检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：李龙侯仁彭大鹏华中农业大学国家兽药残留基准实验室(HZAU)农业部兽药残留检测重点实验室

分子生物学与抗体技术的结合推动了基因工程抗体的发展,为人类食品中农兽药残留的高效率、低成本检测提供了重要的技术手段。基因工程抗体作为一种新型抗体,具有分子小、成本低、可塑性强、易于批量生产等诸多优点,在农兽药残留检测领... 详细信息

分子生物学与抗体技术的结合推动了基因工程抗体的发展,为人类食品中农兽药残留的高效率、低成本检测提供了重要的技术手段。基因工程抗体作为一种新型抗体,具有分子小、成本低、可塑性强、易于批量生产等诸多优点,在农兽药残留检测领域具有潜在的巨大应用价值。本文立足生产实践,综述了基因工程抗体的分类,应用及改造技术,以期能为基因工程抗体的进一步发展提供相关资料。

关键词：基因工程抗体兽药残留检测农兽药残留单链抗体应用及前景

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单链抗体在小分子化学物质残留检测的研究进展

单链抗体在小分子化学物质残留检测的研究进展

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：候仁彭大鹏华中农业大学国家兽药残留基准实验室(HZAU)农业部兽药残留检测重点实验室

兽药、农药及生物毒素等小分子化学物质在食品、饲料或水体中的过量残留对人类、动物的健康及生态环境的平衡造成一定程度的危害。因此建立一种针对上述小分子化学物质残留的快速检测方法是十分必要的。以抗原抗体特异性结合为基础的免... 详细信息

兽药、农药及生物毒素等小分子化学物质在食品、饲料或水体中的过量残留对人类、动物的健康及生态环境的平衡造成一定程度的危害。因此建立一种针对上述小分子化学物质残留的快速检测方法是十分必要的。以抗原抗体特异性结合为基础的免疫分析技术是残留检测的常用手段。此技术的关键是制备可用来检测特异性抗原的抗体。随着对抗体结构的解析及重组DNA技术的发展,单链抗体为小分子化学物质的残留检测提供了新的技术手段。单链抗体具有分子量小、免疫原性低、可塑性强、还可批量生产的优点,具有广阔的发展空间。近年来,以单链抗体为基础建立的酶联免疫吸附法检测小分子化学物质的残留检测成为最常用的分析工具。且单链抗体的筛选策略、表达策略、突变策略及与碱性磷酸酶形成的融合蛋白等进一步提高了抗体产量、灵敏度、广谱性并使免疫分析方法简便化,从而推进单链抗体免疫分析方法在小分子化学物质残留检测的应用。

关键词：残留检测小分子化学物质基因工程抗体单链抗体

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细菌主要外排泵及耐药产生

细菌主要外排泵及耐药产生

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：高海娇徐超程古月袁宗辉华中农业大学国家兽药残留基准实验室(HZAU)农业部兽药残留检测重点实验室

抗生素在抑制和杀灭细菌及各种致病微生物中有着不可替代的作用,细菌对抗生素产生耐药,导致一些药物对病原微生物感染的疗效降低甚至无效。近几年的耐药研究显示,细菌对药物的主动外排在多重耐药（Multidrug resistance,MDR）方面发挥... 详细信息

抗生素在抑制和杀灭细菌及各种致病微生物中有着不可替代的作用,细菌对抗生素产生耐药,导致一些药物对病原微生物感染的疗效降低甚至无效。近几年的耐药研究显示,细菌对药物的主动外排在多重耐药（Multidrug resistance,MDR）方面发挥着重要作用,即抗菌药物进入菌内,会激活细菌内膜的外排蛋白或调节蛋白,将药物排出,使细菌细胞内的药物浓度降低,从而导致药物对细菌的作用减弱或失去药效。在细菌细胞中,能将药物排出至细胞外的外排蛋白又被称作"外排泵"。由外排泵诱导的细菌耐药主要分为固有耐药,获得性耐药和表型性耐药。

关键词：外排泵细菌耐药多重耐药

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磺胺类药物代谢与残留消除以及检测方法研究进展

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中国兽药杂志 2019年第2期53卷 66-75页

作者：孙亚奇郭京超潘源虎刘振利王旭袁宗辉华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学国家兽药残留基准实验室(HZAU)农业部食品兽药残留检测重点实验室武汉430070

对磺胺类药物在动物和人体内的代谢与残留消除规律以及残留检测方法进行综述,并展望磺胺类药物的代谢研究方向以及残留检测技术的发展,以期为开发新的磺胺类药物残留检测方法提供技术支持和参考。

关键词：磺胺类药物代谢残留消除检测方法

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转录因子MondoA在糖代谢中的研究进展

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动物医学进展 2018年第3期39卷 97-102页

作者：崔潞晴黄德玉陆启荣邵羊阳王旭程古月郝海红彭大鹏袁宗辉戴梦红华中农业大学国家兽药残留基准实验室HZAU/农业部食品兽药残留检测重点实验室湖北武汉430070

转录因子MondoA是细胞内葡萄糖代谢的关键调控因子,与Max-like蛋白x(Mlx)形成异源二聚体调控糖酵解相关基因的表达,介导细胞代谢反应,从而维持胞内外葡萄糖稳态。由于人类代谢性疾病和癌症通常伴随着葡萄糖代谢紊乱,因此更好地理解细胞... 详细信息

转录因子MondoA是细胞内葡萄糖代谢的关键调控因子,与Max-like蛋白x(Mlx)形成异源二聚体调控糖酵解相关基因的表达,介导细胞代谢反应,从而维持胞内外葡萄糖稳态。由于人类代谢性疾病和癌症通常伴随着葡萄糖代谢紊乱,因此更好地理解细胞的葡萄糖感应及代谢机制,将为治疗代谢性疾病和癌症提供新的方向。论文综述了细胞中MondoA的分子特征、葡萄糖对MondoA的激活、MondoA对糖代谢的调控及其与癌症的关系,并讨论了可能的研究方向,为细胞代谢机制的研究和代谢性疾病的治疗提供参考。

关键词：转录因子 MondoA 糖代谢代谢性疾病

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玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备及其在动物组织与饲料中的ELISA快速检测方法研究

玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备及其在动物组织与饲料中的ELISA快...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：董国良刘振利谢长清韩肖亚袁宗辉彭大鹏国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部兽药残留检测重点实验室农业部食品安全评价重点开放实验室华中农业大学

[目的]本研究拟通过半抗原设计、抗原合成和单克隆抗体制备,制备一种玉米赤霉烯酮的广谱单克隆抗体,并研制相应的ELISA检测试剂盒,用于动物可食性组织和动物饲料中此类毒素的筛选检测。[方法]本研究以玉米赤霉烯酮为原料连接羧甲基羟胺... 详细信息

[目的]本研究拟通过半抗原设计、抗原合成和单克隆抗体制备,制备一种玉米赤霉烯酮的广谱单克隆抗体,并研制相应的ELISA检测试剂盒,用于动物可食性组织和动物饲料中此类毒素的筛选检测。[方法]本研究以玉米赤霉烯酮为原料连接羧甲基羟胺（CMO）,合成半抗原ZEN-CMO,分别与大分子蛋白KLH、BSA、HSA和OVA进行偶联,制备完全抗原ZEN-CMO-KLH、ZEN-CMO-BSA、ZEN-CMO-HSA和ZEN-CMO-OVA。以玉米赤霉烯酮为原料合成半抗原7-NH-ZEN,通过戊二醛（GA）法与BSA连接,制备完全抗原7-NH-ZEN-GA-BSA。将人工抗原ZEN-CMO-BSA/HSA/KLH和7-NH-ZEN-GA-BSA免疫雌性Balb/c小鼠,监测小鼠血清效价和特异性。通过单克隆技术筛选杂交瘤细胞株,采用小鼠体内诱生法制备单克隆抗体。以ZEN-CMO-OVA为包被原、ZEN为竞争物,优化ELISA条件,建立间接竞争ELISA方法。按1、2、4倍定量限（LOQ）向玉米、猪饲料、猪肉、猪肝脏、猪肾脏和牛奶样品中添加ZEN标准溶液。样品经前处理后用制备的单克隆抗体进行ELISA检测,研制试剂盒产品。[结果]半抗原经质谱鉴定合成成功,人工抗原经紫外分光光度计鉴定成功。动物免疫后,经筛选,获得单克隆杂交瘤细胞株ZEN/6C2,该杂交瘤细胞株的染色体数平均为100.7,经鉴定亚型为IgG。ELISA优化结果表明,包被原最佳浓度为1μg mL,单克隆抗体的最佳稀释度为1:64000;标准曲线回归方程为y=（A-D）/[1+（x/C）]+D,A=0.97351,B=7.47822,C=2.03041,D=0.07020,R=0.99977,IC值为114.0±5.0ng L（n=5）,线性范围10～6250ng L。标准曲线的板内和板间变异系数均小于15%,灵敏度为11.3ng L。该抗体对α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇和玉米赤霉酮的交叉反应率分别为89.5%、39.3%、99.2%、55.5%和44.3%。样品添加实验结果表明药物回收率为62.9%～113.6%,批内和批间变异系数均小于15%,结果表明药物说明该ELISA方法的准确性和重复性良好。通过与液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）对比考核,该ELISA方法与LC-MS/MS方法相关性良好,相关系数为0.995,表明该ELISA方法的检测结果切实可靠。[结论]本研究制备了一种能够同时识别玉米赤霉烯酮及其5种代谢产物的广谱单克隆抗体,与国内外同类抗体相比灵敏度较高,广谱性好;基于该抗体建立了玉米、饲料、动物可食性组织及牛奶中玉米赤霉烯酮及其5种代谢物的ELISA检测方法,填补了该方法在动物可食性组织和牛奶中玉米赤霉烯酮类霉菌毒素检测的空白,为玉米赤霉烯酮类霉菌毒素多残留酶联免疫检测产品的研发奠定了基础,具有较高的学术价值和广阔的应用前景。

关键词：玉米赤霉烯酮类抗原单克隆抗体酶联免疫吸附试验动物组织饲料

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甲氧苄啶类单克隆抗体的制备及其在动物可食性组织中的ELISA快速检测方法研究

甲氧苄啶类单克隆抗体的制备及其在动物可食性组织中的ELISA快速...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：韩肖亚刘振利谢长清董国良袁宗辉彭大鹏国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部兽药残留检测重点实验室农业部食品安全评价重点开放实验室华中农业大学

[目的]本研究拟通过半抗原设计、抗原合成和单克隆抗体制备,制备一种甲氧苄啶类的广谱单克隆抗体,并研制相应的ELISA检测试剂盒,用于动物可食性组织中此类药物的筛选检测。[方法]本研究以二甲氧苄啶（DVD）为原料连接丁二酸酐（HS）,合... 详细信息

[目的]本研究拟通过半抗原设计、抗原合成和单克隆抗体制备,制备一种甲氧苄啶类的广谱单克隆抗体,并研制相应的ELISA检测试剂盒,用于动物可食性组织中此类药物的筛选检测。[方法]本研究以二甲氧苄啶（DVD）为原料连接丁二酸酐（HS）,合成半抗原DVD-HS,又以甲氧苄啶（TMP）为原料合成半抗原TMPCOOH。DVD-HS和TMPCOOH分别与BSA、OVA等大分子蛋白偶联,制备完全抗原DVD-HS-DCC-BSA、DVD-HS-DCC-OVA、TMPCOOH-DCC-BSA和TMPCOOH-DCC-OVA。以二甲氧苄啶（DVD）为半抗原,BSA和OVA连接,制备完全抗原DVD-GA-BSA和DVD-GA-OVA。将完全抗原DVD-HS-DCC-BSA、DVD-GA-BSA和TMPCOOH-DCC-BSA免疫雌性Balb/c小鼠,监测小鼠血清效价和特异性。通过单克隆技术筛选杂交瘤细胞株,采用小鼠体内诱生法制备单克隆抗体。以TMPCOOH-DCC-OVA为包被原、TMP为竞争物,优化ELISA条件,建立间接竞争ELISA方法。按1、2、4倍定量限（LOQ）向牛奶、蜂蜜、猪肉、猪肝脏、鸡肉和鸡肝脏样品中添加TMP标准溶液。样品经前处理后用制备的单克隆抗体进行ELISA检测,研制试剂盒产品。[结果]半抗原经质谱鉴定合成成功,人工抗原经紫外分光光度计鉴定成功。动物免疫后,经筛选,获得单克隆杂交瘤细胞株TMP/2Gl,该杂交瘤细胞株的染色体数平均为103.4。经鉴定亚型为IgGl。ELISA优化结果表明,包被原最佳浓度为100 g/L,单克隆抗体的最佳稀释度为1:16000;标准曲线回归方程为y=（A-D）/[1+（1000x/C）^B]+D,A=0.9244,B=6.5644,C=2.34793,D=0.09546,R=1.00000,IC值为0.232±0.007 g/L（n=5）,线性范围为0.0125～3.2 g/L,灵敏度为0.053 g/L。该抗体对其他五种甲氧苄啶类药物的IC50值分别为DVD （0.527μg/L）、ADP （1.479μg/L）、BQP （4.354μg/L）、OMP （0.965μg/L）、BMP （0.119μg/L）,交叉反应率分别为DVD（44%）、ADP（15.7%）、OMP（24%）、BQP（5.3%）、BDP（195%）,且与磺胺类药物无交叉反应。样品添加实验结果表明药物回收率为81.4%～107.7%,批内和批间变异系数均小于20%,结果表明药物说明该ELISA方法的准确性和重复性良好。通过与液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）对比考核,R2=0.994,相关性良好,由此可说明本试验建立的检测方法是真实可靠的。[结论]本研究通过分子模拟技术,设计出了一种新颖的半抗原,基于此半抗原,获得了一种可识别6种甲氧苄啶类药物的广谱性抗体,与现有的同类单克隆抗体相比较其灵敏度较高、广谱性较强,具有一定的学术意义。基于该抗体,本研究建立了牛奶、蜂蜜、猪肉、猪肝脏、鸡肉、鸡肝脏中甲氧苄啶类药物的多残留ELISA检测方法,该方法样品前处理简单、检测限较低、准确性和重复性较好,具有广阔的应用前景。

关键词：甲氧苄啶类抗原单克隆抗体酶联免疫吸附试验动物可食性组织

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microRNA与炎症因子之间调控的研究进展

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生理科学进展 2018年第2期49卷 120-124页

作者：乔芳郭璞刘相莲黄德玉戴梦红程古月郝海红王旭袁宗辉华中农业大学国家兽药残留基准实验室(HZAU)、农业部食品兽药残留检测重点实验室武汉430070

microRNA是一类非编码单链RNA,通过裂解互补的mRNA或抑制mRNA翻译在转录后水平调控基因的表达。研究表明,microRNA不仅可以调节IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α等炎症因子的表达,并且反过来也可以被这些炎症因子调控,形成复杂的信号通路网,... 详细信息

microRNA是一类非编码单链RNA,通过裂解互补的mRNA或抑制mRNA翻译在转录后水平调控基因的表达。研究表明,microRNA不仅可以调节IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α等炎症因子的表达,并且反过来也可以被这些炎症因子调控,形成复杂的信号通路网,发挥重要的生物学作用。本文总结了近年来microRNA与IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α等炎症因子相互作用的研究进展,以及它们对免疫、炎症反应和癌症等疾病的影响,以期能为相关疾病的研究、诊断、治疗提供新思路。

关键词： microRNA 炎症因子 IL-1β IL-6 IL-8 TNF-α

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兽用二氨基嘧啶类抗菌增效剂毒理学研究进展

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中国兽药杂志 2019年第1期53卷 77-84页

作者：郭京超孙亚奇刘振利王旭袁宗辉国家兽药残留基准实验室(华中农业大学) 农业部兽药残留检测重点实验室农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉)华中农业大学动物医学院武汉430070

二氨基嘧啶类抗菌增效剂是一类广谱、高效的药物,广泛应用于临床。综述二氨基嘧啶类抗菌增效剂的毒性作用,主要包括急性毒性、长期毒性、遗传毒性等,以期为评价其安全性,指导临床合理使用,开发新药,避免应用危害提供参考。

关键词：甲氧苄啶二甲氧苄啶巴喹普林奥美普林艾地普林毒性

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欧盟准用饲料药物添加剂使用和管理现状

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中国兽药杂志 2019年第1期53卷 37-43页

作者：戴梦红王湘如崔潞晴赵月冯家伟程古月黄玲利王玉莲彭大鹏王旭袁宗辉华中农业大学动物医学院武汉430070 国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部兽药残留检测重点实验室武汉430070 湖北省生猪健康养殖协同创新中心武汉430070

欧盟允许在饲料和饮水中添加抗菌药和抗球虫药治疗、预防和防治动物疾病。本文收集和整理了欧盟常见的准用饲料药物添加剂清单,说明其适应症和用法用量,并对其授权程序和使用等管理现状进行简单概述,为中国饲料药物添加剂的使用和管理... 详细信息

欧盟允许在饲料和饮水中添加抗菌药和抗球虫药治疗、预防和防治动物疾病。本文收集和整理了欧盟常见的准用饲料药物添加剂清单,说明其适应症和用法用量,并对其授权程序和使用等管理现状进行简单概述,为中国饲料药物添加剂的使用和管理提供借鉴和参考。

关键词：欧盟饲料药物添加剂兽药管理

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