检索结果-内蒙古大学图书馆

长链非编码RNA LOC101927476抑制卵巢癌细胞侵袭迁移和增殖

中华肿瘤杂志 2022年第1期44卷 104-111页

作者：赵鹏飞南亚兵王亚婷李斌刘芝华国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院妇瘤科北京100021

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)LOC101927476在卵巢癌细胞中的表达及其对卵巢癌生物学特征的影响。方法选取2018—2019年于中国医学科学院肿瘤医院手术治疗的卵巢癌患者。采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测卵巢癌细胞系3AO、OVCA... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)LOC101927476在卵巢癌细胞中的表达及其对卵巢癌生物学特征的影响。方法选取2018—2019年于中国医学科学院肿瘤医院手术治疗的卵巢癌患者。采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测卵巢癌细胞系3AO、OVCA429、TOV21G、A2780、SKOV3以及22例卵巢癌原发瘤和转移瘤组织中LncRNA LOC101927476的表达水平,采用TCGA数据库中卵巢癌转录组测序数据验证LncRNA LOC101927476和GATA4的表达,采用慢病毒包装体系构建过表达LOC101927476(OE-LOC101927476组)和空载(OE-EV组)慢病毒并转染至3AO细胞。设计单链向导RNA(sgRNA),利用CRISPR/Cas9构建LncRNA LOC101927476敲除细胞系。采用Transwell法和划痕实验检测LncRNA LOC101927476对卵巢癌细胞侵袭和转移能力的影响。采用细胞计数盒8(CCK-8)法检测细胞的增殖能力。结果real-time PCR显示,22例卵巢癌患者中,20例转移灶中LncRNA LOC101927476的表达水平低于原发灶。Transwell迁移实验显示,OE-EV组3AO细胞的穿膜细胞数为(1024±76)个,高于OE-LOC101927476组[(699±65)个,P=0.003];sg-Control组OVCA429细胞的穿膜细胞数为(363±27)个,低于sg-LOC101927476组[(472±40)个],差异有统计学意义(P=0.011)。Transwell侵袭实验显示,OE-EV组3AO细胞的穿膜细胞数为(661±95)个,高于OE-LOC101927476组[(357±63)个],差异有统计学意义(P=0.006);sg-Control组OVCA429细胞的穿膜细胞数为(309±13)个,低于sg-LOC101927476组[(512±72)个],差异有统计学意义(P=0.005)。划痕实验显示,培养48 h时,OE-LOC101927476组3AO细胞的划痕愈合比例为(10.86±0.63)%,低于OE-EV组[(57.38±4.42)%],差异有统计学意义(P=0.009);培养24 h时,sg-LOC101927476组OVCA429细胞的划痕愈合比例为(59.98±1.34)%,高于sg-Control组[(23.15±2.03)%],差异有统计学意义(P=0.004)。CCK-8结果显示,OE-LOC101927476组3AO细胞的增殖能力明显减弱,在过表达LncRNA LOC101927476后第4天时,OE-LOC101927476组3AO细胞的吸光度(A)值为2.07±0.08,与OE-EV组(2.29±0.04)比较,差异有统计学意义(P=0.009)。sg-LOC101927476组OVCA429细胞的增殖能力提高,在敲降LncRNA LOC101927476的表达后第4天时,sg-LOC101927476组OVCA429细胞的A值为(2.13±0.03),与sg-Control组(1.93±0.03)比较,差异有统计学意义(P=0.001)。OE-LOC101927476组3AO细胞中GATA4的相对表达水平为1.86±0.25,与OE-EV组(1.00±0.00)比较,差异有统计学意义(P=0.001)。在LncRNA LOC101927476高表达的患者中,GATA4的表达水平为(2.93±0.35),高于LncRNA LOC101927476低表达的患者(0.29±0.06),差异有统计学意义(P=0.001)。结论LncRNA LOC101927476能够抑制卵巢癌的侵袭、迁移和增殖。

关键词：卵巢肿瘤长链非编码RNA 侵袭迁移增殖

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NEFL通过激活EGFR/AKT/S6信号通路促进食管鳞癌细胞的侵袭迁移

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遗传 2022年第4期44卷 322-334页

作者：范志露杨荔艳张娜冯丹郭静常晨苑青蔡岩张钰魏文强王明荣郝佳洁国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院检验科北京100021 国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院流行病学中心北京100021

为探讨神经丝轻链(neurofilament light chain,NEFL)在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达情况及作用机制,本研究首先对食管鳞癌组织及配对的正常食管上皮中NEFL的mRNA和蛋白表达情况进行了检测。基因表达综合... 详细信息

为探讨神经丝轻链(neurofilament light chain,NEFL)在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达情况及作用机制,本研究首先对食管鳞癌组织及配对的正常食管上皮中NEFL的mRNA和蛋白表达情况进行了检测。基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)RNA表达数据,以及临床标本的实时荧光定量逆转录–聚合酶链式反应(real-time quantitative reverse transcription PCR,qRT-PCR)分析结果显示,与正常食管上皮组织相比,食管鳞癌组织中NEFL基因mRNA水平明显升高。Western blot分析结果显示,与正常食管上皮组织相比,食管鳞癌组织中NEFL蛋白水平也明显升高。进一步采用CCK8法和Transwell法检测NEFL过表达对食管鳞癌细胞恶性表型的影响,结果显示敲降NEFL后,食管鳞癌细胞的侵袭和迁移能力显著减弱。体内裸鼠成瘤实验显示,敲降NEFL可显著抑制肿瘤生长。分子水平检测表明,敲降NEFL显著升高上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关分子E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达并降低N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达、下游分子表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的mRNA和蛋白的表达水平,蛋白激酶B(protein kinase B,PKB;又被称为AKT)和核糖体蛋白S6(ribosomal protein S6)的磷酸化水平也显著降低。敲降NEFL后转染EGFR过表达载体,AKT和S6的磷酸化水平以及食管鳞癌细胞侵袭和迁移表型都得以恢复。以上研究结果表明,NEFL过表达可能通过激活EGFR/AKT/S6信号通路促进食管鳞癌细胞EMT,最终促进食管鳞癌细胞的侵袭迁移。

关键词： NEFL 食管鳞癌侵袭迁移 EGFR 上皮间质转化

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肝癌筛查在我国人群中的可及性:一项探索性分析

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中华流行病学杂志 2022年第6期43卷 906-914页

作者：石菊芳曹梦迪严鑫鑫曹毛毛王宇婷李燕婕王鑫李纪宾李霓曲春枫陈万青国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院癌症早诊早治办公室北京100021 国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室/免疫学研究室北京100021

目的系统量化肝癌筛查及监测服务在我国人群中的可及性,尤其是可获得性维度的系列指标。方法参照国际权威机构对癌症筛查可获得性评价涉及的具体内容和指标,包括当地相关政策方案、覆盖率、筛查参与率和依从率及影响因素、治疗率、接受... 详细信息

目的系统量化肝癌筛查及监测服务在我国人群中的可及性,尤其是可获得性维度的系列指标。方法参照国际权威机构对癌症筛查可获得性评价涉及的具体内容和指标,包括当地相关政策方案、覆盖率、筛查参与率和依从率及影响因素、治疗率、接受度、公平性等,通过系统综述方法,结合核心文献/论著、官网、方案报告等渠道,对我国人群肝癌筛查及监测相关指标进行系统整合评估。结果文献检索最终纳入34篇期刊论文,多为地方性肝癌筛查参与率和监测依从率报道,更多信息来自其他渠道。分析结果提示,中央财政支持的3项癌症筛查服务项目,均在特定地区和年龄段有针对一般风险人群的肝癌筛查方案推荐及实践评价,针对筛查发现的不同高危人群有明确监测方案推荐。肝癌初筛的年度覆盖率在全国35~74岁人群中约为0.09%。因项目模式不同,整体筛查参与率(参加复筛人数÷初筛阳性人数×100%)在37.5%~62.3%之间;监测依从率(参加监测人数÷复筛阳性需监测人数×100%)在纳入6项研究的M(Q1,Q3)为26.9%(23.5%,41.0%);系统综述仅纳入2篇影响因素报道。全国大样本分析提示,城市肝癌高危人群对甲胎蛋白检测联合超声筛查的主观接受度为99.3%。农村人群筛查监测发现的肝癌患者治疗率在90%以上。未见公平性相关报道。结论我国主要公卫服务项目均有具体肝癌筛查和高危个体监测的方案推荐,但总体可获得性的提升空间大,主要体现在筛查覆盖率。筛查参与率和监测依从率均存在项目人群研究间差异,需更多影响因素探索;较高的主观接受度提示潜在的客观需求。整体而言,目前针对我国肝癌筛查监测可及性的信息仍然有限,提示需要更多关注。

关键词：肝癌筛查监测可及性可获得性人群

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肿瘤转移相关基因1对宫颈癌HeLa细胞放疗敏感性的作用及机制

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中华肿瘤杂志 2022年第9期44卷 962-967页

作者：孙芳洲王劲松李春晓王婷张竞尧周彦彤王海娟钱海利国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

目的探讨肿瘤转移相关基因1(MTA1)对宫颈癌HeLa细胞放疗敏感性的影响及其分子机制。方法对MTA1敲降的HeLa细胞及对照HeLa细胞进行转录测序,获得差异表达基因并对其进行基因集富集分析和GO聚类分析。采用流式细胞术检测MTA1过表达的HeLa... 详细信息

目的探讨肿瘤转移相关基因1(MTA1)对宫颈癌HeLa细胞放疗敏感性的影响及其分子机制。方法对MTA1敲降的HeLa细胞及对照HeLa细胞进行转录测序,获得差异表达基因并对其进行基因集富集分析和GO聚类分析。采用流式细胞术检测MTA1过表达的HeLa细胞和对照HeLa细胞在10 Gy X射线照射前后的细胞凋亡情况,克隆形成实验和实时无标记动态细胞分析(RTCA)技术检测细胞的增殖情况。选取差异表达基因编码的蛋白构建蛋白相互作用网络,采用免疫荧光实验检测γ-H2AX的表达情况,采用Western blot法检测γ-H2AX、β-CHK2、PARP和cleaved caspase 3的表达水平。结果转录组测序分析获得差异表达基因649个,其中402个基因在MTA1敲降的HeLa细胞中表达上调,247个基因表达下调。与MTA1相关的差异表达基因富集于DNA损伤修复过程,GO聚类分析提示,DNA损伤修复富集于第2位。流式细胞术检测结果显示,10 Gy X射线照射后,MTA1过表达的HeLa细胞凋亡率[(15.67±0.81)%]低于对照HeLa细胞[(40.27±2.73)%,P<0.001]。RTCA结果显示,过表达MTA1的HeLa细胞经2 Gy X射线照射后,细胞增殖能力高于对照HeLa细胞(P=0.024)。克隆形成实验显示,过表达MTA1的HeLa细胞经2 Gy X射线照射前后的克隆数分别为(176±7)个和(137±7)个,均高于对照细胞[分别为(134±4)个和(75±4)个,均P<0.05]。免疫荧光实验结果显示,未经X射线照射的MTA1过表达及对照HeLa细胞中的γ-H2AX几乎无表达,经过10 Gy X射线照射后48 h,对照HeLa细胞中可见明显γ-H2AX表达,且MTA1过表达HeLa细胞中γ-H2AX表达相对较低。Western blot结果显示,10 Gy X射线照射后,过表达MTA1的HeLa细胞中β-CHK2的表达水平(1.04±0.06)高于对照HeLa细胞(0.58±0.25,P=0.036),过表达MTA1的HeLa细胞中γ-H2AX、PARP和cleaved caspase 3的表达水平分别为0.52±0.13、0.52±0.22和0.63±0.18,均低于对照HeLa细胞(分别为0.87±0.06,0.78±0.12和0.90±0.12,均P>0.05)。结论过表达MTA1能降低宫颈癌HeLa细胞对X射线的敏感性,MTA1可能通过降低cleaved caspase 3的表达抑制细胞凋亡、增加β-CHK2表达促进DNA修复。

关键词：宫颈肿瘤 HeLa细胞肿瘤转移相关基因1 放疗敏感性

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胃癌组织内微生物组高分辨率测序方法的建立与初步应用

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中华肿瘤防治杂志 2022年第21期29卷 1536-1541页

作者：李昱潼朱佳润张艺旋刘梅焦宇辰王小兵杜春霞国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院肿瘤内科北京100021

目的构建16SrRNA基因多区域建库、测序及分析流程,验证其可行性,并初步应用于胃癌组织微生物组研究。方法依据细菌16SrRNA基因5个可变区外的保守区序列,设计相应引物,进行多重聚合酶链式反应(PCR)建库、测序。通过分析琼脂糖凝胶电泳图... 详细信息

目的构建16SrRNA基因多区域建库、测序及分析流程,验证其可行性,并初步应用于胃癌组织微生物组研究。方法依据细菌16SrRNA基因5个可变区外的保守区序列,设计相应引物,进行多重聚合酶链式反应(PCR)建库、测序。通过分析琼脂糖凝胶电泳图,评价不同引物的扩增效果,验证5对引物的敏感性以及16SrRNA基因多区域建库的可行性;将16SrRNA基因多区域测序法在微生物相对丰度已知的阳性对照样本中与传统单区域测序方法进行对比,并在胃癌石蜡组织与新鲜组织样本中比较该方法与传统单区域测序方法在不同生物学水平检出微生物数量和α多样性之间的差异。结果16SrRNA基因多区域测序方法能够在各生物学分类水平下检出阳性对照中的全部微生物。在3例胃癌石蜡组织和3例胃癌新鲜组织样本中的各生物学分类水平上检出的微生物数量均高于传统16SrRNA基因测序方法,P<0.01。在胃癌石蜡组织中,单区域V4测序和多区域测序的Shannon指数分别为1.18±0.12和3.08±0.09,t=21.29,P<0.01;Simpson指数分别为0.63±0.04和0.89±0.01,t=10.35,P<0.01;Chao1指数分别为14.67±3.21和199.67±22.50,t=14.10,P<0.01。在胃癌新鲜组织中,单区域V4测序和多区域测序的Shannon指数分别为0.68±0.68和2.88±0.40,t=4.79,P<0.01;Simpson指数分别为0.37±0.32和0.88±0.04,t=2.78,P<0.05;Chao1指数分别为3.33±3.21和115.83±31.95,t=6.07,P<0.01。结论基于16SrRNA基因测序技术,构建的16SrRNA基因多区域建库、测序及分析流程能够提高检测物种的分辨率,提高肿瘤组织中检出微生物的种群数目及多样性,为肿瘤微生物组研究提供了低成本、易操作的技术支撑。

关键词：肿瘤微生物组高分辨率 16SrRNA 胃癌二代测序

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miR-199b在人结直肠癌中的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系

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中华肿瘤杂志 2023年第4期45卷 330-334页

作者：马肖袁伟马洁首都医科大学附属北京友谊医院检验科北京100050 国家癌症中心、国家肿瘤临床医学研究中心、中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 北京医院生物治疗中心、国家老年医学中心、中国医学科学院老年医学研究院北京100730

目的:探讨miR-199b与结直肠癌患者临床病理特征以及预后的关系。方法:收集2011年3—12月于中国医学科学院肿瘤医院接受治疗的202例结直肠癌患者的癌组织及癌旁正常组织,采用实时荧光定量PCR方法检测结直肠癌组织及相应癌旁正常组织中miR... 详细信息

目的:探讨miR-199b与结直肠癌患者临床病理特征以及预后的关系。方法:收集2011年3—12月于中国医学科学院肿瘤医院接受治疗的202例结直肠癌患者的癌组织及癌旁正常组织,采用实时荧光定量PCR方法检测结直肠癌组织及相应癌旁正常组织中miR-199b的表达水平,生存分析采用Kaplan-Meier法和Log rank检验,受试者工作特征(ROC)曲线评估miR-199b预测结直肠癌患者预后的价值。结果:结直肠癌组织中miR-199b的相对表达水平(-7.88±0.11)低于癌旁正常组织(-6.49±0.12, P<0.001)。伴有淋巴结转移的结直肠癌组织中miR-199b的表达水平(-7.51±0.14)高于无淋巴结转移的结直肠癌组织(-8.23±0.17, P<0.001)。miR-199b在Ⅰ~Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期结直肠癌组织中相对表达水平逐渐升高,分别为-8.26±0.17、-7.70±0.16、-6.57±0.27,差异有统计学意义( P<0.001)。miR-199b高表达组患者的5年生存率(75.6%)低于低表达组患者(84.6%, P=0.045)。ROC曲线显示,当miR-199b为-7.965时,曲线下面积为0.578(95% CI:0.468~0.688)。结论:结直肠癌组织中高表达miR-199b与结直肠癌患者TNM分期晚、淋巴结转移以及不良预后有关,miR-199b可能作为结直肠癌患者术后疾病进展及预后的潜在标志物。

关键词：结直肠肿瘤 miR-199b 肿瘤转移预后

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抗HSP90抗体通过内化eHSP90抑制人胃癌干细胞并提高顺铂的抗癌效果

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中国肿瘤生物治疗杂志 2022年第4期29卷 284-293页

作者：孙新张蕙雯孙立新刘军遇珑孙力超冉宇靓中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

目的:探索抗HSP90单克隆抗体28C10通过靶向肿瘤干细胞促进顺铂(cisplatin,DDP)对人胃癌细胞PAMC82恶性生物学行为的抑制效果及其可能的作用机制。方法:28C10单独或与DDP联合处理人胃癌细胞PAMC82,采用不同实验方法检测该细胞的无血清成... 详细信息

目的:探索抗HSP90单克隆抗体28C10通过靶向肿瘤干细胞促进顺铂(cisplatin,DDP)对人胃癌细胞PAMC82恶性生物学行为的抑制效果及其可能的作用机制。方法:28C10单独或与DDP联合处理人胃癌细胞PAMC82,采用不同实验方法检测该细胞的无血清成球能力、迁移和侵袭能力与克隆形成能力,CCK-8法检测28C10对PAMC82细胞恶性生物学行为和协同DDP抗癌能力的影响。采用细胞免疫荧光及流式细胞术检测PAMC82细胞中HSP90及eHSP90(extracellular HSP90)的表达、定位、eHSP90^(+)亚群比例,以及28C10处理后对ALDH^(+)、CD44^(+)、eHSP90^(+)细胞亚群的影响。采用WB实验检测28C10作用后PAMC82细胞中HSP90、干性相关蛋白以及PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白表达的变化。结果:胃癌细胞PAMC82膜表面表达eHSP90,具有2%~3%的eHSP90^(+)细胞亚群,且eHSP90^(+)细胞多为与ALDH^(+)或CD44^(+)共阳性细胞。28C10处理能显著抑制PAMC82细胞的成球、克隆形成、增殖、耐药、迁移及侵袭能力,而且和DDP联用的效果更明显(P<0.05或P<0.01)。流式细胞术分析发现28C10处理显著抑制PAMC82细胞的eHSP90^(+)、ALDH^(+)和CD44^(+)亚群数量(均P<0.01)。免疫荧光实验发现28C10作用后eHSP90发生内吞,WB实验结果显示eHSP90、CD44、ALDH和干性相关蛋白OCT4、SOX2表达量均降低(P<0.05或P<0.01)。结论:抗HSP90单克隆抗体28C10可靶向胃癌PAMC82细胞的ALDH^(+)、CD44^(+)肿瘤干细胞相关亚群、内化eHSP90且降低细胞总HSP90的水平、抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路,从而有效地抑制PAMC82细胞的干性、耐药和其他恶性生物学行为,协同DDP显著提高抗癌效果。

关键词：胃癌 PAMC82细胞肿瘤干细胞 eHSP90 28C10 靶向治疗顺铂

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中国胰腺癌患者居家医养全程管理专家共识

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中华肿瘤杂志 2022年第10期44卷 1076-1082页

作者：中国医师协会肿瘤医师分会中国医疗保健国际交流促进会胰腺疾病分会中国医药教育协会腹部肿瘤专业委员会王成锋张建伟丛明华石川吴宏亮边志民和芳张水生周珙不详国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院胰胃外科分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院胰胃外科国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院综合科北京大学第六医院临床心理测评中心国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院麻醉科北京大学第六医院特需病房

胰腺癌被称为"癌中之王",全球范围内其发病率和死亡率逐年增高。胰腺癌预后极差,现有诊疗手段治疗效果有限。中国医师协会肿瘤医师分会、中国医疗保健国际交流促进会胰腺疾病分会、中国医药教育协会腹部肿瘤专业委员会召集相... 详细信息

胰腺癌被称为"癌中之王",全球范围内其发病率和死亡率逐年增高。胰腺癌预后极差,现有诊疗手段治疗效果有限。中国医师协会肿瘤医师分会、中国医疗保健国际交流促进会胰腺疾病分会、中国医药教育协会腹部肿瘤专业委员会召集相关专家,对于胰腺癌患者居家管理期间病情沟通、随诊、营养支持、癌痛管理、心理调整、腹水管理、黄疸管理及日常饮食管理9个方面提出建议,供临床参考,共识旨在提高胰腺癌患者生活质量,延长生存时间。

关键词：胰腺肿瘤居家医养健康管理

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三阴性乳腺癌组织NFⅠⅩ表达临床意义及其功能

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中华肿瘤防治杂志 2022年第10期29卷 715-724页

作者：牛亚楠赵梓彤冉宇靓宋咏梅王一澎孙力超国家癌症中心·国家肿瘤临床医学研究中心·中国医学科学院·北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 国家癌症中心·国家肿瘤临床医学研究中心·中国医学科学院·北京协和医学院肿瘤医院乳腺外科北京100021

目的探讨核因子Ⅰ/Ⅹ(NFⅠⅩ)在三阴性乳腺癌(TNBC)组织的表达及对TNBC细胞的影响。方法实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白质印迹法检测NFⅠⅩ在乳腺癌细胞系中的表达。使用R包limma分析GEO数据库GSE76275基因表达谱中NFⅠⅩ在TNBC组织与no... 详细信息

目的探讨核因子Ⅰ/Ⅹ(NFⅠⅩ)在三阴性乳腺癌(TNBC)组织的表达及对TNBC细胞的影响。方法实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白质印迹法检测NFⅠⅩ在乳腺癌细胞系中的表达。使用R包limma分析GEO数据库GSE76275基因表达谱中NFⅠⅩ在TNBC组织与non-TNBC组织中的表达。免疫组织化学方法检测30例2015-09-24-2016-01-15中国医学科学院肿瘤医院乳腺外科收治TNBC患者癌组织及癌旁组织中NFⅠⅩ的蛋白水平。应用Kaplan-Meier plot网站(***)进行生存分析。使用特异性小分子干扰RNA(siRNA)敲降NFⅠⅩ,并分为阴性对照组(NC组)和敲降NFⅠⅩ组(siNFⅠⅩ组),分析其对TNBC细胞迁移、侵袭、成球、增殖以及细胞凋亡的影响。蛋白质印迹法检测敲降NFⅠⅩ后Bcl-2的表达变化。基因集富集分析(GSEA)NFⅠⅩ的潜在信号通路。结果 qPCR结果显示,NFⅠⅩ在TNBC细胞系LTT、MDA-MB-231、MDA-MB-468中mRNA相对表达量分别为1.011±0.181、0.208±0.030和0.770±0.168,在Luminal型乳腺癌细胞系MCF7、 T47D中mRNA相对表达量分别为0.111±0.009、0.388±0.009,在HER2阳性乳腺癌BT474、SKBR3细胞系中mRNA相对表达量分别为0.008±0.000、0.037±0.006。TNBC细胞系中NFⅠⅩmRNA表达水平明显高于其他非TNBC细胞系,F=51.100,P<0.001。蛋白质印迹检测也发现,TNBC细胞系中蛋白表达水平显著高于non-TNBC细胞系。GSE76275数据集的分析表明,在TNBC组织中NFⅠⅩ的mRNA水平上调,P<0.001。免疫组化结果显示,NFⅠⅩ主要位于细胞核内,在TNBC组织中阳性表达率为40%(12/30)。临床相关性研究显示,NFⅠⅩ阳性表达与淋巴结转移有关联性,χ^(2)=5.000,P=0.025。Kaplan-Meier plot生存期分析表明,NFⅠⅩ高表达与TNBC患者较差总生存期(HR=1.62,95%CI为1.09~2.39,P<0.05)和无复发生存期(HR=1.52,95%CI为1.16~1.98,P<0.01)相关。细胞迁移实验显示,LTT细胞中,siNFⅠⅩ组的迁移细胞数(74.33±3.06)显著少于NC组(129.00±5.57),差异有统计学意义,t=14.91,P<0.001;MDA-MB-468细胞中,siNFⅠⅩ组的迁移细胞数(66.33±12.70)少于NC组(127.00±12.12),差异有统计学意义,t=5.98,P<0.01。同样地,细胞侵袭实验显示,LTT细胞中siNFⅠⅩ组侵袭细胞数为(49.67±0.58)个,显著低于NC组的(88.00±7.55)个,差异有统计学意义,t=8.77,P<0.001;MDA-MB-468细胞中,siNFⅠⅩ组侵袭细胞数量为19.00±3.61,显著低于NC组(47.68±4.73),差异有统计学意义,t=8.35,P<0.01。无血清成球实验结果显示,LTT细胞中,NC组、 siNFⅠⅩ组的成球数量分别为64.33±6.66、31.33±3.06,敲降NFⅠⅩ后显著抑制了LTT细胞的自我更新能力,t=7.80,P<0.01。细胞增殖实验发现,敲降NFⅠⅩ后显著降低LTT(t=4.16,P<0.01)和MDA-MB-468(t=5.14,P<0.01)的细胞增殖能力。另外细胞凋亡实验显示,敲降NFⅠⅩ组凋亡比例(14.30%±1.37%)较LTT细胞NC组(11.30%±0.86%)显著上升,差异有统计学意义,t=3.21,P<0.05。MDA-MB-468细胞系NC组细胞凋亡比例为9.23%±1.36%,敲降NFⅠⅩ组显著上升为20.61%±3.86%,t=4.82,P<0.01。此外蛋白质印迹结果显示,在NFⅠⅩ敲降的细胞系中Bcl-2下调。GSEA结果显示,NFⅠⅩ参与Wnt信号传导和粘着斑的调节,伪发现率(FDR)<0.25,P<0.05。结论 NFⅠⅩ在TNBC中高表达且与淋巴结转移及不良预后相关。NFⅠⅩ可促进TNBC细胞的迁移、侵袭、自我更新和增殖能力,并通过调控Bcl-2抑制细胞凋亡。

关键词：三阴性乳腺癌 NFⅠⅩ 临床意义肿瘤进展

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趋磁细菌AMB-1对小鼠的生物相容性探究

引用

中国医学前沿杂志（电子版） 2024年第4期16卷 46-54页

作者：马晓雅陈昌友宋涛马洁袁伟国家癌症中心、国家肿瘤临床医学研究中心、中国医学科学院、北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 中国科学院电工研究所北京100190 北京医院生物治疗中心国家老年医学中心中国医学科学院老年医学研究院北京100730

目的在体外和体内条件下探究趋磁细菌AMB-1对BALB/c小鼠的生物相容性。方法透射电镜观察AMB-1形貌特征;显微镜拍摄AMB-1在血清中的运动,Image J计算运动速度;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)检测AMB-1对小鼠乳腺癌细胞4T1和成纤... 详细信息

目的在体外和体内条件下探究趋磁细菌AMB-1对BALB/c小鼠的生物相容性。方法透射电镜观察AMB-1形貌特征;显微镜拍摄AMB-1在血清中的运动,Image J计算运动速度;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)检测AMB-1对小鼠乳腺癌细胞4T1和成纤维细胞L929细胞毒性;流式细胞术评价AMB-1对BALB/c小鼠骨髓来源树突细胞成熟影响;改良寇氏法计算出AMB-1对BALB/c小鼠的半数致死剂量;普鲁士蓝染色BALB/c小鼠心、肝、脾、肺、肾脏器观察AMB-1在小鼠体内的分布情况;流式细胞术检测AMB-1对BALB/c小鼠脾脏树突细胞的影响;检测小鼠BALB/c血生化指标评估其安全性;苏木精-伊红染色BALB/c小鼠心、肝、脾、肺、肾脏器,观察其组织形态变化。结果37℃条件下,AMB-1在血清中可保持运动至少120 min;AMB-1菌量超过3.3×10^(6)个时,对小鼠乳腺癌细胞4T1和成纤维细胞L929具有毒性,随菌量增加,毒性越大;AMB-1可促进骨髓来源树突细胞CD86^(+)、CD80^(+)双阳细胞的比例增大。AMB-1对BALB/c小鼠半数致死剂量为2.59×10^(10)个。AMB-1对小鼠脾脏树突细胞成熟的影响随着时间延长逐渐减弱;血生化指标在正常范围内;小鼠主要脏器无明显组织形态学变化。结论趋磁细菌AMB-1具有良好生物相容性,在体内不会引发严重免疫炎症等不良反应,具有体内应用潜能。

关键词：趋磁细菌AMB-1 生物相容性细胞毒性半数致死剂量

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