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肝细胞亲和-HPLC法体外筛选三七总皂苷(PNS)抗肝细胞脂肪变性的活性成分

广东药科大学学报 2017年第2期33卷 226-230页

作者：徐文博陈艺丹周律贝伟剑范辉广东药科大学中医药研究院国家中医药管理局高脂血症“调肝降脂”重点研究室/脂代谢三级实验室广东省代谢性疾病中医药防治重点实验室广东广州510006 广东药科大学药学院广东广州510006

目的通过肝细胞亲和-HPLC法体外筛选三七总皂苷(PNS)中降脂活性成分。方法采用HepG2细胞系与PNS体外共孵育,联合HPLC法检测孵育后的细胞解离液,色谱柱为Aglient-C_(18)(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱(0~35 min,乙... 详细信息

目的通过肝细胞亲和-HPLC法体外筛选三七总皂苷(PNS)中降脂活性成分。方法采用HepG2细胞系与PNS体外共孵育,联合HPLC法检测孵育后的细胞解离液,色谱柱为Aglient-C_(18)(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱(0~35 min,乙腈的体积百分比为29%;70~100 min,乙腈的体积百分比为29%→40%),流速为1.0 mL/min,检测波长为203 nm;采用体外肝细胞脂肪变性模型对PNS中亲和成分的降脂活性进行评价。结果从PNS中筛选出2个肝细胞特异性亲和成分,分别为人参皂苷Rb_1和人参皂苷Rg_1;与正常组相比,建立的体外肝细胞脂肪变性模型组细胞内三酰甘油(TG)含量显著升高(P<0.05),不同浓度的PNS、人参皂苷Rb_1和人参皂苷Rg_1作用后给药组细胞内TG含量显著降低(P<0.05),呈剂量效应关系。结论建立肝细胞亲和-HPLC法,筛选出PNS亲和成分为人参皂苷Rb_1和人参皂苷Rg_1,经体外模型验证亲和成分具有显著降脂活性。

关键词：三七总皂苷肝细胞 HPLC 脂肪变性

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复方贞术调脂胶囊对糖皮质激素诱导骨质疏松大鼠股骨和腰椎骨密度及生物力学特性的研究

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中国骨质疏松杂志 2016年第2期22卷 135-138,144页

作者：孙平胡伶平董群伟蔡妹群王晓东郭姣刘忠厚广东药学院附属第一医院骨质疏松基地广东广州510006 广东药学院附属第一医院骨科广东广州510006 国家中医药管理局高脂血症调肝降脂重点研究室广东药学院国家中医药管理局脂代谢三级实验室广东广州510006 中国老年学学会骨质疏松委员会北京100102

目的观察复方贞术调脂胶囊(FTZ)对糖皮质激素诱导骨质疏松大鼠股骨和腰椎骨密度及生物力学特性的影响。方法SPF级雄性SD大鼠32只,随机等分为4组:Nrm组为正常对照组,Met组为皮下注射甲强龙(Met)5 mg/(kg·d),每周5次,FTZL组和FTZH组... 详细信息

目的观察复方贞术调脂胶囊(FTZ)对糖皮质激素诱导骨质疏松大鼠股骨和腰椎骨密度及生物力学特性的影响。方法SPF级雄性SD大鼠32只,随机等分为4组:Nrm组为正常对照组,Met组为皮下注射甲强龙(Met)5 mg/(kg·d),每周5次,FTZL组和FTZH组在Met组基础上每日分别给予低剂量FTZ(1.5g/kg)和高剂量FTZ(6g/kg)灌胃,实验期为12w。QDR4500A型双能X线骨密度测定仪测定股骨和腰椎骨密度,MTS-858型生物力学实验机测定股骨和腰椎生物力学性能。结果Met组大鼠股骨和腰椎的骨密度、最大载荷、刚度、弹性模量、皮质骨厚度、股骨中段截面面积和椎体横断面面积均显著低于Nrm组相应指标(P<0.001,P<0.01),股骨骨髓腔面积显著高于Nrm组(P<0.01);FTZL组大鼠的股骨骨密度,最大载荷、刚度、弹性模量、皮质骨厚度、股骨中段截面面积和椎体横断面面积较Met组有升高趋势,股骨骨髓腔面积较Met组减少,但两组间各指标均无显著性差异(P>0.05);FTZH组大鼠股骨和腰椎的骨密度、最大载荷、刚度、弹性模量、皮质骨厚度和椎体横断面面积显著高于Met组相应指标(P<0.01,P<0.05),股骨骨髓腔面积显著低于Met组(P<0.05),股骨中段截面面积较Met组有增加趋势,但无显著性差异(P>0.05),FTZH组腰椎的骨密度和最大荷载显著高于FTZL组(P<0.05),余各项指标间无显著性差异(P>0.05)。结论高剂量FTZ对改善糖皮质激素诱导骨质疏松大鼠股骨和腰椎的骨密度及生物力学特性效果显著。

关键词：糖皮质激素复方贞术调脂胶囊骨密度骨生物力学骨质疏松

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基于UPLC/Q-TOFMS技术的白术药材化学成分快速识别研究

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质谱学报 2015年第1期36卷 72-77页

作者：钟艳梅冯毅凡郭姣广东药学院中心实验室广东广州510006 国家中医药管理局高脂血症"调肝降脂"重点研究室国家中医药管理局"脂代谢"三级实验室广东省代谢性疾病中医药防治重点实验室广东广州510006

建立了超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC/Q-TOF MS)法快速鉴定白术生药材中的多种化学成分。采用Aquity UPLC/Q-TOF micro联用仪,以水-乙腈流动相梯度洗脱,ESI+模式采集数据,Masslynx4.1软件分析处理数据。实验分析了白术药... 详细信息

建立了超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC/Q-TOF MS)法快速鉴定白术生药材中的多种化学成分。采用Aquity UPLC/Q-TOF micro联用仪,以水-乙腈流动相梯度洗脱,ESI+模式采集数据,Masslynx4.1软件分析处理数据。实验分析了白术药材中的24个峰信号,鉴定了其中的20种化学成分。结果表明,应用UPLC/Q-TOF MS技术能够快速鉴定白术药材的化学成分,是中药成分分析的有效手段。

关键词：超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC/Q-TOF MS) 化学成分白术

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佛手提取物调控CYP7A1蛋白表达的研究

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广东药学院学报 2016年第2期32卷 205-209页

作者：邓德城贝伟剑广东药科大学中医药研究院/国家中医药管理局高脂血症调肝降脂重点研究室/脂代谢三级实验室/广东省代谢性疾病中西医结合研究中心广东广州510006

目的探讨佛手提取物(Finger Citron extract)对Hep G2细胞中胆固醇7α羟化酶(CYP7A1)及其核转录调控因子过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)和肝核因子4α(HNF4α)的蛋白表达量的影响。方法采用MTT法得出佛手提取物对Hep G2细胞生长... 详细信息

目的探讨佛手提取物(Finger Citron extract)对Hep G2细胞中胆固醇7α羟化酶(CYP7A1)及其核转录调控因子过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)和肝核因子4α(HNF4α)的蛋白表达量的影响。方法采用MTT法得出佛手提取物对Hep G2细胞生长无明显抑制的浓度,Western blot检测CYP7A1、PPARα和HNF4α的蛋白表达量;采用siRNA干扰技术沉默调控因子PPARα后,观察佛手提取物对CYP7A1的蛋白表达的影响。结果佛手提取物浓度为0.2、1、5、25μg/m L对Hep G2细胞无明显的抑制作用,且均能上调CYP7A1、PPARα和HNF4α的蛋白表达量,沉默调控因子PPARα后,CYP7A1的蛋白表达量显著下降。结论佛手提取物具有一定的降脂作用,其机制可能与其上调PPARα的表达来上调CYP7A1的表达有关。

关键词：佛手提取物胆固醇7α羟化酶 Western blot siRNA干扰技术

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基于中医证候与危险分层关系的高脂血症神经网络预警模型研究

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世界科学技术-中医药现代化 2015年第12期17卷 2666-2669页

作者：周苏娟易法令朴胜华涂泳秋黄展鹏广东药学院医药信息工程学院广州510006 国家中医药管理局高脂血症调肝降脂重点研究室广州510006 国家中医药管理局脂代谢三级实验室广州510006

目的:探讨基于高脂血症中医证候与危险分层的神经网络预警模型。方法:在Matlab R2010a环境下,以高脂血症中医证候为输入,高脂血症危险分层为输出,建立反向传播(BP)神经网络预警模型。随机选取286例作为神经网络学习训练样本,剩余的30例... 详细信息

目的:探讨基于高脂血症中医证候与危险分层的神经网络预警模型。方法:在Matlab R2010a环境下,以高脂血症中医证候为输入,高脂血症危险分层为输出,建立反向传播(BP)神经网络预警模型。随机选取286例作为神经网络学习训练样本,剩余的30例作为测试样本。为了提高模型精度,建模前先对输入自变量进行降维处理。结果:降维前后的结果对比显示,经过降维处理后的神经网络预测准确率有所提高,平均误差为10%左右,说明建立的神经网络模型能够较好地预测高脂血症的风险等级。结论:研究结果表明,所建立的模型能够较好地提取中医证候与高脂血症危险分层的内在关系,将神经网络技术用于高脂血症中医证候与危险分层的研究是可行的。

关键词：高脂血症中医证候危险分层神经网络预警模型

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复方贞术调脂方对游离脂肪酸诱导的胰岛素抵抗HepG2细胞的作用

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广东药学院学报 2015年第3期31卷 349-353页

作者：韩宗余贝伟剑黎明胡旭光广东药学院国家中医药管理局高脂血症"调肝降脂"重点研究室/国家中医药管理局"脂代谢"三级实验室/广东省代谢性疾病中医药防治重点实验室广东广州510006

目的探讨复方贞术调脂方(FTZ)对游离脂肪酸(FFA)诱导的胰岛素抵抗Hep G2细胞NF-κBIRS1-GLUT4通路的影响,阐明FTZ缓解胰岛素抵抗的作用机制。方法采用FFA诱导Hep G2细胞使其产生胰岛素抵抗,3个剂量的FTZ干预后,葡萄糖氧化酶法检测Hep G... 详细信息

目的探讨复方贞术调脂方(FTZ)对游离脂肪酸(FFA)诱导的胰岛素抵抗Hep G2细胞NF-κBIRS1-GLUT4通路的影响,阐明FTZ缓解胰岛素抵抗的作用机制。方法采用FFA诱导Hep G2细胞使其产生胰岛素抵抗,3个剂量的FTZ干预后,葡萄糖氧化酶法检测Hep G2细胞培养液上清液中葡萄糖的含量,酶联免疫法检测Hep G2细胞培养液上清液中TNF-α、IL-6的含量,Western blot检测Hep G2细胞中NF-κB、IRS1、GLUT4蛋白表达,采用PDTC阻断NF-κB蛋白,测定其下游靶点IRS1的蛋白表达。结果FTZ可降低细胞上清液中葡萄糖、TNF-α、IL-6的含量,下调NF-κB的蛋白表达,上调IRS1和GLUT4的蛋白表达。阻断NF-κB之后,再加入FTZ,IRS1的蛋白表达量较未阻断时显著降低。结论 FTZ可改善FFA诱导的胰岛素抵抗,其作用机制可能是通过抑制NF-κB介导的IRS1-GLUT4通路来改善胰岛素抵抗。NF-κB是FTZ作用的关键靶点。

关键词：复方贞术调脂方胰岛素抵抗游离脂肪酸核因子-κB

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依折麦布对饮食性高胆固醇血症大鼠胆固醇吸收及代谢相关靶点的调节作用

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广东药学院学报 2015年第2期31卷 219-223页

作者：方沐潮曹乐贝伟剑广东药学院中医药研究院/国家中医药管理局脂代谢三级实验室及高脂血症调肝降脂重点研究室广东广州510006

目的探讨依折麦布对饮食性高胆固醇血症大鼠胆固醇吸收及代谢相关靶点的调节作用。方法雄性SD大鼠,正常组喂食普通饲料,其余组喂食高脂饲料,复制饮食性高胆固醇血症大鼠模型。依折麦布组除喂食高脂饲料外,每天灌胃给药,连续给药4周,测... 详细信息

目的探讨依折麦布对饮食性高胆固醇血症大鼠胆固醇吸收及代谢相关靶点的调节作用。方法雄性SD大鼠,正常组喂食普通饲料,其余组喂食高脂饲料,复制饮食性高胆固醇血症大鼠模型。依折麦布组除喂食高脂饲料外,每天灌胃给药,连续给药4周,测定大鼠血清、粪便、肝脏的总胆固醇,并测定大鼠肝脏CYP7A1、LXRα、小肠NPC1L1 mRNA和蛋白的表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠血清、粪便总胆固醇含量均显著上升(P<0.01),肝脏总胆固醇含量上升(P<0.05)。与模型组比较,依折麦布组大鼠血清、肝脏总胆固醇含量均显著下降(P<0.01),粪便总胆固醇含量显著上升(P<0.01)。依折麦布组大鼠肝脏CYP7A1、LXRα、小肠NPC1L1 mRNA和蛋白的表达与模型组、正常组比较均显著下降(P<0.01)。结论依折麦布能降低饮食性高胆固醇血症大鼠血清和肝脏总胆固醇含量,增加粪便总胆固醇排出,并能抑制肝脏CYP7A1及小肠NPC1L1的表达,其抑制CYP7A1表达可能与下调LXRα有关。

关键词：依折麦布 NPC1L1 CYP7A1 LXRα 高胆固醇血症

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HPLC法测定人参首乌胶囊中大黄素、大黄素甲醚的含量

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广东药学院学报 2015年第1期31卷 46-49页

作者：曾亮赵文静罗展远贝伟剑广东药学院中医药研究院国家中医药管理局高脂血症调肝降脂重点研究室/脂代谢三级实验室广东省代谢性疾病中医药防治重点实验室广东广州510006

目的建立高效液相色谱法测定人参首乌胶囊中大黄素及大黄素甲醚的质量分数。方法采用Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以甲醇-0.1%（体积分数）H3PO4（体积比80∶20）为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为2... 详细信息

目的建立高效液相色谱法测定人参首乌胶囊中大黄素及大黄素甲醚的质量分数。方法采用Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以甲醇-0.1%（体积分数）H3PO4（体积比80∶20）为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为254 nm。结果大黄素、大黄素甲醚分别在0.03～1.20μg、0.04～1.60μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数r均为0.999 9。大黄素和大黄素甲醚的平均回收率为100.25%（RSD为1.17%）和97.52%（RSD为2.52%）。结论本方法专属性强、重复性好,可用于人参首乌胶囊中大黄素和大黄素甲醚质量分数的测定。

关键词：人参首乌胶囊大黄素大黄素甲醚 HPLC法含量测定

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基于自适应聚类算法的高脂血症中医诊断辅助平台研究

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世界科学技术-中医药现代化 2014年第7期16卷 1619-1624页

作者：涂泳秋陈国华朴胜华郭姣广东药学院广州510006 国家中医药管理局高脂血症调肝降脂重点研究室广州510006 国家中医药管理局脂代谢三级实验室广州510006

高脂血症是血管及脏器疾病的主要基础病变之一,中医药在防治高脂血症方面具有毒副作用小,疗效明显的优势,建立高脂血症诊断辅助平台有助于提高诊疗效率,并为高脂血症辨证分型标准化研究提供数据采集、存储与分析的平台。首先建立高脂血... 详细信息

高脂血症是血管及脏器疾病的主要基础病变之一,中医药在防治高脂血症方面具有毒副作用小,疗效明显的优势,建立高脂血症诊断辅助平台有助于提高诊疗效率,并为高脂血症辨证分型标准化研究提供数据采集、存储与分析的平台。首先建立高脂血症四诊信息临床采集平台及数据库,记录患者就诊不同时期的望诊图像及其余三诊的文字信息,方便医师更准确地掌握治疗过程中患者的临床表现,从而总结治疗经验,提高治疗效果;在此基础上利用可调整相似度阈值的自适应聚类算法对已采集的897个病例四诊信息进行分类,最终得到5类,将得到的每个类别中所对应样本的病症特征与所属中医的证候类别联系起来,最后用相似性算法判断新采集病例属于的哪一类,为中医辨证分型诊断提供建议。

关键词：高脂血症诊断辅助自适应聚类平台研究

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UPLC/Q-TOFMS对三七中皂苷类成分的快速化学表征

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天然产物研究与开发 2014年第8期26卷 1233-1239页

作者：王邱冯毅凡芮雯钟艳梅郭姣广东药学院中心实验室国家中医药管理局高脂血症调肝降脂重点研究室国家中医药管理局脂代谢"三级"实验室广东省代谢性疾病中医药防治重点实验室广州510006

本文主要运用超高效液相串联四级杆飞行时间质谱联用技术(UPLC/Q-TOF MS)对三七中皂苷类成分进行快速分离和鉴定。以超高效液相为分离手段,飞行时间质谱仪为鉴定方法,水饱和正丁醇为提取溶剂,以0.05%甲酸水(A)-0.05%甲酸乙腈(B)为流动... 详细信息

本文主要运用超高效液相串联四级杆飞行时间质谱联用技术(UPLC/Q-TOF MS)对三七中皂苷类成分进行快速分离和鉴定。以超高效液相为分离手段,飞行时间质谱仪为鉴定方法,水饱和正丁醇为提取溶剂,以0.05%甲酸水(A)-0.05%甲酸乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,采用ESI负离子模式进行数据采集。根据实验结果,并结合相关参考文献,二级质谱裂解数据以及元素组成,分离、鉴定出17种皂苷类成分,并发现三七中含有姜糖酯B成分。实验结果表明经过超高效液相的分离,以及Q-TOF MS的二级负离子信息的鉴定,为分析三七中皂苷类成分提供了一种快速、简便、可靠的方法。

关键词：三七皂苷 UPLC Q-TOF MS

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