检索结果-内蒙古大学图书馆

中华创伤杂志 2020年第3期36卷 275-282页

作者：彭威黎中雪卢彦竹艾秋池周江玲侯天勇陆军军医大学西南医院骨科全军矫形外科中心组织工程国家地方联合工程中心全军骨组织工程重点实验室400038

目的初步探讨大段骨缺损移植组织工程骨(TEB)后,Arpin蛋白介导的宿主骨髓间充质干细胞(BMSCs)迁移至移植区参与骨修复的作用。方法免疫荧光观察BMSCs中Arpin蛋白和肌动蛋白相关蛋白2/3(Arp2/3蛋白)的表达及相对定位。构建干扰Arpin蛋白... 详细信息

目的初步探讨大段骨缺损移植组织工程骨(TEB)后,Arpin蛋白介导的宿主骨髓间充质干细胞(BMSCs)迁移至移植区参与骨修复的作用。方法免疫荧光观察BMSCs中Arpin蛋白和肌动蛋白相关蛋白2/3(Arp2/3蛋白)的表达及相对定位。构建干扰Arpin蛋白表达慢病毒,转染BMSCs,通过qRT-PCR和Western blot检测Arpin的抑制水平。按照Arpin蛋白表达含量不同,分为空载体对照组和Arpin表达抑制组进行体外和体内实验。体外实验:用迁移小室建立细胞迁移模型,上室接种空载体对照组和Arpin表达抑制组细胞,荧光显微镜检测细胞迁移数量;6孔板接种空载体对照组和Arpin表达抑制组细胞,建立“伤口愈合实验”模型,显微镜检测“伤口愈合”情况。体内实验:选取8周龄C57BL/6小鼠,所有小鼠按照随机数字表法分为空载体对照组(6只)和Arpin表达抑制组(6只)。切除股骨中段2 mm骨干和骨膜,制作大段骨缺损并移植TEB模型。每只小鼠经尾静脉注射100万个BMSCs细胞,术后2,7 d免疫荧光染色检测BMSCs迁移至骨缺损区数量的差异。术后4周,取股骨进行Micro-CT扫描,检测骨密度(BMD)、相对骨体积(BV/TV)、骨小梁间距(***)、骨小梁厚度(***),然后标本进行病理HE和Masson染色,观察成骨质量。结果小鼠BMSCs表达Arpin蛋白,相对于Arp2/3,其定位在细胞边缘。在转染慢病毒后,BMSCs表达绿色荧光蛋白,并且Arpin表达抑制组Arpin基因及蛋白表达较空载体对照组显著降低(P<0.01)。体外细胞迁移实验中,Arpin表达抑制组细胞迁移数量[(105.7±6.5)个]较空载体对照组[(76.6±6.6)个]高(P<0.01)。“伤口愈合实验”中,Arpin表达抑制组“伤口愈合”百分比[(62.6±3.2)%]较空载体对照组[(43.8±1.9)%]高(P<0.01)。体内实验的免疫荧光结果表示,术后2 d,两组迁移细胞计数差异无统计学意义(P>0.05),几乎无标记细胞迁移;术后7 d,Arpin表达抑制组细胞迁移至移植区的数量[(11.3±1.5)个]较空载体对照组[(5.7±1.5)个]更多(P<0.01)。术后4周,Micro-CT结果显示,相对于空载体对照组[BMD:(140.0±6.0)mg/cm3,BV/TV:(23.4±0.9)%,***:(0.28±0.01)μm,***:(0.15±0.01)μm],Arpin表达抑制组[BMD:(172.7±6.0)mg/cm3,BV/TV:(28.8±1.3)%,***:(0.33±0.01)μm,***:(0.11±0.01)μm]成骨质量更高(P<0.05);病理染色提示,Arpin表达抑制组存在更多的新生骨组织。结论沉默Arpin蛋白的表达会促进BMSCs的迁移,增加宿主BMSCs迁移至骨缺损区域,提高骨修复效果。

关键词：组织工程间充质干细胞细胞迁移分析 Arpin蛋白

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组织工程骨募集宿主间充质干细胞参与骨重建的机制研究

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中华创伤杂志 2018年第4期34卷 362-369页

作者：殷啸龙侯天勇卢彦竹李志琳邢军超杨爱军许建中陆军军医大学西南医院骨科、全军矫形外科中心、组织工程国家地方联合工程中心、全军骨组织工程重点实验室重庆400038

目的探讨创伤后骨缺损组织工程骨（TEB）移植后，组织工程骨募集宿主骨髓间充质干细胞（BMSCs）参与骨重建的机制。方法体内实验：取8周龄FVB／N小鼠，切除股骨干中部2mm骨干和骨膜，制作大段骨缺损。缺损处分别植入脱钙骨基质（DBM）和... 详细信息

目的探讨创伤后骨缺损组织工程骨（TEB）移植后，组织工程骨募集宿主骨髓间充质干细胞（BMSCs）参与骨重建的机制。方法体内实验：取8周龄FVB／N小鼠，切除股骨干中部2mm骨干和骨膜，制作大段骨缺损。缺损处分别植入脱钙骨基质（DBM）和TEB并固定，所有小鼠按随机数字表法分为DBM组（18只）和TEB组（18只）。移植后24h流式细胞术评价宿主BMSCs入血的数量，活体动物体内成像观察两组募集循环中小鼠骨髓间充质干细胞（mBMSCs）到达损伤区域的能力，ELISA法比较两组外周血中基质细胞衍生因子-1（SDF-1）含量。体外实验：（1）迁移小室实验评估SDF-1（100ng／m1）促进人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）迁移的能力，SDF-1／趋化因子受体4（CXCR4）通路通过选择性CXCR4拮抗剂普乐沙福（AMD3100）阻断，按处理因素分为对照组、SDF-1组和SDF-1＋AMD3100组。（2）建立人脐静脉内皮细胞（hUVECs）、hBMSCs共培养体系并通过SDF-1刺激细胞，按共培养细胞和处理因素分为hBMSCs组、hBMSCs＋hUVECs组和hBMSCs＋hUVECs（AMD3100预处理）组。迁移小室实验比较各组hBMSCs迁移数量，ELISA法检测共培养上清的肝细胞生长因子（HGF）水平。（3）对体外培养的hUVECs分别通过SDF-1刺激以及AMD3100拮抗SDF-1／CXCR4，按处理因素分为对照组、SDF-1组和SDF-1＋AMD3100组，实时荧光定量PCR（qRT—PCR）评价各组HGF表达。结果体内实验：骨缺损材料移植后24h，TEB组外周血中间充质干细胞（MSCs）数量、SDF-1浓度与DBM组比较均有明显增高（P〈0．05），TEB组募集的术后注射进入循环的mBMSCs多于DBM组（P〈0．01）。体外实验：（1）单种细胞迁移小室实验中，相比对照组和SDF-1＋AMD3100组，SDF-1组显著增强hBMSCs迁移能力（P〈0．01）。（2）hBMSCs和hUVECs共培养体系迁移小室实验中，与hBMSCs组、hBMSCs＋hUVECs（AMD3100预处理）组比较，hBMSCs＋hUVEC组迁移细胞数量和HGF浓度均显著增多（P〈0．01），而hBMSCs组与hBMSCs＋hUVECs（AMD3100预处理）组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。（3）qRT—PCR显示，与对照组比较，SDF-1组HGF表达明显升高（P〈0．01）。拮抗SDF-1／CXCR4后，SDF-1＋AMD3100组HGF表达与SDF-1组比较显著降低（P〈0．05）。结论骨缺损TEB移植后可以显著提高体内趋化因子SDF-1水平，有效促进宿主MSCs的动员和循环中MSCs的募集。SDF—1不仅通过SDF-1／CXCR4直接促进hBMSCs的迁移，还可上调血管细胞HGF的表达和分泌，进一步放大SDF-1对hBMSCs的趋化作用。

关键词：组织工程间质干细胞基质细胞衍生因子-1

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新型自组装多肽水凝胶对成骨细胞前体细胞作用的体外研究

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第三军医大学学报 2016年第8期38卷 817-823页

作者：陈贝克侯天勇刘健李志强邓墨渊罗飞许建中第三军医大学西南医院骨科全军矫形外科中心组织工程国家地方联合工程中心重庆市再生重建医学工程技术研究中心重庆市组织工程实验室全军骨组织工程重点实验室重庆400038

目的观察新型自组装肽TRSAWmx水凝胶对在体外小鼠成骨细胞前体细胞MC3T3-E1细胞粘附效果、增殖能力及成骨分化能力的影响。方法通过原子力显微镜观察新型水凝胶的自组装性能;以倒置显微镜对贴壁细胞计数,比较不同材料细胞的粘附;以CCK-... 详细信息

目的观察新型自组装肽TRSAWmx水凝胶对在体外小鼠成骨细胞前体细胞MC3T3-E1细胞粘附效果、增殖能力及成骨分化能力的影响。方法通过原子力显微镜观察新型水凝胶的自组装性能;以倒置显微镜对贴壁细胞计数,比较不同材料细胞的粘附;以CCK-8检测和评价不同材料上细胞的增殖;通过激光共聚焦显微镜观察细胞在材料表面的生长;茜素红-S染色观察钙结节形成;检测材料上培养的细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性以及细胞ALP、骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)等基因的表达。结果 TRSAWmx能自组装成纳米纤维结构;在接种30、60、90 min时,TRSAWmx组细胞粘附数明显高于空白组(P<0.05);3、5、7 d时TRSAWmx组细胞有着更佳的增殖活力(P<0.05);在成骨诱导培养3、7、14 d时,TRSAWmx组ALP活性明显高于RADA16-Ⅰ组(P<0.05);培养14 d后,TRSAWmx组茜素红-S染色可见钙结节形成多,成骨相关基因ALP、OCN、VEGF表达水平更高(P<0.05)。结论新型自组装多肽纳米水凝胶TRSAWmx在体外能有效提高MC3T3-E1细胞粘附、增殖和成骨分化能力。

关键词：水凝胶 RADA16-TRSAW MC3T3-E1细胞骨组织工程成骨分化

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组织工程化血管研究状况与展望

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解剖学杂志 2013年第1期36卷 1-3页

作者：朱楚洪第三军医大学解剖学教研室组织工程国家地方联合实验室心血管再生医学与工程中心重庆市生物力学重点实验室重庆400038

心血管疾病已经成为全球发病率和死亡率最高的疾病。目前，临床常用的冠状动脉支架植人术远期血栓形成和在多段较严重的冠状动脉狭窄使该术受到限制。随着现代血管外科技术的发展，冠状动脉旁路移植术治疗冠心病再次引起重视，其中替代... 详细信息

心血管疾病已经成为全球发病率和死亡率最高的疾病。目前，临床常用的冠状动脉支架植人术远期血栓形成和在多段较严重的冠状动脉狭窄使该术受到限制。随着现代血管外科技术的发展，冠状动脉旁路移植术治疗冠心病再次引起重视，其中替代性小直径（4～6mm）动脉成为关键。采用自体静脉进行移植远期通畅率低，这可能是由于自体静脉发生“血管重塑”的病理改变所致。自体动脉无疑是最佳的选择，

关键词：组织工程化血管冠状动脉旁路移植术冠状动脉狭窄心血管疾病冠状动脉支架血管外科技术自体静脉血栓形成

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组织工程血管体内构建

组织工程血管体内构建

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中国生物材料学会2013年大会

作者：曾文陈文吴杨霄刘歌李立朱楚洪第三军医大学解剖学教研室组织工程国家地方联合工程实验室血管组织工程中心重庆市生物力学重点实验室

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炎症消退和神经重建在小口径组织工程血管内皮化和抗内膜增生中的作用研究

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解剖学杂志 2021年第S1期44卷 206-207页

作者：王业勤李彦朝巴召静朱楚洪曾文陆军军医大学人体解剖学教研室国家地方联合工程重点实验室血管组织工程中心重庆市血管科学协同创新中心重庆400038

目前,血液透析或外周血管闭塞治疗等对小口径组织工程血管(TEVGs<6mm)临床需求日益增大,但早期血栓形成和中远期内膜增生严重抑制了其通畅,是临床应用的两大关键难题。小口径TEVGs在植入体内后引发的急慢性炎症反应是引起小口径TEBV... 详细信息

目前,血液透析或外周血管闭塞治疗等对小口径组织工程血管(TEVGs<6mm)临床需求日益增大,但早期血栓形成和中远期内膜增生严重抑制了其通畅,是临床应用的两大关键难题。小口径TEVGs在植入体内后引发的急慢性炎症反应是引起小口径TEBV血栓的重要诱因,目前公认的解决办法是促进早期内皮化。

关键词：临床需求慢性炎症反应内膜增生血液透析内皮化组织工程血管神经重建临床应用

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Crisper/Cas9在体纳米基因递送系统调节Treg细胞功能促进工程血管神经重建

Crisper/Cas9在体纳米基因递送系统调节Treg细胞功能促进工程血管...

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中国解剖学会2021年年会

作者：薛方超汪艳宏曾文陆军军医大学基础医学院人体解剖学教研室国家地方联合工程重点实验室血管组织工程中心

组织工程血管（TEBV）被认为是用于治疗心血管疾病的小口径血管（<4 mm）替代物的理想方案。然而,工程血管移植后急慢性免疫排斥是导致移植失败的关键。维持移植血管微环境的免疫稳态对工程血管在体重塑有重要意义,但具体机制尚不明... 详细信息

组织工程血管（TEBV）被认为是用于治疗心血管疾病的小口径血管（<4 mm）替代物的理想方案。然而,工程血管移植后急慢性免疫排斥是导致移植失败的关键。维持移植血管微环境的免疫稳态对工程血管在体重塑有重要意义,但具体机制尚不明确。之前的研究已经证明,神经的重建有助促进血管的功能化再生与重塑。本研究通过构建Entranster包载Crisper/Cas9纳米基因递送系统,诱导TET2过表达并激活Treg细胞,抑制免疫并促进神经重建以维持血管长期通畅。

关键词：基因递送 Crisper/Cas9 细胞功能系统调节

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脑源性神经生长因子刺激的间充质干细胞通过微环境依赖的分化途径促进糖尿病溃疡修复

脑源性神经生长因子刺激的间充质干细胞通过微环境依赖的分化途径...

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中华医学会糖尿病学分会第十七次全国学术会议

作者：何思毅曾文朱楚洪第三军医大学解剖学教研室国家地方联合工程实验室血管组织工程中心重庆市生物力学重点实验室

目的近年来,移植载有间充质干细胞(MSC)的生物材料已成为治疗糖尿病足溃疡(DFU)的一种重要手段,而移植后的微环境是影响其疗效的关键因素.脑源性神经生长因子(BDNF)是神经营养因子家族中的一员,被认为具有神经保护和促血管生成的作用.

关键词：

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炎症消退和神经重建在小口径组织工程血管内皮化和抗内膜增生中的作用研究

炎症消退和神经重建在小口径组织工程血管内皮化和抗内膜增生中的...

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中国解剖学会2021年年会

作者：王业勤李彦朝巴召静朱楚洪曾文陆军军医大学人体解剖学教研室国家地方联合工程重点实验室血管组织工程中心重庆市血管科学协同创新中心

目前,血液透析或外周血管闭塞治疗等对小口径组织工程血管(TEVGs<6mm)临床需求日益增大,但早期血栓形成和中远期内膜增生严重抑制了其通畅,是临床应用的两大关键难题。小口径TEVGs在植入体内后引发的急慢性炎症反应是引起小口径TEBV血栓的重要诱因,目前公认的解决办法是促进早期内皮化。我们课题组采用诱导内皮祖细胞(EPCs)归巢并分化为内皮细胞来实现工程血管在体内皮化的目的。

关键词：内膜增生组织工程血管炎症消退内皮化作用研究

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肝脏脱细胞基质微颗粒促进HepG2细胞球状体形成与肝相关功能分化的研究

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组织工程与重建外科 2021年第4期17卷 283-289,326页

作者：胡佳辰金岩刘文佳军事口腔医学国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心空军军医大学第三附属医院组织工程中心陕西省西安市710032 西安交通大学第二附属医院生物诊断与生物治疗国家地方联合工程研究中心精准医疗研究院陕西省西安市710004

目的探索肝脏脱细胞基质(dECM)微颗粒对3D培养HepG2细胞的肝相关功能状态的影响。方法通过肝脏门静脉灌流脱细胞液等成分,制得肝脏dECM。用组织学特殊染色、扫描电镜及免疫组织化学等方法鉴定脱细胞效果以及dECM成分。通过液氮冷冻研磨... 详细信息

目的探索肝脏脱细胞基质(dECM)微颗粒对3D培养HepG2细胞的肝相关功能状态的影响。方法通过肝脏门静脉灌流脱细胞液等成分,制得肝脏dECM。用组织学特殊染色、扫描电镜及免疫组织化学等方法鉴定脱细胞效果以及dECM成分。通过液氮冷冻研磨将dECM制备成微颗粒,通过差速离心分离不同粒径范围的微颗粒。利用超低吸附培养板进行HepG2细胞球状体3D培养,向培养基中加入dECM微颗粒,观察其对HepG2细胞球状体的形成及其肝相关功能状态的影响。利用ELISA、PCR检测相关蛋白的分泌和基因表达。结果制得的dECM无细胞结构,保留了细胞外基质的相关成分。在液氮研磨与差速离心分离后,可获得粒径在微米级的dECM微颗粒。dECM微颗粒可以促进HepG2细胞形成更致密的球状体;加入dECM微颗粒的HepG2球状体,细胞分泌白蛋白和尿素氮的水平增加(P<0.05);PCR结果表明,加入dECM微颗粒后,细胞的肝功能相关基因的表达水平显著提升(P<0.05)。结论肝脏脱细胞基质微颗粒可以促进HepG2细胞球状体的形成和HepG2细胞球状体的肝相关功能分化。

关键词：细胞外基质 HepG2细胞细胞球状体组织工程 3D培养

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