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2015第11届全国药物和化学异物代谢学术会议

作者：蹇阳庄笑梅李桦国家抗毒药和毒理学重点实验室北京100850 军事医学科学院毒物药物研究所北京100850

目的建立同时测定欧前胡素及其代谢产物花椒毒酚和独活素的LC-MS/MS方法，并进行欧前胡素及其产物在大鼠体内的血浆药代动力学研究。方法大鼠灌胃给予欧前胡素(30 mg/kg)后，不同时间点采集血样，有机蛋白沉淀法进行血浆样品前处理，... 详细信息

目的建立同时测定欧前胡素及其代谢产物花椒毒酚和独活素的LC-MS/MS方法，并进行欧前胡素及其产物在大鼠体内的血浆药代动力学研究。方法大鼠灌胃给予欧前胡素(30 mg/kg)后，不同时间点采集血样，有机蛋白沉淀法进行血浆样品前处理，采用LC-MS/MS法测定原型及两个代谢产物的血药浓度。

关键词：欧前胡素花椒毒酚大黄素 HPLC-MS/MS 血浆药代动力学

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基于原子吸收法探究血液灌流对血铊的清除作用

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中华危重病急救医学 2015年第4期27卷 259-262页

作者：田甜王永安聂志勇王姣彭晓波原野李万华邱泽武薛艳萍熊艺茹 100071北京全军中毒救治中心军事医学科学院附属医院中毒救治科 100850北京抗毒药物与毒理学国家重点实验室军事医学科学院毒物药物研究所 100020北京首都医科大学附属北京朝阳医院放射科医务部科训科

目的：基于原子吸收法检测犬全血铊含量，观察血液灌流（HP）对血中铊的清除效能。方法经股动脉取未染毒比格犬的血液，根据实验动物体质量与血容量的换算公式，配制成3组浓度梯度的含硝酸亚铊（TlNO3）的犬血，充分模拟血液在体环境进... 详细信息

目的：基于原子吸收法检测犬全血铊含量，观察血液灌流（HP）对血中铊的清除效能。方法经股动脉取未染毒比格犬的血液，根据实验动物体质量与血容量的换算公式，配制成3组浓度梯度的含硝酸亚铊（TlNO3）的犬血，充分模拟血液在体环境进行HP，以前一剂量组最后一次灌流结束后犬血中所含TlNO3的总量确定下一组含铊血液样品的配制。应用石墨炉原子吸收仪检测每次灌流前后犬全血铊含量，并对其进行统计分析。结果犬全血铊含量在0～200μg/L线性良好，相关系数为0.9984；日内精密度＜4.913%，日内回收率96.2%～111.9%；日间精密度＜7.502%，日间回收率89.6%～105.2%。高、中、低剂量组每次灌流后血铊浓度均明显降低〔高剂量组从（453.43±27.80）mg/L降至（56.09±14.44）mg/L，F＝8.820，P＝0.003；中剂量组从（64.51±13.60）mg/L降至（3.19±0.23）mg/L，F＝36.312，P＝0.000；低剂量组从（5.40±0.98）mg/L降至（0.38±0.25）mg/L，F＝46.240，P＝0.000〕。高、中、低剂量组4次灌流后总体吸附率分别为（87.63±2.48）%、（95.06±1.54）%、（92.76±4.87）%，组间比较差异无统计学意义（F＝4.231，P＝0.070）。结论采用石墨炉原子吸收仪检测血铊浓度定量准确、灵敏度高、稳定性强，所测样品处理简单，保存时间长，适合批量样本的检测。HP可以稳定、高效地清除血中的铊，4次灌流即可吸附90%以上的铊；且HP的吸附效率与血铊含量无关，即使血铊含量低，HP也是有效的。

关键词：铊中毒血液灌流炭肾

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应用T细胞依赖性抗体反应模型评价参麦注射液对大鼠免疫功能的影响

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中国药理学与毒理学杂志 2015年第1期29卷 65-70页

作者：熊克朝徐伟李志刚张纲李泽君韩刚李磊宁袁本利王和枚吴纯启李振江唐春萍丁日高王全军广东药学院中药学院广东广州510006 军事医学科医学院毒物药物研究所国家北京药物安全评价研究中心北京100850 中国人民解放军军医学院北京100853 神威药业集团有限公司河北石家庄065201 抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的建立T细胞依赖性抗体反应(TDAR)大鼠模型,研究参麦注射液(SMIJ)对大鼠免疫功能的影响。方法 SD大鼠按分组分别ig给予环孢素A(CSA)0.02 g·kg-1,iv给予SMIJ溶剂或SMIJ 0.6,1.2和2.4 g·kg-1,每天1次,连续28 d。于给药第15天... 详细信息

目的建立T细胞依赖性抗体反应(TDAR)大鼠模型,研究参麦注射液(SMIJ)对大鼠免疫功能的影响。方法 SD大鼠按分组分别ig给予环孢素A(CSA)0.02 g·kg-1,iv给予SMIJ溶剂或SMIJ 0.6,1.2和2.4 g·kg-1,每天1次,连续28 d。于给药第15天和第22天经左后足趾sc给予钥孔其虫戚血蓝蛋白(KLH)2.4 mg·kg-1进行免疫刺激。实验期间观察大鼠的一般状态,每周测体质量和摄食量。在第20天和第29天用ELISA法分别测定大鼠血清KLH-Ig M和KLH-Ig G抗体浓度,第29天活杀大鼠,应用全自动血液分析仪测定血液红细胞和白细胞数及白细胞分类,用天平称取肺、肝、脾和胸腺质量并计算脏器系数,采用HE染色法观察肺、肝、脾、胸腺和淋巴结组织病理变化。结果实验期间未见大鼠死亡,各给药组体质量增长和摄食量无异常。与正常对照组相比,模型组大鼠血清KLH-Ig M和KLH-Ig G抗体浓度均明显增高(P<0.01),提示KLH引起机体免疫应答;与模型组相比,血清KLH-Ig M和KLH-Ig G抗体浓度在CSA组均明显降低(P<0.01),而在SMIJ溶剂组和给药组则无明显变化。给药后第29天,与正常对照组相比,模型组大鼠各项血液学指标和脏器系数无差异,各组织脏器亦无明显病变;与模型组相比,CSA组白细胞、嗜酸性粒细胞和淋巴细胞数、脾和胸腺脏器系数均明显降低(P<0.05,P<0.01),脾出现白髓范围和脾小体淋巴细胞数目减少及淋巴小结界限不清等免疫抑制现象,而SMIJ溶剂和给药组各项血液学和脏器系数均无明显改变,各组织脏器亦无明显病变。结论建立了SD大鼠TDAR研究模型,连续尾静脉给予SMIJ 28 d对SD大鼠TDAR无明显影响。

关键词：参麦注射液 T细胞依赖性抗体反应钥孔虫戚血蓝蛋白

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基于有孔壳层隔绝纳米粒子增强拉曼光谱的芥子气现场检测新方法

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分析化学 2014年第10期42卷 1465-1470页

作者：高敬吴剑峰高海月郭磊谢剑炜军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室

基于有孔壳层隔绝纳米粒子增强拉曼光谱技术,建立了一种快速便捷、高灵敏的芥子气及其相关物现场检测新方法。加入0.1 mol/L MgSO4可诱导纳米粒子有效团聚,形成多"热点"的拉曼散射,实现低至10μg/L芥子气的便携式拉曼光谱快... 详细信息

基于有孔壳层隔绝纳米粒子增强拉曼光谱技术,建立了一种快速便捷、高灵敏的芥子气及其相关物现场检测新方法。加入0.1 mol/L MgSO4可诱导纳米粒子有效团聚,形成多"热点"的拉曼散射,实现低至10μg/L芥子气的便携式拉曼光谱快速检测,线性范围为10;000μg/L,分析增强因子约为1.1×106。本方法法直接应用于环境水样中微量芥子气的快速检测,回收率介于88%;14%之间。芥子气相关物（如2-氯乙基乙基硫醚、硫二甘醇、芥子亚砜和芥子砜）可得到有效区分。

关键词：壳层隔绝纳米粒子增强拉曼光谱芥子气现场检测

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神经发育期毒死蜱急性染毒对幼龄大鼠行为学的影响

神经发育期毒死蜱急性染毒对幼龄大鼠行为学的影响

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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛

作者：闫长会陈爽秦川叶小娥郭珣军事医学科学院毒物药物研究所国家北京药物安全评价与研究中心抗毒药物与毒理学国家重点实验室

【目的】毒死蜱(Chlorpyrifos,CPF)是一种广谱、高效、低毒的有机磷农药,目前我国农村经常报道幼童误服CPF并造成急性中毒事件。中毒幼童临床症状消失后一般停止治疗,但CPF中毒诱发的中枢神经毒性可能会持续存在。本研究旨在探讨CPF急... 详细信息

【目的】毒死蜱(Chlorpyrifos,CPF)是一种广谱、高效、低毒的有机磷农药,目前我国农村经常报道幼童误服CPF并造成急性中毒事件。中毒幼童临床症状消失后一般停止治疗,但CPF中毒诱发的中枢神经毒性可能会持续存在。本研究旨在探讨CPF急性染毒后神经发育期幼龄大鼠神经行为学的改变及其神经毒性表现。【方法】本研究选择不致死但诱发动物出现明显有机磷中毒症状的剂量(60、90mg/kg),对PND21的雄性SD大鼠单次灌胃染毒。在染毒结束24h(PND22)以及PND30,PND60、PND90、PND120检测动物临床表现、中枢神经系统各指标的变化、自发行为以及空间学习记忆功能(Morris水迷宫)。【结果】染毒后大部分动物出现流涎,肌肉震颤、四肢无力等有机磷中毒症状,至PND22基本恢复至对照组水平,但染毒动物自发行为发生改变,主要表现为运动总路程减少、运动速度减慢、活动时间减少、中央活动增加(p<0.01),至PND30、PND60、PND90动物自发行为各项指标恢复至对照组水平,但PND120动物出现自发活动增加,表现为活动时间增加、活动次数及直立活动增加、中央活动增加(p<0.05)。水迷宫检测(PND27)结果显示动物到达平台潜伏期明显延长(p<0.05),且该表现一直持续至PND120,转换平台位置后,染毒大鼠同时还表现出参考记忆的损伤,染毒剂量组大鼠潜伏期仍明显滞后于溶剂对照组。【结论】神经发育期CPF急性染毒不仅对幼龄大鼠的空间学习记忆可造成严重损伤,而且可能一直持续至成年,并可伴随非特异性的中枢神经损伤症状。

关键词：有机磷神经毒性神经发育

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曲格列酮肝脏线粒体毒性通路分子起始事件(MIE)

曲格列酮肝脏线粒体毒性通路分子起始事件(MIE)

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2015年（第五届）药物毒理学年会

作者：王全军呼丹吴纯启廖明阳军事医学科医学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室国家北京药物安全评价研究中心

随毒理学技术的发展以及国家对于毒理学科的重视程度逐年加大,风险评估的理念逐渐移植到人们对于化合物、食品、药物和环境污染物的安全性认识中。同时,因科技的进步,新化学物质日益增多。传统危险度评定模式无法满足大量化合物及环境... 详细信息

随毒理学技术的发展以及国家对于毒理学科的重视程度逐年加大,风险评估的理念逐渐移植到人们对于化合物、食品、药物和环境污染物的安全性认识中。同时,因科技的进步,新化学物质日益增多。传统危险度评定模式无法满足大量化合物及环境污染物对人类健康危害评价的需求。基于此,2007年美国国家研究委员会(NRC)发布了"21世纪毒性测试:远景与策略"(简称TT21C)的报告,该报告阐述了毒性测试策略变革

关键词：曲格列酮线粒体毒性肝脏线粒体毒性通路分子起始事件 MIE

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基于rasH2转基因小鼠模型的F3SM短期致癌试验研究

基于rasH2转基因小鼠模型的F3SM短期致癌试验研究

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2015年（第五届）药物毒理学年会

作者：刘悦钟武张思明孔琦董延生韩刚樊星呼丹李磊宁王和枚吴纯启廖明阳李松王全军丁日高军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室国家北京药物安全评价研究中心

背景在药物的临床前安全性评价中,传统的致癌性试验是采用2种啮齿类动物进行2年的长期试验。但由于在周期、成本、预测性等方面存在缺点,目前的趋势是使用新的模型进行中/短期替代试验,代替一项长期试验或作为附加证据参与权重。在目前... 详细信息

背景在药物的临床前安全性评价中,传统的致癌性试验是采用2种啮齿类动物进行2年的长期试验。但由于在周期、成本、预测性等方面存在缺点,目前的趋势是使用新的模型进行中/短期替代试验,代替一项长期试验或作为附加证据参与权重。在目前开发出的新模型和方法中,转基因动物模型最为突出,其中rasH2和p53+/-两种转基因小鼠已经被美国FDA所接受。与p53+/-小鼠只能用于评价遗传毒性致癌物质不同,rasH2转基因小鼠同时适用于遗传毒性和非遗传毒性的致癌物,使用范围更广,目前只有日本开发源公司能够培育、提供,小鼠不易获得且价格昂贵,国内还没有对于这种模型开展相关研究的文献或数据。本研究选用非遗传毒性的潜在致癌化合物F3SM,使用rasH2转基因小鼠模型进行短期(6个月)致癌试验,建立转基因小鼠短期致癌性研究技术体系,以有助于推动我国致癌毒性试验技术的发展,尽快与国际水平接轨。目的 1.建立rasH2转基因小鼠模型短期致癌研究评价体系;2.与国外致癌性模型数据比较,深入了解rasH2转基因小鼠模型;3.提升国内致癌性评价的能力,推动创新药物研发的需要;4.探究受试物致癌毒性,为申报提供必要的数据支持。方法选用10周龄的rasH2转基因小鼠雌雄各200只,设置7个实验组:空白对照组(10只/性别/组)、阳性对照组(15只/性别/组)、溶剂对照组(25只/性别/组)以及30,60,120,240 mg/kg 4个给药剂量组(25只/性别/主实验组),以及每个给药组设有毒代卫星组(1 5只/性别/卫星组)。所有除空白对照组和阳性对照组,其余动物每天灌胃给药1次,每周6天,连续给药26周。阳性对照药物选用国际通用的氨基甲酸乙酯,于给药期第1,3,5天腹腔注射给药。试验期间监测动物的生长状况和临床症状,进行三次毒代动力学分析,给药结束后剖杀主试验动物,计算死亡率,测量脏器系数,测定血液生化、血液学指标,并进行组织病理学检查,统计各组别各器官肿瘤的发生率,分析F3SM的潜在致癌毒性。结果试验终期,空白对照组动物自发脾脏肿瘤3例(1例脾血管瘤,2例脾血管肉瘤);阳性对照组动物在实验期内全部死亡,肺腺瘤发生率达90%。空白对照组和阳性组动物在试验期间存活率、肿瘤发生类型、部位和概率均与文献报道一致。血液生化和血液学指标提示了F3SM对肝脏的损伤和动物应激;脏器系数结果明确提示肝脏肿大,且剂量-效应关系明显。组织病理学详细记录了所有死亡及剖杀动物各个器官的病变及肿瘤发生情况,经统计分析肿瘤的发生情况得出,30,60,120,240mg/kg剂量下,F3SM均在雄性动物中导致了肝腺瘤发生,但30mg/kg剂量下肿瘤发生很可能是由溶剂导致。连续给药26周,30,60和120mg/kg剂量的F3SM在rasH2小鼠体内均未见明显蓄积,240mg/kg剂量连续13周给药后暴露量增加,雌性动物有蓄积倾向,连续26周给药体内暴露量降低,未见明显蓄积。结论 rasH2转基因小鼠模型短期致癌试验体系建立成功。在本次试验条件下,60,120,240mg/kg剂量的F3SM在且仅在雄性小鼠身上有明确的致肝脏肿瘤作用(肝腺瘤),30mg/kg,60-240mg/kg剂量的F3SM对雌性小鼠无致癌性。

关键词：短期致癌试验 rasH2转基因小鼠药物安全性评价

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非供试品因素对清醒遥测动物心血管和呼吸系统检测结果的影响

非供试品因素对清醒遥测动物心血管和呼吸系统检测结果的影响

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中国药理学会安全药理学专业委员会成立大会暨第四届安全药理学国际学术研讨会

作者：闫长会秦川郭珣陈爽叶小娥军事医学科学院毒物药物研究所国家北京药物安全评价与研究中心抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京 100850

目的：从试验设计、操作以及数据处理等方面对中心现有试验条件进行优化,从而减少与非供试品药物作用相关的试验因素对清醒遥测动物心血管和呼吸系统检测结果的影响. 方法：利用DSI植入式以及EMKA无创式遥测系统对清醒Beagle犬或恒... 详细信息

目的：从试验设计、操作以及数据处理等方面对中心现有试验条件进行优化,从而减少与非供试品药物作用相关的试验因素对清醒遥测动物心血管和呼吸系统检测结果的影响. 方法：利用DSI植入式以及EMKA无创式遥测系统对清醒Beagle犬或恒河猴的心电图、体温、呼吸和血压的生理参数进行8-24h连续监测，探讨给药操作(静脉注射5ml/kg的生理盐水)、人员进入等非供试品相关的试验因素对心率、PR间期、QT间期各生理指标的影响，并探讨拉丁方试验设计的数据分析方法以及结果解释。结果：静脉给药操作可诱发Beagle犬心率加快，该效应可持续1-2h，部分敏感动物可出现一过性的呼吸频率加快，但对潮气量没有影响。静脉注射5ml/kg的生理盐水对恒河猴的心血管和呼吸系统没有明显影响。结论：利用拉丁方设计进行清醒遥测动物心血管和呼吸系统检测，需注意非供试品因素对各检测指标的影响，均衡匹配可能的混杂因素，以免其造成实验结果的偏差。

关键词：机能诊断心血管系统呼吸系统非供试品药物

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同位素稀释气相色谱-质谱联用法监测芥子气染毒家兔尿液中的硫二甘醇

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分析化学 2014年第7期42卷 980-984页

作者：聂志勇张雅姣吴弼东闫珑冯建林刘勤谢剑炜抗毒药物与毒理学国家重点实验室军事医学科学院毒物药物研究所毒物分析实验室

以硫二甘醇（TDG）的八氘代同位素（TDG-d8）为内标,采用自制Florisil固相萃取（SPE）柱提取尿样中的TDG,用五氟苯甲酰氯（PFBZ）衍生化后,再经SPE净化富集,通过考察优化两步固相萃取（SPE）等前处理步骤,建立了尿液中TDG的高灵敏同位... 详细信息

以硫二甘醇（TDG）的八氘代同位素（TDG-d8）为内标,采用自制Florisil固相萃取（SPE）柱提取尿样中的TDG,用五氟苯甲酰氯（PFBZ）衍生化后,再经SPE净化富集,通过考察优化两步固相萃取（SPE）等前处理步骤,建立了尿液中TDG的高灵敏同位素稀释-负化学电离-气相色谱/质谱（ID-NCI-GC/MS）分析方法。研究了家兔皮肤芥子气（HD）染毒（0.02;.15 LD50）后,尿液中TDG随时间变化的时效关系及其与HD染毒剂量间的量效关系。结果显示,本方法的检出限为0.1μg/L,定量限为0.3μg/L;家兔染毒后尿液中TDG含量迅速升高,然后又快速减少,并呈现二次释放的特点;各剂量组在第1日内TDG排出量最多,且随着中毒剂量增高,尿液中高含量的TDG维持时间延长。因而,尿液中TDG的异常升高可以作为HD暴露的重要特征指标。

关键词：生物标志物硫二甘醇固相萃取芥子气气相色谱-质谱联用

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罗通定重复灌胃给药对SD大鼠中枢神经的影响

罗通定重复灌胃给药对SD大鼠中枢神经的影响

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中国药理学会安全药理学专业委员会成立大会暨第四届安全药理学国际学术研讨会

作者：闫长会邓耐赵继波军事医学科学院毒物药物研究所国家北京药物安全评价与研究中心抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京 100850

目的:罗通定是一种非麻醉性镇痛药,拟将其用于临床盐酸可卡因的戒断治疗,本试验是探讨罗通定在药效或药效以上剂量时对大鼠神经系统的影响,从而预测罗通定可能出现的非期望药理作用及其可能产生的不良反应;并探讨盐酸可卡因对罗通定重... 详细信息

目的:罗通定是一种非麻醉性镇痛药,拟将其用于临床盐酸可卡因的戒断治疗,本试验是探讨罗通定在药效或药效以上剂量时对大鼠神经系统的影响,从而预测罗通定可能出现的非期望药理作用及其可能产生的不良反应;并探讨盐酸可卡因对罗通定重复给药大鼠神经系统的可能影响. 方法:本研究以SD大鼠为实验动物模型，采用神经系统功能观察组合试验(FOB)和自发活动视频分析系统评价罗通定连续灌胃5天以及盐酸可卡因对罗通定连续给药大鼠的神经系统的可能影响。结果:罗通定连续灌胃给药后大鼠神经行为发生改变，3,10,30mg/kg三个剂量的大鼠均出现不同程度的中枢抑制，其中3mg/kg剂量组在给药后仅头部触摸反应在药后D1-D3与同期溶剂对照组相比其差异显著(p<0.05)，而该指标在D4, DS恢复至对照水平;10mg/kg剂量组动物药后出现对外界刺激的反应降低(觉醒、手指逼近、头部触摸)，直立活动减少，肢体张力降低，翻正反射降低(p<0.05或p<0.01).30mg/kg剂量组动物的中枢抑制症状更加明显，主要表现为睡眠动物数量增加，对外界刺激的反应降低(觉醒、手指逼近、头部触摸、畏惧)，直立活动减少，自主活动减少，身体张力、腹部张力、肢体张力降低，视觉位置感降低，翻正反射降低等神经行为的改变。该变化从药后D1一直持续到D5。罗通定连续灌胃给药对动物体温没有明显影响。腹腔注射盐酸可卡因能够克服罗通定的部分中枢抑制作用，与给药前相比3.10,30mg/kg三个剂量组动物均出现中枢兴奋性增加，主要表现为睡眠动物数量减少，绕笼运动动物数量增加，自主活动增多，身体、肢体张力增加，翻正反射恢复等，该变化从药后10min一直持续到药后1h，与盐酸可卡因给药前相比差别具有显著的统计学意义(p<0.05或p<0.01)。盐酸可卡因给药后动物体温升高。阳性对照组灌胃给予20mglkg的盐酸氯丙嗦后，动物出现明显的中枢抑制和明显的体温降低，与中心历史资料和文献报道一致。结论:罗通定连续灌胃可引起动物中枢抑制，主要表现为睡眠动物数量增加，动物对外界刺激的反应降低，但对动物体温没有明显影响;腹腔注射盐酸可卡因能够克服罗通定的部分中枢抑制作用。

关键词：罗通定神经系统重复灌胃给药中枢抑制作用

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