近年来,野生动物的保护研究已成为一大热点,其采样方法主要以非损伤性取样(粪便)为主。为筛选一种操作简单、经济成本较适宜的动物粪便基因组DNA高效提取试剂盒,笔者选用QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit(德国:粪便DNA纯化试剂盒)、生工...
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近年来,野生动物的保护研究已成为一大热点,其采样方法主要以非损伤性取样(粪便)为主。为筛选一种操作简单、经济成本较适宜的动物粪便基因组DNA高效提取试剂盒,笔者选用QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit(德国:粪便DNA纯化试剂盒)、生工磁珠法基因组DNA抽提试剂盒、Stool Genomic DNA Kit(康为世纪:粪便基因组提取试剂盒)、生工Ezup柱式土壤DNA抽提试剂盒这4种来自不同厂家,其使用频率较高及市售商业化的试剂盒,各自提取4份新鲜藏酋猴(Macaca thibetana)粪便样本的基因组DNA。通过比较各试剂盒所提取基因组DNA的浓度、纯度,并对其16S rRNA进行PCR扩增及singer测序,从而获得不同试剂盒基因组DNA的提取效果。比较发现,Stool Genomic DNA Kit(康为世纪)的效果较好且经济,并将其应用于兽类(野猪),灵长类(黔金丝猴),鸟类(黑颈鹤、灰鹤、斑头雁和红腹角雉)等物种进行验证,发现均获得理想的基因组DNA提取效果,说明Stool Genomic DNA Kit(康为世纪)可作为鸟兽等野生动物粪便基因组DNA提取的有效试剂盒。这一研究结果为其他类似研究提供了参考依据。
水韭属(Iso?tes)是一类世界广布的石松类植物,本文报道了在云南省发现的一个新的水韭属居群。该居群为六倍体群体,染色体数目为66条。利用扫描电镜对其进行孢子观察,发现其大孢子赤道面直径为470~500μm(平均480μm),近极面和远极面纹饰均为网格状,小孢子表面为棘刺状纹饰,与之前国内记载的六倍体物种东方水韭(Isoetes orientalis Hong Liu&Q. F. Wang)不同,基于叶绿体基因组数据重建的系统发育结构支持该物种是一个独立物种,最终将其确定为一个新物种,命名为青锋水韭(I. fengii Y. F. Gu&Y. H. Yan)。青锋水韭与二倍体云贵水韭(I. yunguiensis Q. F. Wang&W. C. Taylor)在叶和大孢子形态上较为相似,但后者的小孢子表面为瘤状突起且孢子囊为卵形;而与六倍体宽叶水韭(I. japonica A. Braun)的区别在于后者的小孢子表面光滑。青锋水韭目前仅在云南省紫溪山森林公园发现两个居群,且数目很少,根据IUCN红色名录评估标准,将青锋水韭评为极危(CR)等级。本文编制了中国已知水韭属物种的分种检索表,以期为本属物种的鉴定和保护工作提供参考。
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