检索结果-内蒙古大学图书馆

中南林业科技大学学报 2010年第2期30卷 1-9页

作者：谭晓风蒋瑶王保明张琳中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学林学院湖南长沙410004 中南林业科技大学国家油茶科学中心生物技术实验室湖南长沙410004

以油茶‘湘林1号’品种的近成熟种子为材料,采用简并PCR、RACE、交错PCR等技术,获得了油茶乙酰辅酶A羧化酶BC亚基基因的全长cDNA克隆。该基因cDNA序列全长1 901 bp,含有一个1 599 bp的ORF,编码533个氨基酸残基。BC蛋白的等电点pI为6.88... 详细信息

以油茶‘湘林1号’品种的近成熟种子为材料,采用简并PCR、RACE、交错PCR等技术,获得了油茶乙酰辅酶A羧化酶BC亚基基因的全长cDNA克隆。该基因cDNA序列全长1 901 bp,含有一个1 599 bp的ORF,编码533个氨基酸残基。BC蛋白的等电点pI为6.88,分子量为58 509.3 u,含两个跨膜结构域,是一个不稳定的非分泌蛋白。模体搜索结果表明在BC上具有N-糖基化位点、蛋白激酶C磷酸化位点、ATP结合位点等多个功能结构域。同源建模的模型中发现12个α-螺旋,整个BC蛋白为一个内凹的结构。该基因已登录到GenBank,并被命名为co-bc。

关键词：油茶乙酰辅酶A羧化酶 BC 基因克隆序列分析

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绵毛优若藜冷诱导SSH文库构建研究

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中南林业科技大学学报 2010年第2期30卷 65-69页

作者：张党权明付焕江平樊绍刚杨自辉邓顺阳中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004 兰州大学土木工程与力学学院甘肃兰州730000 甘肃省治沙研究所甘肃省荒漠化防治重点实验室甘肃武威733000

绵毛优若藜是我国近年成功引种的高抗逆性饲用及防风固沙植物。以常温下的绵毛优若藜叶片和嫩枝为对照组,冷胁迫诱导处理后的叶片和嫩枝为试验组,获得两者高质量mRNA后反转录成cDNA,RsaI消化使其平末端化,试验组cDNA的5’末端连接上2个... 详细信息

绵毛优若藜是我国近年成功引种的高抗逆性饲用及防风固沙植物。以常温下的绵毛优若藜叶片和嫩枝为对照组,冷胁迫诱导处理后的叶片和嫩枝为试验组,获得两者高质量mRNA后反转录成cDNA,RsaI消化使其平末端化,试验组cDNA的5’末端连接上2个特异接头,然后分别与过量对照组cDNA进行杂交,把两份杂交样品混合后,与过量的新鲜变性的对照组cDNA过夜杂交,杂交后的混合液稀释后进行第一轮抑制性PCR以选择扩增特异表达的cDNA,然后以第一轮PCR产物为模板用巢式引物进行二次抑制性PCR,获得的富集差异表达cDNA即为绵毛优若藜冷胁迫SSH文库。将SSH文库的cDNA插入到载体中,共获得了362个克隆,为后续绵毛优若藜的抗冻基因克隆与转基因应用奠定了基础。

关键词：绵毛优若藜抑制消减杂交文库冷胁迫抗冻基因 cDNA克隆

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油茶SRAP标记的PCR体系建立与优化

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中南林业科技大学学报 2010年第3期30卷 57-62页

作者：祝全东张党权李晓云杨书斌韩欣宋志丹刘作梅赵倩谢晓敏邝先松中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004 抚州市林业科学研究所江西抚州344000 赣州市林业科学研究所江西赣州341000

油茶是我国主要的木本食用油料树种,拟建立油茶新型SRAP标记(序列相关扩增多态性)的优化PCR体系。以油茶优良品种的总DNA为材料,分析了影响油茶SRAP-PCR的主要参数,包括模板DNA量、引物浓度、dNTPs、Mg2+浓度、TaqDNA聚合酶用量、退火温... 详细信息

油茶是我国主要的木本食用油料树种,拟建立油茶新型SRAP标记(序列相关扩增多态性)的优化PCR体系。以油茶优良品种的总DNA为材料,分析了影响油茶SRAP-PCR的主要参数,包括模板DNA量、引物浓度、dNTPs、Mg2+浓度、TaqDNA聚合酶用量、退火温度6个因素的影响,建立了适合油茶SRAP-PCR的优化体系为:20μL的PCR反应体系中,2.0μL 10×PCR buffer,2.0 mmol/L Mg2+,225μmol/L dNTPs,0.6μmol/L引物,30 ng模板DNA和0.75 U Taq DNA聚合酶;最佳PCR循环条件为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,35℃复性1 min,72℃延伸1 min,5循环;94℃变性1 min,52℃复性1 min,72℃延伸1 min,35循环;最后72℃延伸10 min;4℃保存。本研究结果可为今后利用SRAP这一新型标记技术进行油茶分子遗传学与标记辅助选择育种研究打下基础。

关键词：经济林学油茶分子标记 SRAP PCR 体系优化

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6个梨品种S基因型鉴定及新基因S_(45)-RNase序列分析

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果树学报 2010年第5期27卷 689-693页

作者：王立新梁文杰谭晓风李秀根张琳温州科技职业学院浙江温州325006 中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室长沙410004 中国农业科学院郑州果树研究所郑州450009

梨是典型的配子体自交不亲和果树,生产上需要配置授粉树才能获得理想的产量。鉴定梨品种的S基因型能够为合理配置授粉树提供理论依据。为鉴定S基因型,设计特异性引物对6个中国原产梨品种的基因组DNA进行扩增,片段回收、克隆、测序。使... 详细信息

梨是典型的配子体自交不亲和果树,生产上需要配置授粉树才能获得理想的产量。鉴定梨品种的S基因型能够为合理配置授粉树提供理论依据。为鉴定S基因型,设计特异性引物对6个中国原产梨品种的基因组DNA进行扩增,片段回收、克隆、测序。使用生物信息学软件对各序列进行分析,确定6个梨品种S基因型分别为:宝珠S22S42,半斤酥S5S21,张掖长把S19S22,贵德长把S19S22,满顶雪S4S15,水冬瓜S15S45。其中S45为新分离鉴定的梨S-RNase基因,GenBank登录号为:EF643634。S45和梨S26的相似性最高,但高变区有5个氨基酸差异。

关键词：梨自交不亲和性 S基因型鉴定

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中国梨新SFBB-gamma基因的鉴定及序列分析

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中南林业科技大学学报 2010年第8期30卷 5-10,40页

作者：乌云塔娜包梅荣李铁柱中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学林学院湖南长沙410004 中南林业科技大学学科建设处湖南长沙410004

通过分子生物学方法分离鉴定了4个新的梨SFBB-gamma基因,并对其序列进行了生物信息学分析。SFBB-gamma基因的特异性引物对4个梨品种进行PCR扩增结果表明,4个品种均扩增出一条1 250 bp左右的条带;通过DNA测序和生物信息学分析方法从‘鸭... 详细信息

通过分子生物学方法分离鉴定了4个新的梨SFBB-gamma基因,并对其序列进行了生物信息学分析。SFBB-gamma基因的特异性引物对4个梨品种进行PCR扩增结果表明,4个品种均扩增出一条1 250 bp左右的条带;通过DNA测序和生物信息学分析方法从‘鸭梨’、‘红皮酥’、‘中梨二号’和‘兰州软儿’等梨品种中分离鉴定了SFBB21(EU422961)、SFBB26(EU422961)、SFBB31(EU422959)、SFBBd-gamma(EU422962)基因。聚类分析中发现,仁果类SFBB基因和核果类和SFB基因明显的分成两类,仁果类中梨SFBB基因和苹果SFBB基因又各分成一类,这与物种的亲缘关系相符合。新鉴定的梨SFBB基因中从白梨中分离鉴定的SFBB21-gamma基因与梨其他SFBB-gamma基因的亲缘关系最远。该研究为梨自交不亲和机理研究和遗传改良提供理论基础。

关键词：中国梨自交不亲和性 SFBB基因

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14个杏李品种的ISSR分析及分子鉴别

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内蒙古农业大学学报（自然科学版） 2010年第2期31卷 147-153页

作者：段伟闫文德乌云塔娜李洪果包梅荣中南林业科技大学生命科学院长沙410004 中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室长沙410004 中南林业科技大学林学院长沙410004

采用ISSR分子标记,对14个杏李品种进行了遗传多样性分析,从100条ISSR引物中筛选出多态性较高的22条引物对14个杏李品种进行扩增,共扩增出205个位点,多态性位点比率为81.95%;建立了11个肉眼无法区分的杏李品种的分子识别卡,用3条引物的3... 详细信息

采用ISSR分子标记,对14个杏李品种进行了遗传多样性分析,从100条ISSR引物中筛选出多态性较高的22条引物对14个杏李品种进行扩增,共扩增出205个位点,多态性位点比率为81.95%;建立了11个肉眼无法区分的杏李品种的分子识别卡,用3条引物的3个特异性识别位点即可将11个杏李品种区分开;聚类分析结果显示:14个杏李品种基因型间的平均遗传距离(GD)为4.6632,味馨与其它品种之间平均遗传距离最大,为10.332,风味玫瑰与味厚之间遗传距离最小,为2.3462;UPGMA聚类分析可将14个供试品种分为两组,即含有杏基因75%李基因25%的‘味馨’单独分为1组,其他品种均含李基因75%以上杏基因25%以下,聚为另1组;第2类进一步可细分为5个亚组,其中‘味馨’、‘风味皇后’、‘味王’单独成类,与其它品种的亲缘关系相对较远。本研究为开展杏李、杏和李之间远缘杂交实验及良种培育、砧木改良等提供较可靠的理论依据。

关键词：杏李 ISSR 分子标记亲缘关系

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桐油制备生物柴油的工艺研究

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中南林业科技大学学报 2010年第12期30卷 134-137页

作者：孙汉洲杜勋军谭晓风章怀云中南林业科技大学应用化学研究所湖南长沙410004 中南林业科技大学生物技术开放性中心实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004

油桐是我国特有的木本油料树种。分别采用单因素法和正交试验法研究了桐油合成生物柴油的工艺条件。实验结果表明:桐油制备生物柴油的适宜工艺条件为醇油摩尔比8∶1,反应时间80 min,反应温度40℃,催化剂NaOH用量为油重的0.7%。按此工艺... 详细信息

油桐是我国特有的木本油料树种。分别采用单因素法和正交试验法研究了桐油合成生物柴油的工艺条件。实验结果表明:桐油制备生物柴油的适宜工艺条件为醇油摩尔比8∶1,反应时间80 min,反应温度40℃,催化剂NaOH用量为油重的0.7%。按此工艺生物柴油的收率可达98.2%。

关键词：桐油生物柴油酯交换甲醇

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树脂催化合成桐酸甲酯-马来酸酐加合物

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中南林业科技大学学报 2010年第12期30卷 138-141,155页

作者：周尽花杜勋军吴宇雄叶翠层孙汉洲章怀云谭晓风中南林业科技大学应用化学研究所湖南长沙410004 中南林业科技大学生物技术开放性中心实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004

桐油是我国重要的林产生物质资源,开发桐油下游产品,提高桐油经济附加值具有重要的意义。由桐油经酯交换合成了桐酸甲酯,采用树脂催化法在溶液中合成了桐酸甲酯-马来酸酐加合物(MEMAA),考察了不同催化树脂种类、树脂用量、反应时间、物... 详细信息

桐油是我国重要的林产生物质资源,开发桐油下游产品,提高桐油经济附加值具有重要的意义。由桐油经酯交换合成了桐酸甲酯,采用树脂催化法在溶液中合成了桐酸甲酯-马来酸酐加合物(MEMAA),考察了不同催化树脂种类、树脂用量、反应时间、物料配比等因素对MEMAA收率的影响。结果表明:DT-851为桐酸甲酯与马来酸酐加成反应的适宜催化树脂,当桐酸甲酯用量为20 g时,桐酸甲酯与马来酸酐摩尔物料比为1∶1.3,催化树脂用量为4 g,反应介质甲苯用量为100 mL,回流反应10 h,所得MEMAA总收率为76.9%(以桐油计)。树脂催化溶液法合成MEMAA具有收率高、产物易分离纯化、反应条件温和、树脂可反复使用等特点。

关键词：桐油桐酸甲酯-马来酸酐加合物桐酸甲酯催化

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中国梨醇-酰基转移酶基因的克隆及遗传多态性

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中南林业科技大学学报 2010年第4期30卷 39-44页

作者：乌云塔娜康秀胡尚力马腾中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学林学院湖南长沙410004 中南林业科技大学生命科学与技术学院湖南长沙410004

以6个中国梨品种为实验材料,对基因组DNA进行醇-酰基转移酶(AAT)基因的特异性PCR扩增、克隆、DNA序列测定和生物信息学分析,研究了中国梨AAT基因的遗传多态性。结果表明,浓香、微香、无香梨品种中均克隆到约1 600 bp大小的1-4条AAT基因... 详细信息

以6个中国梨品种为实验材料,对基因组DNA进行醇-酰基转移酶(AAT)基因的特异性PCR扩增、克隆、DNA序列测定和生物信息学分析,研究了中国梨AAT基因的遗传多态性。结果表明,浓香、微香、无香梨品种中均克隆到约1 600 bp大小的1-4条AAT基因。其中外显子部分存在1个HXXXD活性区和4个可变区,内含子中至少存在8处长度缺失和突变。基因结构分析表明,这些AAT基因同属于家族cl03601的转移酶基因家族pfam02548。系统发育分析表明,本实验所克隆到的中国梨AAT基因关系最近,与网上已知序列的苹果和西洋梨的关系略远。

关键词：中国梨醇-酰基转移酶基因克隆遗传多态性

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7个杏李品种花粉SFB基因的克隆鉴定

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中南林业科技大学学报 2010年第12期30卷 1-5页

作者：李芳东乌云塔娜杜红岩李洪果杨绍彬北京林业大学北京100083 中国林业科学研究院经济林研究开发中心河南郑州450009 中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学林学院湖南长沙410004

以美国杏李品种为试验材料,利用Prunus的SFB基因特异性引物,对7个杏李品种进行PCR扩增,并进行克隆、测序。采用生物信息学分析方法分离鉴定了‘恐龙蛋’等7个杏李品种的花粉SFB基因。PCR结果显示,‘风味皇后’、‘味帝’、‘味王’、‘... 详细信息

以美国杏李品种为试验材料,利用Prunus的SFB基因特异性引物,对7个杏李品种进行PCR扩增,并进行克隆、测序。采用生物信息学分析方法分离鉴定了‘恐龙蛋’等7个杏李品种的花粉SFB基因。PCR结果显示,‘风味皇后’、‘味帝’、‘味王’、‘风味玫瑰’、‘味厚’、‘味馨’、‘恐龙蛋’等7个品种均扩增出一条460 bp左右的片段;对PCR产物回收克隆后测序,并通过BLAST比对和生物信息学分析表明,‘风味皇后’、‘味王’、‘风味玫瑰’、‘味厚’、‘味帝’、‘恐龙蛋’等6个品种中克隆到了一个SFBh基因;‘风味皇后’、‘味王’、‘风味玫瑰’、‘味厚’、‘味馨’等5个品种中克隆到了一个SFBe基因;‘味帝’和‘恐龙蛋’中分离克隆了SFBb基因;‘味馨’中分离克隆了一个SFB2基因;故7个杏李品种的花粉SFB基因型鉴定为:‘风味皇后’、‘味王’、‘风味玫瑰’和‘味厚’等4个品种的花粉SFB基因型相同,为SFBeSFBh;‘味帝’和‘恐龙蛋’的花粉SFB基因型相同,为SFBbSFBh;味馨’的花粉SFB基因型为SFBeSFB2。

关键词：杏李自交不亲和性 F-Box SFB基因

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