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2012全国发育生物学大会

作者：邹小停孟姣李莉张勤王威钟冉李常银周玉长张勇朱大海中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系

最新研究发现,内源性代谢中间产物在不同的生物学过程中都发挥着十分重要的调控功能,但目前已知具有这样功能的内源性代谢小分子却寥寥无几。我们通过系统发现鉴定了一个与骨骼肌发育相关的内源性代谢小分子X。实验表明内源性代谢小分子... 详细信息

最新研究发现,内源性代谢中间产物在不同的生物学过程中都发挥着十分重要的调控功能,但目前已知具有这样功能的内源性代谢小分子却寥寥无几。我们通过系统发现鉴定了一个与骨骼肌发育相关的内源性代谢小分子X。实验表明内源性代谢小分子X剂量和时间依赖的促进C2C12和原代骨骼肌干细胞的增殖。同时,X可以协同IGF-1对肌细胞增殖的促进作用和拮抗Myostatin对骨骼肌干细胞增殖的抑制作用。同时,利用cardiotoxin诱导的小鼠骨骼肌再生模型,我们探讨了该小分子在骨骼肌再生种的功能。我们的结果表明,该内源性代谢小分子可以通过调控骨骼肌干细胞的激活和增值加速骨骼肌的再生。本研究的重要发现是,内源性代谢小分子X通过非Ras和不依赖能量代谢的方式激活Mek/Erk/Cyclin D1信号通路从而促进骨骼肌干细胞的激活、增殖和再生。结论:内源性代谢小分子X除了可以为细胞提供能量外,本研究首次证明了该代谢小分子还具有细胞信号分子的重要调控功能。该研究结果为揭示内源性代谢中间产物的细胞信号转导功能提供了全新的视野和研究方向。同时,也为应用该代谢小分子治疗骨骼肌疾病展示了良好的临床前景。

关键词：骨骼肌干细胞小分子 Erk/Cyclin D1 内源性 Cyclin 信号通路信号分子

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MRG通过影响骨骼肌干细胞微环境调控骨骼肌干细胞功能

MRG通过影响骨骼肌干细胞微环境调控骨骼肌干细胞功能

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2012全国发育生物学大会

作者：孟姣邹小停张勇朱大海中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系

骨骼肌干细胞在骨骼肌损伤再生中起着十分重要的作用,而各种细胞因子和细胞间的相互作用为骨骼肌干细胞的活化、增殖、分化以及融合提供了关键的微环境。因此,研究微环境对骨骼肌干细胞功能的调控作用具有十分重要的理论意义和临床价值... 详细信息

骨骼肌干细胞在骨骼肌损伤再生中起着十分重要的作用,而各种细胞因子和细胞间的相互作用为骨骼肌干细胞的活化、增殖、分化以及融合提供了关键的微环境。因此,研究微环境对骨骼肌干细胞功能的调控作用具有十分重要的理论意义和临床价值。最近我们实验室发现了一个在转录和翻译水平都受Myostatin上调,而且在骨骼肌损伤早期高表达的泛素连接酶基因MRG(Mmyostatin Regulated Gene)。为了研究MRG在骨骼肌发育以及再生中的功能,我们建立了MRG基因敲除小鼠。利用MRG基因敲除小鼠进行的骨骼肌再生研究表明,与野生型相比MRG基因敲除小鼠骨骼肌损伤后再生速度加快。有趣的是,我们发现单个肌纤维上骨骼肌干细胞的数目在野生型和MRG基因敲除小鼠间并没有明显差异。同时,我们还发现CTX损伤2小时后MRG的表达就迅速升高。基于以上结果我们假设,MRG很可能是通过影响细胞因子的分泌从而改变骨骼肌干细胞的微环境进而影响其活化增殖和再生过程。为了验证这一假设,我们检测了损伤后血清中细胞因子的浓度变化,发现在MRG基因敲除小鼠中大部分细胞因子浓度均低于野生型小鼠,而这些细胞因子在mRNA水平的表达却没有明显差异。以上结果为我们的假设提供了部分理论依据。同时,分子机制研究表明,MRG对骨骼肌干细胞微环境的影响可能是通过泛素化它的底物Snapin来调节细胞因子的分泌来实现的。

关键词：骨骼肌干细胞细胞因子野生型 MRG 基因敲除小鼠干细胞微环境

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DNA的甲基化修饰与DNA甲基转移酶

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国外医学（遗传学分册） 2001年第1期24卷 5-8页

作者：尹斌沈岩中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

组织特异的 DNA甲基化谱是哺乳动物基因组的显著特征。DNA的甲基化修饰参与基因表达调控、发育调节、基因组印迹和 X染色体灭活等诸多重要生物学过程。大多数印迹基因可以调节胚胎的生长和发育。印迹功能的紊乱将导致发育异常及死胎。... 详细信息

组织特异的 DNA甲基化谱是哺乳动物基因组的显著特征。DNA的甲基化修饰参与基因表达调控、发育调节、基因组印迹和 X染色体灭活等诸多重要生物学过程。大多数印迹基因可以调节胚胎的生长和发育。印迹功能的紊乱将导致发育异常及死胎。基因组范围内的广泛的去甲基化及随后发生的重新甲基化 ,可能使胚胎消除其亲本特异的甲基化谱 ,从而进入正常发育程序。DNA甲基化异常与肿瘤等疾病有关。肿瘤细胞的总体甲基化水平比正常细胞低 ,但是伴有某些 Cp G岛甲基化程度增高。抑癌基因启动子的异常甲基化和癌基因的去甲基化均影响肿瘤发生发展过程。哺乳动物 DNA甲基化谱的建立和维持需要维持 DNA甲基化的甲基转移酶和 DNA重新甲基转移酶。

关键词： DNA 甲基转移酶肿瘤原核生物宿主防御

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盲肠结扎穿孔术建立急性肺损伤小鼠模型

盲肠结扎穿孔术建立急性肺损伤小鼠模型

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第九届中青年呼吸学者论坛

作者：郭峰邹镇蒋澄宇中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室生物化学与分子生物学系

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双向凝胶电泳技术、蛋白质组学与基础和临床医学

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国外医学（分子生物学分册） 2001年第2期23卷 118-121页

作者：胡莉萍沈岩中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

双向凝胶电泳 (two dim ensional electrophoresis,2 DE)技术建立于 70年代 ,90年代之后又重新兴起。2 DE的复兴主要源于两方面的原因 :一是双向电泳从理论到技术的完善 ,如固相 p H梯度 (imm obilized ph gradi-ent,IPG)的建立 ,IPG等... 详细信息

双向凝胶电泳 (two dim ensional electrophoresis,2 DE)技术建立于 70年代 ,90年代之后又重新兴起。2 DE的复兴主要源于两方面的原因 :一是双向电泳从理论到技术的完善 ,如固相 p H梯度 (imm obilized ph gradi-ent,IPG)的建立 ,IPG等电聚焦精度的提高 ;二是双向电泳技术与质谱、N-端测序等下游技术结合适应了蛋白质组研究发展的要求 ,已在新药发明。

关键词：双向凝胶电泳蛋白质组学基础医学临床医学

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小鼠生精细胞特异表达载体AAV-Dazl-RFP-Flag的构建及表达验证

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基础医学与临床 2020年第6期40卷 753-758页

作者：李雅惠李凯罗艳云李梦真邙新雨宋伟杨涛山西医科大学生物化学与分子生物学教研室山西太原030001 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的构建含有生精细胞特异启动子Dazl的真核报告基因表达载体AAV-Dazl-RFP-Flag,研究生精细胞特异启动子Dazl在生精细胞中的启动效果。方法通过同源重组的方法对腺相关病毒载体AAV-CMV-RFP-Flag进行改造,构建小鼠生精细胞特异表达载体AA... 详细信息

目的构建含有生精细胞特异启动子Dazl的真核报告基因表达载体AAV-Dazl-RFP-Flag,研究生精细胞特异启动子Dazl在生精细胞中的启动效果。方法通过同源重组的方法对腺相关病毒载体AAV-CMV-RFP-Flag进行改造,构建小鼠生精细胞特异表达载体AAV-Dazl-RFP-Flag。在体外,转染GC1-spg野生型细胞和HEK-293T细胞,通过免疫荧光、q-PCR、Western blot验证AAV-Dazl-RFP-Flag在体外的表达特异性。在体内,将AAV-Dazl-RFP-Flag进行腺相关病毒(AAV)包装,通过显微注射技术将AAV注射到小鼠睾丸内,通过q-PCR检测AAV-Dazl-RFP-Flag在体内的表达特异性。结果成功构建了AAV-Dazl-RFP-Flag表达载体,并在体内、外水平验证了AAV-Dazl-RFP-Flag的表达。结论小鼠生精细胞特异表达载体AAV-Dazl-RFP-Flag可以在生精细胞中特异性表达,为雄性生殖不育的基因治疗提供更高效的载体工具。

关键词： Dazl 启动子基因治疗精子发生

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转基因动物技术的进展

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中国实验动物学杂志 1997年第3期7卷 180-183页

作者：梁红燕琦祖和中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室，北京

转基因动物技术的进展梁红燕（综述）琦祖和（审校）（中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室，北京转基因动物技术自八十年代初建立以来，对生命科学的发展起到了重大的推动作用。它使动物和人体... 详细信息

转基因动物技术的进展梁红燕（综述）琦祖和（审校）（中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室，北京转基因动物技术自八十年代初建立以来，对生命科学的发展起到了重大的推动作用。它使动物和人体基因工程研究由以往的单基因离体水平...

关键词：逆转录病毒离体转基因动物病毒感染配合基因转移技术单基因生命科学人体基因细胞水平

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Myostatin信号调节的miR-A通过调控靶基因Eya4表达促进骨骼肌干细胞激活

Myostatin信号调节的miR-A通过调控靶基因Eya4表达促进骨骼肌干细...

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2012全国发育生物学大会

作者：武日茂翟丽丽王威李婷婷于潇华李常银钟冉周玉长张勇朱大海中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系

Myostatin属于TGF-beta生长因子超家族成员之一,功能研究表明Myostatin是骨骼肌生长发育负调控因子。但是,目前对Myostatin在骨骼肌干细胞的激活、增殖与分化过程中的功能及作用机制并不清楚。近年来的研究发现miRNA参与骨骼肌干细胞的... 详细信息

Myostatin属于TGF-beta生长因子超家族成员之一,功能研究表明Myostatin是骨骼肌生长发育负调控因子。但是,目前对Myostatin在骨骼肌干细胞的激活、增殖与分化过程中的功能及作用机制并不清楚。近年来的研究发现miRNA参与骨骼肌干细胞的激活、增殖与分化过程的调控。因此,我们利用Myostatin基因敲除小鼠通过miRNA芯片的分析,系统筛选了骨骼肌组织中受Myostatin信号调控的miRNAs,发现miR-A受Myostatin信号的负调控。采用C2C12细胞系的体外（In vitro）研究表明miR-A能够促进骨骼肌细胞的分化。为了进一步分析miR-A对骨骼肌干细胞功能的调控作用,我们制备了miR-A转基因小鼠。miR-A转基因鼠的骨骼肌组织发育正常,与野生型小鼠相比,miR-A转基因鼠的骨骼肌干细胞数量显著减少。采用Cardiotoxin（CTX）诱导的骨骼肌损伤-再生模型,发现骨骼肌组织损伤1.5天和3.5天后Pax7、MyoD及Pax7/MyoD的细胞数量在miR-A转基因小鼠中均高于野生型小鼠,这些数据提示miR-A能够促进骨骼肌干细胞的激活。进一步分析miR-A调控的靶基因,发现Eya4基因的3'-UTR含有miR-A的结合位点,通过报告基因分析表明miR-A可以靶向Eya4。miR-A转基因鼠骨骼肌组织中Eya4蛋白表达显著降低进一步证明miR-A可以调控Eya4基因的表达和功能。结论:总之,本研究发现Myostatin负调控的miR-A能够通过靶向Eya4基因促进骨骼肌干细胞的激活,从而促进骨骼肌再生。

关键词：骨骼肌干细胞 Myostatin miR-A 信号调节靶基因

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线虫尾部性细胞分化相关基因研究进展

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国外医学（遗传学分册） 2004年第2期27卷 123-124,F003-F004页

作者：王伟秋李强沈岩中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

人类性器官分化发育异常的分子机制一直是发育生物学和遗传学极为关注的问题,模式生物学的发展为解决这一问题提供了新的思路。由于线虫尾部性细胞分化发育的调节与人类性器官分化发育的局部调节有一定相似性,因此线虫尾部性细胞分化相... 详细信息

人类性器官分化发育异常的分子机制一直是发育生物学和遗传学极为关注的问题,模式生物学的发展为解决这一问题提供了新的思路。由于线虫尾部性细胞分化发育的调节与人类性器官分化发育的局部调节有一定相似性,因此线虫尾部性细胞分化相关基因的研究,对人类性发育异常的分子水平研究有重要的参考价值。本文从线虫调节腹侧中线上皮融合、外阴形态发育、直肠、尾部形态发育、尾部神经、肌肉和性腺发育的相关基因等方面,总结了与线虫尾部性细胞分化密切相关的一些基因研究进展,其中以腹侧中线上皮融合相关基因对于线虫尾部性细胞分化尤为重要。

关键词：线虫尾部性细胞分化基因研究进展

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肠道病毒EV71感染对T细胞免疫功能影响的研究

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医学研究杂志 2010年第8期39卷 50-53页

作者：杜伯雨白璐沈岩缪时英王琳芳国家医学分子生物学重点实验室中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院北京市疾病预防控制中心北京100005

目的探讨肠道病毒EV71感染对T淋巴细胞系Jurkat细胞免疫功能的影响。方法首先,用RT-PCR和免疫荧光的方法检测EV71能否感染Jurkat细胞,其次用Annexin V-FITC试剂检测EV71感染后的Jurkat细胞凋亡的情况,最后用ELISA的方法分析感染后的Jur... 详细信息

目的探讨肠道病毒EV71感染对T淋巴细胞系Jurkat细胞免疫功能的影响。方法首先,用RT-PCR和免疫荧光的方法检测EV71能否感染Jurkat细胞,其次用Annexin V-FITC试剂检测EV71感染后的Jurkat细胞凋亡的情况,最后用ELISA的方法分析感染后的Jurkat细胞分泌细胞因子的情况。结果 EV71能够感染Jurkat细胞,并能够引起Jurkat细胞的凋亡,同时EV71感染还能导致Jurkat细胞分泌细胞因子IL-2,IFN-γ,IL-6和IL-10的能力下降。结论 EV71病毒感染对机体免疫功能的影响是多方面的,它不但能够诱导T细胞的凋亡,还能引起T细胞分泌细胞因子的能力降低,从而在数量和功能上影响参与免疫应答的T淋巴细胞。

关键词： EV71 T细胞免疫力

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