检索结果-内蒙古大学图书馆

陆军军医大学学报 2025年第4期47卷 350-359页

作者：刘姝琳魏静朱宝行叶演潘佳乐赵安妮宋振彭六生李海波孙红武邹全明陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系微生物与生化药学教研室国家免疫生物制品工程技术研究中心佳木斯大学临床医学黑龙江佳木斯重庆理工大学药学院重庆

目的探究植物源性免疫刺激分子麦冬皂苷对以冠状病毒刺突蛋白受体结合域(receptor binding domain,RBD)为抗原的亚单位疫苗的免疫应答增强效应及初步机制。方法用CCK-8法评价麦冬皂苷D’(ophiopogonin D’,OPD’)对骨髓来源的树突状细胞... 详细信息

目的探究植物源性免疫刺激分子麦冬皂苷对以冠状病毒刺突蛋白受体结合域(receptor binding domain,RBD)为抗原的亚单位疫苗的免疫应答增强效应及初步机制。方法用CCK-8法评价麦冬皂苷D’(ophiopogonin D’,OPD’)对骨髓来源的树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cell,BMDCs)的细胞毒性;将Balb/c雌性小鼠按照随机数字表法分成4组:Control组、RBD组、RBD/OPD’组、RBD/Alum组,使用免疫剂量为抗原5μg/只、佐剂100μg/只,按照第0、21、42天肌肉注射免疫程序进行免疫;监测小鼠体质量、生化指标等评价其体内安全性;用ELISA检测特异性IgG及其亚型抗体滴度;用ELISA试剂盒检测脾细胞上清中细胞因子水平;ELISpot检测脾细胞分泌γ干扰素(interferon-gamma,IFN-γ)的细胞数量;用激光共聚焦显微镜观察BMDCs对抗原的摄取;流式细胞术定量分析BMDCs对抗原的吞噬能力;用转录组学技术结合生物信息学研究方法,初步探究其增强免疫效应的机制。结果当OPD’浓度<5μg/mL时BMDCs存活率为100%;小鼠单次肌肉注射后除体质量略有下降外,生化指标结果均处于正常范围;疫苗肌肉注射免疫后,RBD/OPD’组血清特异性IgG、IgG1和IgG2a滴度与RBD组相比均显著升高(P<0.05);与RBD组相比,RBD/OPD’组Th1细胞免疫应答的细胞因子IL-1β、TNF-α、IFN-γ显著增高(P<0.01),促进淋巴细胞分泌IFN-γ的细胞数量显著增加(P<0.001);激光共聚焦显微镜发现,OPD’处理后的BMDCs能摄取更多抗原,流式细胞术定量分析结果显示OPD’能显著提高BMDCs的抗原摄取率(P<0.01);转录组学结果显示,与RBD组相比RBD/OPD’组PPAR信号通路显著富集。结论麦冬皂苷D’可有效增强RBD亚单位疫苗的免疫应答水平,且其作用机制可能与激活PPAR信号通路有关。

关键词：麦冬皂苷佐剂免疫应答蛋白疫苗

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金黄色葡萄球菌巨噬细胞胞内生存关键分泌蛋白筛选体系的构建

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陆军军医大学学报 2024年第8期46卷 815-821页

作者：石姚佳田湉熊廷蓉王于张笑恺邹全明河南大学药学院河南开封475004 陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系微生物与生化药学教研室国家免疫生物制品工程技术研究中心重庆400038 陆军军医大学士官学校基础部石家庄050081

目的建立金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,***)巨噬细胞胞内感染状态下分泌蛋白高通量筛选体系,探索金葡菌胞内生存所需关键分泌蛋白。方法利用课题组建立的金葡菌分泌蛋白真核系统表达载体库,通过DNA转染表达技术,得到能够在细... 详细信息

目的建立金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,***)巨噬细胞胞内感染状态下分泌蛋白高通量筛选体系,探索金葡菌胞内生存所需关键分泌蛋白。方法利用课题组建立的金葡菌分泌蛋白真核系统表达载体库,通过DNA转染表达技术,得到能够在细胞内表达金葡菌分泌蛋白的RAW264.7巨噬细胞阵列。金葡菌感染RAW264.7后,清除胞外菌,观察金葡菌胞内生存情况。最后通过构建相应分泌蛋白的过表达及敲除金葡菌验证筛选结果。结果通过探索RAW264.7质粒转染剂量、金葡菌感染复数(multiplicity of infection,MOI)以及感染时间,确立筛选体系的最优质粒转染剂量为1.0μg/孔、MOI为1.0、感染时间为4 h。筛选结果结合相应分泌蛋白过表达和敲除菌株验证,成功筛选出hypothetical protein、Serine protease E等分泌蛋白具有促进胞内金葡菌生存功能。结论成功构建金葡菌巨噬细胞胞内生存关键分泌蛋白筛选体系。

关键词：金黄色葡萄球菌巨噬细胞胞内感染分泌蛋白

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新型抗菌化合物HL-J6与金黄色葡萄球菌PBP1的相互作用研究

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陆军军医大学学报 2025年第9期47卷 912-921页

作者：徐铭琦史祥睿刘威段浩魏静邓炎江悦高英英李海波佳木斯大学临床医学院黑龙江佳木斯陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系微生物与生化药学教研室国家免疫生物制品工程技术研究中心重庆重庆大学药学院重庆陆军军医大学(第三军医大学)全军免疫学研究所重庆重庆医科大学附属巴南医院检验科重庆

目的探究新型抗菌化合物HL-J6与金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白1(penicillinbinding protein 1, PBP1)的相互作用。方法以MRSA252基因组DNA为模板,PBP1F/R为上下游引物,以Nde I/Xho I为酶切位点构建表达质粒pET30a-pbp1-39-608。将质... 详细信息

目的探究新型抗菌化合物HL-J6与金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白1(penicillinbinding protein 1, PBP1)的相互作用。方法以MRSA252基因组DNA为模板,PBP1F/R为上下游引物,以Nde I/Xho I为酶切位点构建表达质粒pET30a-pbp1-39-608。将质粒转入大肠杆菌中进行表达并通过亲和层析纯化获得PBP1-39-608蛋白;利用肽聚糖侧链主干肽的硫酯类似物S2d作为底物,测定HL-J6对PBP1-39-608转肽酶活性的抑制作用;用微量热泳动技术(microscale thermophoresis,MST)检测HL-J6与PBP1-39-608的亲和力,并通过细胞热转移实验(cell thermal shift assay,CETSA)确证结合作用;分别利用AutoDock Vina和Desmond软件进行分子对接和动力学模拟,明确HL-J6与PBP1-39-608蛋白的结合模式和关键氨基酸残基。结果成功构建pET30a-pbp1-39-608重组质粒,诱导表达后,经纯化获得相对分子质量约为65×103的PBP1-39-608蛋白;HL-J6可呈时间依赖性抑制PBP1-39-608的转肽酶活性(P<0.001);HL-J6与PBP1-39-608的结合解离常数Kd约为64.92μmol/L;分子对接结果显示HL-J6通过与ILE-348、ASN-370、THR-516、PHE-423等主要氨基酸残基相互作用结合在PBP1-39-608的活性口袋,结合评分为-8.38 kcal/mol(<-5.00 kcal/mol);动力学模拟结果显示二者结合后50 ns趋于稳定。结论 HL-J6可显著抑制金黄色葡萄球菌PBP1的转肽酶活性,并与其存在稳定的相互作用。

关键词：金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白 HL-J6 重组蛋白:相互作用

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ECM和YAP/TAZ在决定细胞命运的过程中的作用机制

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现代生物医学进展 2016年第4期16卷 785-788,800页

作者：李笋左钱飞曹力尹李俊林曾浩解放军第234医院药械科辽宁朝阳122000 第三军医大学药学院微生物与生化药学教研室国家免疫制品工程技术研究中心重庆400038 第三军医大学药学系十八营重庆400038

近年来,有研究表表明从细胞微环境中转化而来的机械信号可以调控细胞形状和影响细胞的命运。然而,这些机械信号转化成调节细胞生物过程的信号的机制仍然不是十分清楚。最新研究已阐明细胞可通过来自细胞外基质(extracellular matrix,ECM... 详细信息

近年来,有研究表表明从细胞微环境中转化而来的机械信号可以调控细胞形状和影响细胞的命运。然而,这些机械信号转化成调节细胞生物过程的信号的机制仍然不是十分清楚。最新研究已阐明细胞可通过来自细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的机械信号和细胞行为调控之间的相互作用来募集Hippo信号通路中的核心组件YAP/TAZ的作用机制。此外,研究发现在Wnt和Hippo信号之间的串扰是调节细胞命运的核心。这些机制可以解释力学微环境的信号是如何调节细胞行为和决定细胞命运的。本文重点对ECM和YAP/TAZ在决定细胞命运的过程中的作用机制展开系统综述。

关键词：细胞外基质机械转导 Hippo信号细胞外因子 YAP/TAZ

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葡聚糖修饰的超顺磁性氧化铁纳米颗粒最佳工艺条件确定及质量评价

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中华核医学与分子影像杂志 2015年第2期35卷 139-144页

作者：李易孙红武文曦琳欧阳羽文明李少林成都市第三人民医院放射科 610031 国家免疫制品工程技术研究中心暨第三军医大学药学院微生物及生化药学教研室重庆医科大学附属第一医院放射科 400016

目的确定葡聚糖修饰的SPIO纳米颗粒最佳工艺条件并对其质量进行评价.方法利用影响SPIO纳米颗粒粒径的4因素（溶液pH值、葡聚糖浓度、反应温度、搅拌速度）3水平正交实验设计,得出SPIO纳米颗粒的最佳制备工艺条件,并在该条件下制备SPI... 详细信息

目的确定葡聚糖修饰的SPIO纳米颗粒最佳工艺条件并对其质量进行评价.方法利用影响SPIO纳米颗粒粒径的4因素（溶液pH值、葡聚糖浓度、反应温度、搅拌速度）3水平正交实验设计,得出SPIO纳米颗粒的最佳制备工艺条件,并在该条件下制备SPIO纳米颗粒样品,分别用透射电镜、粒度分析仪对其进行形貌观察及粒径检测,用原子吸收光谱仪测定其铁含量,红外光谱仪分析表征,X射线粉末衍射法进行成分鉴定,振动样品磁强计测定磁学参数,并用其标记SKOV3卵巢癌细胞,验证其磁学性质.结果制备葡聚糖修饰SPIO纳米颗粒的最佳工艺条件为：葡聚糖浓度10mg/ml,反应溶液pH值10,反应温度80℃,搅拌速度600 r/min.制备的SPIO纳米颗粒呈球形,分布较均匀,大小较一致,平均粒径7.0 nm,铁含量（12.36±0.08） g/L;红外光谱分析示样品外成功包裹葡聚糖,样品成分为Fe3O4,有超顺磁性;可进入待标记细胞,并使细胞带有磁性.结论最佳工艺条件下制备的葡聚糖修饰SPIO纳米颗粒性质稳定、粒径较小、分散性较好,能顺利进入待标记细胞并使细胞具有一定磁性,为后续研究奠定了良好基础.

关键词：纳米粒子超顺磁性氧化铁右旋糖酐类

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长非编码RNA在基因调控和肿瘤形成中的作用

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现代生物医学进展 2015年第27期15卷 5392-5396页

作者：李笋左钱飞李俊林曹力尹肖斌解放军第234医院药械科辽宁122000 第三军医大学药学院微生物与生化药学教研室国家免疫制品工程技术研究中心重庆400038 第三军医大学药学系十八营重庆400038

哺乳动物中,只有小部分基因转录成为编码蛋白质的RNA,大量的基因则转录为不能编码蛋白质的RNA,即nc RNA。长非编码RNA(lnc RNAs)是分子长度在200-100000 nt之间的一类nc RNA。lnc RNAs的数量超过蛋白质编码基因的数量。目前,对长非编码R... 详细信息

哺乳动物中,只有小部分基因转录成为编码蛋白质的RNA,大量的基因则转录为不能编码蛋白质的RNA,即nc RNA。长非编码RNA(lnc RNAs)是分子长度在200-100000 nt之间的一类nc RNA。lnc RNAs的数量超过蛋白质编码基因的数量。目前,对长非编码RNA(lnc RNAs)的生物学特性,转录调控以及其在肿瘤发生发展中的作用机制的研究任然是RNA研究的热点。lnc RNAs通过控制染色质重塑,转录调控和录转录后调控而在基因的转录调节中发挥了重要作用。lnc RNAs与多种肿瘤相关,并且在抑制因素和促进因素中都具有重要的作用。众多文献报道的结果表明lnc RNAs参与调控基因表达,在正常细胞与肿瘤细胞的转换中起到至关重要的作用。

关键词：长非编码RNA 基因调控肿瘤

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超顺磁性氧化铁(SPIO)与多聚赖氨酸(PLL)纳米粒的制备、结构验证及其空间结构表征

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复旦学报（医学版） 2014年第3期41卷 309-314,327页

作者：李易文曦琳孙红武葛晓东李妹玲文明重庆医科大学附属第一医院放射科重庆400016 第三军医大学药学院微生物及生化药学教研室-国家免疫制品工程技术研究中心重庆400038

目的探讨葡聚糖修饰的超顺磁性氧化铁（super-paramagnetic iron oxide,SPIO）与多聚赖氨酸（polylysine,PLL）纳米粒的制备及其结构验证和空间结构表征。方法在共沉淀法制备葡聚糖修饰的SPIO基础上,加入PLL制备出一种新的SPIO-PLL纳... 详细信息

目的探讨葡聚糖修饰的超顺磁性氧化铁（super-paramagnetic iron oxide,SPIO）与多聚赖氨酸（polylysine,PLL）纳米粒的制备及其结构验证和空间结构表征。方法在共沉淀法制备葡聚糖修饰的SPIO基础上,加入PLL制备出一种新的SPIO-PLL纳米粒,利用粒度电位分析仪、透射电镜（transmission electron microscopy,TEM）对SPIO-PLL的粒径、电位、形貌学进行检测;高效液相凝胶色谱法（gel permeation chromatography,GPC）、红外光谱（fourier transform infrared spectroscopy,FTIR）及核磁共振氢谱法（1HNMR）对SPIOPLL连接成功与否进行验证;高精度的原子力显微镜（atomic force microscope,AFM）对SPIO-PLL的结构、形态及连接状态进行空间结构表征。结果粒度电位分析和TEM结果显示SPIO-PLL的平均粒径为7.37 nm,平均电位为13.6 mV;GPC、FTIR及1HNMR结果显示SPIO及PLL之间已经成功连接;高精度AFM清楚显示出SPIO与PLL之间以亚胺键形式稳定相连。结论成功制备出一种性质稳定、粒径较小的新型SPIO-PLL纳米粒,这将对随后的肿瘤特异性探针制备奠定一定的基础。

关键词：多聚赖氨酸(PLL) 纳米粒超顺磁性氧化铁(SPIO) 结构表征

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四种变形链球菌临床菌株的生长特性和粘附率比较研究

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现代口腔医学杂志 2014年第4期28卷 210-213页

作者：陈建康樵星芳孙红武邹全明重庆市中药研究院.重庆市啮齿类实验动物工程技术研究中心国家免疫生物制品技术工程研究中心暨第三军医大学药学院微生物与生物化学药学教研室 400065

目的探索从第三军医大学西南医院分离的四种变形链球菌临床株的生长特征和粘附能力。方法采用传统和经典的玻璃试管粘附试验方法,对四种变形链球菌临床株在玻璃试管中粘附24h、48h后的生长特性和粘附率进行统计分析比较。结果从第三军... 详细信息

目的探索从第三军医大学西南医院分离的四种变形链球菌临床株的生长特征和粘附能力。方法采用传统和经典的玻璃试管粘附试验方法,对四种变形链球菌临床株在玻璃试管中粘附24h、48h后的生长特性和粘附率进行统计分析比较。结果从第三军医大学西南医院分离并鉴定命名为11号临床菌株的生长速度稍快于标准株ATCC700610和1、8、14号临床菌株,但不存在显著性差异;11号临床菌株在玻璃试管上粘附24h和48h的粘附率均高于标准株ATCC700610和1、8、14号三株变形链球菌临床菌株;对四种变形链球菌临床菌株对玻璃试管粘附24h后粘附率比较,11号临床菌株和标准株ATCC700610间存在显著性差异;对四种变形链球菌临床株对玻璃试管粘附48h后粘附率比较发现,标准株ATCC700610和8号、14号临床株间差异显著,1号和8、11、14号临床菌株间差异显著。结论本次研究结果提示从第三军医大学西南医院分离鉴定并命名为11号临床菌株具有较强的粘附能力,可以为后期有关变形链球菌疫苗研发和研究提供一定的理论参考和科学依据。

关键词：变形链球菌分离鉴定粘附临床菌株玻璃试管法

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YAP/TAZ对发育和肿瘤的调控及其功能的研究进展

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现代生物医学进展 2013年第2期13卷 379-381,302页

作者：左钱飞白艳涛李佳乐曾浩第三军医大学医学检验系(药学院)临床微生物学及免疫学教研室国家免疫制品工程技术研究中心重庆400038

Hippo通路是一种在进化中形成的保守的蛋白激酶级联通路,它与发育中器官的大小和肿瘤的形成有关。Hippo通路的中枢是从肿瘤抑制子Hippo到原癌蛋白YAP/TAZ的激酶级联反应。YAP/TAZ是Hippo通路下游的主要的效应分子,它们广泛表达于多种组... 详细信息

Hippo通路是一种在进化中形成的保守的蛋白激酶级联通路,它与发育中器官的大小和肿瘤的形成有关。Hippo通路的中枢是从肿瘤抑制子Hippo到原癌蛋白YAP/TAZ的激酶级联反应。YAP/TAZ是Hippo通路下游的主要的效应分子,它们广泛表达于多种组织器官中。在哺乳动物细胞中,Hippo通路激酶级联反应通过对YAP/TAZ磷酸化作用,促使其从细胞核转入细胞质中,从而抑制了YAP/TAZ的功能作用。TEAD家族转录子被鉴定为YAP/TAZ发挥生物学功能的重要调节因子。YAP/TAZ的失调引起的相关的基因的表达改变,将会影响细胞的增殖,分化,以及凋亡,从而会影响器官的大小以及肿瘤的形成。本文综述Hippo通路的最新进展,重点关注的是该通路中的YAP/TAZ调控的缺失对发育缺陷和肿瘤的影响。这将为我们研究再生医学,组织工程技术,肿瘤的干预防治提供新的思路与策略。

关键词： Hippo通路 YAP TAZ 发育肿瘤

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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)重组亚单位疫苗FnBPA的免疫保护作用研究

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免疫学杂志 2012年第10期28卷 837-841页

作者：左钱飞吴翼董衍东蔡昌芝冯强解庆华曾浩邹全明第三军医大学医学检验系(药学院)临床微生物学及免疫学教研室暨国家免疫生物制品工程技术研究中心重庆400038

目的评价耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)候选疫苗抗原FnBPA活性片段的免疫原性以及其在抵抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染中的免疫保护作用。方法构建pGEX-6p-2-FnBPA表达载体,经可溶表达及亲和纯化后的重组蛋白免疫Balb/c小鼠。末次... 详细信息

目的评价耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)候选疫苗抗原FnBPA活性片段的免疫原性以及其在抵抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染中的免疫保护作用。方法构建pGEX-6p-2-FnBPA表达载体,经可溶表达及亲和纯化后的重组蛋白免疫Balb/c小鼠。末次免疫后的第7天,分离免疫小鼠的血清ELISA检测IgG及其亚型抗体水平,同时测定体外抗体介导的调理吞噬作用。末次免疫后的第14天,经尾静脉感染ATCC国际标准株MRSA-252,统计分析感染后各组的小鼠的生存率以及检测脾脏,肾脏的细菌定植量。结果成功构建、表达及纯化了FnBPA活性片段,重组蛋白纯度可达90%;免疫后诱导小鼠机体产生了高效价的IgG抗体,并在体外能发挥抗体介导的调理吞噬作用;在感染保护评价实验中,与对照组相比,实验组的生存率显著提高(P<0.01),并显著降低了脾脏与肾脏的细菌定植量(P<0.05)。结论耐甲氧西林金黄色葡萄球菌重组亚单位疫苗FnBPA具有良好的免疫原性和免疫保护作用,可以作为MRSA疫苗研究的重要候选抗原。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 FnBPA 调理吞噬作用免疫保护性

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