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中国实验方剂学杂志 2014年第21期20卷 144-148页

作者：王绚陈军蔡宝昌南京医科大学附属南京儿童医院南京210008 江苏省中药炮制重点实验室南京210023 南京中医药大学国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心南京210023

目的:考察优化马钱子总生物碱贴膏剂(MTAP)对大鼠佐剂性关节炎(AA)的治疗作用及其机制。方法:60只大鼠随机分为模型组、正常组、扶他林乳胶剂组(24 mg·kg-1),MTAP低、中、高剂量组(12,24,48 mg·kg-1)。大鼠足跖皮内注射弗氏... 详细信息

目的:考察优化马钱子总生物碱贴膏剂(MTAP)对大鼠佐剂性关节炎(AA)的治疗作用及其机制。方法:60只大鼠随机分为模型组、正常组、扶他林乳胶剂组(24 mg·kg-1),MTAP低、中、高剂量组(12,24,48 mg·kg-1)。大鼠足跖皮内注射弗氏完全佐剂造模后,给药组于腹部脱毛区域给予一定面积的贴膏剂,模型组、正常组给予空白基质的贴膏剂,隔天给药1次,连续治疗30 d。采用足容积法测定足肿胀度,MTT法检测刀豆蛋白(Con A)和脂多糖(LPS)诱导的脾淋巴细胞增殖反应,ELISA法测定腹腔巨噬细胞(PMΦ)产生白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,HE染色法光镜观察关节病理形态学变化等。结果:与正常组比较,模型组关节滑膜组织可见多量炎细胞浸润,有不同程度的充血、水肿;AA大鼠T,B细胞增殖水平显著升高(P<0.05),腹腔巨噬细胞产生的IL-1β,TNF-α的含量亦显著升高(P<0.05)。与模型组比较,MTAP给药组对大鼠原发性和继发性肿胀有明显的治疗作用(P<0.05),对AA大鼠升高的TNF-α水平、增强的T,B细胞增殖反应及关节病理形态改变等方面均有不同程度的改善作用(P<0.05,P<0.01)。结论:MTAP对大鼠佐剂性关节炎有一定的治疗作用,其作用机制可能与其改善AA大鼠异常的细胞免疫功能,调节细胞因子的平衡有关。

关键词：优化马钱子总生物碱贴膏剂佐剂性关节炎炎症免疫调节

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矿物药炮制研究方法述评

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南京中医药大学学报 2014年第6期30卷 596-600页

作者：李伟东高倩倩赵根华翁泽斌吴育陈志鹏南京中医药大学、江苏省中药炮制重点实验室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京210023 南通市中医院药剂科江苏南通226001

矿物药在我国应用已经有几千年的悠久历史,而中药炮制又是我国具有自主知识产权的一项独特的制药技术。矿物药需要经过炮制才能在临床上使用,而目前大部分矿物药的炮制机理尚不明确,有待深入系统研究。自然铜作为临床常用矿物药,其在炮... 详细信息

矿物药在我国应用已经有几千年的悠久历史,而中药炮制又是我国具有自主知识产权的一项独特的制药技术。矿物药需要经过炮制才能在临床上使用,而目前大部分矿物药的炮制机理尚不明确,有待深入系统研究。自然铜作为临床常用矿物药,其在炮制过程中发生了复杂的化学变化。近年来,对自然铜炮制过程化学成分变化及其机制进行了系统研究,取得了系列研究成果,这些研究思路和方法为矿物药的炮制研究提供了很好的借鉴和示范。

关键词：矿物药炮制研究综述

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掌叶半夏毒针晶及凝集素蛋白的致炎作用与巨噬细胞的相关性研究

掌叶半夏毒针晶及凝集素蛋白的致炎作用与巨噬细胞的相关性研究

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第五届全国中医药博士生优秀论文颁奖会议

作者：潘耀宗郁红礼吴皓陈叶青王奎龙南京中医药大学药学院江苏省中药炮制重点实验室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心

目的:探索掌叶半夏毒针晶及凝集素蛋白诱导炎症与巨噬细胞的相关性。方法:自掌叶半夏块茎中提取分离纯化掌叶半夏毒针晶与凝集素蛋白;采用SDS-PAGE凝胶电泳联合质谱分析鉴定凝集素蛋白;采用大鼠腹腔巨噬细胞体外培养模型,以TNF-α和IL-... 详细信息

目的:探索掌叶半夏毒针晶及凝集素蛋白诱导炎症与巨噬细胞的相关性。方法:自掌叶半夏块茎中提取分离纯化掌叶半夏毒针晶与凝集素蛋白;采用SDS-PAGE凝胶电泳联合质谱分析鉴定凝集素蛋白;采用大鼠腹腔巨噬细胞体外培养模型,以TNF-α和IL-1β为指标,研究掌叶半夏毒针晶及凝集素蛋白刺激巨噬细胞释放炎症因子的影响;采用扫描电镜法观察经掌叶半夏毒针晶和凝集素蛋白刺激后巨噬细胞的形态变化;采用巨噬细胞-中性粒细胞体外共培养迁移模型,考察掌叶半夏毒针晶和凝集素蛋白分别刺激巨噬细胞对中性粒细胞迁移的影响。结果:掌叶半夏毒针晶和凝集素蛋白刺激巨噬细胞后,巨噬细胞体积增大,伪足数量增加,细胞膜逐渐破裂。且两者体外均能显著诱导中性粒细胞迁移,其促迁移聚集作用与巨噬细胞释放炎症因子相关。结论:掌叶半夏毒针晶及凝集素蛋白诱导炎症与巨噬细胞介导密切相关。

关键词：掌叶半夏毒针晶掌叶半夏凝集素蛋白巨噬细胞扫描电镜体外中性粒细胞趋化炎症因子

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多指标正交优选大腹皮饮片切制工艺

多指标正交优选大腹皮饮片切制工艺

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2014年全国中药炮制学术年会暨中药饮片创新发展论坛及协同创新联盟会议

作者：郁红礼汤丽娟吴皓毛春芹陆兔林毛善虎南京中医药大学药学院江苏省中药炮制重点实验室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心

目的优选大腹皮饮片切制工艺。方法采用正交试验法,以4种生物碱(槟榔次碱、去甲槟榔次碱、槟榔碱、去甲槟榔碱)含量及水溶性煎出物得率为指标,采用相关系数综合评分法,选择切制宽度、烘干温度和烘干时间为考察因素,优化大腹皮饮片的炮... 详细信息

目的优选大腹皮饮片切制工艺。方法采用正交试验法,以4种生物碱(槟榔次碱、去甲槟榔次碱、槟榔碱、去甲槟榔碱)含量及水溶性煎出物得率为指标,采用相关系数综合评分法,选择切制宽度、烘干温度和烘干时间为考察因素,优化大腹皮饮片的炮制工艺。结果优选出的炮制工艺为:大腹皮药材抢水洗后,润透,纵切1cm段,50℃,烘2.5h。结论优选出的大腹皮炮制工艺稳定可行,重现性好。

关键词：大腹皮炮制工艺正交设计生物碱 HPLC 水溶性煎出物得率

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天南星科有毒中药炮制减毒共性机理

天南星科有毒中药炮制减毒共性机理

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2014年全国中药炮制学术年会暨中药饮片创新发展论坛及协同创新联盟会议

作者：吴皓郁红礼葛秀允潘耀宗金羊平张倩南京中医药大学药学院江苏省中药炮制重点实验室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心

天南星科的半夏(Pinellia ternata（Thunb.）Breit.)、掌叶半夏（Pinellia pedatisecta Schott.）、天南星（Arisaema amurense Maxim）、白附子（Typhonium giganteum Engl.）是常用有毒中药。因其有毒,故在临床应用前需要把它们浸泡在白矾溶液中来炮制减毒。毒针晶和凝集素被认为天南星科有毒中药中共性的毒性物质,两者均具有显著的致炎作用。本文研究了白矾溶液降低毒性成分毒性的炮制机理。采用整体动物腹腔致炎模型和家兔眼结膜刺激模型研究白矾炮制对针晶、凝集素蛋白的刺激性及致炎毒性的影响;采用电镜扫描观察针晶在炮制过程中的晶型变化;采用HPLC法研究针晶的溶解、锈蚀是与白矾溶液中何种离子相关;以Al-NMR技术研究草酸铝络合物的形成与针晶溶解、锈蚀之间的关系;采用蛋白Shotgun质谱分析技术研究白矾溶液浸泡前后凝集素蛋白肽序列变化。结果显示毒针晶及凝集素蛋白腹腔注射导致的小鼠腹腔渗出液中PGE及蛋白含量升高,白矾溶液炮制炮制后其致炎作用显著降低。电镜扫描显示毒针晶在炮制过程中针晶溶解、锈蚀,晶型结构被破坏;HPLC法测定显示以白矾溶液浸泡毒针晶可使毒针晶中草酸含量明显下降,这与白矾中的Al相关;Al-NMR分析显示白矾中的Al可与针晶中的CO形成稳定的络合物,促使毒针晶的草酸钙溶解;SDS凝胶电泳和LC-MS/MS蛋白肽序列分析结果表明,毒针晶经白矾溶液浸泡后,毒针晶带有的凝集素蛋白溶解并降解,凝集素蛋白序列变化,蛋白结构破坏。结论:天南星科有毒中药采用白矾炮制解毒的共性机制:白矾溶液中的Al与毒针晶中草酸钙的草酸根形成络合物,促使草酸钙溶解,毒针晶特殊晶型的刚性结构被破坏,机械刺激破坏;同时白矾溶液浸泡使毒针晶上带有的凝集素蛋白溶解并降解,破坏了毒蛋白的结构,使致炎效应显著降低。双重作用导致天南星科有毒中药的毒性显著下降。

关键词：天南星科有毒中药毒针晶凝集素蛋白白矾炮制解毒机制

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青娥丸盐炙品与生品抗去卵巢诱导的骨质疏松效应的比较研究

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南京中医药大学学报 2014年第5期30卷 438-442页

作者：颜翠萍翁泽斌吴育陈志鹏蔡宝昌李伟东南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023 济川药业集团股份有限公司江苏泰州225400 南京中医药大学药学院江苏南京210023 南通市中医院药剂科江苏南通226001

目的研究盐制对青娥丸补肾健骨药效的影响,根据中医"盐制入肾"的理论,盐制可以增加中药温肾壮阳的功效。本研究观察不同炮制品配伍的青娥丸对去卵巢(Ovariectomy,OVX)大鼠诱导的骨质疏松症(Osteoporosis)的治疗作用,并进一步... 详细信息

目的研究盐制对青娥丸补肾健骨药效的影响,根据中医"盐制入肾"的理论,盐制可以增加中药温肾壮阳的功效。本研究观察不同炮制品配伍的青娥丸对去卵巢(Ovariectomy,OVX)大鼠诱导的骨质疏松症(Osteoporosis)的治疗作用,并进一步探讨盐制引起青娥丸治疗骨质疏松症的药效差异的机制。方法采用大鼠去卵巢骨质疏松症模型,制备以补骨脂和杜仲生品及盐炙品配伍的青娥丸,给予大鼠不同炮制品配伍青娥丸混悬液(2mL/200g)灌胃,给药持续12周。采用双能X射线骨密度仪对大鼠左股骨干骺端骨密度(BMD)进行测定;同时测量血清中与骨代谢相关的生化指标来评价不同炮制品青娥丸的治疗效果;采用Micro-CT和HE染色的方法对大鼠左股骨干骺端骨小梁的微结构进行分析;对子宫进行HE染色,评价青娥丸对子宫的刺激作用。结果青娥丸能够抑制大鼠去卵巢引起的肥胖,增加去卵巢大鼠的子宫质量,盐炙品配伍青娥丸抑制大鼠体质量增加和增加子宫质量的效果与生品配伍青娥丸并无明显差异,同时青娥丸还能够增加大鼠股骨的BMD,改善去卵巢引起的大鼠骨小梁微结构的受损,且研究结果表明,盐炙品配伍的青娥丸治疗效果优于生品配伍组。同时,以生品及盐炙品配伍的青娥丸治疗均没有引起大鼠子宫病变。结论青娥丸对治疗大鼠去卵巢引起的骨质疏松症有良好的治疗效果,且盐制增强了青娥丸的抗骨质疏松药效。以生品及盐炙品配伍青娥丸在治疗剂量范围内均没有引起子宫病变。

关键词：青娥丸骨质疏松症去卵巢大鼠盐制

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镰形棘豆对肝癌细胞SMMC-7721线粒体膜电位及Caspase-3蛋白表达的影响

镰形棘豆对肝癌细胞SMMC-7721线粒体膜电位及Caspase-3蛋白表达的...

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全国民族医药发展学术研讨会

作者：杨光明燕珂李伟东潘扬蔡宝昌南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室国家中医药管理局中药炮制标准重点研究室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心南京 210023 南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室国家中医药管理局中药炮制标准重点研究室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心南京 210023 南京中医药大学药用菌与中药生物技术研究所南京 21

目的：研究藏药镰形棘豆对SMMC-7721人肝癌细胞的线粒体膜电位及Caspase-3蛋白表达的影响. 方法：镰形棘豆总黄酮0.05,0,075, 0,1 mg·mL-1分别作用于SMMC-7721细胞后,流式细胞术检测线粒体膜电位,Western blot检测对凋... 详细信息

目的：研究藏药镰形棘豆对SMMC-7721人肝癌细胞的线粒体膜电位及Caspase-3蛋白表达的影响. 方法：镰形棘豆总黄酮0.05,0,075, 0,1 mg·mL-1分别作用于SMMC-7721细胞后,流式细胞术检测线粒体膜电位,Western blot检测对凋亡相关蛋白Caspase-3蛋白表达的影响. 结果：镣形棘豆总黄酮作用SMMC-7721细胞后可以使细胞的线粒体跨膜电位明显降低,与药物浓度呈负相关.中、高剂量组的SMMC-7721细胞中Caspase-3蛋白表达明显升高(P＜0.01). 结论：镰形棘豆总黄酮诱导SMMC-7721细胞的凋亡可能是通过线粒体途径,并且与影响Caspase-3的表达有关.为镰形棘豆抗肿瘤的作用机制的实验和临床研究奠定理论和实验依据.

关键词：肝癌细胞镰形棘豆线粒体膜电位半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3 蛋白表达抗肿瘤活性

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不同炮制品的杜仲含药血清及其环烯醚萜类成分对绝经后妇女成骨细胞增殖、分化的影响

不同炮制品的杜仲含药血清及其环烯醚萜类成分对绝经后妇女成骨细...

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2014年全国中药炮制学术年会暨中药饮片创新发展论坛及协同创新联盟会议

作者：翁泽斌颜翠萍高倩倩赵根华陈志鹏蔡宝昌李伟东南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心南京中医药大学药学院江苏省泰州市药检所

[目的]研究杜仲盐炙前后含药血清及其环烯醚萜类成分对绝经后妇女的成骨细胞增殖和分化的影响。探讨杜仲对骨质疏松症的治疗机制,阐述应用盐炙品入药的必要性。[方法]以绝经后妇女股骨松质骨分离得到的成骨细胞为研究对象,给予大鼠生品... 详细信息

[目的]研究杜仲盐炙前后含药血清及其环烯醚萜类成分对绝经后妇女的成骨细胞增殖和分化的影响。探讨杜仲对骨质疏松症的治疗机制,阐述应用盐炙品入药的必要性。[方法]以绝经后妇女股骨松质骨分离得到的成骨细胞为研究对象,给予大鼠生品及盐炙品杜仲水提液灌胃(10 mL·kg),给药持续7 d,第7天采集大鼠血液制备含药血清。实验分为空白对照组、空白血清组、杜仲含药血清组、盐杜仲含药血清组。以雌二醇作为对照阳性药物。采用MTT法检测各组含药血清及各单体成分对人成骨细胞增殖的影响;同时测量成骨细胞碱性磷酸酶活性来评价各组含药血清及各单体成分对人成骨细胞分化的作用。[结果]杜仲生品和盐炙品含药血清均能促进入成骨细胞的增殖,提高碱性磷酸酶的活性,且血清浓度为20%时,杜仲盐炙品含药血清对成骨细胞增殖、分化的促进作用显著优于生品（P<0.01）;同时杜仲中4种环烯醚萜类成分对人成骨细胞的增殖和分化均有促进作用。[结论]杜仲生品和盐炙品含药血清均具有良好的促进人成骨细胞增殖和分化的作用,其中盐炙品的作用显著优于生品。杜仲中环烯醚萜类成分可能是其补肾健骨作用的有效成分。

关键词：杜仲环烯醚萜盐炙成骨细胞骨质疏松症

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山茱萸炮制过程中的红外光谱分析

山茱萸炮制过程中的红外光谱分析

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2014年全国中药炮制学术年会暨中药饮片创新发展论坛及协同创新联盟会议

作者：杨光明张玉玲李伟东潘扬蔡宝昌南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室国家中医药管理局中药炮制标准重点研究室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心南京中医药大学药用菌与中药生物技术研究所

目的:利用红外光谱技术,分析炮制过程中山茱萸红外光谱的宏观和指纹特征。方法:以酒蒸法炮制山茱萸药材,对炮制过程中不同时间点的酒萸肉饮片进行红外光谱信息采集并进行分析。结果:根据红外光谱信息,可以推断山茱萸中存在醇类、有机酸... 详细信息

目的:利用红外光谱技术,分析炮制过程中山茱萸红外光谱的宏观和指纹特征。方法:以酒蒸法炮制山茱萸药材,对炮制过程中不同时间点的酒萸肉饮片进行红外光谱信息采集并进行分析。结果:根据红外光谱信息,可以推断山茱萸中存在醇类、有机酸类、酯类等化合物,炮制过程中各类成分有规律地变化并趋于稳定,在3309 cm,1713cm,1020 cm有特征吸收。此外,在8～12 h炮制样品中羧酸含量最高,结合文献判断为最佳炮制时间。结论:该方法快速、方便,特征性强,可以识别山茱萸炮制品中的主体成分,为炮制工艺的优化提供科学的依据。

关键词：山茱萸红外光谱炮制

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天南星科有毒中药炮制减毒共性机理

天南星科有毒中药炮制减毒共性机理

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全国民族医药发展学术研讨会

作者：吴皓郁红礼葛秀允潘耀宗金羊平张倩南京中医药大学药学院江苏南京 210023 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京 210023 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京 210023

天南星科的半夏(Pinellia ternata (Thunb.) Breit.)、掌叶半夏(Pinellia pedatisecta Schott.)、天南星(Arisaema amurense Maxim)、白附子(Typhonium giganteum Engl.)是常用有毒中药.因其有毒,故在临床应用前需要把它们浸泡在白矾溶液中采炮制减毒.毒针晶和凝集素被认为天南星科有毒中药中共性的毒性物质,两者均具有显著的致炎作用.本文研究了白矾溶液降低毒性成分毒性的炮制机理.采用整体动物腹腔致炎模型和家兔眼结膜刺激模型研究白矾炮制对针晶、凝集素蛋白的刺激性及致炎毒性的影响;采用电镜扫描观察针晶在炮制过程中的晶型变化;采用HPLC法研究针晶的溶解、锈蚀是与白矾溶液中何种离子相关;以27Al-NMR技术研究草酸铝络合物的形成与针晶溶解、锈蚀之间的关系;采用蛋白Shotgun质谱分析技术研究白矾溶液浸泡前后凝集素蛋白肽序列变化.结果显示毒针晶及凝集素蛋白腹腔注射导致的小鼠腹腔渗出液中PGE2及蛋白含量升高,白矾溶液炮制炮制后其致炎作用显著降低.电镜扫描显示毒针晶在炮制过程中针晶溶解、锈蚀,晶型结构被破坏;HPLC法测定显示以白矾溶液浸泡毒针晶可使毒针晶中草酸含量明显下降,这与白矾中的Al3+相关;27Al-NMR分析显示白矾中的Al3+可与针晶中的C2O42-形成稳定的络合物,促使毒针晶的草酸钙溶解;SDS凝胶电泳和LC-MS/MS蛋白肽序列分析结果表明,毒针晶经白矾溶液浸泡后,毒针晶带有的凝集素蛋白溶解并降解,凝集素蛋白序列变化,蛋白结构破坏.结论:天南星科有毒中药采用白矾炮制解毒的共性机制:白矾溶液中的Al3+与毒针晶中草酸钙的草酸根形成络合物,促使草酸钙溶解,毒针晶特殊晶型的刚性结构被破坏,机械刺激破坏;同时白矾溶液浸泡使毒针晶上带有的凝集素蛋白溶解并降解,破坏了毒蛋白的结构,使致炎效应显著降低.双重作用导致天南星科有毒中药的毒性显著下降.

关键词：天南星科中药炮制毒针晶凝集素蛋白解毒机制

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