检索结果-内蒙古大学图书馆

中华神经外科杂志 2008年第1期24卷 69-72页

作者：王建交杨立庄刘福生金贵善柴奇彭小忠(点评) 北京市神经外科研究所首都医科大学附属北京天坛医院100050 哈尔滨医科大学附属第二医院神经外科中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室

目的探讨重组单纯疱疹病毒介导的内皮抑素和血管生成抑素（Endo-Angio）融合基因对C6胶质瘤的疗效。方法构建含有Endo-Angio融合基因的重组单纯疱疹病毒，四唑蓝比色法（MTT法）体外观察其C6细胞的裂解作用；Western-blot观察Endo—Angi... 详细信息

目的探讨重组单纯疱疹病毒介导的内皮抑素和血管生成抑素（Endo-Angio）融合基因对C6胶质瘤的疗效。方法构建含有Endo-Angio融合基因的重组单纯疱疹病毒，四唑蓝比色法（MTT法）体外观察其C6细胞的裂解作用；Western-blot观察Endo—Angio融合蛋白的表达。建立大鼠C6模型，当肿瘤体积≥2mm^3时，治疗组瘤腔内注射10^7pfu（10μl）病毒，对照组注射等剂量生理盐水。MRI动态观察肿瘤体积变化，组织病理行微血管计数，并记录荷瘤鼠生存时间。结果体外实验示：当感染率（MOI）=1000时，99％的C6细胞死亡；头部MRI发现治疗组胶质瘤生长减慢；荷瘤鼠存活期：对照组（20．3±0．45）d，治疗组（38．3±0．96）d，中位生存期延长（P〈0．01）；HE染色见瘤细胞分散，体积较小，无出血坏死；病理染色示：治疗组和对照组新生血管均值分别为（5．3±1．7）／HP和（15．6±2．8）／HP（P〈0．01）。结论重组单纯疱疹病毒介导的Endo-Angio融合基因不仅通过抑制肿瘤的新生血管生成，而且通过裂解肿瘤细胞双重作用治疗颅内胶质瘤。

关键词：内皮抑素血管生成抑素血管生成 C6胶质瘤病毒-基因治疗

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颗粒酶B抑制剂的研究进展

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国际免疫学杂志 2008年第3期31卷 197-200页

作者：李一叶卢圣栋(审校) 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院分子生物学国家重点实验室北京100005

颗粒酶B是细胞毒淋巴细胞发挥免疫杀伤作用的重要效应因子，不仅在靶细胞内快速诱导凋亡及其它细胞毒作用，还具有重要的胞外生物学功能。颗粒酶B在机体内的自稳调节主要通过与丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族成员相互作用而实现。这种内源抑... 详细信息

颗粒酶B是细胞毒淋巴细胞发挥免疫杀伤作用的重要效应因子，不仅在靶细胞内快速诱导凋亡及其它细胞毒作用，还具有重要的胞外生物学功能。颗粒酶B在机体内的自稳调节主要通过与丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族成员相互作用而实现。这种内源抑制剂是细胞毒淋巴细胞及某些抗原递呈细胞保持其免疫内稳态的重要调控者，在临床上还能缓解与颗粒酶B死亡路径相关的自身免疫性疾病及移植排斥反应。多种肿瘤细胞已被发现有颗粒酶B抑制剂的表达，可能与其逃避促凋亡作用有关。为抵制抗感染效应，各种病毒亦进化产生了不同作用机制的颗粒酶B抑制剂。研究各种天然及人工合成的颗粒酶B抑制剂有助于在对抗人类自身免疫性疾病及癌症方面提供基于选择性调控的新型治疗方法，在抗病毒药物研制方面也具有潜在的临床应用价值。

关键词：颗粒酶B 丝氨酸蛋白酶抑制剂淋巴细胞生物学

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人Ndfip1和Nedd4的原核表达,纯化和抗体制备

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生命科学研究 2008年第1期12卷 40-44页

作者：黄守均张勇菅记涌朱大海中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础医学院生化与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室中国北京100005

为了进一步从蛋白水平上检测Ndfip1(Nedd4 family interacting protein 1)和Nedd4(Neuronal precursor cell-expressed developmentally down-regulated 4)在肢带型肌营养不良(Limb-girdle muscular dystrophy,LGMD)患者的肌肉组织中的表达及功能,以正常人的脑和肾脏组织的总RNA为模板,RT-PCR扩增Ndfip1和Nedd4部分编码序列,构建原核表达重组质粒pET28b-hNdfip1和pET28b-hNedd4,转化大肠杆菌BL21后,加IPTG诱导蛋白表达,Ni-NTA层析柱纯化蛋白,免疫BALB/c小鼠制备抗体.Westernblot检测显示抗体能识别人和小鼠的Ndfip1和Nedd4,小鼠各组织中Ndfip1的蛋白表达谱与文献报道的Ndfip1 mRNA表达谱不一致,暗示Ndfip1具有转录和翻译水平的调控.

关键词： Ndfip1 Nedd4 肢带型肌营养不良抗体

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雄激素受体和免疫系统

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国际免疫学杂志 2008年第3期31卷 168-171页

作者：康宁何维(审校) 北京协合医学院基础学院中国医学科学院基础医学研究所免疫学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京协和医学院基础学院中国医学科学院基础医学研究

雄激素可以介导大量的生理反应，其作用是通过雄激素受体实现的。雄激素受体分为细胞内受体和膜受体。细胞内受体属于核受体家族，有3个结构域，分别是转录激活结构域、DNA结合结构域和配体结合结构域。膜受体是近年来新发现的一种雄激... 详细信息

雄激素可以介导大量的生理反应，其作用是通过雄激素受体实现的。雄激素受体分为细胞内受体和膜受体。细胞内受体属于核受体家族，有3个结构域，分别是转录激活结构域、DNA结合结构域和配体结合结构域。膜受体是近年来新发现的一种雄激素受体，可能与G蛋白有关，引发细胞内Ca^2＋水平的升高，并产牛下游的一系列反应。近年来的研究显示，雄激素和雄激素受体与免疫系统有密切的关系，对其发育和反应性有重要影响。

关键词：雄激素雄激素受体免疫系统

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利用GAL4和萤光素酶确定锌指蛋白HZF1的激活结构域

利用GAL4和萤光素酶确定锌指蛋白HZF1的激活结构域

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第九届全国酶学学术讨论会暨邹承鲁诞辰85周年纪念会

作者：邓敏捷彭瀚张俊武中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室

大量研究已证明锌指蛋白在细胞分化和发育过程中扮演着重要角色。先前我们课题组从人骨髓 cDNA 文库中筛选到一个新的锌指蛋白基因 HZF1,并已证明其在红系和巨核系分化中具有重要作用(Leukemia,20:1109-1116,2006)。为了鉴定 HZF1

关键词：锌指蛋白 HZF1 萤光素酶转录激活

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载脂蛋白A-Ⅰ不同部位半胱氨酸突变对受体结合能力的影响

载脂蛋白A-Ⅰ不同部位半胱氨酸突变对受体结合能力的影响

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第四届全国血脂分析与临床学术研讨会暨第九届全国脂蛋白学术会议

作者：张新波陈保生中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院国家医学分子生物学重点实验室

目的探讨载脂蛋白 A-I(apoA-I)不同部位半胱氨酸突变对其受体结合能力的影响, 选择合适的载脂蛋白 AI 半胱氨酸突变体作为药物载体。方法根据 apoA-I 的结构特点以及天然半胱氨酸突变体 apoA-IBMilanoB(A-IBMB)、apoA-IBParisB 发生突... 详细信息

目的探讨载脂蛋白 A-I(apoA-I)不同部位半胱氨酸突变对其受体结合能力的影响, 选择合适的载脂蛋白 AI 半胱氨酸突变体作为药物载体。方法根据 apoA-I 的结构特点以及天然半胱氨酸突变体 apoA-IBMilanoB(A-IBMB)、apoA-IBParisB 发生突变的特殊位置,本课题组自行设计并构建了7个 apoA-I 的半胱氨酸突变体:A-I(S52C)、A-I(N74C)、A-I(K107C)、A-I (G129C)、A-IM(R173C)、A-I(K195C)及 A-I(S228C)。FITC 标记野生型载脂蛋白 AI 及其半胱氨酸突变体,并检测标记蛋白的标记率。流式细胞仪(FACS)检测野生型载脂蛋白 AI 及其半胱氨酸突变体与 HepG2细胞的结合能力。结果野生型载脂蛋白 AI 及其半胱氨酸突变体蛋白的标记率均≥98%。与野生型 apoA-I 相比,载脂蛋白 A-IBBMB 的受体结合力显著升高,A-I(S52C)、A-I (K107C)及 A-I(G129C)突变蛋白的受体结合能力显著降低,A-I(N74C)、A-I(K195C)及 A -I(S228C)蛋白的受体结合能力与野生型 apoA-I 基本相同。结论载脂蛋白 AI 不同部位半胱氨酸突变对受体结合能力具有不同的影响,A-IM(R173C)可能更适合于作为药物载体。

关键词：受体结合不同部位半胱氨酸

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睾丸表达新基因HSD-28的克隆及其编码蛋白质的研究

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医学研究杂志 2008年第12期37卷 28-31,F0003页

作者：张宁王勇陈迎春吴宁缪时英王琳芳中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室/北京协和医学院(清华大学医学部)基础学院北京100005

目的研究从人初级精母细胞特异EST文库中克隆的新基因HSD-28及编码蛋白质在精子发生过程中的表达及可能发挥的功能。方法利用根据本实验室构建的人初级精母细胞特异EST文库,通过电子克隆方法,从网络数据库资源获取基因HSD-28。纯化原核... 详细信息

目的研究从人初级精母细胞特异EST文库中克隆的新基因HSD-28及编码蛋白质在精子发生过程中的表达及可能发挥的功能。方法利用根据本实验室构建的人初级精母细胞特异EST文库,通过电子克隆方法,从网络数据库资源获取基因HSD-28。纯化原核表达系统表达的HSD-28蛋白,以此免疫新西兰白兔制备针对HSD-28的特异性多克隆抗体。采用免疫组化的方法研究HSD-28在人睾丸组织中的表达定位。最后,利用酵母双杂交系统筛选与HSD-28相互作用的蛋白质。结果克隆得到了的HSD-28基因,提交GenBank获得登陆号为AY251533,全长为641个碱基,其中开放阅读框为504碱基,编码一个由168个氨基酸构成的蛋白质,命名为HSD-28蛋白。将构建的pET-30a-HSD-28重组质粒转化到BL21(DE3)宿主菌,表达并纯化了HSD-28蛋白,大小约为28kDa。免疫组织化学结果显示,HSD-28蛋白特异的定位于人精原细胞和早期初级精母细胞。筛选得到与HSD-28相互作用的两个阳性克隆45#和106#。结论从人睾丸cDNA文库中成功克隆得到HSD-28基因,其编码蛋白质表达定位于人精原细胞和初级精母细胞中,可能参与精子发生过程中减数分裂的调节。

关键词： HSD-28 精原细胞初级精母细胞减数分裂

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人工耳蜗植入者线粒体12SrRNA基因突变的分析

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中国医药生物技术 2008年第3期3卷 169-172页

作者：陈东野陈晓巍田永胜左瑾曹克利方福德中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院耳鼻喉科 100730 基础医学研究所/医学分子生物学国家重点实验室

目的研究接受人工耳蜗植入的耳聋患者中,线粒体12SrRNA基因突变的类型和发生概率。方法选取100例接受人工耳蜗植入的非综合征性耳聋患者(语前聋96例,语后聋4例;氨基糖苷类药物使用史者16例),取外周血提取基因组DNA,以PCR方法扩增线粒体1... 详细信息

目的研究接受人工耳蜗植入的耳聋患者中,线粒体12SrRNA基因突变的类型和发生概率。方法选取100例接受人工耳蜗植入的非综合征性耳聋患者(语前聋96例,语后聋4例;氨基糖苷类药物使用史者16例),取外周血提取基因组DNA,以PCR方法扩增线粒体12SrRNA基因,扩增产物纯化后直接测序分析突变。结果100例患者中有2例检测到线粒体12SrRNA基因1555A>G纯合突变,1例检测到delT961Cn杂合突变,致病基因突变总检出率为3%。结论在所研究的人工耳蜗植入群体中,线粒体12SrRNA基因突变不是主要的致聋病因。

关键词：突变线粒体基因 rRNA 听觉丧失耳蜗植入术

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人磷脂转移蛋白的原核表达及其抗体的制备与鉴定

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免疫学杂志 2008年第6期24卷 684-687页

作者：刘惠荣吴刚周冰申乐薛红陈保生内蒙古农业大学生物工程学院生物科学教研室呼和浩特010018 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京市药品不良反应监测中心北京100024

目的利用大肠杆菌表达人磷脂转移蛋白(PLTP),制备兔抗人PLTP的多克隆抗血清。方法采用RT-PCR技术,将人PLTP蛋白编码序列克隆入pET-30b(+)原核表达载体,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,切胶纯化蛋白后免疫家兔,制备PLTP抗血清。用间接ELISA法... 详细信息

目的利用大肠杆菌表达人磷脂转移蛋白(PLTP),制备兔抗人PLTP的多克隆抗血清。方法采用RT-PCR技术,将人PLTP蛋白编码序列克隆入pET-30b(+)原核表达载体,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,切胶纯化蛋白后免疫家兔,制备PLTP抗血清。用间接ELISA法、Western blot、细胞免疫荧光检测对抗血清效价及特异性进行鉴定。结果SDS-PAGE分析表明,PLTP基因在大肠杆菌BL21(DE3)菌株的包涵体中高效表达,最佳诱导表达时间为3h;将纯化的蛋白免疫家兔,ELISA法测定的抗血清效价为1∶256000;Western blot及细胞免疫荧光检测显示,抗血清可以与PLTP原核及真核表达蛋白特异结合。结论成功地将PLTP进行了原核表达,制备了高效价、高特异性的兔抗人PLTP抗血清,为PLTP的临床检测及其结构与功能的进一步研究提供了有力工具。

关键词：磷脂转移蛋白原核表达抗体

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NeuroD在神经细胞分化中的调控作用

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医学分子生物学杂志 2008年第3期5卷 278-282页

作者：方洪波张业沈珝琲中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京市100005

神经分化因子(NeuroD)是一种含bHLH结构域的结合E-box的转录调控因子,主要参与神经细胞分化过程和胰腺发生、功能维持。近年来的研究表明,NeuroD的表达受细胞因子调控或某些化学因子影响,同时与多种蛋白,如Brg1,AK1和Htt等共同调节下游... 详细信息

神经分化因子(NeuroD)是一种含bHLH结构域的结合E-box的转录调控因子,主要参与神经细胞分化过程和胰腺发生、功能维持。近年来的研究表明,NeuroD的表达受细胞因子调控或某些化学因子影响,同时与多种蛋白,如Brg1,AK1和Htt等共同调节下游基因表达,进而调控细胞周期和神经细胞分化进程。这些研究为NeuroD参与细胞分化进程,糖尿病和其他神经性疾病的发生提供了依据。

关键词： NeuroD 胰腺全反式维甲酸

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