检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学杂志 1999年第10期79卷 764-768页

作者：臧梦维沈琦刘景生中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探讨一氧化氮合酶（NOS）抑制剂NG-硝基-L-精氨酸（L-NNA）对阿片耐受和依赖机制中腺苷酸环化酶-环磷酸腺苷（AC-cAMP）系统、Ca2+系统和一氧化氮-环磷酸鸟苷（NO-cGMP）系统变化的影响。方法实验共分为对照组，阿片激动剂组，阿片... 详细信息

目的探讨一氧化氮合酶（NOS）抑制剂NG-硝基-L-精氨酸（L-NNA）对阿片耐受和依赖机制中腺苷酸环化酶-环磷酸腺苷（AC-cAMP）系统、Ca2+系统和一氧化氮-环磷酸鸟苷（NO-cGMP）系统变化的影响。方法实验共分为对照组，阿片激动剂组，阿片激动剂+纳洛酮组;L-NNA+阿片激动剂组和L-NNA+阿片激动剂+纳洛酮组。采用竞争性蛋白结合试验，3H-精氨酸转化成3H-胍氨酸方法，放射免疫测定和激光共聚焦显微镜技术，测定cAMP含量，NOS活性，cGMP生成量和[Ca2+]i水平。免疫组织化学检测iNOS蛋白表达。结果稳定表达iNOS基因的NG-LNCXiNOS细胞在高选择性δ-受体激动剂δ-阿片受体高选择性激动剂（DPDPE）长时程作用及纳洛酮戒断时，胞内cAMP水平和[Ca2+]i增加，胞浆相iNOS活性和cGMP生成增多，与DPDPE预处理剂量成正比。10-4mol/LL-NNA能降低吗啡、DPDPE、DADLE诱发的cAMP、iNOS活性和蛋白及cGMP的升高，但不能降低[Ca2+]i。结论NOS抑制剂延缓阿片耐受和依赖的发生，可能是负调控AC-cAMP系统和NO-cGMP系统，为临床应用NOS抑制剂防治阿片耐受和成瘾提供了实验依据。

关键词：阿片样δ 麻醉品依赖一氧化氮信号传递

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人LDB1 cDNA的分离与克隆

引用

科学通报 1999年第7期44卷 755-760页

作者：周严杜光伟汪俊华陈建和袁建刚强伯勤医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005

根据与鼠LIM结构域结合蛋白Ldb1有较高一致性的人ESTAA45 2 734设计筛库引物 ,在人胎脑cDNA文库中筛出一长度为 2 398bp的cDNA克隆 .其开放读码框编码 34 7个氨基酸 ,与鼠Ldb1、爪蟾XLdb1及果蝇Chip蛋白高度同源 ,含LIM相互作用结构域... 详细信息

根据与鼠LIM结构域结合蛋白Ldb1有较高一致性的人ESTAA45 2 734设计筛库引物 ,在人胎脑cDNA文库中筛出一长度为 2 398bp的cDNA克隆 .其开放读码框编码 34 7个氨基酸 ,与鼠Ldb1、爪蟾XLdb1及果蝇Chip蛋白高度同源 ,含LIM相互作用结构域及核定位信号 .该基因命名为LDB1 (LIMDomainBindingprotein 1 ) ,GenBank接受号为AF0 5 2 ***杂交示LDB1基因在心、脑、肺中表达较高 ,其蛋白产物LDB1作为LIM结构域结合蛋白可能与发育相关 .

关键词： LIM结构域结构蛋白分离克隆 LDB1 cDNA

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人和鼠GRY-RBP cDNA的克隆

引用

科学通报 1999年第19期44卷 2088-2094页

作者：杜光伟潘美辉周严陈建和姚辉袁建刚强伯勤中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

通过筛选人胎儿脑cDNA文库 ,克隆了编码一个新的RNA结合蛋白的人cDNA ,命名为GRY RBP .人GRY RBPcDNA的长度为 2 932bp ,编码一个具 6 2 3个氨基酸 ,分子量为 6 9.6ku的RNA结合蛋白 .GRY RBP蛋白含有 3个RNA识别基序 (RNARecognitionmot... 详细信息

通过筛选人胎儿脑cDNA文库 ,克隆了编码一个新的RNA结合蛋白的人cDNA ,命名为GRY RBP .人GRY RBPcDNA的长度为 2 932bp ,编码一个具 6 2 3个氨基酸 ,分子量为 6 9.6ku的RNA结合蛋白 .GRY RBP蛋白含有 3个RNA识别基序 (RNARecognitionmotifs,RRMs)和一个富含甘氨酸 (G)、精氨酸 (R)、酪氨酸 (Y)的羧基端 .经数据库比较发现该蛋白与许多RRMRNA结合蛋白有较高的相似性 .还以鼠脑cDNA文库为模板 ,利用PCR扩增了鼠GRY RBPcDNA的全编码区和部分非编码区 .Northern杂交发现人GRY RBP在所检测的 8种成人组织中都有表达 ,在心脏。

关键词： cDNA RNA结合蛋白 GRY-RBP 克隆

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

热休克基因mRNA定量RT-PCR检测方法的建立及其应用

引用

科学通报 1999年第18期44卷 1928-1933页

作者：王艳林沈珝琲中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

广泛存在于生物细胞中的热休克蛋白 (heatshockproteins,HSP)不仅在机体的应激保护、生长发育中起重要作用 ,而且与疾病的发生密切相关 .因此 ,建立准确检测细胞中HSP基因表达水平的RT PCR方法对基础及临床研究均具有重要意义 .首先应用... 详细信息

广泛存在于生物细胞中的热休克蛋白 (heatshockproteins,HSP)不仅在机体的应激保护、生长发育中起重要作用 ,而且与疾病的发生密切相关 .因此 ,建立准确检测细胞中HSP基因表达水平的RT PCR方法对基础及临床研究均具有重要意义 .首先应用DNA重组技术及体外转录体系制备了一种能用作测定hsp70 ,hsp90α及hsp90 βmRNA的复合内参照RNA ;然后 ,通过对反应条件的优化、选择 ,建立了一种特异检测 3种主要的人HSP基因mRNA水平的定量RT PCR体系 .应用此体系测定了hsp70 ,hsp90α及hsp90 β在Jurkat细胞中的组成性及热诱导表达规律 .

关键词：热休克基因 mRNA 定量RT-PCR检测热休克白质

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

MBLL cDNA的克隆及组织表达分析

引用

科学通报 1999年第22期44卷 2408-2413页

作者：杜光伟周严陈建和汪俊华阴彬袁建刚强伯勤中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

果蝇的mbl(muscleblind)基因编码一个核蛋白 ,含有 2个Cys3 His锌指基序 .mbl基因的突变将影响果蝇所有光感受器细胞的分化 .根据与mbl基因高度同源的人ESTAA0 86 1 39设计PCR引物 ,筛选胎儿脑cDNA点阵文库 ,得到一个人cDNA ,命名为MBLL... 详细信息

果蝇的mbl(muscleblind)基因编码一个核蛋白 ,含有 2个Cys3 His锌指基序 .mbl基因的突变将影响果蝇所有光感受器细胞的分化 .根据与mbl基因高度同源的人ESTAA0 86 1 39设计PCR引物 ,筛选胎儿脑cDNA点阵文库 ,得到一个人cDNA ,命名为MBLL(muscleblind_like) .MBLL长为 2 5 95bp ,含有一个完整的开放阅读框 ,编码 2 5 5个氨基酸 ,具有 4个Cys3 His锌指基序 ,氨基酸序列与果蝇mbl有很高的同源性 (GenBank接受号 :AF0 6 1 2 6 1 ) .利用Northern和RNA斑点杂交检测MBLL基因在 43种成人组织 ,7种胎儿组织中的表达 ,结果显示MBLL是一个广泛表达的基因。

关键词： MBLL cDNA 克隆组织表达基因编码

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

谷胱甘肽巯基转移酶pi参与肿瘤细胞耐药性的产生

引用

中国医学科学院学报 1999年第5期21卷 402-406页

作者：曹威左瑾方福德中日友好医院临床医学研究所北京100029 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的建立携带大鼠谷胱甘肽巯基转移酶ｐｉ（ＧＳＴ－ｐｉ）ＣＤＮＡ的细胞表达体系。方法用磷酸钙沉淀法将重组质粒ｐＳＶ－ＧＴ和载体质粒ｐＳＶ－ｎｅｏ分别转染ＨｅＬａ细胞，Ｇ４１８筛选得两株转染阳性细胞ＨｅＬａ／ｐＳＶ－ＧＴ... 详细信息

目的建立携带大鼠谷胱甘肽巯基转移酶ｐｉ（ＧＳＴ－ｐｉ）ＣＤＮＡ的细胞表达体系。方法用磷酸钙沉淀法将重组质粒ｐＳＶ－ＧＴ和载体质粒ｐＳＶ－ｎｅｏ分别转染ＨｅＬａ细胞，Ｇ４１８筛选得两株转染阳性细胞ＨｅＬａ／ｐＳＶ－ＧＴ和ＨｅＬａ／ｐＳＶ－ｎｅｏ；采用细胞原位杂交法，以地高辛标记的ＧＳＴ－ｐｉ　ｃＤＮＡ为探针，检测两细胞株ＧＳＴ－ｐｉｍＲＮＡ的表达水平；用ＭＴＴ法检测不同抗癌药物对细胞株的毒性作用。结果ＨｅＬａ／ｐＳＶ－ＧＴ的ＧＳＴ－ｐｉｍＲＮＡ表达明显升高，而ＨｅＬａ／ｐＳＶ－ｎｅｏ和ＨｅＬａ细胞的表达水平很低。阿霉素、丝裂霉素Ｃ和顺铂对ＨｅＬａ／ｐＳＶ－ＧＴ的ＩＣ５０分别为７０．１３、１０．９５和１６．５２ｕｇ／ｍｌ，对ＨｅＬａ／ｐＳＶ－ｎｅｏ的ＩＣ５０分别为１０．３４、７．４８和１３．７０ｕｇ／ｍｌ，长春新碱对两细胞株的毒性无明显差别。结论ＨｅＬａ／ｐＳＶ－ＧＴ细胞具有较高的耐药性。ＧＳＴ－ｐｉｍＲＮＡ的大量表达可能是产生多药耐药的原因，此细胞株可作为一个稳定的遗传学系统在ＧＳＴ－ｐｉ与肿瘤细胞耐药的研究中广泛应用。

关键词： GST-pi 肿瘤耐药性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

PHF2全长cDNA及剪接异构体的克隆鉴定

引用

科学通报 1999年第8期44卷 835-840页

作者：汪俊华杜光伟周严阴彬胡松年袁建刚强伯勤中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

PHD锌指结构蛋白作为HOX基因的上游调控因子 ,在生物体的发育过程中起着重要作用 .涉及该蛋白的异常还与人类的某些恶性疾病如白血病相关 .利用基因数据库同源性比较、PCR扩增、cDNA文库筛选cDNA及部分基因组DNA序列分析、多组织Norther... 详细信息

PHD锌指结构蛋白作为HOX基因的上游调控因子 ,在生物体的发育过程中起着重要作用 .涉及该蛋白的异常还与人类的某些恶性疾病如白血病相关 .利用基因数据库同源性比较、PCR扩增、cDNA文库筛选cDNA及部分基因组DNA序列分析、多组织Northern印迹杂交等方法 ,克隆鉴定了一种新的人类编码PHD蛋白的全长cDNA(PHF2GenBankAcc :AF 0 5 2 2 0 5 )

关键词： PHD锌指结构可变剪接异构体 PHF2 克隆 cDNA

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

改进的反向PCR技术克隆转移基因的旁侧序列

引用

生物化学与生物物理进展 1999年第6期26卷 600-602页

作者：李竹红刘德培梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

对传统的反向ＰＣＲ技术作了一些改进：用巢式ＰＣＲ扩增含量极少的靶序列；ＰＣＲ反应体系中加入５％的甲酰胺以减少非特异性扩增．结果表明，改进的反向ＰＣＲ体系是克隆人基因组已知片段旁侧序列的高度灵敏、高度特异的方法．

关键词：反向PCR 旁侧序列转移基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一个新的人类硫氧化还原蛋白基因的克隆

引用

科学通报 1999年第12期44卷 1307-1310页

作者：周彦潘美辉袁建刚杜光伟强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

根据不同发育阶段 ( 1 3,33周 )的人胎脑组织mRNA差异显示分析 (又称DDRT PCR)所得到的具有差异表达的EST的序列 ,设计引物筛选点阵排列的人胎脑cDNA文库 ,得到一个新的全长cDNA克隆 .这个克隆全长 1 2 0 8bp ,包含一个 889bp的开放阅读... 详细信息

根据不同发育阶段 ( 1 3,33周 )的人胎脑组织mRNA差异显示分析 (又称DDRT PCR)所得到的具有差异表达的EST的序列 ,设计引物筛选点阵排列的人胎脑cDNA文库 ,得到一个新的全长cDNA克隆 .这个克隆全长 1 2 0 8bp ,包含一个 889bp的开放阅读框 ,一个 1 32bp的 5′非翻译序列和一个 2 0 9bp的 3′非翻译序列以及典型的polyA加尾信号 .其推断的氨基酸序列与人硫氧化还原蛋白同源 ,而且含有硫氧化还原蛋白的保守的活性位点序列 .将它命名为人的类硫氧化还原蛋白基因 (humanthioredoxinlikegene ,hTRXL) .

关键词：差异显示硫氧化还原蛋白胎脑基因克隆

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

3种化学诱导物对大鼠GST-P基因表达的影响及机理

引用

科学通报 1999年第23期44卷 2550-2554页

作者：廖名湘刘东远左瑾张红云方福德中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

大鼠谷胱甘肽S_转移酶P(GST_P)基因可被多种化学致癌物诱导表达 .采用基因诱导实验、共转染报告质粒瞬时表达实验、凝胶阻滞实验和分子杂交实验探讨了 3种化学物诱导GST_P基因表达的机理 .结果表明 ,佛波酯 (TPA)、甲基丙烯酸环氧丙酯 (... 详细信息

大鼠谷胱甘肽S_转移酶P(GST_P)基因可被多种化学致癌物诱导表达 .采用基因诱导实验、共转染报告质粒瞬时表达实验、凝胶阻滞实验和分子杂交实验探讨了 3种化学物诱导GST_P基因表达的机理 .结果表明 ,佛波酯 (TPA)、甲基丙烯酸环氧丙酯 (GMA)和H2 O2 对GST_P基因表达的影响及其机理不甚相同 :TPA和GMA主要通过激活AP_1或相应转录因子与GPEⅠ增强子元件相作用而促进GST_P表达 ,H2 O2

关键词：癌变 GST-P基因基因表达调控化学诱导物

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：