检索结果-内蒙古大学图书馆

2,5-二甲氧基-4-碘苯丙胺影响丘脑网状核介导皮质丘脑通路40 Hz gamma振荡研究

中国药理学与毒理学杂志 2023年第7期37卷 531-532页

作者：高明伟孙传耀王福旗张树卓苏瑞斌军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室神经精神药理学北京市重点实验室

目的探讨2,5-二甲氧基-4-碘苯丙胺（DOI）影响丘脑网状核（TRN）脑区介导皮质丘脑通路40 Hz脑电同步gamma振荡活动，揭示DOI所致的幻觉样感知行为的可能机制。方法光遗传结合离体脑片电生理的方法，验证40Hz光激活TRN脑区PV神经元介... 详细信息

目的探讨2,5-二甲氧基-4-碘苯丙胺（DOI）影响丘脑网状核（TRN）脑区介导皮质丘脑通路40 Hz脑电同步gamma振荡活动，揭示DOI所致的幻觉样感知行为的可能机制。方法光遗传结合离体脑片电生理的方法，验证40Hz光激活TRN脑区PV神经元介导的皮质丘脑通路可产生40 Hz脑电同步振荡活动。DOI所致甩头行为结合光遗传方法，探究40 Hz光激活、抑制PV-cre小鼠TRN脑区PV神经元介导的神经环路对甩头行为的作用。在体多通道记录结合光遗传，揭示DOI对TRN脑区40 Hz gamma振荡的作用机制。结果 40 Hz光遗传学激活TRN脑区PV神经元介导的Cg→TRN→MDL神经环路减少了DOI(2 mg·kg-1)所致的甩头反应次数（n=6,P<0.01）；光遗传学抑制TRN脑区PV神经元介导的Cg→TRN→MDL神经环路增加DOI所致的甩头次数（n=6,P<0.01;P<0.01;P<0.05）;DOI降低了TRN脑区gamma振荡功率谱（n=6,P<0.05）。结论TRN脑区PV神经元介导Cg→TRN→MDL皮质丘脑环路中40 Hz gamma振荡参与了DOI诱导的小鼠甩头反应。DOI可能通过影响TRN脑区同步gamma振荡活动，参与了幻觉形成。

关键词： 2,5-二甲氧基-4-碘苯丙胺 gamma振荡丘脑网状核皮质丘脑通路

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唑吡坦对低压低氧致失眠模型小鼠的镇静催眠作用

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中国药理学与毒理学杂志 2024年第2期38卷 81-88页

作者：梁欢欢许琳俞纲苏瑞斌李明媛天津科技大学生物工程学院天津市透明质酸应用研究企业重点实验室天津300457 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的研究唑吡坦的镇静催眠作用及对丘脑和下丘脑氨基酸类神经递质含量的影响。方法模拟海拔5500 m低压低氧环境,通过阈上剂量(50 mg·kg^(-1),ip)戊巴比妥钠诱导小鼠翻正反射消失(LORR)实验建立低压低氧致失眠模型。采用LORR实验观... 详细信息

目的研究唑吡坦的镇静催眠作用及对丘脑和下丘脑氨基酸类神经递质含量的影响。方法模拟海拔5500 m低压低氧环境,通过阈上剂量(50 mg·kg^(-1),ip)戊巴比妥钠诱导小鼠翻正反射消失(LORR)实验建立低压低氧致失眠模型。采用LORR实验观察常压常氧和低压低氧条件下唑吡坦(0.33,1,3,9和27 mg·kg^(-1),ip)与戊巴比妥钠镇静催眠阈下(20 mg·kg^(-1),ip)和阈上剂量的协同效应及唑吡坦(10,13,17,20,23,30和40 mg·kg^(-1),ip)的镇静催眠效应。运用高效液相荧光检测法测定常压常氧和低压低氧条件下给予唑吡坦(10,20和40 mg·kg^(-1),ip)1 h后,小鼠丘脑和下丘脑谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)含量。结果低压低氧处理1 d显著缩短阈上剂量戊巴比妥钠诱导小鼠LORR持续时间(P<0.05)。与常压常氧溶媒组和低压低氧致失眠溶媒组相比,常压常氧唑吡坦9和27 mg·kg^(-1)组和低压低氧致失眠模型+唑吡坦9和27 mg·kg^(-1)组均显著缩短阈下及阈上剂量戊巴比妥钠诱导LORR的潜伏期(P<0.01,P<0.05),同时显著延长LORR持续时间(P<0.01,P<0.05);常压常氧唑吡坦组和低压低氧致失眠模型+唑吡坦组致小鼠LORR的半数有效剂量(ED50)分别为16.21和20.55 mg·kg^(-1)。神经递质水平检测结果表明,与常压常氧溶媒组相比,常压常氧唑吡坦40 mg·kg^(-1)组显著降低丘脑和下丘脑Glu含量及下丘脑Glu/GABA比值(P<0.01,P<0.05);与常压常氧溶媒组相比,低压低氧致失眠模型组小鼠下丘脑Glu含量及Glu/GABA比值显著升高(P<0.01,P<0.05),低压低氧致失眠模型+唑吡坦40 mg·kg^(-1)组显著逆转其升高(P<0.05)。结论在低压低氧条件下,唑吡坦的镇静催眠效应减弱,唑吡坦对下丘脑中Glu和GABA水平的调节可能在其镇静催眠效应中发挥重要作用。

关键词：低压低氧唑吡坦翻正反射谷氨酸 γ-氨基丁酸

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5-HT_(2A)R异源二聚体功能研究进展

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中国药理学通报 2023年第7期39卷 1201-1205页

作者：高欢谭博杜广营苏瑞斌烟台大学药学院山东烟台264005 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

血清素2A受体(5-HT_(2A)R)作为致幻剂、抗抑郁药、抗焦虑药和非典型抗精神病药物等许多精神活性药物的作用靶点,受到人们的广泛关注。5-HT_(2A)R属于G蛋白偶联受体(GPCRs),与mGluR2、D_(2)R和CB_(1)R等多种GPCRs形成异源二聚体。二聚体... 详细信息

血清素2A受体(5-HT_(2A)R)作为致幻剂、抗抑郁药、抗焦虑药和非典型抗精神病药物等许多精神活性药物的作用靶点,受到人们的广泛关注。5-HT_(2A)R属于G蛋白偶联受体(GPCRs),与mGluR2、D_(2)R和CB_(1)R等多种GPCRs形成异源二聚体。二聚体中的mGluR2、D_(2)R与CB_(1)R影响5-HT_(2A)R偶联的信号通路和诱导的动物行为,并且3种受体分别被敲除后,致幻性5-HT_(2A)R激动剂诱导产生的甩头反应次数明显降低。基于5-HT_(2A)R/mGluR2、5-HT_(2A)R/D_(2)R和5-HT_(2A)R/CB_(1)R异源二聚体的重要性,该文将3种受体与5-HT_(2A)R形成异源二聚体的发现与功能进行详细综述,为探寻以5-HT_(2A)R为靶点的精神活性药物作用机制提供参考。

关键词： 5-HT_(2A)R mGluR2 D_(2)R CB_(1)R 异源二聚体甩头反应

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2,5-二甲氧基-4-碘苯丙胺对卡巴胆碱诱导的小鼠离体海马CA3区γ振荡的作用

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中国药理学与毒理学杂志 2023年第2期37卷 91-97页

作者：高明伟张树卓苏瑞斌南京中医药大学江苏南京210000 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的探究5-羟色胺2A受体(5-HT_(2A)R)激动剂2,5-二甲氧基-4-碘苯丙胺(DOI)对卡巴胆碱(CCh)诱发的小鼠离体海马CA3区γ振荡的作用。方法制备C57BL/6J小鼠离体海马脑片,用人工脑脊液(ACSF)灌流,用离体脑片电生理法记录海马CA3区局部场电位... 详细信息

目的探究5-羟色胺2A受体(5-HT_(2A)R)激动剂2,5-二甲氧基-4-碘苯丙胺(DOI)对卡巴胆碱(CCh)诱发的小鼠离体海马CA3区γ振荡的作用。方法制备C57BL/6J小鼠离体海马脑片,用人工脑脊液(ACSF)灌流,用离体脑片电生理法记录海马CA3区局部场电位(LFP),用NeuroExplorer软件分析LFP功率,用Matlab软件分析θ振荡和γ振荡的相位振幅耦合。离体海马脑片给予CCh 5μmol·L^(-1),记录给药前后海马CA3区LFP的变化,并给予荷包牡丹碱(Bic)5μmol·L^(-1)验证γ振荡的诱发。在CCh诱导产生γ振荡后给予DOI 10μmol·L^(-1),分析DOI对γ振荡功率的影响,计算θ振荡和γ振荡的相位振幅耦合调制指数(MI)。结果离体海马脑片给予CCh 5μmol·L^(-1)后,海马CA3区LFP功率较给药前显著升高(P<0.01);在此基础上给予Bic 5μmol·L^(-1)后,LFP功率较给Bic前显著降低(P<0.01),表明γ振荡诱发成功。给予DOI 10μmol·L^(-1)后,CCh诱发的γ振荡功率较给DOI前显著增加(P<0.05),θ振荡功率及θ振荡与γ振荡相位振幅耦合MI较给DOI前无显著差异。结论DOI可能是通过增加海马CA3区γ振荡功率,而非通过影响θ振荡或θ振荡与γ振荡相位振幅耦合发挥影响认知的药理学作用。

关键词： 5-羟色胺2A受体 2,5-二甲氧基-4-碘苯丙胺 γ振荡海马电生理

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六味地黄苷糖对创伤应激致恐惧敏化的保护作用

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军事医学 2024年第2期48卷 129-135页

作者：李奉安秦钰石天尧周文霞南京中医药大学南京210023 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的探究六味地黄苷糖对创伤应激致恐惧敏化的保护作用及潜在机制。方法选取6周龄雄性SPF级C57BL/6J小鼠,分为空白对照组、对照组、创伤应激组和创伤后药物保护组[LW-AFC,1.6 g/(kg·d),创伤后连续灌胃2周],考察各组小鼠在新环境、... 详细信息

目的探究六味地黄苷糖对创伤应激致恐惧敏化的保护作用及潜在机制。方法选取6周龄雄性SPF级C57BL/6J小鼠,分为空白对照组、对照组、创伤应激组和创伤后药物保护组[LW-AFC,1.6 g/(kg·d),创伤后连续灌胃2周],考察各组小鼠在新环境、社会交互以及观察性恐惧测试等非联想记忆依赖的恐惧敏化反应,并用Z-Score标准化的方法整合并评估运动距离、僵直时间、角落区停留时间等多个行为变量,以获得一个综合恐惧敏化得分,考察各组小鼠的恐惧敏化行为。ELISA法检测各组小鼠血清中促肾上腺皮质激素释放激素、促肾上腺皮质激素、皮质酮、肾素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮的浓度。结果与对照组相比,创伤应激组小鼠在新环境测试时运动距离显著减少(P<0.0001)、僵直时间显著增加(P<0.0001)、角落区停留时间有增加趋势但差异无统计学意义、综合恐惧敏化得分显著升高(P<0.0001);在社会交互测试中,其运动距离显著减少(P<0.0001)、僵直时间显著增加(P<0.0001)、角落区停留时间显著增加(P<0.05)、综合恐惧敏化得分显著升高(P<0.0001);在观察性恐惧测试时,其运动距离显著减少(P<0.05)、僵直时间显著增加(P<0.0001)、角落停留时间显著增加(P<0.05)、综合恐惧敏化得分显著增加(P<0.0001)。与创伤应激组相比,创伤后药物保护组小鼠在3个测试中的各行为指标和综合恐惧敏化得分均有改善趋势,且在社会交互测试中的僵直时间(P<0.05)及综合恐惧敏化得分(P<0.05)存在统计学差异,在观察性恐惧测试中的僵直时间(P<0.05)及综合恐惧敏化得分(P<0.01)存在统计学差异。与空白对照组相比,对照组和创伤应激组小鼠在恐惧敏化测试后肾素和醛固酮水平均有升高趋势,且创伤应激组小鼠肾素和醛固酮水平均显著升高(P<0.01、P<0.05);与创伤应激组相比,创伤后药物保护组小鼠肾素和醛固酮水平有所降低且醛固酮水平差异存在统计学意义(P<0.05)。结论创伤应激小鼠在新环境、社会交互和观察性恐惧中均具有明显的恐惧敏化行为,其可能与肾素-血管紧张素-醛固酮系统的过度激活有关;LW-AFC对创伤应激小鼠在社会交互和观察性恐惧中的恐惧敏化行为具有明显的改善作用,其可能与调节创伤应激小鼠肾素-血管紧张素-醛固酮系统有关。

关键词：创伤应激恐惧敏化下丘脑-垂体-肾上腺轴肾素-血管紧张素-醛固酮系统六味地黄苷糖

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疑似蛇毒液样品的纳升级超高效液相色谱-高分辨质谱分析鉴定

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色谱 2023年第2期41卷 122-130页

作者：李泽华王闯徐斌陈佳张瑛郭磊谢剑炜军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850 中央民族大学药学院民族医药教育部重点实验室北京100081 北京市公安司法鉴定中心法庭毒物分析公安部重点实验室北京100192

针对5个疑似蛇毒毒液及其沾染样品,基于纳升级超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(Nano LC-MS/HRMS)技术,结合尺寸排阻色谱分离,建立了一种蛋白质种类及物种归属的严格鉴定方法。5个样品经尺寸排阻色谱分离后均得到3个洗脱峰... 详细信息

针对5个疑似蛇毒毒液及其沾染样品,基于纳升级超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(Nano LC-MS/HRMS)技术,结合尺寸排阻色谱分离,建立了一种蛋白质种类及物种归属的严格鉴定方法。5个样品经尺寸排阻色谱分离后均得到3个洗脱峰,分别冻干后以胰蛋白酶进行溶液内酶解处理并进行液相色谱-高分辨质谱分析鉴定。首先采用全扫描-数据依赖型MS/MS(Full MS/dd MS^(2))采集模式对样品中的肽段信息进行非靶向采集,依次与Swiss-Prot、蛇亚目(Serpentes)、游蛇科(Colubroidea)、眼镜蛇科(Elapidae)、眼镜蛇亚科(Elapinae)、眼镜蛇属(Naja)蛋白质数据库逐级收缩比对;再筛选符合肽谱匹配度、肽段错误发现率小于1%和特征肽段数目大于等于2的蛋白质,共鉴定到32种蛋白质均来自中华眼镜蛇(Naja atra),可归属于Naja atra的10个家族,主要为三指毒素、金属蛋白酶、磷脂酶A2等。最后,采用平行反应监测模式选取每种蛋白质的两条特征肽段进行靶向验证,当两条特征肽段均满足“至少75%的y^(+)和b^(+)离子的Δm/z小于5 ppm”时,方认为鉴定到了样品中的某一蛋白质。最终鉴定出5个样品均含有Naja atra蛇毒。此鉴定方法研究系统、严格,可为蛇毒中毒司法鉴定以及蛇毒药物研究等提供有效的技术支持。

关键词：纳升级超高效液相色谱高分辨质谱蛇毒蛋白质组学平行反应监测

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硫芥对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的毒效应及机制

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中国药理学与毒理学杂志 2023年第4期37卷 263-273页

作者：张赔徐斌蒋宁周文霞烟台大学药学院山东烟台264005 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的建立硫芥(SM)染毒的神经细胞损伤模型,研究SM的神经细胞毒性效应及潜在机制。方法采用SM 0(溶剂,0.2%乙醇),0.1,1.0,10,50,100,200,400和800μmol·L^(-1)孵育人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞30 min,而后去除药物,换用正常培养基孵育... 详细信息

目的建立硫芥(SM)染毒的神经细胞损伤模型,研究SM的神经细胞毒性效应及潜在机制。方法采用SM 0(溶剂,0.2%乙醇),0.1,1.0,10,50,100,200,400和800μmol·L^(-1)孵育人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞30 min,而后去除药物,换用正常培养基孵育24 h。应用IncuCyte ZOOM长时间动态活细胞成像及数据分析系统观察细胞融合率和细胞形态;CCK-8法检测细胞活力;SM 0,1.0,10,25,50,100和400μmol·L^(-1)以同样方式处理细胞,calcein-AM/PI荧光染色检测活细胞比例和死细胞比例;试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放率;5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)-488细胞增殖试剂盒检测细胞增殖;免疫荧光法测定细胞DNA双链断裂标志物γ-H2AX。SM 0,1.0,10和100μmol·L^(-1)以同样方式处理细胞后,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)相对含量;试剂盒检测细胞内NAD+/NADH和ATP含量;SM 10μmol·L^(-1)处理细胞后,超高效液相色谱-串联质谱法检测细胞内SM-DNA加合物种类。结果与溶剂组相比,SM染毒后2 h时,SM 800μmol·L^(-1)组细胞融合率降至<5%且不再增加;SM染毒6~8 h后,SM 10~400μmol·L^(-1)组细胞融合率曲线逐渐降低。SM染毒后24 h时,细胞活力呈浓度依赖性降低(P<0.05,P<0.01,r=-0.6681),半数抑制浓度(IC50)为15.92μmol·L^(-1)。SM 25~400μmol·L^(-1)显著增加死细胞比例(P<0.01),浓度依赖性显著增加LDH释放率(P<0.01,r=0.9401);SM 400μmol·L^(-1)显著降低EdU阳性细胞比例(P<0.01)。SM 1.0~100μmol·L^(-1)均可显著增加细胞内ROS含量(P<0.01),且显著降低细胞内NAD+/NADH和ATP含量(P<0.01),均呈浓度依赖性(r分别为0.8074,-0.8885和-0.9514);SM 25~400μmol·L^(-1)可浓度依赖性增加γ-H2AX阳性细胞比例(P<0.01,r=0.8550)。在SM 10μmol·L^(-1)染毒细胞中检测到2种SM与DNA加合物——单加合物N7-HETEG和双加合物Bis-G。结论SM对SH-SY5Y细胞具有明显的细胞毒性作用,可破坏细胞膜结构,阻碍细胞增殖,降低细胞存活率,其机制可能与引起神经细胞内DNA加合物形成、DNA损伤、能量代谢紊乱和氧化应激反应密切相关。

关键词：硫芥人神经母细胞瘤细胞 DNA损伤氧化应激能量代谢

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基于转录组数据分析的六味地黄方活性组分LWD-b抗补体作用的发现与验证

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中国药理学与毒理学杂志 2023年第3期37卷 168-177页

作者：林颖韩露高圣乔罗丹肖智勇周文霞南京中医药大学江苏南京210023 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的基于转录组数据分析发现与验证六味地黄方活性组分的抗补体作用,并研究其可能的作用途径。方法人恶性黑素瘤细胞A375用DMEM/F12高糖培养基培养,分为细胞对照、六味地黄苷糖LW-AFC、寡糖组分CA-30、多糖组分LWB-B和糖苷组分LWD-b组... 详细信息

目的基于转录组数据分析发现与验证六味地黄方活性组分的抗补体作用,并研究其可能的作用途径。方法人恶性黑素瘤细胞A375用DMEM/F12高糖培养基培养,分为细胞对照、六味地黄苷糖LW-AFC、寡糖组分CA-30、多糖组分LWB-B和糖苷组分LWD-b组(终浓度均为100 mg·L^(-1)),培养6 h后用L1000技术采集细胞转录组数据,采用Cosine相似度算法和特征方向法对各组转录组数据进行相似性比对和差异表达分析,采用基因富集分析算法进行KEGG通路富集分析。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定补体通路基因C3和C5 m RNA表达。采用基于补体经典途径的溶血活性实验测定相对溶血率,观察LWAFC,CA-30,LWB-B和LWD-b(终浓度均为1,10和100 mg·L^(-1))及LWD-b中各主要成分莫诺苷、芍药苷、獐牙菜苷、马钱苷、马钱苷酸和丹皮酚原苷(终浓度均为1和100μmol·L^(-1))的抗补体活性。采用补体成分(C1q,C2,C3,C4,C5和C9)缺失血清法测定LWD-b的补体作用靶点。结果转录组数据分析结果显示,LWD-b下调的基因显著富集于补体级联激活通路(P<0.01),而LW-AFC,CA-30和LWB-B此作用不明显。RT-qPCR结果表明,与细胞对照组相比,LWD-b 100 mg·L^(-1)组补体C3和C5 mRNA表达明显降低(P<0.01)。抗补体活性测定结果表明,与补体组相比,LWD-b各浓度组及LW-AFC 10和100 mg·L^(-1)组相对溶血率均明显降低(P<0.01),但仅LWD-b组相对溶血抑制率>20%,提示LWD-b具有抗补体活性,LW-AFC,CA-30和LWB-B此作用不明显。LWD-b中主要成分的抗补体活性筛选结果表明,与补体组相比,莫诺苷1和100μmol·L^(-1)组及芍药苷100μmol·L^(-1)组相对溶血率均明显降低(P<0.01),且相对溶血抑制率均>20%;獐牙菜苷、马钱苷、马钱苷酸和丹皮酚原苷组相对溶血率虽也明显降低(P<0.01),但其相对溶血抑制率均<20%;提示莫诺苷和芍药苷具有显著抗补体活性,而其余成分抗补体活性较弱。补体成分缺失血清法测定结果表明,分别与补体C1q,C2,C3,C5和C9缺失血清组相比,LWD-b 100 mg·L^(-1)处理后相对溶血率变化均<5%,提示LWD-b降低溶血能力与其作用于上述补体成分相关。结论基于转录组数据分析发现并验证了六味地黄方活性组分LWD-b具有抗补体激活作用,莫诺苷和芍药苷可能是其发挥该作用的主要活性成分。LWD-b可能通过作用于补体成分C1q,C2,C3,C5和C9发挥作用。

关键词：六味地黄方活性组分 LWD-b 补体系统溶血实验转录组数据分析

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基于淋巴类器官的抗体药物代谢替代技术研究现状

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中国临床药理学杂志 2023年第9期39卷 1354-1358页

作者：李娜许重远车津晶军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室南方医科大学南方医院临床药学中心

抗体药物具有相对分子质量大、亲脂性差、膜通透性有限以及高度特异性等性质。其吸收、分布和消除过程区别于传统的小分子药物，与淋巴器官密切相关，容易产生免疫原性。淋巴类器官芯片是以淋巴系统为基础、以微流控芯片技术为核心的微... 详细信息

抗体药物具有相对分子质量大、亲脂性差、膜通透性有限以及高度特异性等性质。其吸收、分布和消除过程区别于传统的小分子药物，与淋巴器官密切相关，容易产生免疫原性。淋巴类器官芯片是以淋巴系统为基础、以微流控芯片技术为核心的微型细胞培养装置，是一种更具生理真实性的体外模型。与传统的二维细胞培养相比，类器官更接近体内细胞运动和多细胞间信号交流的状态；与动物实验相比，类器官更符合伦理学要求，且能够更好地预测药物与人体的相互作用，有望对传统药代动力学评价系统加以补充和完善，从而获得更加客观真实的生理药物代谢评价结果。本文综述了基于淋巴类器官的抗体药物代谢替代技术研究现状，主要包括淋巴类器官的研究现状及其对于抗体药物代谢研究的意义，包括淋巴类器官的抗体药代动力学替代研究和免疫原性替代研究，以期为相关药物研究提供新思路。

关键词：淋巴类器官抗体药物生理药代动力学药物代谢替代技术免疫原性

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基于HPLC指纹图谱和多成分含量测定结合化学计量学的盐杜仲质量评价研究

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中国中药杂志 2024年第1期49卷 141-150页

作者：王婷格罗陆遥薛瑞李劲草李硕张杨张有志南京中医药大学江苏南京210023 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850 华北理工大学药学院河北唐山063210

建立盐杜仲的HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法,结合指纹图谱相似度评价、聚类分析(cluster analysis, CA)、主成分分析(principal component analysis, PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(orthogonal partial least square discriminate analysis, OPLS-DA)进行不同来源盐杜仲的质量评价。采用Cosmosil 5C18-MS-Ⅱ色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),以甲醇-0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长238 nm,柱温30℃,进样量10μL。20批不同来源盐杜仲的指纹图谱相似度评价结果表明,除S3批次样品指纹图谱相似度为0.893外,其余19批次样品的相似度均≥0.919,表明相似度较好;共标定14个共有峰,并指认了京尼平苷酸等7个共有峰,京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷、京尼平、松脂醇二葡萄糖苷、鹅掌楸苷和松脂醇单葡萄糖苷7个成分的质量分数依次为0.062 0%~0.426 9%、0.024 9%~0.116 5%、0.009 5%~0.052 9%、0.005 5%~0.034 8%、0.115 9%~0.317 8%、0.016 4%~0.108 8%、0.026 4%~0.039 8%;通过CA、PCA和OPLS-DA均可将20批盐杜仲划分为3类,且通过OPLS-DA项下的变量重要性投影(variable importance in projection, VIP)值分析筛选出京尼平苷酸和绿原酸2个差异质量标志物。该研究建立的HPLC指纹图谱和多成分含量测定方法稳定、可靠,可为盐杜仲的质量控制提供参考。

关键词：盐杜仲指纹图谱含量测定化学计量学质量评价

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