检索结果-内蒙古大学图书馆

现代肿瘤医学 2019年第15期27卷 2619-2622页

作者：孙力超杨婧遇珑张媛张峰陈梦刘军孙立新杨治华冉宇靓国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院/分子肿瘤学国家重点实验室

目的:研究抗人肝癌干细胞单抗28C10体内外功能,为肝癌干细胞的靶向治疗提供有应用价值的候选治疗剂。方法:采用无血清成球实验、侵袭实验和CCK-8方法等检测分析28C10单抗对MHCC97-Lsphere的细胞自我更新、侵袭和耐药的影响。裸鼠体内治... 详细信息

目的:研究抗人肝癌干细胞单抗28C10体内外功能,为肝癌干细胞的靶向治疗提供有应用价值的候选治疗剂。方法:采用无血清成球实验、侵袭实验和CCK-8方法等检测分析28C10单抗对MHCC97-Lsphere的细胞自我更新、侵袭和耐药的影响。裸鼠体内治疗实验研究单抗28C10联合顺铂对MHCC97-L移植瘤生长的作用。Western-Blot方法鉴定该单抗识别抗原的分子量。结果:流式细胞检测结果显示单抗28C10能够识别MHCC97-L中CD90阳性细胞的比例为2.75%。体外功能实验结果显示单抗28C10能显著抑制MHCC97-Lsphere细胞的无血清成球能力和侵袭能力,抑制率分别达33.33%和53.8%。28C10能显著抑制MHCC97-Lsphere的顺铂耐药能力,其IC50为0.74μg/ml,而对照组的IC50为1.42μg/ml。抗体体内治疗实验结果显示,低、高剂量抗体28C10均能抑制肝癌移植瘤的生长,抑制率分别达到了24.0%和67.7%,单独顺铂组肝癌移植瘤的抑制率为35.9%,而顺铂联合高剂量抗体28C10组对肝癌移植瘤的抑制率达到70.1%。Western-Blot结果显示单抗28C10识别的抗原蛋白分子量约100kD。结论:筛选获得了1株抗肝癌干细胞的功能性单抗,为靶向肝癌干细胞治疗肝癌奠定了重要的基础。

关键词：肝癌肿瘤干细胞功能性单克隆抗体靶向治疗 CD90

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采用肝癌球体细胞筛选鉴定识别肝癌干细胞的单抗

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实用肿瘤学杂志 2019年第3期33卷 193-199页

作者：孙力超杨婧孙立新张媛杨治华冉宇靓国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院/分子肿瘤学国家重点实验室

目的采用肝癌球体细胞筛选鉴定识别肝癌干细胞的单抗,为靶向肿瘤干细胞治疗肝癌提供候选治疗单抗。方法采用无血清悬浮培养的方法富集培养肝癌干细胞。通过细胞免疫荧光、顺铂耐药实验、Real-timePCR、裸鼠皮下成瘤实验等方法筛选、鉴... 详细信息

目的采用肝癌球体细胞筛选鉴定识别肝癌干细胞的单抗,为靶向肿瘤干细胞治疗肝癌提供候选治疗单抗。方法采用无血清悬浮培养的方法富集培养肝癌干细胞。通过细胞免疫荧光、顺铂耐药实验、Real-timePCR、裸鼠皮下成瘤实验等方法筛选、鉴定抗肝癌干细胞单抗。采用免疫组织化学的方法鉴定单抗识别的抗原在肝癌组织中的表达情况。质谱鉴定抗原。结果MHCC97L细胞能在无血清悬浮培养条件下形成细胞球,并能被PKH26染料标记。流式细胞检测发现MHCC97L球体细胞中CD90表达比例较亲本细胞提高了3.4倍。无血清成球抑制实验获得6株显著抑制MHCC97L细胞在无血清成球的单抗,抑制率分别为54.67%,50.33%,45.73%,42.26%,39.11%,37.63%。细胞免疫荧光结果显示单抗28C10和CD90在MHCC97L细胞中能共定位。Real-TimePCR检测结果显示MHCC97L28C10^+细胞Sox-2和Oct-4表达显著高于MHCC97L28C10-细胞。流式细胞检测,在MHCC97L及其sphere细胞中28C10^+细胞比例分别为7.98%和10.7%,28C10^+细胞比例提高了1.34倍。流式细胞术分选获得的28C10^+细胞的体外成球能力、侵袭能力显著高于28C10-细胞。CCK-8法检测结果显示28C10^+细胞较28C10-细胞显示出对化疗药物顺铂的耐药,IC50分别为1.96μg/mL和1.16μg/mL。裸鼠致瘤实验结果显示,28C10^+细胞裸鼠皮下接种2×10^4cells/只,2个月可形成肿瘤,成瘤率为40%。另外1只未形成肿瘤的裸鼠形成了肺部转移灶(1/5)。免疫组化检测显示单抗28C10的靶抗原阳性率为72.0%(77/107),而在癌旁组织中低表达,差异有统计学意义。质谱结果显示28C10识别的抗原为HSP90α。结论采用MHCC97L球体细胞模型成功鉴定一株特异识别肝癌干细胞的单抗,为靶向肝癌干细胞的抗体治疗奠定基础。

关键词：肝癌肿瘤干细胞单克隆抗体 CD90 HSP90α

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基于肿瘤基因图谱计划挖掘食管鳞癌数据

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中华肿瘤杂志 2018年第7期40卷 517-522页

作者：何思源王小兵焦宇辰国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室 100021

目的利用肿瘤基因图谱计划（TCGA）数据库中食管鳞癌数据，探讨正常食管上皮细胞和食管鳞癌细胞中差异表达的基因及其与患者预后的关系。方法在TCGA数据库中检索81例食管鳞癌的转录组数据和患者的临床资料。采用edgeR软件鉴定正常组织... 详细信息

目的利用肿瘤基因图谱计划（TCGA）数据库中食管鳞癌数据，探讨正常食管上皮细胞和食管鳞癌细胞中差异表达的基因及其与患者预后的关系。方法在TCGA数据库中检索81例食管鳞癌的转录组数据和患者的临床资料。采用edgeR软件鉴定正常组织和肿瘤组织间差异表达的基因，对差异表达基因行功能富集分析，应用String数据库构建蛋白间的互相作用网络。基于表达值构建基因共表达网络和基因表达水平的高低对患者进行分组，分析各组患者的预后。结果在TCGA数据库中共鉴定到2788个差异表达基因，其中1168个基因在肿瘤组织中表达水平上调，1620个基因在肿瘤组织中表达水平下调。上调的基因富集到细胞周期、DNA复制和错配修复等通路，下调的基因富集到代谢相关通路。蛋白互相作用网络分析获得包含707个基因及其3428个互作关系，食管鳞癌组织中发生拷贝数扩增的基因与其他一些重要基因存在相互作用。基因共表达分析检测到10个共表达模块，其中棕色模块的核糖体蛋白基因与肿瘤所在食管部位有关（P=0．003）。TNFRSFIOB高表达组和TNFRSFl0B低表达组患者的3年生存率分别为82．5％和15．1％，DDXl8高表达组和DDXl8低表达组患者的3年生存率分别为82．4％和15．2％，差异均有统计学意义（均P〈0．1）。结论TCGA食管鳞癌数据库中，与核糖体蛋白相关的基因与食管鳞癌发生的部位有关。TNFRSFl0B和DDXl8的低表达与患者的预后差有关，其可能成为食管鳞癌患者潜在的预后分子标志物。

关键词：食管肿瘤肿瘤鳞状细胞基因差异表达预后

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转移相关1基因对胃癌细胞生物学行为的影响

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中华肿瘤杂志 2018年第8期40卷 580-586页

作者：王劲松钱海利王海娟许东奎国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室 100021 国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院VIP病房 100021

目的研究肿瘤转移相关1（MTA1）基因对胃癌细胞迁移、侵袭、生长等多种生物学特性的影响。方法利用pSilencer3.1－MTA1－siRNA载体构建稳定敲降MTA1的人胃癌BGC－823细胞，通过Boyden实验、划痕愈合实验、克隆形成实验和四甲基偶氮唑蓝... 详细信息

目的研究肿瘤转移相关1（MTA1）基因对胃癌细胞迁移、侵袭、生长等多种生物学特性的影响。方法利用pSilencer3.1－MTA1－siRNA载体构建稳定敲降MTA1的人胃癌BGC－823细胞，通过Boyden实验、划痕愈合实验、克隆形成实验和四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测敲降MTA1基因对BGC－823细胞多种生物学行为的影响。同时，利用pcDNA3－MTA1质粒过表达MTA1基因进行反向验证。在裸鼠皮下分别注射pSilencer3.1－MTA1－siRNA转染细胞、pcDNA3－MTA1转染细胞和对照细胞，检测MTA1基因对胃癌BGC823细胞体内成瘤能力的影响。采用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）测定pSilencer3.1－MTA1－siRNA转染组、pcDNA3－MTA1转染组和对照组细胞中integrinβ1、cyclinD1和尿激酶受体（uPAR）等转移相关基因的表达，观察其与MTA1表达的相关性。结果成功构建了稳定敲降及过表达MTA1的BGC－823细胞。Boyden实验和划痕愈合实验结果显示，与对照组细胞比较，pSilencer3.1－MTA1－siRNA转染组发生迁移和侵袭的细胞数明显减少[分别为（25±2）和（12±1）个]，pcDNA3－MTA1转染组发生迁移和侵袭的细胞数则明显增多[分别为（218±2）和（269±3）个]，差异均有统计学意义（均P〈0.01）。MTT法和克隆形成实验结果表明，pcDNA3－MTA1转染组细胞生长加快，克隆形成能力增强，pSilencer3.1－MTA1－siRNA转染组细胞与之相反。皮下成瘤实验显示，pSilencer3.1－MTA1－siRNA转染组肿瘤体积和重量分别为（711.32±284.30）mm3和（0.87±0.24）g，明显小于对照组[（1 482.41±511.90）mm3和（1.39±0.30）g]，而pcDNA3－MTA1转染组肿瘤体积和肿瘤重量分别为（3 158.73±1 823.22）mm3和（2.23±0.51）g，明显大于对照组，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。RT－PCR检测结果显示，与对照组细胞比较，pSilencer3.1－MTA1－siRNA转染组细胞cyclinD1、integrinβ1和uPAR mRNA表达下调，而pcDNA3－MTA1转染组细胞cyclinD1、integrinβ1和uPAR mRNA表达上调。结论敲降MTA1可削弱人胃癌BGC－823细胞的增殖、侵袭及迁移能力，而MTA1的过表达不仅能够增强BGC－823细胞的上述能力，还明显促进BGC－823细胞的体内成瘤能力，并诱发恶性胃癌表型。MTA1可能通过调控其他转移相关基因进而调控肿瘤细胞的多种生物学行为。

关键词：胃肿瘤转移相关基因1 生物学行为细胞系裸鼠

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循环肿瘤细胞单细胞测序——液体活检的新视角

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生命科学 2018年第1期30卷 63-73页

作者：赵丽娜赵晓航国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室

循环肿瘤细胞是实体肿瘤原发灶或转移灶侵袭、脱落进入外周血的,具有高活力、高转移潜能的肿瘤细胞。由于肿瘤存在异质性,导致肿瘤组织高通量测序分析难以发现低丰度肿瘤干细胞的基因组特征。循环肿瘤细胞单细胞测序,通过比较患者外周... 详细信息

循环肿瘤细胞是实体肿瘤原发灶或转移灶侵袭、脱落进入外周血的,具有高活力、高转移潜能的肿瘤细胞。由于肿瘤存在异质性,导致肿瘤组织高通量测序分析难以发现低丰度肿瘤干细胞的基因组特征。循环肿瘤细胞单细胞测序,通过比较患者外周血循环肿瘤细胞、肿瘤原发灶和转移灶及转移淋巴结中单细胞基因组、转录组和表观遗传组的差异,避免肿瘤异质性的干扰,为认识肿瘤的生物学进程提供了全新视角。现综述了运用单细胞测序技术分析实体肿瘤外周血循环肿瘤细胞基因组变异的主要技术和研究进展。

关键词：循环肿瘤细胞单细胞测序全基因组扩增液体活检

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泛素羧基末端水解酶L5对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

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中华肿瘤杂志 2018年第12期40卷 900-904页

作者：丁芳马建林吴晓巍刘芝华国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室 100021

目的探讨泛素羧基末端水解酶L5(UCHL5)在乳腺癌细胞增殖和凋亡过程中的作用。方法以慢病毒介导的shRNA系统敲低SW527细胞中UCHL5基因的表达,采用MTS法检测UCHL5表达改变对SW527细胞增殖的影响,采用裸鼠皮下成瘤实验检测UCHL5对SW527细... 详细信息

目的探讨泛素羧基末端水解酶L5(UCHL5)在乳腺癌细胞增殖和凋亡过程中的作用。方法以慢病毒介导的shRNA系统敲低SW527细胞中UCHL5基因的表达,采用MTS法检测UCHL5表达改变对SW527细胞增殖的影响,采用裸鼠皮下成瘤实验检测UCHL5对SW527细胞裸鼠体内成瘤能力的影响,采用annexinV-PI双染法检测SW527细胞的凋亡。以TCGA浸润性乳腺癌数据分析UCHL5的表达与乳腺癌增殖凋亡相关基因表达的相关性。以Kaplan Meier-plotter在线数据库分析UCHL5表达与乳腺癌患者预后的关系。结果敲低UCHL5的表达后,SW527细胞第2、4天的A值分别为0.822±0.017和1.045±0.023,均明显低于对照组细胞在第2、4天的A值(分别为0.976±0.016和1.284±0.025,P<0.001)。在裸鼠成瘤实验中,UCHL5敲低后SW527细胞的成瘤体积为(166.90±75.05)mm^3,明显小于对照组细胞的成瘤体积[(329.80±35.84)mm^3,P=0.029]。流式细胞术检测结果显示,敲低UCHL5的表达后,SW527细胞的凋亡比例为(8.60±1.13)%,明显高于对照组[(2.95±0.07)%,P=0.020]。TCGA数据库分析表明,UCHL5的表达与细胞增殖相关基因的表达呈正相关,且随着UCHL5表达升高,促凋亡相关基因表达下降。Kaplan Meier-plotter分析显示,UCHL5高表达乳腺癌患者的总生存时间和无复发生存时间均明显短于UCHL5低表达患者(均P<0.001)。结论敲低UCHL5的表达可抑制SW527细胞的增殖和裸鼠皮下成瘤能力,促进细胞凋亡,并且UCHL5的高表达预示着乳腺癌患者的不良预后。

关键词：乳腺肿瘤 SW527细胞泛素羧基末端水解酶L5 细胞增殖凋亡预后

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间变淋巴瘤激酶融合基因在肺肉瘤样癌中的表达及治疗分析

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中华医学杂志 2018年第9期98卷 688-691页

作者：牛海涛董平王佳妮曾益新袁伟袁芃国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院特需医疗部北京100021 国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院内科北京100021 山东淄博万杰肿瘤医院肿瘤科国家癌症中心/分子肿瘤学国家重点实验室

目的探讨间变淋巴瘤激酶（ALK）融合基因在肺肉瘤样癌（LSC）中的表达情况及ALK抑制剂的治疗作用。方法对2011年1月至2014年12月在中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院和山东淄博万杰肿瘤医院就诊的84例经组织病理学证实的LSC标本进行... 详细信息

目的探讨间变淋巴瘤激酶（ALK）融合基因在肺肉瘤样癌（LSC）中的表达情况及ALK抑制剂的治疗作用。方法对2011年1月至2014年12月在中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院和山东淄博万杰肿瘤医院就诊的84例经组织病理学证实的LSC标本进行ALK融合基因检测。全组患者均采用手术为主、结合化疗或靶向治疗的多学科综合治疗模式。术后辅助化疗以铂类为基础的两药联合方案为主。复发或转移患者中，ALK融合基因阳性者，采用克唑替尼靶向治疗。应用x2检验对两组1、3、5年生存率进行统计学比较。结果84例患者中82例完成随访。9例（10．7％）患者表达ALK融合基因，应用克唑替尼治疗后，1例疗效评估为完全缓解，6例部分缓解，2例疾病稳定；其1、3、5年生存率分别为100％（9／9）、100％（9／9）和88．9％（8／9）。而ALK融合基因阴性患者1、3、5年生存率分别为65．8％（48／73）、15．1％（11／73）和6．8％（5／73），两组生存率差异均有统计学意义（X。：1．56、1．21、0．83，均P〈0．05）。结论LSC患者可能表达ALK融合基因，与常规化疗相比，克唑替尼可显著延长ALK融合基因阳性患者的生存时间。

关键词：肺肉瘤样癌间变淋巴瘤激酶融合基因克唑替尼

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食管鳞状细胞癌癌前病变的分子改变

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国际肿瘤学杂志 2019年第7期46卷 430-433页

作者：常晨王明荣国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

食管鳞状细胞癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一,其发生具有较典型的癌前病变阶段.目前关于标志物的研究主要集中在核酸和蛋白水平,DNA水平包括基因组水平的遗传学改变、基因扩增、缺失、突变、断裂、融合,RNA水平包括mRNA、微小RNA(m... 详细信息

食管鳞状细胞癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一,其发生具有较典型的癌前病变阶段.目前关于标志物的研究主要集中在核酸和蛋白水平,DNA水平包括基因组水平的遗传学改变、基因扩增、缺失、突变、断裂、融合,RNA水平包括mRNA、微小RNA(miRNA)、长非编码RNA(lncRNA)等的表达改变,蛋白水平包括表达水平、亚细胞定位以及翻译后的修饰等变化.鉴定早期食管鳞状细胞癌和癌前病变的分子改变,对于探索该病早期诊断的生物标志物和早期干预靶点均具有重要的意义.

关键词：食管肿瘤肿瘤,鳞状细胞 DNA RNA 蛋白质类癌前病变

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同源盒基因MEOX1在肿瘤中的研究进展

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国际肿瘤学杂志 2019年第5期46卷 278-280页

作者：张媛孙力超国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

作为一种同源盒转录因子,MEOX1可通过与基因组特异DNA基序相结合调控目的基因的表达.MEOX1在细胞增殖、迁移和分化中起关键作用,并参与胚胎发育中骨骼、肌肉、血管的形成.近年来研究发现,MEOX1在乳腺癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌等多种... 详细信息

作为一种同源盒转录因子,MEOX1可通过与基因组特异DNA基序相结合调控目的基因的表达.MEOX1在细胞增殖、迁移和分化中起关键作用,并参与胚胎发育中骨骼、肌肉、血管的形成.近年来研究发现,MEOX1在乳腺癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌等多种肿瘤组织中高表达,并与肿瘤患者的淋巴结转移和不良预后密切相关.同时MEOX1还可调控肿瘤细胞的增殖和迁移,提示其在肿瘤的发生发展中起重要作用.

关键词：基因,同源盒肿瘤 MEOX1

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程序性死亡受体配体1在肝癌中的表达及其临床意义

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肿瘤研究与临床 2019年第9期31卷 577-580页

作者：张媛张峰孙立新杨治华冉宇靓孙力超国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

目的探讨程序性死亡受体配体1(PD-L1)在肝癌组织中的表达水平及其临床意义。方法采用免疫组织化学染色法检测110例肝癌组织中PD-L1的表达水平,包括95例肝细胞肝癌和15例胆管细胞癌,并分析其与肝细胞肝癌患者临床病理特征间的关系。结果... 详细信息

目的探讨程序性死亡受体配体1(PD-L1)在肝癌组织中的表达水平及其临床意义。方法采用免疫组织化学染色法检测110例肝癌组织中PD-L1的表达水平,包括95例肝细胞肝癌和15例胆管细胞癌,并分析其与肝细胞肝癌患者临床病理特征间的关系。结果免疫组织化学结果显示,PD-L1在肝癌组织中的阳性率为69.1%(76/110),其中细胞膜阳性率为46.4%(51/110),细胞质阳性率为22.7%(25/110)。PD-L1在肝细胞肝癌中的阳性率高于胆管细胞癌[78.9%(75/95)比6.7%(1/15)],差异有统计学意义(χ2=31.693,P<0.01)。PD-L1阳性表达与肝细胞肝癌的浸润深度及TNM分期有关(χ2值均为4.629,P值均为0.031),但与患者年龄、性别、病理分级均无关(均P>0.05)。进一步分析发现,PD-L1蛋白细胞表达定位与肝细胞肝癌病理分级有关(P=0.013)。结论肝细胞肝癌患者PD-L1阳性表达与肿瘤浸润深度和TNM分期相关,为肝癌靶向PD-L1的免疫治疗提供理论依据。

关键词：肝肿瘤程序性死亡受体配体1 免疫组织化学

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