检索结果-内蒙古大学图书馆

中国循环杂志 2015年第S1期 25-25页

作者：李昊崔永春唐跃北京市中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外心血管病医院心血管疾病国家重点实验室北京市心血管植入材料临床前评价重点实验室动物实验中心100037

目的：探讨二维斑点追踪成像（STI）技术评价小鼠心肌梗死（MI）后应变力改变以及节段性功能异常的方法。　　方法：雄性10 W龄C57BL/6小鼠行心脏左冠状动脉前降支结扎造成心肌梗死，在梗死后第7天行常规超声心动图检测，在1%异氟烷麻... 详细信息

目的：探讨二维斑点追踪成像（STI）技术评价小鼠心肌梗死（MI）后应变力改变以及节段性功能异常的方法。
　　方法：雄性10 W龄C57BL/6小鼠行心脏左冠状动脉前降支结扎造成心肌梗死，在梗死后第7天行常规超声心动图检测，在1%异氟烷麻醉下采集标准胸骨旁长轴与短轴二维图像，测量并计算左心室后壁厚度（LVPWd）、左心室舒张末期内径（LVIDd）以及左心室射血分数（LVEF）等参数。随后采用STI模块，测量左心室心肌应变力（Strain）、应变率（Strain rate）、运动峰值速度（Peak velocity）和加速时间（Time to peak）等参数。心脏取材后固定处理，石蜡包埋后行HE染色和天狼猩红染色。

关键词：二维图像斑点追踪技术评价小鼠心肌梗死梗死后应变力左心室舒张末期内径左心室射血分数天狼猩红染色左心室心肌左冠状动脉性功能异常超声心动图心脏石蜡包埋加速时间峰值速度方法

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调控自噬对晚期泡沫细胞凋亡的影响

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中国循环杂志 2015年第S1期 31-31页

作者：崔永春刘晓鹏李凯张宏张冬唐跃北京市中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外心血管病医院心血管疾病国家重点实验室北京市心血管植入材料临床前评价重点实验室动物实验中心100037

目的：阐明调控自噬对晚期泡沫细胞凋亡的影响。　　方法：将人THP-1细胞来源的巨噬细胞（THP-M）分别与50μg/ml ox-LDL孵育6 h、12 h和24 h；油红O染色观察细胞内脂质蓄积的变化，酶荧光法试剂盒检测细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆... 详细信息

目的：阐明调控自噬对晚期泡沫细胞凋亡的影响。
　　方法：将人THP-1细胞来源的巨噬细胞（THP-M）分别与50μg/ml ox-LDL孵育6 h、12 h和24 h；油红O染色观察细胞内脂质蓄积的变化，酶荧光法试剂盒检测细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯的含量变化，免疫印迹法检测细胞内LC3II和P62的表达水平；然后分别利用不同浓度自噬激动剂雷帕霉素和抑制剂3-MA预处理THP-M或ATG5特异性siRNA转染的THP-M细胞对自噬进行调节，观察细胞内脂含量的变化。

关键词：调控泡沫细胞凋亡细胞内总胆固醇免疫印迹法脂质蓄积细胞来源内脂雷帕霉素巨噬细胞检测含量变化胆固醇酯表达水平预处理荧光法抑制剂特异性试剂盒

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应用CRISPR-CAS9技术制备miR-155基因敲除小鼠

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中国循环杂志 2015年第S1期 23-23页

作者：崔永春张冬王佩合张宏李凯吴爱丽唐跃北京市中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外心血管病医院心血管疾病国家重点实验室北京市心血管植入材料临床前评价重点实验室动物实验中心100037

目的：探讨利用typeⅡbacterial CRISPR/CAS9系统构建miR RNA-155基因敲除小鼠的可行性。　　方法：首先，利用软件设计构建识别靶定靶序列的sgRNA，构建致靶基因切割的CRISPR/Cas9载体质粒；然后体外鉴定sgRNA/Cas9的活性检测；设计构... 详细信息

目的：探讨利用typeⅡbacterial CRISPR/CAS9系统构建miR RNA-155基因敲除小鼠的可行性。
　　方法：首先，利用软件设计构建识别靶定靶序列的sgRNA，构建致靶基因切割的CRISPR/Cas9载体质粒；然后体外鉴定sgRNA/Cas9的活性检测；设计构建基因敲进的打靶载体；体外转录sgRNA/Cas9 mRNA；小鼠受精卵注射sgRNA/Cas9 mRNA和打靶载体；最后miR-155基因敲除F0代C57/BL6小鼠的可遗传性检测，并剪鼠尾提DNA进行鉴定。

关键词：应用技术基因敲除设计构建小鼠受精卵靶载体载体质粒系统构建体外转录利用软件鉴定活性检测遗传性靶序列靶基因注射识别切割方法

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Sirt1激动剂白藜芦醇对NIH3T3成纤维细胞增殖与分化的影响

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中国循环杂志 2015年第S1期 23-23页

作者：张宏刘晓鹏张冬李凯崔永春唐跃北京市中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外心血管病医院心血管疾病国家重点实验室北京市心血管植入材料临床前评价重点实验室动物实验中心100037

目的：成纤维细胞增殖与分化是组织发生纤维化的病理基础。已有报道证明sirt1激动剂白藜芦醇可以发挥对抗心脏、肾脏纤维化的作用，但其作用机制并不完全清楚。本实验目的是探讨白藜芦醇对NIH3T3小鼠胚胎成纤维细胞增殖与分化的影响，... 详细信息

目的：成纤维细胞增殖与分化是组织发生纤维化的病理基础。已有报道证明sirt1激动剂白藜芦醇可以发挥对抗心脏、肾脏纤维化的作用，但其作用机制并不完全清楚。本实验目的是探讨白藜芦醇对NIH3T3小鼠胚胎成纤维细胞增殖与分化的影响，发现其潜在作用机制。

关键词：激动剂白藜芦醇小鼠胚胎成纤维细胞增殖与分化作用机制肾脏纤维化组织发生病理基础证明心脏实验对抗

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谷氨酰胺通过抑制氧化应激减轻糖尿病心肌缺血再灌注损伤

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中国循环杂志 2015年第S1期 22-22页

作者：李凯崔永春张宏刘晓鹏张冬唐跃北京市中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外心血管病医院心血管疾病国家重点实验室北京市心血管植入材料临床前评价重点实验室动物实验中心100037

目的：细胞氧化应激增加是糖尿病心肌缺血再灌注损伤的核心环节之一。既往实验已经证实谷氨酰胺具有明显的细胞内抗氧化应激作用。谷氨酰胺是否也能在糖尿病心肌细胞缺血再灌注损伤中发挥抗氧化应激作用尚不可知。

关键词：谷氨酰胺氧化应激糖尿病心肌缺血再灌注损伤应激作用心肌细胞抗氧化核心环节细胞内实验

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超声二维斑点追踪技术评价小鼠心肌梗死后节段性室壁运动异常

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中国分子心脏病学杂志 2015年第3期15卷 1354-1358页

作者：李昊张幼怡沈蔷陶瑾崔永春唐跃中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外心血管病医院心血管疾病国家重点实验室实验动物中心北京市100037 北京大学第三医院心内科血管医学研究所卫生部心血管分子生物学与调节肽重点实室分子心血管教育部重点实验室北京市100191 中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外心血管病医院超声科北京市100037

目的探讨超声二维斑点追踪成像(speckle tracking imaging,STI)技术评价小鼠心肌梗死(myocardial infarction,MI)后节段性室壁运动异常的方法。方法 10周龄C57BL/6雄性小鼠行左冠状动脉前降支结扎造成心肌梗死,在梗死后第7天行常规超声... 详细信息

目的探讨超声二维斑点追踪成像(speckle tracking imaging,STI)技术评价小鼠心肌梗死(myocardial infarction,MI)后节段性室壁运动异常的方法。方法 10周龄C57BL/6雄性小鼠行左冠状动脉前降支结扎造成心肌梗死,在梗死后第7天行常规超声心动图检测,采集胸骨旁长轴左心室二维图像,测量并计算左室后壁厚度(LVPWd)、左室射血分数(EF%)等参数。进而采用STI模块,测量运动峰值速度(Peak velocity)和加速时间(Time to peak)等参数。心脏取材后置于4%多聚甲醛中固定,石蜡包埋,行HE染色和天狼猩红染色。结果心肌梗死后7天,小鼠心脏间质出现显著胶原沉积。超声心动图提示MI组LVPWd与Sham组相比显著减小(0.66±0.02 mm vs 0.54±0.03 mm,P<0.01),EF(%)下降(71.6±1.69%vs 32.6±3.00%,P<0.001)。STI技术-向量分析示心肌梗死后室壁运动明显降低,室壁运动速度-时间曲线则进一步明确MI组存在明显心肌反向运动。节段性分析示MI组各节段的室壁峰值速度均小于相应节段的Sham组(均P<0.001),加速时间均长于相应节段的Sham组(均P<0.01)。结论应用STI技术可实现对于小鼠急性心肌梗死后节段性室壁运动变化的定性、定位和定量分析。

关键词：斑点追踪心肌梗死小鼠超声心动图

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一次性静脉注射高剂量链脲佐菌素建立1型糖尿病小型猪模型

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中国实验动物学报 2014年第4期22卷 12-15页

作者：崔永春李凯张宏刘晓鹏袁卫民李巨波吴爱丽唐跃中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外心血管病医院动物实验中心心血管疾病国家重点实验室北京市心血管植入材料临床前评价重点实验室北京100037

目的：探讨通过一次性注射高剂量链脲佐菌素（ streptozotocin，STZ）方法建立1型糖尿病小型猪模型的可行性。方法中华实验小型猪耳缘静脉一次性注射链脲佐菌素溶液150 mg/kg，分别在给药前和给药后10 min、30 min、90 min、第1天、第2... 详细信息

目的：探讨通过一次性注射高剂量链脲佐菌素（ streptozotocin，STZ）方法建立1型糖尿病小型猪模型的可行性。方法中华实验小型猪耳缘静脉一次性注射链脲佐菌素溶液150 mg/kg，分别在给药前和给药后10 min、30 min、90 min、第1天、第2天、第3天和第7天空腹采集静脉血，动态监测空腹血糖，并利用静脉糖耐量实验和C肽释放实验对模型进行鉴定。结果给药后第1天开始，模型组空腹血糖明显升高并始终维持在16.7～20.6 mmol/L的浓度范围，达到糖尿病标准；静脉葡萄糖耐量试验和C肽释放实验结果表明，静脉注射体积分数50％的葡萄糖1 h后模型猪血糖浓度高于11.1 mmol/L，2 h后未能恢复至空腹血糖水平；而胰岛素和C肽在注入葡萄糖后基本未发生任何反应，始终保持痕量水平。结论一次性静脉注射大剂量链脲佐菌素的方法能够成功建立1型糖尿病小型猪模型。

关键词： 1型糖尿病,小型猪,链脲佐菌素血糖

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不同阶段泡沫细胞模型的建立与鉴定

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中国分子心脏病学杂志 2014年第3期14卷 953-957页

作者：崔永春刘晓鹏张宏李凯孟宪敏唐跃中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外心血管病医院心血管疾病国家重点实验室北京市心血管植入材料临床前评价重点实验室动物实验中心北京市100037

目的建立不同阶段的泡沫细胞,并对其生物特性进行鉴定。方法体外培养人THP-1来源的巨噬细胞(THP-M),由ox-LDL诱导其转化为不同阶段泡沫细胞,ELISA方法检测不同阶段泡沫细胞内总胆固醇和胆固醇酯含量;透射电镜和油红O染色光镜观察细胞内... 详细信息

目的建立不同阶段的泡沫细胞,并对其生物特性进行鉴定。方法体外培养人THP-1来源的巨噬细胞(THP-M),由ox-LDL诱导其转化为不同阶段泡沫细胞,ELISA方法检测不同阶段泡沫细胞内总胆固醇和胆固醇酯含量;透射电镜和油红O染色光镜观察细胞内脂质,噻唑蓝染色法测定不同阶段泡沫细胞的活性变化规律。Western blot方法测定II型微管相关蛋白1轻链3(LC3II)蛋白表达水平。结果 24h开始,THP-M细胞质内出现大量的红染颗粒或脂质空泡,总胆固醇和胆固醇酯均较对照组增加,细胞胆固醇酯含量大于总胆固醇的50%,泡沫细胞已经形成。噻唑蓝染色结果显示,自48h开始少量泡沫细胞出现死亡现象(存活率93.21±3.66%),60h和72h细胞存活率率分别为72.15±2.23%和63.06±1.83%。电镜扫描结果发现,24h细胞内脂滴聚集,24h内细胞浆自噬小体逐渐增多。36h、48h细胞内脂滴大小和形态各异,可见吞噬脂滴后尚未消化完全的自噬溶酶体,部分细胞膜破裂;60h和72h,细胞内自噬小体数量明显减少,细胞大量崩解。Western blot检测结果表明自噬标志性蛋白LC3II表达水平变化规律与电镜观察自噬小体结果一致。结论利用oxLDL诱导THP-M24h、36h-48h、60h-72h后,细胞形态和细胞内脂含量分别符合早期、中期和晚期泡沫细胞的生物特征,成功建立了早、中、晚期泡沫细胞模型,其中细胞活力变化可能与II型凋亡(自噬性死亡)相关。为不同病程AS研究提供支持。

关键词：氧化型低密度脂蛋白 THP-1细胞泡沫细胞动脉粥样硬化

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经左心耳小切口二尖瓣腱索拉伤联合回旋支Ameroid环植入建立小型猪缺血性二尖瓣返流模型

经左心耳小切口二尖瓣腱索拉伤联合回旋支Ameroid环植入建立小型...

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：唐跃中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外心血管病医院北京市心血管植入材料临床前评价重点实验室心血管疾病国家重点实验室动物实验中心北京100037

背景临床上对于缺血性二尖瓣返流(ischemic mitral regurgitation,IMR)病症尚无理想治疗方法。但目前研究攻克该疾病新方法过程中存在的瓶颈问题是尚无理想的动物模型。目的探索一种简便、稳定、均一的建立大动物慢性IMR模型的方法。... 详细信息

背景临床上对于缺血性二尖瓣返流(ischemic mitral regurgitation,IMR)病症尚无理想治疗方法。但目前研究攻克该疾病新方法过程中存在的瓶颈问题是尚无理想的动物模型。目的探索一种简便、稳定、均一的建立大动物慢性IMR模型的方法。方法：利用小切口自制拉钩定位拉伤二尖瓣后叶腱索联合冠脉左回旋支Ameroid环植入建立小型猪IMR模型。

关键词：二尖瓣返流缺血性心肌病小型猪

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经肱动脉介入自体血栓建立比格犬回旋支血栓栓塞致急性心肌缺血模型初探

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中国循环杂志 2013年第S1期 56-57页

作者：田毅崔永春唐跃叶振袁卫民杨建中张宝杰张会东李巨波李秋菊北京市中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外心血管病医院心血管疾病国家重点实验室动物实验中心100037

目的：探索微创介入技术建立比格犬冠状动脉左回旋支血栓栓塞致急性心肌缺血模型，为溶栓新药临床前药效学评价提供相对稳定、均一的实验动物模型。　　方法：成年比格犬5只，雄性，15~20 kg。动物术前禁食12小时，常规麻醉，采集比格... 详细信息

目的：探索微创介入技术建立比格犬冠状动脉左回旋支血栓栓塞致急性心肌缺血模型，为溶栓新药临床前药效学评价提供相对稳定、均一的实验动物模型。
　　方法：成年比格犬5只，雄性，15~20 kg。动物术前禁食12小时，常规麻醉，采集比格犬静脉血10 ml，加入凝血酶（100 IU/ml），37℃水浴30分钟，制成自体血栓。经肱动脉送导管至冠状动脉左回旋支中部，注入自体血栓，造成左前降支血管堵塞，模拟临床绝大多数急性心肌缺血性疾病的发生机制和病理变化过程。实验过程中随时监控动物心电、呼吸指标。分别在注入血栓前、注入血栓后即刻和30 min行冠脉造影，测量LCX冠脉流量，确认冠状动脉的血栓栓塞情况。利用标准12导联心电图54条标准/32分记分系统评价心肌缺血30 min后的缺血面积。对I、II、aVL、aVF、Vl~V6这10个导联进行记分，以R波宽度、R/Q及R/S振幅的比值为积分对象，各导联记分的总和就是该例QRS积分数，每个标准分值是l~3分，每1分代表3％的左室范围。

关键词：动脉介入自体血栓成年比格犬左回旋支血栓栓塞心肌缺血性疾病冠状动脉心肌缺血模型实验动物模型记分导联心电图标准药效学评价左前降支系统评价术前禁食实验过程临床介入技术积分对象

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