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中华肿瘤杂志 2018年第9期40卷 653-658页

作者：王微袁伟魏训东齐军马沽国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院检验科 100021 国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院分子肿瘤学国家重点实验室 100021 北京医院生物治疗中心国家老年医学中心 100730

目的探讨粒细胞集落刺激因子受体（G-CSFR）在结肠炎相关结直肠癌（CAC）发生发展过程中的表达水平，并分析其阳性表达的免疫细胞亚群。方法联合应用氧化偶氮甲烷（AOM）和葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导C57BL/6小鼠，建立CAC动物模型，模拟... 详细信息

目的探讨粒细胞集落刺激因子受体（G-CSFR）在结肠炎相关结直肠癌（CAC）发生发展过程中的表达水平，并分析其阳性表达的免疫细胞亚群。方法联合应用氧化偶氮甲烷（AOM）和葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导C57BL/6小鼠，建立CAC动物模型，模拟结直肠癌疾病发展中的3个阶段，即炎症恢复期（AD1）、轻度不典型增生期（AD2）和原位癌形成期（AD3）。于AD1、AD2和AD3结束后，分别取结直肠组织制备单细胞悬液，应用流式细胞仪和荧光定量PCR法检测粒细胞集落刺激因子（G-CSF）和粒细胞集落刺激因子受体（G-CSFR）的表达，并分析G-CSFR在T细胞、巨噬细胞、中性粒细胞等免疫细胞中的表达情况。结果小鼠结直肠炎-癌转化模型成功建立，可以有效模拟结直肠炎-癌的发生和发展过程。实时荧光定量PCR检测结果显示，AD1组、AD2组和AD3组小鼠结直肠组织中G-CSF mRNA的表达水平分别为对照组的1.2倍、7.3倍和18.0倍，其中AD2组与对照组、AD3组与对照组比较，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。AD1组、AD2组和AD3组小鼠结直肠组织中G-CSFR mRNA的表达水平分别为对照组的1.5倍、2.2倍和4.5倍，其中AD3组与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0.05）。流式细胞仪检测结果显示，对照组、AD1组、AD2组和AD3组小鼠结直肠组织中CD45＋G-CSFR＋细胞的比例分别为（21.84±1.77）%、（41.48±4.15）%、（44.84±8.54）%和（57.76±1.95）%，AD2组和AD3组均明显高于对照组（均P〈0.05）。对照组、AD1组、AD2组和AD3组小鼠结直肠组织中CD45＋G-CSFR＋巨噬细胞的比例分别为（21.54±5.88）%、（47.14±5.25）%、（42.49±7.80）%和（29.25±8.24）%；CD45＋G-CSFR＋T细胞的比例分别为（30.04±6.87）%、（29.65±8.08）%、（33.75±7.37）%和（33.32±9.85）%；CD45＋G-CSFR＋中性粒细胞的比例分别为（2.39±2.10）%、（4.05±1.56）%、（3.62±2.67）%和（2.26±0.85）%。各组小鼠结直肠组织中巨噬细胞亚群和T细胞亚群占CD45＋G-CSFR＋细胞群的比例均明显高于粒细胞亚群所占的比例（均P〈0.05）。对照组与AD1组、对照组与AD2组、AD1组与AD3组、AD2组与AD3组小鼠结直肠组织中G-CSFR＋巨噬细胞含量的比较，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论CAC发生发展过程中，G-CSFR的表达明显上调，其阳性表达的巨噬细胞随疾病进展而富集于结肠组织，提示其参与CAC的发生发展。

关键词：结直肠肿瘤粒细胞集落刺激因子受体巨噬细胞免疫细胞亚群炎症性肠病

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程序性死亡受体配体1在肝癌中的表达及其临床意义

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肿瘤研究与临床 2019年第9期31卷 577-580页

作者：张媛张峰孙立新杨治华冉宇靓孙力超国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

目的探讨程序性死亡受体配体1(PD-L1)在肝癌组织中的表达水平及其临床意义。方法采用免疫组织化学染色法检测110例肝癌组织中PD-L1的表达水平,包括95例肝细胞肝癌和15例胆管细胞癌,并分析其与肝细胞肝癌患者临床病理特征间的关系。结果... 详细信息

目的探讨程序性死亡受体配体1(PD-L1)在肝癌组织中的表达水平及其临床意义。方法采用免疫组织化学染色法检测110例肝癌组织中PD-L1的表达水平,包括95例肝细胞肝癌和15例胆管细胞癌,并分析其与肝细胞肝癌患者临床病理特征间的关系。结果免疫组织化学结果显示,PD-L1在肝癌组织中的阳性率为69.1%(76/110),其中细胞膜阳性率为46.4%(51/110),细胞质阳性率为22.7%(25/110)。PD-L1在肝细胞肝癌中的阳性率高于胆管细胞癌[78.9%(75/95)比6.7%(1/15)],差异有统计学意义(χ2=31.693,P<0.01)。PD-L1阳性表达与肝细胞肝癌的浸润深度及TNM分期有关(χ2值均为4.629,P值均为0.031),但与患者年龄、性别、病理分级均无关(均P>0.05)。进一步分析发现,PD-L1蛋白细胞表达定位与肝细胞肝癌病理分级有关(P=0.013)。结论肝细胞肝癌患者PD-L1阳性表达与肿瘤浸润深度和TNM分期相关,为肝癌靶向PD-L1的免疫治疗提供理论依据。

关键词：肝肿瘤程序性死亡受体配体1 免疫组织化学

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同源盒基因MEOX1在肿瘤中的研究进展

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国际肿瘤学杂志 2019年第5期46卷 278-280页

作者：张媛孙力超国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

作为一种同源盒转录因子,MEOX1可通过与基因组特异DNA基序相结合调控目的基因的表达.MEOX1在细胞增殖、迁移和分化中起关键作用,并参与胚胎发育中骨骼、肌肉、血管的形成.近年来研究发现,MEOX1在乳腺癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌等多种... 详细信息

作为一种同源盒转录因子,MEOX1可通过与基因组特异DNA基序相结合调控目的基因的表达.MEOX1在细胞增殖、迁移和分化中起关键作用,并参与胚胎发育中骨骼、肌肉、血管的形成.近年来研究发现,MEOX1在乳腺癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌等多种肿瘤组织中高表达,并与肿瘤患者的淋巴结转移和不良预后密切相关.同时MEOX1还可调控肿瘤细胞的增殖和迁移,提示其在肿瘤的发生发展中起重要作用.

关键词：基因,同源盒肿瘤 MEOX1

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食管鳞状细胞癌癌前病变的分子改变

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国际肿瘤学杂志 2019年第7期46卷 430-433页

作者：常晨王明荣国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

食管鳞状细胞癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一,其发生具有较典型的癌前病变阶段.目前关于标志物的研究主要集中在核酸和蛋白水平,DNA水平包括基因组水平的遗传学改变、基因扩增、缺失、突变、断裂、融合,RNA水平包括mRNA、微小RNA(m... 详细信息

食管鳞状细胞癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一,其发生具有较典型的癌前病变阶段.目前关于标志物的研究主要集中在核酸和蛋白水平,DNA水平包括基因组水平的遗传学改变、基因扩增、缺失、突变、断裂、融合,RNA水平包括mRNA、微小RNA(miRNA)、长非编码RNA(lncRNA)等的表达改变,蛋白水平包括表达水平、亚细胞定位以及翻译后的修饰等变化.鉴定早期食管鳞状细胞癌和癌前病变的分子改变,对于探索该病早期诊断的生物标志物和早期干预靶点均具有重要的意义.

关键词：食管肿瘤肿瘤,鳞状细胞 DNA RNA 蛋白质类癌前病变

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液滴微流控单细胞转录组检测技术的建立和优化

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癌变．畸变．突变 2019年第1期31卷 9-14,21页

作者：周鲁林杨润坤张文冯林肖汀程书钧张开泰张蕾国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室癌发生及预防分子机理北京市重点实验室北京100021 哈尔滨医科大学附属第二医院结直肠肿瘤外科哈尔滨150086 国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院免疫学研究室北京100021 国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院内镜科北京100021

目的:建立基于液滴微流控技术的单细胞转录组检测平台,并对该平台的有效性和在肿瘤研究中的潜在应用方向进行探讨。方法:利用液滴微流控体系,实现单个细胞和单个标记微球在油包水型乳浊液微滴中的共同包裹,即实现单细胞的分离与标记。... 详细信息

目的:建立基于液滴微流控技术的单细胞转录组检测平台,并对该平台的有效性和在肿瘤研究中的潜在应用方向进行探讨。方法:利用液滴微流控体系,实现单个细胞和单个标记微球在油包水型乳浊液微滴中的共同包裹,即实现单细胞的分离与标记。通过调节流路内各项参数获得最适单细胞标记率。以混合的人急性早幼粒白血病细胞系HL-60和小鼠黑色素瘤细胞系B16-F10为模拟样品,评价所建系统的各项技术指标。结果:在油相和水相流速分别为200和30μL/min的条件下,细胞和微球浓度分别为250和400个/μL时,达到最适细胞标记率(11.87±3.75)%。模拟样品检测结果显示,输入细胞7.50万个,理论细胞标记率为11%时,可获得7 535个细胞的转录组数据,其中人和鼠转录组混合细胞有70个,仅占全部细胞的0.9%。利用转录组差异能够区分两类细胞,且能筛选出每类细胞的特异性表达标志物。结论:本研究建立了一个基于液滴微流控的单细胞转录组分析平台,平台的各项指标能够满足肿瘤学实验室要求,在肿瘤研究中具有广泛的潜在应用价值。

关键词：单细胞测序微流控转录组肿瘤细胞

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Skp1蛋白在非小细胞肺癌组织和外周血中的表达水平及其临床意义

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癌变．畸变．突变 2019年第2期31卷 89-95页

作者：朱嘉微胡箫王希君王雅茹冯林肖汀国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室癌发生及预防分子机理北京市重点实验室北京100021

目的:检测S期激酶相关蛋白1(Skp1)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织和外周血中的表达水平并探讨其临床意义。方法:采用Western blot检测34例NSCLC组织及相应癌旁组织中Skp1蛋白的表达水平。采用组织芯片和免疫组织化学染色检测Skp1在86例NSCL... 详细信息

目的:检测S期激酶相关蛋白1(Skp1)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织和外周血中的表达水平并探讨其临床意义。方法:采用Western blot检测34例NSCLC组织及相应癌旁组织中Skp1蛋白的表达水平。采用组织芯片和免疫组织化学染色检测Skp1在86例NSCLC组织及相应癌旁组织中的表达情况,并分析Skp1蛋白的表达与NSCLC临床病理指标及患者预后的关系。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测39例NSCLC患者及27例健康人血浆中的Skp1蛋白水平。结果:Western blot和免疫组化法分析结果显示Skp1蛋白在NSCLC组织中的表达水平均显著高于相应癌旁组织(P<0.001)。ELISA法分析结果显示NSCLC病人血浆中的Skp1蛋白表达水平显著高于健康人群(P=0.003)。Kaplan-Meier单因素生存分析显示Skp1蛋白在NSCLC组织中的高表达与中晚期(Ⅱ+Ⅲ)NSCLC患者的不良预后显著相关(P=0.001),多因素Cox回归分析显示Skp1蛋白能够作为影响中晚期(Ⅱ+Ⅲ)NSCLC患者预后的独立危险因素。Skp1蛋白表达水平与病理类型、临床分期、分化程度、淋巴结转移等因素无显著相关关系(P>0.05)。结论:Skp1蛋白在NSCLC患者中高表达,并且Skp1蛋白在NSCLC组织中的高表达与中晚期(Ⅱ+Ⅲ)NSCLC患者的不良预后显著相关,可作为中晚期NSCLC患者预后的独立危险因素。

关键词： Skp1 非小细胞肺癌预后危险因素

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室温放置4 h对样本尿蛋白质组分析的影响

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基础医学与临床 2019年第9期39卷 1330-1334页

作者：杨丽君郭正光景宗攀孙玉琳孙伟赵晓航中国医学科学院北京协和医学院国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院中心实验室北京100005

目的探讨用医院检验科尿常规检查剩余的尿液样本开展尿蛋白质组分析,以便充分利用资源。方法同一个体尿液样本采集后分别采用立即冻存和室温下放置4h后冻存于-80℃备用。尿液样本分别进行聚丙烯酰胺凝胶电泳、二维凝胶电泳和液相色谱串... 详细信息

目的探讨用医院检验科尿常规检查剩余的尿液样本开展尿蛋白质组分析,以便充分利用资源。方法同一个体尿液样本采集后分别采用立即冻存和室温下放置4h后冻存于-80℃备用。尿液样本分别进行聚丙烯酰胺凝胶电泳、二维凝胶电泳和液相色谱串联质谱分析,对比两种尿液样本采集方法对尿蛋白质组分析的影响。用点杂交免疫印迹法分析了室温放置4h尿液样本(n=150)中胞质非特异性二肽酶(CNDP2)蛋白在结直肠癌(CRC)患者与健康对照尿液中的含量。结果立即冻存和经室温放置4h后冻存的尿液样本的主要蛋白条带、数量和位置无明显差异;从中分别鉴定了(1204±50,n=3)个和(1155±7,n=3)个尿蛋白质,以及(7501±661,n=3)条和(6940±182,n=3)条多肽,两组样本间无差异。尿蛋白CNDP2在结直肠癌患者尿液中含量显著高于健康对照(P<0.001)。结论采集后立即冻存和室温放置4h后冻存尿液样本的尿蛋白质组分析无明显差异。医院检验科尿常规检查剩余的尿液样本可用于尿蛋白质组分析。CNDP2在结直肠癌患者尿液中含量升高,是结直肠癌候选的尿蛋白标志物。

关键词：尿蛋白质组二维凝胶电泳液相色谱串联质谱尿蛋白生物标志物

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我国农村地区肝癌一级预防模式的建立

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中华肿瘤杂志 2018年第7期40卷 481-489页

作者：曲春枫陈陶阳王宇婷姚红玉陈坤朱健陈万青贺欢国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室免疫室 100021 国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院癌症早诊早治办公室 100021 启东市人民医院启东肝癌防治研究所病因室 226200

原发性肝癌的主要病理类型是肝细胞癌（HCC），其病因相对清楚，慢性乙肝病毒感染是我国高发区HCC的主要病因，其次为黄曲霉毒素暴露。在江苏省启东市开展的肝癌一级预防干预措施中，新生儿期接种乙肝疫苗对〈30岁人群肝癌发病的保护率... 详细信息

原发性肝癌的主要病理类型是肝细胞癌（HCC），其病因相对清楚，慢性乙肝病毒感染是我国高发区HCC的主要病因，其次为黄曲霉毒素暴露。在江苏省启东市开展的肝癌一级预防干预措施中，新生儿期接种乙肝疫苗对〈30岁人群肝癌发病的保护率为84％（95％CI为23％～97％）；清洁饮水和降低黄曲霉毒素暴露后，〈35岁人群的肝癌发病风险与30年前比较，降低至少4倍。清洁水源、防霉改粮、预防乙型肝炎病毒感染是农村高发区有效的肝癌一级预防模式。

关键词：肝肿瘤一级预防人群研究

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主要促进因子超家族成员Mfsd2a的研究进展

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癌变．畸变．突变 2019年第1期31卷 86-88页

作者：朱嘉微肖汀国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室癌发生及预防分子机理北京市重点实验室北京100021

癌症进程是细胞逐步向恶性程度更高、侵袭性更强方向演变的过程,这个过程是由体细胞遗传学和表观遗传学改变的积累引起的。目前研究发现了1个含有遗传组件的106 kb连锁不平衡区域,它与肺腺癌病人生存紧密相关。这个区域精细定位到了1号... 详细信息

癌症进程是细胞逐步向恶性程度更高、侵袭性更强方向演变的过程,这个过程是由体细胞遗传学和表观遗传学改变的积累引起的。目前研究发现了1个含有遗传组件的106 kb连锁不平衡区域,它与肺腺癌病人生存紧密相关。这个区域精细定位到了1号染色体p34区,包括3个重要的胚胎发育相关基因:MYCL1、TRIT1和Mfsd2a。其中MYCL1和TRIT1在肿瘤生长和发育中所起作用已经相继报道,Mfsd2a被认为是血脑屏障形成和维持完整性的关键组成部分,而对于Mfsd2a在肿瘤中的功能性研究却很少。人类在大脑生长期间如何迅速建立起脂质含量,以及在成年期如何维持其脂质仍未清楚。本文从大脑发育、血脑屏障的维持、疾病的发生等方面介绍主要促进因子超家族成员Mfsd2a在其中发挥的作用。

关键词：大脑发育血脑屏障疾病发生 Mfsd2a

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stomatin对非小细胞肺癌细胞中葡萄糖转运蛋白1表达及定位的影响

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癌症进展 2019年第4期17卷 399-402页

作者：刘明依安华英袁伟马洁国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 北京医院生物治疗中心/国家老年医学中心北京100730

目的探究stomatin基因对非小细胞肺癌细胞中葡萄糖转运蛋白1(Glut1)表达及定位的影响。方法采用RNA干扰技术敲降A549、H520细胞内stomatin基因,利用实时荧光定量聚合酶链反应技术及蛋白质免疫印迹技术检测Glut1在两种细胞内的表达变化... 详细信息

目的探究stomatin基因对非小细胞肺癌细胞中葡萄糖转运蛋白1(Glut1)表达及定位的影响。方法采用RNA干扰技术敲降A549、H520细胞内stomatin基因,利用实时荧光定量聚合酶链反应技术及蛋白质免疫印迹技术检测Glut1在两种细胞内的表达变化。采用细胞免疫荧光染色技术对stomatin蛋白及Glut1蛋白进行定位并观察其位置变化。以PcDNA3.1(-)为载体,构建在Glut1第一个细胞外段插入flag标签的质粒3×flag-Glut1-PcDNA3.1(-),并将其导入过表达stomatin的A549、H520细胞中,利用流式细胞术检测细胞膜上Glut1的表达情况。结果 A549、H520细胞中敲降stomatin表达,Glut1的mRNA和蛋白表达量均未发生变化;A549、H520细胞中敲降stomatin表达,Glut1蛋白的主要表达位置由细胞膜转移到细胞质中;stomatin过表达的肺癌细胞A549、H520中,Glut1蛋白在细胞膜上的表达量明显上调。结论 stomatin表达的改变不影响非小细胞肺癌中Glut1的表达量,stomatin表达上调时能够促进Glut1在细胞膜上的定位,stomatin表达下调时Glut1更多定位在细胞质中。

关键词：非小细胞肺癌 stomatin 葡萄糖转运蛋白1 蛋白转位

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