确度RSD均小于15%,回收率在87.22%~107.75%之间。紫草氰苷和格列风内酯在体内吸收均较迅速,0.5h达到最高血药浓度,并且消除速率较快,24h基本消除。结论经方法学检验,此方法准确、稳定,可用于紫草氰苷和格列风内酯的药物代谢动力学研究。

关键词：天葵子紫草氰苷格列风内酯 UPLC-MS/MS 药物代谢动力学

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消癌解毒方通过调控PI3K/AKT通路抑制乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖的作用与机制探讨

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南京中医药大学学报 2018年第2期34卷 173-177页

作者：孙浩沈卫星徐长亮孙东东谭佳妮许惠琴程海波南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药药效与安全性评价重点实验室江苏南京210023 南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方与产业化工程实验室江苏南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心江苏南京210023

目的研究消癌解毒方抗乳腺癌细胞的活性及作用机制。方法显微镜观察MDA-MB-231细胞形态,MTT法考察细胞的增殖抑制率,流式细胞术观察细胞周期,Western blot检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白P53、P21、Cyclin B1、CDK1的表达。结果与对照组相... 详细信息

目的研究消癌解毒方抗乳腺癌细胞的活性及作用机制。方法显微镜观察MDA-MB-231细胞形态,MTT法考察细胞的增殖抑制率,流式细胞术观察细胞周期,Western blot检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白P53、P21、Cyclin B1、CDK1的表达。结果与对照组相比,消癌解毒方给药组细胞减少,排列疏松,体积变小,形态变圆;消癌解毒方可以提高MDA-MB-231细胞的增殖抑制率(P<0.05~0.01),使肿瘤细胞的细胞周期阻滞于G2/M期(P<0.05~0.01),可以抑制与细胞周期相关的PI3K/AKT信号通路,上调P53、P21,下调Cyclin B1、CDK1蛋白的表达(P<0.05~0.01)。结论消癌解毒方能阻滞MDA-MB-231细胞周期,抑制乳腺癌细胞的增殖,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。

关键词：消癌解毒方乳腺癌细胞细胞增殖 PI3K/AKT通路

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基于表面等离子共振技术的药物抗淀粉样蛋白聚集作用的实验方法研究

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中药药理与临床 2018年第4期34卷 183-186页

作者：曾瑾戴瑛任思冲华桦鄢良春赵军宁四川省中医药科学院转化药理与应用研究所四川省中医药转化医学中心国家中医药管理局中药质量生物评价重点研究室四川省道地药材系统开发工程技术研究中心中药品质评价与创新中药研究四川省重点实验室成都610041

目的:探索基于表面等离子共振技术的抗淀粉样蛋白聚集药物的实验条件、方法。方法:制备Amyloidβ1-40与1-42单体和聚体,配制对照分析物CR/TS/TT浓度梯度(0μg/ml、7. 81μg/ml、15. 63μg/ml、31. 25μg/ml、62. 5μg/ml、125μg/ml、25... 详细信息

目的:探索基于表面等离子共振技术的抗淀粉样蛋白聚集药物的实验条件、方法。方法:制备Amyloidβ1-40与1-42单体和聚体,配制对照分析物CR/TS/TT浓度梯度(0μg/ml、7. 81μg/ml、15. 63μg/ml、31. 25μg/ml、62. 5μg/ml、125μg/ml、250μg/ml、500μg/ml)。采用CM5芯片,分别将蛋白的单体和聚体通过氨基偶联固定于芯片表面。将样品依次进样,进行亲合分析。结果:Aβ1-40与Aβ1-42单体在25℃温度下静置24 h可制备成实验用聚集体; SPR分析系统进样参数:流速30μl/min,结合时间300s,解离时间300s,再生1 m M Na OH 15s;实验优选阳性对照为CR(Congo Red)。结论:以上实验条件可用于SPR系统中抗β淀粉样蛋白聚集药物的初步筛选,实验方法稳定,结果可信。

关键词： SPR 抗β淀粉样蛋白聚集

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消癌解毒方对CT26荷瘤小鼠抗结肠癌药效及机制研究

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中华中医药学刊 2018年第7期36卷 1625-1629,I0010,I0011页

作者：周芷若俞晓忆贾志荣程海波沈卫星吴云皓许惠琴南京中医药大学药学院江苏南京210023 国家中医药管理局名医验方研究中心江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室江苏省中医药抗肿瘤协同创新中心江苏南京210023 江苏省中药药效与安全性评价重点实验室江苏南京210023 中国药科大学国家药物代谢动力学重点实验室江苏南京210023

目的：观察消癌解毒方对小鼠CT26结肠癌细胞皮下移植瘤的抑制作用及其作用机制。方法：将以插块法接种结肠癌细胞皮下移植瘤成功的CT26荷瘤小鼠随机分为模型组（Veh）、阳性药物奥沙利铂组（OXA）、和消癌解毒方组（XJD）,观察各组小鼠... 详细信息

目的：观察消癌解毒方对小鼠CT26结肠癌细胞皮下移植瘤的抑制作用及其作用机制。方法：将以插块法接种结肠癌细胞皮下移植瘤成功的CT26荷瘤小鼠随机分为模型组（Veh）、阳性药物奥沙利铂组（OXA）、和消癌解毒方组（XJD）,观察各组小鼠体质量、肿瘤体积、肿瘤质量、计算抑瘤率。采用Western-Blot、免疫组化法检测肿瘤组织样品中F4/80,TGF-β1,IL-6和IL-1β的表达,并与模型组和奥沙利铂组进行比较,研究消癌解毒方对结肠癌细胞皮下移植瘤的抑制作用及其作用机制。结果：消癌解毒方能够比较明显地抑制瘤体生长,改善结肠癌小鼠生存质量,该组小鼠肿瘤组织中F4/80,TGF-β1,IL-6和IL-1β表达量均高于模型组（P〈0.01,P〈0.05）。结论：消癌解毒方能够通过增强肿瘤部位巨噬细胞的活性,增加细胞因子IL-1β,IL-6的表达;同时增加荷瘤小鼠肿瘤部位TGF-β1的表达来达到杀伤和诱导肿瘤细胞的凋亡,两种途径提高机体对肿瘤的免疫抑制,来延缓结肠癌的发生发展。

关键词：消癌解毒方结肠癌 CT26细胞

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药食同源中药在肿瘤预防中的应用探讨

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四川中医 2018年第2期36卷 46-48页

作者：邢蓓蓓程海波沈卫星南京中医药大学国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室江苏南京210023 南京中医药大学江苏南京210029

近年来,恶性肿瘤的发病率和死亡率不断提高,早期预防、早期诊治是控制恶性肿瘤高发率和高死亡率的重要途径。中医药在恶性肿瘤的预防中可发挥重要作用,其中药食同源类中药具有安全性高、副反应小、价格低廉、剂型灵活、功效明确、患者... 详细信息

近年来,恶性肿瘤的发病率和死亡率不断提高,早期预防、早期诊治是控制恶性肿瘤高发率和高死亡率的重要途径。中医药在恶性肿瘤的预防中可发挥重要作用,其中药食同源类中药具有安全性高、副反应小、价格低廉、剂型灵活、功效明确、患者依从度高、可长期服用等优点,并在中医癌毒病机理论等中医药抗肿瘤理论指导下,瞄准癌前病变阶段,贯穿防癌祛毒、扶正祛邪的基本原则,按照药食同源中药的四气五味、归经、功效,进行合理组方,优化剂型,长期干预,可在恶性肿瘤的预防中发挥其独特的优势。

关键词：恶性肿瘤预防药食同源癌毒病机

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消癌解毒方对CT26荷瘤小鼠IL-6/STAT3信号通路的影响

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辽宁中医杂志 2018年第6期45卷 1289-1292,I0005页

作者：石文静谭佳妮沈卫星徐长亮孙东东程海波南京中医药大学转化医学研究中心、国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室、江苏省抗肿瘤验方与产业化工程实验室江苏南京210023 南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心江苏南京210023

目的：观察消癌解毒方对荷瘤小鼠瘤组织内IL-6/STAT3信号通路的影响。方法：将40只雄性CT26荷瘤小鼠随机分为模型对照组（生理盐水灌胃2 m L·d^-1）,消癌解毒方低、中、高剂量组（消癌解毒方中药灌胃5,10,20 g生药·kg^（-1）... 详细信息

目的：观察消癌解毒方对荷瘤小鼠瘤组织内IL-6/STAT3信号通路的影响。方法：将40只雄性CT26荷瘤小鼠随机分为模型对照组（生理盐水灌胃2 m L·d^-1）,消癌解毒方低、中、高剂量组（消癌解毒方中药灌胃5,10,20 g生药·kg^（-1））,奥沙利铂组（奥沙利铂腹腔注射5 mg·kg^-1）,每组8只。连续给药14 d,末次给药2 h后处死小鼠,剥取瘤组织。采用末端转移酶标记技术（TUNEL）法观察小鼠瘤组织中细胞凋亡率;免疫组化染色法检测小鼠瘤组织中Cleaved Caspase-3蛋白表达;蛋白质免疫印迹（Western blot）法检测小鼠瘤组织中信号转导和转录激活因子3（signal transducers and activators of transcription 3,STAT3）,磷酸化的信号转导和转录激活因子3（phospho-STAT3,p-STAT3）,白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）蛋白的表达。结果：TUNEL结果显示,与模型对照组比较,消癌解毒方各组小鼠瘤组织中细胞凋亡指数明显升高（P〈0.01）;免疫组化结果显示,与模型对照组比较,消癌解毒方中、高剂量组可以显著增加Cleaved Caspase-3蛋白表达（P〈0.05）;Western blot结果表明与模型对照组比较,消癌解毒方中、高剂量组可以显著降低pSTAT3,IL-6的蛋白表达（P〈0.05）。结论：消癌解毒方可以促进肿瘤细胞凋亡,其机制可能与抑制IL-6/STAT3信号通路,上调Cleaved Caspase-3的表达有关。

关键词：消癌解毒方结直肠癌 IL-6/STAT3信号通路

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消癌解毒方对结肠癌的抑制作用及对Treg细胞的影响

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南京中医药大学学报 2017年第5期33卷 515-518页

作者：谭佳妮石文静沈卫星徐长亮孙东东程海波南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点实验室江苏省抗肿瘤验方与产业化工程实验室江苏南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心江苏南京210023

目的探讨消癌解毒方对结肠癌的抗肿瘤作用及作用机制。方法皮下注射结肠癌细胞CT26于BALB/c小鼠右腋下,建立荷瘤小鼠模型,连续灌胃给药14d后,处死小鼠,分离外周血单核细胞,流式细胞仪检测消癌解毒方对Treg细胞分布的影响,免疫组化检测... 详细信息

目的探讨消癌解毒方对结肠癌的抗肿瘤作用及作用机制。方法皮下注射结肠癌细胞CT26于BALB/c小鼠右腋下,建立荷瘤小鼠模型,连续灌胃给药14d后,处死小鼠,分离外周血单核细胞,流式细胞仪检测消癌解毒方对Treg细胞分布的影响,免疫组化检测消癌解毒方对肿瘤组织内Foxp3蛋白表达的影响。结果消癌解毒方可以显著抑制结肠癌荷瘤的增长,降低CD4+Foxp3+Treg细胞在外周血及脾脏的分布,减少Foxp3蛋白在肿瘤组织内的表达。结论消癌解毒方具有显著抑制结肠癌增殖的作用,其机制可能与减少外周血内Treg细胞的分布及肿瘤组织中Foxp3的表达进而影响其下游信号通路传导相关。

关键词：消癌解毒方结肠癌调节性T细胞

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转化医学视角下的中药复方物质基础研究思路与建议

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中华中医药杂志 2017年第4期32卷 1415-1418页

作者：孙东东沈卫星苗筠杰闫秋莹程海波南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心南京210023 南京中医药大学药学院南京210023

物质基础研究是中药复方研究的重要内容,是实现中医药基础研究与临床应用之间双向转化的关键环节。论文简述了当前中药复方物质基础研究的基本情况和存在的问题,提出以转化医学视角,开展中药复方物质基础研究的思路与方法,要注重中医药... 详细信息

物质基础研究是中药复方研究的重要内容,是实现中医药基础研究与临床应用之间双向转化的关键环节。论文简述了当前中药复方物质基础研究的基本情况和存在的问题,提出以转化医学视角,开展中药复方物质基础研究的思路与方法,要注重中医药理论创新及药物创制;要统筹好给药前以及给药后两个环节;还要充分借助现代仪器分析技术和生命科学手段。

关键词：中药复方物质基础转化医学思路

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