检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2012年第7期32卷 761-766页

作者：王乐卢雅彬熊霞辉朱宁陈梅红中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究Txndc5基因在小鼠前成骨细胞增殖中的作用。方法用雌激素诱导小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1,或在MC3T3-E1细胞中分别用质粒载体过表达Txndc5和用siRNA抑制Txndc5的表达后,Western blot检测Txndc5和细胞周期蛋白水平,荧光实时定量PC... 详细信息

目的研究Txndc5基因在小鼠前成骨细胞增殖中的作用。方法用雌激素诱导小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1,或在MC3T3-E1细胞中分别用质粒载体过表达Txndc5和用siRNA抑制Txndc5的表达后,Western blot检测Txndc5和细胞周期蛋白水平,荧光实时定量PCR检测Cyclin A的mRNA水平,MTS法和细胞计数法检测细胞增殖速度,流式细胞术检测细胞周期。结果雌激素诱导MC3T3-E1增殖加快时,Txndc5的蛋白水平亦上升。抑制Txndc5的表达阻止雌激素的促细胞增殖作用。过表达Txndc5使MC3T3-E1细胞增殖速度加快,S期细胞比例增加,同步化细胞进入细胞周期18 h时,过表达Txndc5组Cyclin A的表达升高,且S期细胞比例为18.69%±4.08%,而对照组仅为8.15%±3.68%。抑制Txndc5的表达则使MC3T3-E1细胞增殖速度减慢,S期细胞比例减少,Cyclin A的表达下降。抑制Cyclin A的表达减弱Txndc5的促细胞增殖作用。结论 Txndc5通过上调Cyclin A的表达介导雌激素的促前成骨细胞增殖作用。

关键词： Txndc5 MC3T3-E1细胞细胞增殖雌激素

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miR-195过表达促进人神经胶质瘤细胞T98G凋亡

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基础医学与临床 2012年第7期32卷 783-787页

作者：赵志强阴彬彭小忠中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的检测过表达miR-195对人神经胶质瘤细胞T98G增殖的影响,探讨miRNA-195在胶质瘤发病过程中可能机制。方法用合成的miR-195模拟物,转染miR-195表达水平较低的人神经胶质瘤细胞T98G,用MTT、流式细胞术和TUNEL法分别检测T98G细胞增殖、... 详细信息

目的检测过表达miR-195对人神经胶质瘤细胞T98G增殖的影响,探讨miRNA-195在胶质瘤发病过程中可能机制。方法用合成的miR-195模拟物,转染miR-195表达水平较低的人神经胶质瘤细胞T98G,用MTT、流式细胞术和TUNEL法分别检测T98G细胞增殖、细胞周期和凋亡,用Western blot检测细胞BCL-2的表达。结果 miR-195模拟物转染T98G后,成熟miR-195明显升高(P<0.05)。在T98G中过表达miR-195后,可明显抑制细胞增殖,过表达miR-195能促进T98G细胞的凋亡和下调细胞BCL-2的表达。结论过表达miR-195能显著促进T98G细胞凋亡,提示miR-195可能对胶质瘤的治疗起作用。

关键词： miR-195 T98G细胞细胞增殖凋亡 BCL-2

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SLC30A3促进人髓性白血病细胞K562向早期红系分化

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基础医学与临床 2012年第7期32卷 773-777页

作者：董林范翠青朱宁陈梅红中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究SLC30A3在红系分化中的作用。方法在人髓性白血病K562细胞系中用质粒载体过表达SLC30A3后,检测细胞红系分化指标CD235、ε-、γ-和β-珠蛋白的表达量及细胞增殖速度。流式细胞术检测CD235的表达,荧光实时定量PCR检测珠蛋白mRNA... 详细信息

目的研究SLC30A3在红系分化中的作用。方法在人髓性白血病K562细胞系中用质粒载体过表达SLC30A3后,检测细胞红系分化指标CD235、ε-、γ-和β-珠蛋白的表达量及细胞增殖速度。流式细胞术检测CD235的表达,荧光实时定量PCR检测珠蛋白mRNA水平,Western blot法检测转录因子GATA-2蛋白水平,MTS法检测细胞增殖速度。结果过表达SLC30A3使K562细胞的红系分化特异标志CD235的表达升高,CD235阳性细胞率由对照组的34.25%±16.89%增加至95.7%±0.14%(P<0.01),ε-、γ-和β-珠蛋白的表达明显升高,红系分化相关转录因子GATA-2的表达降低,细胞增殖速度加快。结论 SLC30A3促进人髓性白血病K562细胞系向早期红系分化。

关键词： SLC30A3 红系分化 K562细胞

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Tmed2促进体外小鼠前成骨细胞MC3T3-E1增殖

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基础医学与临床 2012年第7期32卷 751-755页

作者：熊元熊霞辉卢雅彬朱宁陈梅红中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究Tmed2基因对小鼠前成骨细胞增殖的影响。方法 1)分别在小鼠MC3T3-E1细胞中过表达和抑制Tmed2,检测细胞增殖情况。2)用雌激素处理细胞后,检测细胞的增殖及Tmed2基因的表达量。荧光实时定量PCR检测mRNA水平,MTS法检测细胞活力和增... 详细信息

目的研究Tmed2基因对小鼠前成骨细胞增殖的影响。方法 1)分别在小鼠MC3T3-E1细胞中过表达和抑制Tmed2,检测细胞增殖情况。2)用雌激素处理细胞后,检测细胞的增殖及Tmed2基因的表达量。荧光实时定量PCR检测mRNA水平,MTS法检测细胞活力和增殖,流式细胞术检测细胞周期,Western blot法检测蛋白水平。结果过表达Tmed2使MC3T3-E1细胞的增殖速度加快,细胞周期中S期细胞比例明显增加,且Cyclin A的表达升高。而抑制Tmed2基因表达使MC3T3-E1细胞的增殖速度减慢。雌激素处理使细胞增殖速度加快的同时,Tmed2基因的表达显著增高。结论 Tmed2通过上调Cyclin A的表达,使S期细胞比例增加,加快小鼠前成骨细胞MC3T3-E1的增殖。此外,Tmed2的表达受雌激素的调控,可能参与雌激素促进MC3T3-E1细胞增殖的作用。

关键词： Tmed2 MC3T3-E1细胞细胞增殖雌激素

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MiR-21通过抑制RECK表达促进胆管癌细胞QBC939的侵袭

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基础医学与临床 2012年第5期32卷 510-515页

作者：于岚刘卫陈松森何小东刘长征中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院基本外科北京100730 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究miR-21在胆管癌组织及细胞系中的表达特征及其在胆管癌发生过程中的功能。方法用real-time PCR与Northern blot法分析miR-21在胆管癌组织及胆管癌细胞系QBC939中的表达;选择特异抑制剂Anti-miR-21敲低QBC939细胞内源性miR-21的... 详细信息

目的研究miR-21在胆管癌组织及细胞系中的表达特征及其在胆管癌发生过程中的功能。方法用real-time PCR与Northern blot法分析miR-21在胆管癌组织及胆管癌细胞系QBC939中的表达;选择特异抑制剂Anti-miR-21敲低QBC939细胞内源性miR-21的表达,检测细胞增殖及凋亡表型;用萤光素酶双报告基因以及流式细胞仪分析法筛选并鉴定miR-21的靶基因;用体外侵袭实验分析miR-21对胆管癌细胞系QBC939体外侵袭能力的影响。结果 miR-21在胆管癌组织及胆管癌细胞系QBC939中表达均明显上调;QBC939转染Anti-miR-21后,抑制细胞增殖并促进细胞凋亡;miR-21可以抑制RECK的表达,并可以通过两者之间的相互作用,参与QBC939细胞系的体外侵袭调控。结论抑制miR-21的功能可以抑制胆管癌的进展。

关键词： miR-21 胆管癌 RECK 侵袭

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PDZ结构域中间序列结合特性及其临床应用

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基础医学与临床 2012年第10期32卷 1230-1234页

作者：牟一蔡鹏飞高友鹤中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生理与病理生理学系国家医学分子生物学重点实验室北京100005 中国医学科学院病原生物学研究所北京协和医学院寄生虫学实验室北京100730

PDZ结构域在生物体中广泛存在,介导着大量的蛋白质相互作用,参与和执行多种生物过程和生理功能。PDZ结构域常规地结合配体蛋白C末端4～5个氨基酸残基。然而,蛋白质的相互作用可能比想象中复杂得多。研究发现PDZ结构域还存在着非常规的... 详细信息

PDZ结构域在生物体中广泛存在,介导着大量的蛋白质相互作用,参与和执行多种生物过程和生理功能。PDZ结构域常规地结合配体蛋白C末端4～5个氨基酸残基。然而,蛋白质的相互作用可能比想象中复杂得多。研究发现PDZ结构域还存在着非常规的结合特性,PDZ结构域非常规结合的特性研究有助于丰富蛋白质相互作用网络,发现蛋白质新功能,并能以结合特性为基础研发安全有效的药物应用于相关疾病的治疗。

关键词： PDZ结构域非常规结合特性中间序列临床应用

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MicroRNA-125b在胃癌组织中的高表达并促进胃癌细胞系HGC-27和MGC-803的增殖

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基础医学与临床 2012年第5期32卷 500-504页

作者：阎文婷蒋凤兵王芳余佳冯涛重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探讨microRNA-125b(miR-125b)基因在胃癌患者组织中的表达改变情况,及其对胃癌细胞系增殖和凋亡的影响。方法使用real-time PCR方法检测miR-125b在40例临床诊断为胃癌患者的癌组织与癌旁对照组织中的表达情况。随后使用miR-125b mi... 详细信息

目的探讨microRNA-125b(miR-125b)基因在胃癌患者组织中的表达改变情况,及其对胃癌细胞系增殖和凋亡的影响。方法使用real-time PCR方法检测miR-125b在40例临床诊断为胃癌患者的癌组织与癌旁对照组织中的表达情况。随后使用miR-125b mimic转染胃癌细胞系HGC-27和MGC-803,确认过表达成功后,分别使用CCK-8试剂盒和流式细胞仪检测过表达miR-125b对细胞增殖和凋亡的影响。结果证实在胃癌患者组织中miR-125b的表达水平显著高于癌旁对照组(P<0.01)。在胃癌细胞系HGC-27和MGC-803中过表达miR-125b后,细胞增殖明显增加:转染72 h,HGC-27(scramble组:1.632±0.09,mimic组:2.473±0.08),MGC-803(scramble组:1.603±0.05,mimic组:2.554±0.07)),同时细胞凋亡也受到抑制。结论 miR-125b可能作为癌基因在胃癌中发挥作用,并对细胞增殖和凋亡具有显著影响。

关键词： microRNA-125b 胃癌细胞增殖细胞凋亡

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B细胞淋巴瘤／白血病-xL重组腺病毒的构建及其功能鉴定

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中华实验外科杂志 2012年第4期29卷 618-621,F0004页

作者：倪冷刘昌伟刘暴宋伟李天佳王琳芳中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院血管外科北京100730 中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

目的构建携带目的基因B细胞淋巴瘤／白血病．xL（bcl—xL）的重组腺病毒并鉴定其功能。方法构建重组腺病毒pAdxsi—GFP-bcl—xL并体外感染人脐静脉内皮细胞，检测目的蛋白表达及氧化应激下细胞凋亡。结果重组腺病毒pAdxsi—GFP—bcl—x... 详细信息

目的构建携带目的基因B细胞淋巴瘤／白血病．xL（bcl—xL）的重组腺病毒并鉴定其功能。方法构建重组腺病毒pAdxsi—GFP-bcl—xL并体外感染人脐静脉内皮细胞，检测目的蛋白表达及氧化应激下细胞凋亡。结果重组腺病毒pAdxsi—GFP—bcl—xL构建成功，感染人脐静脉内皮细胞后可成功表达目的蛋白bcl—xL，膜联蛋白V／异硫氰酸荧光素（AnnexinV／FITC）荧光染色及碘化丙锭（PI）染色结果提示，在氧化应激下，重组腺病毒感染组早期及中晚期细胞凋亡率均较对照组（H2O2组）显著降低，两组早、中晚期凋亡率分别为（3．7±0．2）％、（10．3±0．5）％（P〈0．01）及（6．8±1．3）％、（18．3±2．8）％（P〈0．05）。结论成功构建重组腺病毒pAdxsi—GFP—bcl—xL，它可显著降低氧化应激介导的血管内皮细胞凋亡。

关键词： B细胞淋巴瘤白血病-xL 腺病毒脐静脉内皮细胞氧化应激

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AIDS患者γδ T细胞能够杀伤自体HIV感染的CD4^+ T细胞

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基础医学与临床 2012年第7期32卷 778-782页

作者：李珍焦艳梅崔莲仙吴昊何维中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 首都医科大学附属北京佑安医院感染科北京100069

目的建立自体人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的CD4+T细胞模型,检测获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者γδT细胞对自体HIV感染的CD4+T细胞的杀伤作用。方法分离健康志愿者和未治疗的AIDS患者外周血单个核细胞(PBMCs),磁珠分选获得高纯度的CD4+... 详细信息

目的建立自体人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的CD4+T细胞模型,检测获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者γδT细胞对自体HIV感染的CD4+T细胞的杀伤作用。方法分离健康志愿者和未治疗的AIDS患者外周血单个核细胞(PBMCs),磁珠分选获得高纯度的CD4+T细胞,加入植物血凝素(PHA)和白细胞介素-2(IL-2)共同培养,建立自体HIV感染的CD4+T细胞模型。流式细胞术检测HIV-P24+CD4+T细胞的比例。乳酸脱氢酶(LDH)法测定γδT细胞的细胞毒作用。结果培养到第10天时,HIV-P24+CD4+T细胞的比例达到最高值。AIDS患者的γδT细胞不仅能够杀伤自体HIV感染的CD4+T细胞(细胞溶解率为71.1±97),而且对HIV也有一定的杀伤作用(细胞溶解率为24.2±18.2)。而健康志愿者γδT细胞对自体CD4+T细胞没有杀伤作用(细胞溶解率为4.3±10.1)。结论 AIDS患者γδT细胞能够杀伤自体HIV感染的CD4+T细胞,为采用γδT细胞过继免疫治疗AIDS提供了依据。

关键词： γδT细胞人类免疫缺陷病毒获得性免疫缺陷综合征

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2009甲型H1N1疫苗株与普通季节性H1N1疫苗株在呼吸道细胞中感染效率的比较

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基础医学与临床 2012年第6期32卷 613-617页

作者：王玉国洪小栩何丽芳杨宁王丽丽赵琼英蒋澄宇中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 国家药典委员会北京100061 云南沃森生物技术股份有限公司云南昆明650106

目的探讨2009甲型H1N1疫苗株与季节性H1N1疫苗株在人呼吸道细胞中感染效率的差异。方法用间接免疫荧光法检测H1N1病毒感染A549、CNE-2Z、H1650、Hep-2和MRC-5细胞的效率;用间接免疫荧光法检测抑制因子对H1N1病毒侵入细胞的影响。结果 1)... 详细信息

目的探讨2009甲型H1N1疫苗株与季节性H1N1疫苗株在人呼吸道细胞中感染效率的差异。方法用间接免疫荧光法检测H1N1病毒感染A549、CNE-2Z、H1650、Hep-2和MRC-5细胞的效率;用间接免疫荧光法检测抑制因子对H1N1病毒侵入细胞的影响。结果 1)2009甲型H1N1疫苗株感染人呼吸道细胞的效率:H1650>A549>CNE-2Z>MRC-5>Hep-2;季节性H1N1疫苗株感染人呼吸道细胞的效率A549>CNE-2Z>H1650>MRC-5>Hep-2;2)2009甲型H1N1疫苗株和季节性H1N1疫苗株均依赖于内吞作用进入细胞。结论在A549细胞中,季节性H1N1疫苗株的感染效率明显高于甲型H1N1疫苗株;在H1650细胞中,甲型H1N1疫苗株的感染效率明显高于季节性H1N1疫苗株。

关键词：甲型H1N1病毒流感病毒呼吸道细胞感染效率

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